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    天然植物激素對(duì)鐵皮石斛組培苗誘導(dǎo)芽分化的影響

    2016-10-18 14:55:15徐艷張家偉
    科技視界 2016年22期
    關(guān)鍵詞:組織培養(yǎng)激素

    徐艷 張家偉

    【摘 要】為減少在植物組織培養(yǎng)中使用化學(xué)合成激素導(dǎo)致的環(huán)境污染,以鐵皮石斛為材料,研究綠豆芽研磨液與化學(xué)合成激素對(duì)鐵皮石斛組培苗誘導(dǎo)不定芽的影響。結(jié)果顯示,混合使用合成激素0.5mg/L 6BA+0.1mg/L NAA+150g/L綠豆芽研磨液培養(yǎng)基的效果最好,而單獨(dú)使用50g/L綠豆芽研磨液亦有良好效果。

    【關(guān)鍵詞】激素;組織培養(yǎng);綠豆芽液

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    綠豆芽(自制),仙斛1號(hào)組培苗(河源市裕森農(nóng)林發(fā)展有限公司提供),6-BA,NAA,瓊脂,糖,WPM;以食品攪拌機(jī)將綠豆芽攪拌成漿即為綠豆芽液。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    實(shí)驗(yàn)所用的鐵皮石斛品種為仙斛1號(hào),選擇生長(zhǎng)情況相近的鐵皮石斛,去除頭部和尾部,保留中間部分的莖節(jié)為實(shí)驗(yàn)材料。

    空白組:以WPM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,糖15g/L,瓊脂8g/L。pH 6.8,121℃下滅菌25分鐘。

    實(shí)驗(yàn)組:以WPM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,附加不同量的綠豆芽研磨液(50g/L、100g/L、150g/L、200g/L、250g/L),糖15g/L,瓊脂8g/L。pH 6.8,121℃下滅菌25分鐘。

    對(duì)照組:

    (1)以WPM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再附加不同量的綠豆芽研磨液(50、100、150、200、250g/L),糖15g/L,瓊脂8g/L,另加化學(xué)合成激素0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA。pH 6.8,121℃下滅菌25分鐘。

    (2)以WPM為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加化學(xué)合成激素0.5mg/L 6-BA、0.1mg/L NAA,糖15g/L,瓊脂8g/L。pH 6.8,121℃下滅菌25分鐘。

    2 結(jié)果與分析

    取生長(zhǎng)情況相似的鐵皮石斛組培苗莖,插入不同激素組合的WPM培養(yǎng)基中,28℃培養(yǎng)10天,觀察其不定芽萌發(fā)情況[1-3]。

    2.1 無(wú)添加激素與綠豆芽研磨液培養(yǎng)基生長(zhǎng)情況

    在空白組實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料在未添加綠豆芽研磨液、6-BA和 NAA的條件下,不定芽依然會(huì)萌動(dòng)生長(zhǎng),但芽生長(zhǎng)情況不均勻,芽苗細(xì)小。

    2.2 單化學(xué)激素誘導(dǎo)鐵皮石斛發(fā)芽情況

    單獨(dú)使用化學(xué)激素培養(yǎng)出的組織培養(yǎng)苗生長(zhǎng)不均勻,部分芽沒(méi)有萌發(fā),芽生長(zhǎng)不均勻,最長(zhǎng)1.9厘米,最短0.4厘米。

    2.3 綠豆芽提取物誘導(dǎo)鐵皮石斛發(fā)芽情況

    經(jīng)分析發(fā)現(xiàn),添加50g/L,100g/L,150g/L綠豆芽研磨液的不定芽萌發(fā)數(shù)量與生長(zhǎng)情況均比空白組好。但若綠豆芽研磨液濃度高于200g/L,則不定芽芽萌發(fā)數(shù)量與生長(zhǎng)情況比空白組差。添加50g/L綠豆芽研磨液的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)3)不定芽萌發(fā)數(shù)量與生長(zhǎng)情況優(yōu)于只添加化學(xué)激素的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)2)。隨著綠豆芽研磨液添加量的增多,接種芽不生長(zhǎng)的情況越嚴(yán)重,說(shuō)明綠豆芽研磨液最適宜的使用量為50g/L。

    2.4 化學(xué)激素聯(lián)合綠豆芽提取物誘導(dǎo)鐵皮石斛發(fā)芽情況

    經(jīng)過(guò)分析發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)基配添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L、150g/L綠豆芽研磨液的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)10)芽增殖數(shù)和芽長(zhǎng)均為最好,部分苗一個(gè)芽節(jié)萌發(fā)生長(zhǎng)出五個(gè)芽?;瘜W(xué)激素聯(lián)合綠豆芽研磨液在誘導(dǎo)鐵皮石斛不定芽萌發(fā)中效果優(yōu)于單獨(dú)使用化學(xué)激素或單獨(dú)使用綠豆芽研磨液。

    2.5 討論

    植物學(xué)理論認(rèn)為,由于頂端生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),植物頂端幼芽含有較豐富的生長(zhǎng)激素,因此植物幼芽可作為尋找純天然植物組織培養(yǎng)激素的來(lái)源。目前食用植物的組織培養(yǎng)需要使用化學(xué)激素,可能導(dǎo)致食品安全問(wèn)題,因此開發(fā)純天然植物激素替代或部分替代化學(xué)激素將非常有必要。本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn):添加50g/L綠豆芽研磨物的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)3)芽增殖數(shù)與芽長(zhǎng)均優(yōu)于添加化學(xué)激素的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)2),說(shuō)明添加豆芽研磨液可引起不定芽較好的萌發(fā)和生長(zhǎng),在一定程度上與添加化學(xué)激素的作用類似。而添加6-BA 0.5mg/L、NAA 0.1mg/L、150g/L綠豆芽研磨液的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)10)芽增殖數(shù)和芽長(zhǎng)均優(yōu)于添加50g/L綠豆芽研磨物的實(shí)驗(yàn)組(實(shí)驗(yàn)3),說(shuō)明純天然植物激素聯(lián)合化學(xué)激素可引發(fā)更好的不定芽萌發(fā)和生長(zhǎng)。

    【參考文獻(xiàn)】

    [1]秦廷豪.鐵皮石斛的組織培養(yǎng)與快速繁殖.熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)[J].2008,28(1):25-29.

    [2]張紅梅,劉建東,王巖花,張利平.鐵皮石斛莖段快繁技術(shù)研究.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)[J].2010,30(6):495-499.

    [3]李霖明,劉霖貴,鐘云芳.種有機(jī)添加物對(duì)鐵皮石斛的組培苗壯苗階段的生長(zhǎng)影響.熱帶林業(yè)[J].201139(2):38-40.

    [4]李媛,朱丹紅,潘會(huì)堂,張啟翔.3種石斛蘭以莖段為外植體的離體快繁技術(shù).東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)[J].2013,8(41):77-81.

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