馬來甜龍竹試管苗生根誘導(dǎo)培養(yǎng)研究

李云海++陳麗華++劉云謠

摘要 以馬來甜龍竹的試管苗為試驗(yàn)材料，采用1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA（0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L）+0.7%瓊脂+30 g/L蔗糖，pH值為5.8的培養(yǎng)基，對馬來甜龍竹試管苗生根的影響進(jìn)行研究。結(jié)果表明：在培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L+0.7%瓊脂+30 g/L蔗糖時，馬來甜龍竹試管苗在接種45 d后的生根、葉長、葉色和株高等綜合情況都比較好，并且生根率高達(dá)85%，利于試管苗的馴化移栽。

關(guān)鍵詞 馬來甜龍竹；組織培養(yǎng)；試管苗；生根誘導(dǎo)；生根率

中圖分類號 S795 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-5739（2016）24-0146-01

馬來甜龍竹[（Dendrocalamus aspera（J.A.et J.H.Schult.）Backer ex Heyhe）]屬竹亞科（Gramiaeae bambnsoideae）牡竹屬叢生大型竹類，竹干橫切面周長10～30 cm，竹壁厚2.2～2.5 cm，株高20～30 m，是世界上巨型竹種之一。馬來甜龍竹造型美觀，是園林綠化的優(yōu)良竹種[1]；其筍有甜味，也具有較高的食用和經(jīng)濟(jì)價值。

馬來甜龍竹試管苗誘導(dǎo)生根方面，已有學(xué)者做了相應(yīng)的試驗(yàn)研究工作。劉榮輝等[1]研究得到NAA 5 mg/L+多效唑0.1 mg/L利于馬來甜龍竹生根；1/2MS+NAA1.0 mg/L+20 g/L蔗糖+0.5%瓊脂（pH值5.8）和1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+PP333 0.1 mg/L則是龔力波等[2]和蘇 海等[3]通過研究得到的適合馬來甜龍竹生根誘導(dǎo)的培養(yǎng)基。此外，TDZ也可顯著誘導(dǎo)竹子生根[4]，國外也有報(bào)道稱IAA和香豆素配合使用可以使生根率達(dá)90%以上[5]。本試驗(yàn)以云南師范大學(xué)薯類作物研究所提供的馬來甜龍竹試管苗為試驗(yàn)材料，以1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA（0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L）+0.7%瓊脂+30%蔗糖、pH值為5.8的培養(yǎng)基進(jìn)行研究，以期從中篩選出可用于本試驗(yàn)誘導(dǎo)馬來甜龍竹試管苗生根的較適宜的培養(yǎng)基激素濃度。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以馬來甜龍竹試管苗為試驗(yàn)材料，以1/2MS培養(yǎng)基添加6-BA 1.0 mg/L為基礎(chǔ)（蔗糖和瓊脂的用量分別為30 g/L和0.7%，pH值調(diào)至5.8），設(shè)置萘乙酸（NAA）濃度為4個水平，即0.5、1.5、2.5、3.5 mg/L，各試驗(yàn)處理分別用L-1、L-2、L-3和L-4表示。

1.2 試驗(yàn)方法

把供試的長勢較均勻的馬來甜龍竹試管苗剪去基部的愈傷組織等，切分成2～3苗的小叢并轉(zhuǎn)接到不同NAA濃度的培養(yǎng)基上。每處理接種5瓶，每瓶接種5小叢，封膜后放置于培養(yǎng)室中培養(yǎng)。培養(yǎng)室溫度為21～23 ℃，光照強(qiáng)度2 000 lx，光照時間12 h/d。

1.3 調(diào)查統(tǒng)計(jì)

每隔15 d觀察記錄馬來甜龍竹試管苗接種后的生根及生長情況，至第45天時對其生根和生長情況進(jìn)行測量并作生物統(tǒng)計(jì)分析[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理生根情況

由表1可知，到第45天時，從平均生根數(shù)來看，處理L-2最多，為4.25叢；處理L-1次之，為3.20叢；其后依次為L-3、L-4，分別為2.75叢、2.33叢。方差分析中各處理之間差異顯著，各重復(fù)之間差異不顯著。進(jìn)一步的多重比較結(jié)果為，L-2與L-3和L-4之間差異極顯著；L-2與L-1之間差異顯著；L-1與L-3、L-4之間及L-3與L-4之間差異不顯著（表2）。從生根率來看，隨著NAA的濃度增加，馬來甜龍竹試管苗的生根率不斷上升，當(dāng)?shù)竭_(dá)L-2的濃度時，生根率達(dá)到最大；但當(dāng)NAA的濃度升至L-3和L-4時，二者的差異已經(jīng)不明顯并且生根率反而降低，故處理L-2的培養(yǎng)基比較適合馬來甜龍竹的生根誘導(dǎo)培養(yǎng)。

2.2 不同處理株高生長情況

由表2可知，到第45天，各處理的植株均有一定程度的生長，其中處理L-2植株最高，為7.45 cm；其次為處理L-1，株高為7.16 cm；處理L-4居第三，株高為6.37 cm；處理L-3最矮，為6.18 cm。進(jìn)一步方差分析和多重比較可得出，L-2與L-1、L-3、L-4之間差異極顯著；L-1與L-3、L-4之間差異顯著；L-3與L-4之間差異不顯著。因此，處理L-2的促生長效果較之其他3個處理稍好。

2.3 不同處理葉片長度

由表3可知，到第45天，處理L-2的葉片平均長度最高，為3.23 cm。方差分析表明，各處理之間差異顯著，各重復(fù)之間差異不顯著。進(jìn)一步多重比較結(jié)果表明，L-2與L-1、

L-3之間差異極顯著，L-2與L-4之間差異顯著，L-1與L-3、L-4之間，L-3與L-4之間差異不顯著?？梢钥闯?，處理L-2馬來甜龍竹試管苗葉片的生長情況較好。

3 結(jié)論與討論

綜合上述各處理中試管苗的平均生根數(shù)、平均株高和平均葉長數(shù)據(jù)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析，可以得出本試驗(yàn)中較適宜誘導(dǎo)馬來甜龍竹試管苗生根的培養(yǎng)基配方為1/2MS+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5 mg/L+0.7%瓊脂+30 g/L蔗糖，pH值5.8。在此培養(yǎng)基的誘導(dǎo)培養(yǎng)下，馬來甜龍竹試管苗在生根情況及植株整體的生長情況、植株的高度和葉片長度等方面均有較大的優(yōu)勢。除生根率可高達(dá)85%以外，同時也更利于之后試管苗的馴化移栽。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 劉榮輝，楊大應(yīng)，吳曉榮. 馬來甜龍竹組織培養(yǎng)技術(shù)研究初探[J].六盤水師范高等?？茖W(xué)校學(xué)報(bào)，2005，17（6）：10-13.

[2] 龔力波，鄭思鄉(xiāng)，肖龍騫，等.馬來甜龍竹的組織培養(yǎng)繁殖試驗(yàn)[J].云南林業(yè)科技，2003（1）：5-7.

[3] 蘇海，鐘明，蔡時可，等.馬來甜龍竹的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].植物生理學(xué)通訊，2004，40（4）：468-469.

[4] LIN C S，CTIANG W C.Micropropagation of Bambusa edulis through no-dal explants of field-grown culms and flowering of regenerated plantlets[J].Plant cell Reports，1998，17（8）：617-620.

[5] SAXENA S.In vitro propagation of the bamboo（Bambusa tulda Roxb.）through shoot proliferation[J].Plant Cell Reports，1990，9（8）：431-434.

[6] 張有珍，劉倩倩，何冬冬，等.鋪地竹試管快速繁殖研究[J].浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)，2012（1）：151-154.