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    桑黃成分及其抗腫瘤作用機(jī)制研究進(jìn)展

    2017-03-06 17:27:00孫佳琦張甘霖于明薇王笑民
    關(guān)鍵詞:桑黃多糖腫瘤

    孫佳琦 張甘霖 于明薇 王笑民

    [摘要] 桑黃是一種名貴的中藥材,近年研究發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤作用明顯。總結(jié)國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的有關(guān)桑黃及其提取物關(guān)于腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)桑黃主要是通過(guò)抗突變預(yù)防腫瘤的發(fā)生,通過(guò)促凋亡、阻滯周期、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、抑制血管生成的途徑抑制腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移,延長(zhǎng)生存期。與化療藥聯(lián)合應(yīng)用起減毒增效的作用。本文綜述桑黃各種成分提取物及其抗腫瘤作用機(jī)制,為進(jìn)一步研究桑黃抗腫瘤機(jī)制奠定基礎(chǔ)。

    [關(guān)鍵詞] 桑黃;腫瘤;多糖;Hispolon

    [中圖分類(lèi)號(hào)] R961 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210(2016)11(c)-0039-05

    Progress in the study of composition and mechanism of antitumor effect of Phellinus igniarius

    SUN Jiaqi ZHANG Ganlin YU Mingwei WANG Xiaomin

    Department of Oncology, Beijing Hospital of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100010, China

    [Abstract] Phelinus igniarius is a kind of rare Chinese traditional medicine. Many studies are conducted about its antineoplastic effects in recent years. To summarize the published studies about Phelinus igniarius and its extracts antineoplastic at home and abroad, and found Phelinus igniarius preventing tumor by anti-mutation, inhibit tumor proliferation, invasion and metastasis, prolong survival by inducing apoptosis, arresting cell cycle, regulating immunity, anti-oxidation, antiangiogenesis. Phelinus igniarius with chemotherapy can enhance the effects of chemotherapy and alleviate the drug toxicity. This review summarizes the various kinds of Phellinus igniarius ingredients extractions and its antitumor effect mechanism. Lay the foundation for further study on the antitumor mechanism of Phellinus igniarius.

    [Key words] Phelinus igniarius; Neoplasms; Polysaccharides; Hispolon

    桑黃[Phelinus igniarius(L.ex.Fr)Quel],又稱(chēng)桑臣、桑耳、桑黃菇等,分類(lèi)學(xué)上屬擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、多孔菌目、多孔菌科、針層孔菌屬,是一類(lèi)有重要藥用價(jià)值的多年生大型真菌[1],主要寄生于桑樹(shù)。最早在李時(shí)珍的《本草綱目》中就有記載桑黃能“利五臟,宣腸胃氣,排毒氣”。郁仁存教授將腫瘤致病機(jī)制歸納為:內(nèi)虛、痰濁、瘀血、癌毒,即因內(nèi)虛導(dǎo)致臟腑氣機(jī)運(yùn)化不利,痰濁停滯,瘀血內(nèi)阻,愈加阻滯氣機(jī),加之癌毒作怪而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。桑黃的主要功效:疏利五臟之氣機(jī),宣統(tǒng)腸胃運(yùn)化之氣,從而使痰濁瘀血得以運(yùn)化消散,更能排毒氣,使腫瘤無(wú)以化生。早在1971年就有桑黃多糖抑制腫瘤增殖的實(shí)驗(yàn)研究[2]。本文對(duì)桑黃的抗腫瘤研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié),以期對(duì)桑黃的抗腫瘤作用機(jī)制有更系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)。

    1 桑黃的主要成分

    桑黃的主要活性成分包括多糖、甾體、黃酮類(lèi)物質(zhì)、酚類(lèi)物質(zhì)、萜類(lèi)、香豆素類(lèi)物質(zhì)、生物堿,其中報(bào)道最多的是多糖。提取方法報(bào)道最多的是醇提物。早期對(duì)其活性成分的研究多集中于酸性多糖、蛋白結(jié)合多糖、蛋白-葡聚糖復(fù)合物。近年來(lái)對(duì)其成分進(jìn)行提純,多個(gè)單體被分離出來(lái),包括早在2000年提取出的作為幾丁質(zhì)合成酶抑制劑抗真菌的Phellinsin A[3]和有神經(jīng)氨酸苷酶抑制作用的inotilone等[4]。研究最多的桑黃提取單體是Hispidin。早在2004年,Park等[5]報(bào)道從桑黃中提取出Hispidin,并逐步發(fā)現(xiàn)其具有抗氧化、抗脂質(zhì)過(guò)氧化、保護(hù)神經(jīng)、預(yù)防阿爾茨海默病、調(diào)節(jié)免疫抗炎、抗腫瘤、抗流感的效果。

    2 桑黃的抗腫瘤作用

    2.1 抗突變

    桑黃能夠有效抑制直接誘突變劑4-硝基鄰苯二胺(NPD),疊氮化鈉(NaN3),甲基硝基亞硝基胍(MNNG)、阿霉素、N-亞硝基二乙胺[6]和間接誘突變劑2-乙酰基氨基芴(2-AAF)、苯并芘[7]的誘變[8],并能抑制電離輻射的誘突變[9]。說(shuō)明桑黃有抗突變活性,可能是通過(guò)誘導(dǎo)醌氧化還原酶(QR)和谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GST)的活性,提高谷胱甘肽水平,在癌癥預(yù)防中發(fā)揮作用[10]。

    2.2 抑制腫瘤細(xì)胞增殖

    桑黃對(duì)多種腫瘤,如肺癌、前列腺癌、肝癌、黑色素瘤、結(jié)腸癌、乳腺癌、膀胱癌、白血病、口腔癌、胃腺癌、宮頸癌、腦癌、皮膚乳頭狀瘤的生長(zhǎng)具有抑制作用。

    2.3 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡

    桑黃提取物Phelinus linteus(PL)對(duì)前列腺癌、膀胱癌、腎癌、肺癌、乳腺癌、胃癌、肝癌、腦癌等的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明,PL明顯活化Caspase-3,Caspase-9[11],并能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞THP-1凋亡[12]。Hispolon在鼻咽癌細(xì)胞HONE-1實(shí)驗(yàn)中能夠活化Caspase-3,-8,-9,PARP裂解,并促進(jìn)p-ERK1/2,p38 MAPK,JNK1/2,其促凋亡作用可以被MAPK抑制劑阻斷[13]。桑黃多糖也可以誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞凋亡[12]。500 μg/mL作桑黃粗多糖用于HO-8910PM細(xì)胞96 h可誘導(dǎo)其凋亡[14]。Hispolon可以有效抑制肺癌細(xì)胞A549和H661,抑制了G1-S通路相關(guān)蛋白:Cyclin D1,Cyclin E,CDK2,CDK4和CDK6,但是增加了p21(CIP1)和p27(KIP1)CDK的抑制劑CDK的表達(dá),還降低了線粒體膜蛋白的表達(dá),推斷其通過(guò)線粒體途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并促進(jìn)細(xì)胞色素C釋放入細(xì)胞質(zhì),Caspase-9,Caspase-3和ADP核糖聚合酶的分裂,增加了p53的表達(dá)[15]。在體內(nèi)桑黃通過(guò)增加Caspase-3表達(dá),降低Ki67陽(yáng)性細(xì)胞活化,活化Caspase8/9/3,顯著降低HL-60荷瘤小鼠腫瘤的生長(zhǎng)[16]。以上實(shí)驗(yàn)表明無(wú)論是桑黃多糖,還是提取出的有效單體都能通過(guò)激活Caspase,有效促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。

    2.4 對(duì)腫瘤細(xì)胞周期阻滯

    桑黃提取物polysaccharide能導(dǎo)致結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞S期阻滯,下調(diào)Cyclin D1,Cyclin E,CDK2[17]。在HepG-2細(xì)胞有相似的S期阻滯,并認(rèn)為與鈣網(wǎng)蛋白,p27 kip1-cyclin A/D1/E-CDK2 通路有關(guān)[18],對(duì)人肝癌細(xì)胞Hep3B[19]有類(lèi)似的S期阻滯效果。但也有報(bào)道稱(chēng),HT-29細(xì)胞出現(xiàn)G0/G1期阻滯[20]SW480細(xì)胞出現(xiàn)G2/M期阻滯[21]。對(duì)肺癌細(xì)胞A-549和H-611[15],小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10,人白血病細(xì)胞NB4[22],有G0/G1期阻滯的效果。桑黃能夠阻滯細(xì)胞周期,其機(jī)制尚不明確,有待進(jìn)一步證實(shí)。

    2.5 促進(jìn)腫瘤細(xì)胞自噬

    有關(guān)自噬的研究并不多,只有桑黃提取物和低劑量的氟尿嘧啶合用可以提高三陰乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231細(xì)胞的研究,認(rèn)為可以提高細(xì)胞自噬[23]。

    2.6 抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移

    桑黃提取物能夠在體內(nèi)降低肝癌細(xì)胞H22,肉瘤細(xì)胞B16[24],Lewis肺癌S-180[25]的轉(zhuǎn)移,并降低VEGF的表達(dá)。在體外實(shí)驗(yàn)中,桑黃提取物能夠抑制小鼠黑色素瘤和肝癌細(xì)胞HepG2的粘附功能,抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)移[26-27]。桑黃子實(shí)體的乙醇提取物(EEPI)在低于細(xì)胞毒作用濃度就可以明顯降低SK-Hep-1細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)水平,抑制侵襲遷移,并能完全抑制RHE細(xì)胞轉(zhuǎn)移微管形成[28]。EEPI可以抑制人肝癌細(xì)胞SK-Hep-1遷移和侵襲能力,能夠降低MMP-2和VEGF的表達(dá)[28]。桑黃云芝膠囊抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠的肺轉(zhuǎn)移,其中高劑量組轉(zhuǎn)移集落明顯少于模型組(P<0.05)[29],并能抑制小鼠S180、H22腫瘤組織中VEGF表達(dá),認(rèn)為它能抑制腫瘤血管生成[30]。

    2.7 調(diào)節(jié)免疫

    與其他真菌多糖一樣,桑黃多糖能夠調(diào)節(jié)免疫增強(qiáng)體質(zhì)[31]。在荷瘤鼠實(shí)驗(yàn)中桑黃多糖在抑瘤同時(shí)能夠明顯提高血清IL-2、IL-18水平和脾指數(shù)及胸腺指數(shù)[32-33],并可以刺激機(jī)體,使其淋巴細(xì)胞數(shù)量增殖[34]。桑黃云芝膠囊也有類(lèi)似的效果[30]。表明桑黃具有抗腫瘤活性,且能夠調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能,多個(gè)實(shí)驗(yàn)證實(shí)其抗腫瘤作用可能與免疫調(diào)節(jié)機(jī)制相關(guān)[24,35-38]。

    2.8 抗血管生成

    桑黃含有的葡聚糖能夠抑制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVECs的增殖,抑制肝癌細(xì)胞H22在小鼠體內(nèi)的增殖,認(rèn)為桑黃葡聚糖能夠抑制血管生成,起抗腫瘤的作用[39]。桑黃蛋白結(jié)合多糖PL能夠抑制結(jié)腸癌細(xì)胞SW480的增殖侵襲和HUVECs細(xì)胞增殖和毛細(xì)管形成,能夠降低HUVECs細(xì)胞VEGFR2的表達(dá)[36],在SW480荷瘤裸鼠模型中表現(xiàn)出了良好的抑瘤作用,能夠降低瘤組織β連環(huán)蛋白的表達(dá),降低Cyclin D1[40]。

    2.9 抗雌激素作用

    Hispolon與ERβ的結(jié)合能力較ERα強(qiáng),能夠選擇性地激活ERβ,從而對(duì)雌激素依賴(lài)性腫瘤細(xì)胞起抑制作用。對(duì)ER+的MCF-7細(xì)胞株證明了Hispolon具有良好的抗腫瘤和抗雌激素的效果。

    2.10 抗氧化作用

    上調(diào)HepG2胞內(nèi)的ROS,通過(guò)調(diào)節(jié)PI3K/Akt,MAPK相應(yīng)蛋白的激活,促進(jìn)轉(zhuǎn)錄因子AP-1,NF-κB mRNA的表達(dá),從而調(diào)節(jié)HepG2細(xì)胞的增殖,使用桑黃多糖干預(yù)則可以通過(guò)下調(diào)ROS而抑制HepG2的增殖[41]。桑黃高氧化程度的不飽和26元大環(huán)代謝物phelligridimer A表現(xiàn)出了抗氧化作用,但是對(duì)于一些癌細(xì)胞株是沒(méi)有作用的[42]。桑黃的另一種提取物Phelligridin G能防止小鼠肝臟微粒體脂質(zhì)過(guò)氧化,具有抗氧化作用,并對(duì)人腫瘤細(xì)胞有溫和的選擇性細(xì)胞毒作用[43]。

    2.11 與其他藥物的協(xié)同作用

    桑黃云靈膠囊與氟尿嘧啶聯(lián)合應(yīng)用,較單獨(dú)應(yīng)用環(huán)磷酰胺(CTX)明顯延長(zhǎng)了H22荷瘤鼠存活天數(shù)[44]。桑黃子實(shí)體醇提物與奧沙利鉑或氟尿嘧啶合用時(shí)能夠協(xié)同抑制人肝癌SK-Hep-1細(xì)胞的增殖[28]。桑黃和CTX聯(lián)合能夠提高S180荷瘤鼠的機(jī)體免疫力,降低CTX的毒性,提高抗腫瘤的作用[46]。桑黃提取物可以降低順鉑引起的腎毒性[47]。桑黃能夠激活Caspase,與阿霉素合用能夠增加藥效[47-48]。

    3 小結(jié)

    對(duì)于不同的腫瘤,桑黃所產(chǎn)生的作用也是不盡相同的[24],但是均表現(xiàn)出了一定的抑制作用,并通過(guò)PI3K/AKT信號(hào)通路,激活Bcl-2,激活線粒體細(xì)胞傳導(dǎo)通路,抑制G1-S通路,促進(jìn)凋亡。通過(guò)上調(diào)p27Kip和p21cip的表達(dá)量,抑制Cyclin D1/CDK4和Cyclin E/CDK2兩個(gè)復(fù)合物的活性,使細(xì)胞阻滯于G1/S期,通過(guò)抑制MMP抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移,通過(guò)抑制VEGF抑制新生血管形成。連同抗氧化和調(diào)節(jié)免疫的作用,共同抑制腫瘤的生長(zhǎng),延長(zhǎng)荷瘤實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生存期,并且能夠通過(guò)抑制突變預(yù)防惡性腫瘤的發(fā)生。

    傳統(tǒng)中醫(yī)藥是一個(gè)等待人們?nèi)ネ诰虻膶毑?,世事變遷,疾病也是千變?nèi)f化層出不窮,但疾病萬(wàn)變不離其宗,即病機(jī),抓住病機(jī)猶如提綱挈領(lǐng),必然使變化的疾病迎刃而解。桑黃是傳統(tǒng)中醫(yī)藥的一顆瑰寶,“利五臟,宣腸胃氣,排毒氣”的功效對(duì)應(yīng)了腫瘤“內(nèi)虛、痰濁、血瘀、癌毒”的中醫(yī)病機(jī)。在中醫(yī)理論指導(dǎo)下,人們對(duì)桑黃抗腫瘤作用機(jī)制的研究不斷深入,逐漸揭開(kāi)桑黃抗腫瘤的作用機(jī)制,讓傳統(tǒng)的中醫(yī)理論得到了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的證實(shí)。桑黃作為一種頗具前景的中藥,正在得到世界的認(rèn)識(shí),隨著對(duì)桑黃成分結(jié)構(gòu)研究的進(jìn)一步深入,其抗腫瘤的作用機(jī)制進(jìn)一步得以明晰。

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    (收稿日期:2016-08-25 本文編輯:王紅雙)

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