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    黃豆苷元的含量測定及理化性質(zhì)考察分析

    2017-03-04 00:39:24周燕燕韓永超尹桂麗
    科學(xué)與財富 2016年32期
    關(guān)鍵詞:含量測定分析

    周燕燕+韓永超+尹桂麗

    摘 要:為了更好的了解和研究中藥藥品葛根的成分及含量,為葛根入藥時提供更精準(zhǔn)的藥理依據(jù)。本文對葛根中的黃豆苷元進(jìn)行了分析探究。本文主要是采用紫外分光光度法對黃豆苷元固體脂質(zhì)納米粒中黃豆苷元的含量進(jìn)行考察,并對理化性質(zhì)進(jìn)行分析,為后續(xù)的黃豆苷元制劑研究提供參考。

    關(guān)鍵詞:黃豆苷元;含量測定;理化性質(zhì)考察;分析

    黃豆苷元屬于中藥的一種,是葛根的提取物,屬于異黃酮化合物。我國對于葛根中異黃酮化合物的提取方法主要有純現(xiàn)代中藥提取和中藥分離技術(shù)方法,這種提取物可以對高血壓和心腦血管類疾病進(jìn)行有效治療,服用后病情控制效果顯著,并且無副作用和不良反應(yīng),也不會在體內(nèi)沉積,目前只有我國對于黃豆苷元有技術(shù)性的研究,此項目在國外沒有意向,而我國現(xiàn)在對于黃豆苷元的還處于口服藥品階段,但口服藥品需要一定的快速溶解性,這樣才可以讓藥物在胃中短時間內(nèi)吸收對病情起到作用,但黃豆苷元較為難溶于水,它在人體的吸收情況并不理想,如果遇見病人的腸胃功能較差,更會影響黃豆苷元的吸收,降低了其臨床的應(yīng)用作用。所以制藥方面考慮黃豆苷元制成固體脂質(zhì)納米粒,固體脂質(zhì)納米粒與普通的制劑相比較,具有更高的載藥量和包封率、毒性低和生物利用率較高等優(yōu)點。

    1 黃豆苷元體外分析方法的建立

    1.1 制備黃豆苷元SLN

    在黃豆苷元SLN準(zhǔn)備過程中,首先要將單硬脂酸甘油酯進(jìn)行加熱,溫度要達(dá)到70℃使其溶化,再加入主體藥物黃豆苷元,充分?jǐn)嚢枳屗幬锞鶆虻姆稚⒅羻斡仓岣视王ブ?,而后加入同樣溫度的其中含有豆磷脂的水溶液,再進(jìn)一步進(jìn)行機(jī)械攪拌,一直到初乳的形成方可停止,然后將其在500W的功率下進(jìn)行超聲分散5min,從0.45μm的為微孔中過濾,在原有量的基礎(chǔ)上附加注射用水,將其體積補充到處方量,放置室內(nèi)進(jìn)行冷卻,溫度與室內(nèi)相同后就可以得到黃豆苷元SLN。

    1.2 選擇波長檢測

    提取黃豆苷元對照片適量,將其和無水乙醇一起溶解,進(jìn)行定量稀釋,成為適當(dāng)濃度的溶液,與此同時,用同樣的方法在進(jìn)行空白脂質(zhì)納米粒的乙醇溶液的配置,無水乙醇溶液為空白,按照分光光度法,將其放置紫外掃描,紫外掃描的波長范圍在200~400之間,在檢測中發(fā)現(xiàn)黃豆苷元對紫外掃描的最大吸收波長為249nm,因為同樣濃度的空白納米粒在這樣的波長范圍內(nèi)沒有被干擾的,所以就可以確定黃豆苷元的檢測波長為249nm。

    1.3 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線

    取黃豆苷元對照品進(jìn)行精密量需10mg,將取出的黃豆苷元對照品放進(jìn)100mL的量瓶中,用無水乙醇進(jìn)行溶解并稀釋至刻度,精密量取上述5mL置50mL的量瓶中,在此加入無水乙醇進(jìn)行稀釋到刻度作為儲存液。對儲存液進(jìn)行精密量取,分別取出1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0mL置10mL量瓶中,之后用無水乙醇進(jìn)行定容,用分光光度法,在249nm的波長處測定其吸收度,線性回歸以吸收度A對濃度C方式進(jìn)行,得出的回歸方程為Y= 0. 1146X-0.018,R2=0.9995。得出結(jié)果表明在1.0~6.0μg/mL范圍黃豆苷元內(nèi)線性關(guān)系良好。

    1.4 精密度試驗

    取黃豆苷元適量精密稱定,將其分為兩份,兩份分別使用無水乙醇制成1.0,3.0,6.0μg/mL濃度的溶液,使用0.45μm濾膜進(jìn)行過濾,對其分別在日內(nèi)和日間進(jìn)行重復(fù)測定,對其精密度進(jìn)行考察,結(jié)果表明其精密度考察結(jié)果符合方法學(xué)的要求。

    1.5 回收率試驗

    首先從黃豆苷元的對照品中取精密稱取10mg,放進(jìn)100mL的量瓶中,使用無水乙醇將其溶解,然后進(jìn)行稀釋到一定刻度。取溶解稀釋后的溶液5mL放至準(zhǔn)備好的空的50mL量瓶中,然后再使用無水乙醇對其進(jìn)行定容。制備好這種溶液后,留做對照品的儲備液。然后,再取空白SLN混懸液5mL,置3個25mL棕色容量瓶中,依次加入對照品儲備液2.5,7.5,15.0mL,加無水乙醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得濃度分別為1.0、3.0、6.0μg/mL的樣品溶液,分別測定吸收度,代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中計算回收率。結(jié)果表明,該分析方法的回收率符合方法學(xué)要求。

    1.6 樣品含量的測定

    精密量取適量SLN混懸液3mL,置25mL量瓶中,加適量無水乙醇,超聲約5min,加無水乙醇稀釋至刻度。搖勻,濾過。精密量取續(xù)濾液5mL,置25mL量瓶中,加無水乙醇至刻度,搖勻,作為供試品溶液。以無水乙醇為空白,于249nm波長處測定吸收度A樣,另取已知濃度黃豆苷元對照品溶液同法測定吸收度A對,按照公式計算供試液濃度C樣:C樣=C對×A樣/A對。

    2 黃豆苷元基本理化性質(zhì)研究

    2.1 黃豆苷元在不同pH值磷酸鹽緩沖液中的溶解度:將過量黃豆苷元原料投入pH值為2.0,5.8,6.5,7.2,7.8的磷酸鹽緩沖液的錐形瓶中,渦旋15min,置空氣恒溫振蕩器中,37℃、120次/min恒溫振蕩12h,平衡48h后,在規(guī)定時間取樣,用0.45μm微孔濾膜保溫過濾后,測定溶液吸收度,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算藥物的濃度,結(jié)果黃豆苷元在不同pH值磷酸鹽緩沖液中的溶解度分別為1.643,2.064,2.567,5.179,6.876μg/mL。結(jié)果表明黃豆苷元的溶解度隨著pH值的升高而增加。

    2.2 黃豆苷元在不同介質(zhì)中油水分布系數(shù)的測定:本文采用搖瓶法測定黃豆苷元的油/水分配系數(shù)。本實驗選擇正辛醇為油相,pH2.0,5.7,6.5,7.8的磷酸鹽緩沖液及蒸餾水為水相,在經(jīng)水飽和過的正辛醇溶液中定量加入黃豆苷元溶解后,0.45μm濾膜過濾,與經(jīng)正辛醇飽和的不同pH值水相各15mL裝入錐形瓶中,密塞,于渦旋振蕩器上劇烈振蕩30min后,放入37℃空氣恒溫振蕩器中,在120r/min下振蕩72h,靜置后兩相分層,分別吸取水相和油相,紫外分光光度法測定黃豆苷元在水相中的濃度(Cw),計算油相的濃度Co=(m總-Cw·Vw)/V,油相和水相中藥物濃度的比值即為油/水分配系數(shù)P=C油相/C水相=Co/Cw,每種介質(zhì)重復(fù)測定3次取平均值。

    結(jié)果如下:水相為pH2.0,5.7,6.5,7.8的緩沖液及蒸餾水時,測得的油/水分配系數(shù)P分別為120.4,82.3,76.8,18.4和48.6,表明黃豆苷元油水分配系數(shù)隨pH值升高而降低。

    3 討論

    由本文上述分析可以得知,在對黃豆苷元的含量進(jìn)行測定和分析時,可以采用體外分析法進(jìn)行測定和分析,并且這樣的測定方法符合藥典相關(guān)規(guī)定和要求。在本研究中,對黃豆苷元的測定采取了紫外分光光度法的測定方法,并確定其檢測波長是249mm。本次測定試驗結(jié)果顯示,分析方法不但可行,且重現(xiàn)性非常好。除此之外,準(zhǔn)確度也十分高,因而可以將本體外分析法當(dāng)做黃豆苷元的測定方法推廣使用。希望本文的研究分析可以為藥學(xué)工作人員的工作提供一些借鑒和幫助。

    參考文獻(xiàn)

    [1]李忠亮,王曉波,宋曉楠,襲榮剛,姚文,石焱.黃豆苷元膠囊在健康人體的藥動學(xué)研究及生物等效性評價[J].藥學(xué)服務(wù)與研究,2015(04).

    [2]李忠亮,王文博.黃豆苷元在健康人體內(nèi)的藥動學(xué)研究[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報,2015(01).

    [3]王艷梅,呂立勛.黃豆苷元的藥理作用及臨床應(yīng)用[J].中國藥師,2014(09).

    [4]韓文全,李艷芹,何志松.黃豆苷元的研究與開發(fā)[J].食品與藥品,2016(05).

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