復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及血清生化指標(biāo)的影響

■ 陳 靜 周振金 劉乃芝 謝全喜 徐海燕 谷 巍 王春鳳 殷潔鑫

（1.山東寶來利來生物工程股份有限公司，山東泰安271000；2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林長春130000；3.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州225300）

霉菌毒素（mycotoxins）是絲狀真菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，其性質(zhì)穩(wěn)定，不易分解。目前已鑒別出的霉菌毒素有400多種[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前世界上每年至少有25%的農(nóng)作物被霉菌毒素所污染，這些農(nóng)作物被動(dòng)物攝入后能引起多種不良的生理反應(yīng)，主要表現(xiàn)為慢性中毒，導(dǎo)致動(dòng)物的生長、繁殖障礙，影響動(dòng)物生產(chǎn)性能、產(chǎn)蛋率和孵化率等[2-3]，同時(shí)毒素在動(dòng)物組織中殘留，通過肉、蛋、奶和奶酪等畜產(chǎn)品給人類健康帶來危害[4]，引起代謝紊亂、免疫抑制、致癌、致畸和活性誘變等[5]。因而，霉菌毒素成為影響食品安全的一個(gè)重要因素。

在過去的幾十年，科學(xué)工作者就一直致力于飼料霉菌的預(yù)防、解毒、脫毒方面的研究工作[4,6]。研究表明，霉變飼料中添加霉菌毒素吸附劑是解決這個(gè)問題最為有效和最主要的方法[7]，防止或減少動(dòng)物的霉菌毒素中毒癥狀。同時(shí)生物脫毒法的處理?xiàng)l件相對(duì)溫和，不破壞飼料中其他營養(yǎng)成分，且能增加產(chǎn)品的營養(yǎng)價(jià)值，目前生物脫毒法也受到廣泛關(guān)注。本試驗(yàn)旨在探討霉菌毒素吸附劑水合硅酸鹽和益生菌組成的復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑對(duì)飼喂霉變飼料的蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和血清生化指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑：主要由枯草芽孢桿菌、乳酸桿菌和水合硅酸鹽等成分組成，其中枯草芽孢桿菌及其代謝產(chǎn)物可降解玉米赤霉烯酮、乳酸桿菌可降解黃曲霉毒素B1，均由山東寶來利來生物工程股份有限公司研究院提供，活菌數(shù)≥5.0×108cfu/g；霉變玉米置于自然條件（溫度23～28℃，濕度65%～85%）培養(yǎng)制備，將水分提高至20%左右，肉眼觀察有明顯霉變產(chǎn)生，用霉菌毒素ELISA試劑盒檢測(cè)，其中黃曲霉毒素B1（AFB1）90 μg/kg，按照50%霉變玉米替代正常玉米配制試驗(yàn)飼料黃曲霉毒素B1（AFB1）27.9 μg/kg，已超過蛋雞的安全限度20 μg/kg；玉米赤霉烯酮（ZEN）2 512 μg/kg，按照50%霉變玉米替代正常玉米配制試驗(yàn)飼料玉米赤霉烯酮（ZEN）778.7 μg/kg，已超過蛋雞的安全限度500 μg/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧

420日齡海蘭褐產(chǎn)蛋雞600只，隨機(jī)分為5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)40只?？瞻讓?duì)照組（Ⅰ組）：飼喂正常玉米日糧；陰性對(duì)照組（Ⅱ組）：飼喂用50%霉變玉米替代正常玉米的日糧；試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組，飼喂在陰性對(duì)照日糧的基礎(chǔ)上添加復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑，添加量分別為1.0‰、2.0‰和4.0‰。預(yù)飼期1周，試驗(yàn)期28 d。

飼養(yǎng)過程中防止飼料發(fā)霉和霉變飼料繼續(xù)發(fā)霉，將飼料置于干燥、陰涼條件下存放?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

常規(guī)飼養(yǎng)管理，人工喂料和揀蛋。飼料為干粉料，自由采食和飲水。每日8：00、11：00、14：00和17：00各喂料1次。每天喂料以次日添料時(shí)基本不剩料為標(biāo)準(zhǔn)。每天15：00撿蛋1次。試驗(yàn)期內(nèi)采用自然加人工光照，光照強(qiáng)度為20 lx，16 h/d，舍內(nèi)溫度控制在18～23℃，相對(duì)濕度為40%～60%，自然通風(fēng)。每天定時(shí)記錄各個(gè)重復(fù)組試驗(yàn)雞產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、破軟蛋數(shù)等，每周統(tǒng)計(jì)1次采食量。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定

于正試期第1 d早上6：00將料槽里的飼料全部清除干凈，然后飼喂試驗(yàn)日糧，每周末定時(shí)結(jié)料、稱重，并統(tǒng)計(jì)各重復(fù)的實(shí)際耗料量。試驗(yàn)期每天以重復(fù)為單位，記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、采食量、破殼數(shù)、次蛋數(shù)（蛋殼著色不均勻、沙皮蛋、軟殼蛋、薄殼蛋及畸形蛋等），計(jì)算試驗(yàn)蛋雞每周的蛋重、產(chǎn)蛋數(shù)、料蛋比和軟破蛋率。

1.4.2 蛋品質(zhì)測(cè)定

于試驗(yàn)35 d時(shí)，每組隨機(jī)抽取30枚（每個(gè)重復(fù)10枚）蛋采用全自動(dòng)蛋品質(zhì)儀測(cè)定雞蛋蛋重、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋形指數(shù)等。

蛋殼厚度：分別取蛋的大頭、小頭和中間部分的蛋殼，用鑷子剔除內(nèi)殼膜，用蛋殼厚度測(cè)定儀分別測(cè)其厚度，取其平均值作為蛋殼厚度。

蛋形指數(shù)：分別用游標(biāo)卡尺測(cè)量雞蛋的橫徑長和縱徑長，計(jì)算縱徑長/橫徑長的比值。

1.4.3 血液生化指標(biāo)的測(cè)定

于試驗(yàn)35 d時(shí)從每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)抽取5只禁食（自由飲水）12 h后的蛋雞，翅下采血，4 000 r/min離心取血清。采用日立7020全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和堿性磷酸酶（ALP）含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel軟件進(jìn)行初步處理后，采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用One-way ANOVA進(jìn)行方差分析，LSD法進(jìn)行組間多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能的影響（見表2）

表2 復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，產(chǎn)蛋率方面，與空白對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組飼喂霉菌毒素日糧后顯著降低產(chǎn)蛋率（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，隨著復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑添加劑量的增加產(chǎn)蛋率呈升高趨勢(shì)，其中2.0‰和4.0‰添加量組產(chǎn)蛋率分別提高5.81%和11.22%，差異均顯著（P＜0.05）；日耗料量方面，與空白對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組飼喂霉菌毒素日糧后日耗料量顯著提高（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，隨著復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑添加劑量的增加日耗料量呈降低趨勢(shì)，差異均顯著（P＜0.05）；料蛋比方面，與空白對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組飼喂霉菌毒素日糧后料蛋比顯著提高34.95%（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，隨著復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑添加劑量的增加料蛋比呈降低趨勢(shì)，差異均顯著（P＜0.05），其中4.0‰添加量組料蛋比最低；破軟殼率方面，與空白對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組顯著提高（P＜0.05）。隨復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑添加劑量的增加破軟殼率呈降低趨勢(shì)，其中2.0‰和4.0‰添加量組顯著低于陰性對(duì)照組（P＜0.05）。綜上可知，2.0‰和4.0‰添加量組在改善霉菌毒素污染的蛋雞生產(chǎn)性能方面效果較好，其中以4.0‰添加量組效果最優(yōu)。

2.2 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響（見表3）

表3 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，與空白對(duì)照組相比，陰性對(duì)照組飼喂霉菌毒素日糧蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋黃色澤分別降低19.44%、16.29%和20.50%，差異均顯著（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，各霉菌毒素吸附劑添加組蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋黃色澤均呈增高趨勢(shì)，其中2.0‰和4.0‰添加量組蛋殼厚度分別提高20.69%和27.59%，1.0‰、2.0‰和4.0‰添加量組蛋殼強(qiáng)度分別提高9.73%、17.79%和15.77%，4.0‰添加量組蛋黃色澤提高19.00%，差異均顯著（P＜0.05）；霉菌毒素和復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑對(duì)蛋重、蛋黃重、蛋形指數(shù)、蛋白高度和哈氏單位沒有顯著影響。

2.3 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞血清生化指標(biāo)的影響（見表4）

表4 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞血清生化指標(biāo)的影響（U/l）

由表4可知，與對(duì)照組（I組）相比，陰性對(duì)照組（Ⅱ組）ALT、AST和ALP分別升高87.58%、23.19%和48.66%，差異均顯著（P＜0.05）。與陰性對(duì)照組相比，各復(fù)合型霉菌毒素吸附劑組ALT、AST和ALP均呈下降趨勢(shì)，其中4.0‰添加量組ALT和AST分別降低25.04%和16.19%，2.0‰和4.0‰添加量組ALP分別降低11.99%和17.46%，差異均顯著（P＜0.05）。綜上可知，飼料中污染霉菌毒素后對(duì)蛋雞肝臟造成一定程度的損傷，添加復(fù)合型霉菌毒素吸附劑后使得ALT、AST和ALP含量呈下降趨勢(shì)，說明復(fù)合型霉菌毒素吸附劑吸附了一定量的霉菌毒素，減輕了對(duì)肝臟的損傷，其中以4.0‰添加量效果最優(yōu)。

3 討論

3.1 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞生產(chǎn)性能的影響

飼料中常因劣質(zhì)原料或存放不當(dāng)含有霉菌毒素，如果不強(qiáng)化管理或脫毒處理，將對(duì)產(chǎn)蛋雞產(chǎn)生危害，從而影響蛋雞養(yǎng)殖效益。霉菌毒素可導(dǎo)致蛋雞卵巢和輸卵管萎縮、產(chǎn)蛋量下降、畸形蛋增多、生產(chǎn)性能下降，飼料報(bào)酬降低等。其中對(duì)蛋雞影響及毒害作用較大的毒素有黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮等[8]。李俊營等[9]研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加吸附劑載鋅納米蒙脫石可提高蛋雞產(chǎn)蛋率。張軍民等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在蛋雞日糧中添加0.2%霉菌毒素吸附劑可極顯著提高產(chǎn)蛋率，降低破損率。史艷云等[11]研究發(fā)現(xiàn)，在含有霉菌毒素的蛋雞日糧中添加枯草芽孢桿菌可顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率和蛋殼強(qiáng)度，降低料蛋比。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與空白對(duì)照組相比，霉菌毒素顯著降低蛋雞產(chǎn)蛋率、顯著提高料蛋比和破軟殼率；2.0‰和4.0‰復(fù)合型霉菌毒素吸附劑組可顯著提高含霉菌毒素日糧蛋雞產(chǎn)蛋率、顯著降低破軟殼率和料蛋比，其中4.0‰添加量時(shí)效果接近正常水平。

3.2 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)的影響

Zaghini等[12]報(bào)道，日糧中霉菌毒素可使雞蛋的蛋黃重、蛋黃色澤、蛋殼強(qiáng)度和蛋殼厚度等蛋品質(zhì)指標(biāo)顯著變差。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂霉菌毒素日糧可顯著降低（P＜0.05）蛋殼厚度、蛋殼強(qiáng)度和蛋黃色澤19.44%、16.29%和20.50%。添加2.0‰和4.0‰復(fù)合霉菌毒素吸附劑可使蛋殼厚度分別提高20.69%和27.59%、蛋殼強(qiáng)度分別提高17.79%和15.77%，差異均顯著（P＜0.05）。4.0‰復(fù)合霉菌毒素吸附劑可顯著提高蛋黃色澤19.00%（P＜0.05）。在一定程度上改善了雞蛋的蛋品質(zhì)，緩解了霉菌毒素對(duì)蛋雞的毒害作用。這與史艷云等[11]研究結(jié)果相一致。本試驗(yàn)中添加霉菌毒素吸附劑對(duì)蛋品質(zhì)的改善效果較空白對(duì)照組較差，分析原因可能是試驗(yàn)采用的發(fā)霉玉米的營養(yǎng)成分已被破壞，營養(yǎng)水平低于正常玉米，即使添加了霉菌毒素吸附劑也不可能達(dá)到正常玉米的營養(yǎng)價(jià)值。

3.3 復(fù)合型霉菌毒素吸附劑對(duì)海蘭褐蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)的變化反映組織細(xì)胞通透性和動(dòng)物機(jī)體新陳代謝機(jī)能的基本狀況。霉菌毒素是肝毒素，低劑量可致動(dòng)物肝臟損傷、免疫機(jī)能抑制，長期接觸可引發(fā)動(dòng)物癌變致死[13]。在毒素造成蛋雞肝臟機(jī)能紊亂和肝細(xì)胞受損時(shí)，多種與肝臟活動(dòng)相關(guān)的酶類會(huì)釋放出來進(jìn)入血液中，使血清中多種酶的活性升高，因此血清酶活性變化是評(píng)估動(dòng)物組織和器官損傷程度的依據(jù)[14]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)霉玉米使蛋雞血清中ALT、AST和ALP含量顯著升高，蛋雞肝臟受到損傷。4.0‰復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑組ALT、AST和ALP分別降低25.04%、16.19%和17.46%，差異均顯著（P＜0.05），維持了機(jī)體代謝穩(wěn)定，說明霉變飼料中添加該復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑可緩解霉菌毒素對(duì)肝臟等器官的損傷作用。

4 結(jié)論

復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑能夠明顯改善霉菌毒素所導(dǎo)致的的產(chǎn)蛋率低下、料蛋比和破軟殼率升高等問題，在一定程度上改善蛋品質(zhì)，并能明顯緩解霉菌毒素對(duì)肝臟等器官的損傷作用，其中以4.0‰添加量的復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑效果最好，2‰添加量的復(fù)合型霉菌毒素脫毒劑效果次之。