匹多莫德輔助治療嬰幼兒支原體肺炎療效觀察及免疫功能變化

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(南京醫(yī)科大學附屬常州市第二人民醫(yī)院兒科，江蘇 常州 213003)

·臨床醫(yī)學·

匹多莫德輔助治療嬰幼兒支原體肺炎療效觀察及免疫功能變化

徐凱虹，周羅根*，程寶金

(南京醫(yī)科大學附屬常州市第二人民醫(yī)院兒科，江蘇 常州 213003)

目的探討匹多莫得輔助治療對嬰幼兒支原體肺炎患兒的T淋巴細胞亞群的百分比的影響及細胞因子和免疫球蛋白表達的變化。方法選取100例嬰幼兒支原體肺炎患兒，隨機分為觀察組(n=50)和對照組(n=50)。對照組給予紅霉素治療，觀察組采用紅霉素聯合匹多莫德治療，比較兩組患兒T淋巴細胞亞群、血清細胞因子、血清免疫球蛋白及臨床療效。結果與對照組比較，觀察組患兒外周血中CD3+、CD4+和CD4+/CD8+細胞數顯著升高，而CD8+細胞數則顯著下降，兩組間比較，其差異有顯著性(P<0.05)；觀察組患兒血清中白細胞介素(IL)-12、IFN-γ的水平顯著升高，而IL-6和IL-8的水平則明顯下降(P<0.05)；此外，觀察組患兒血清IgM、IgG和IgA的水平較對照組增高(P<0.05)，并且觀察組的臨床療效要優(yōu)于對照組(92.0% vs 66.0%，P<0.05)。結論匹多莫得佐治嬰幼兒支原體肺炎，可顯著改善患兒免疫功能，提高臨床療效，值得臨床推廣使用。

嬰幼兒支原體肺炎； 匹多莫德； T淋巴細胞亞群； 細胞因子； 免疫球蛋白

近年來，支原體肺炎(Mycoplasma Pneumonia，MMP)的發(fā)病率逐漸上升，目前已經成為嬰幼兒常見的急性呼吸道感染疾病，治療不及時則可引起流行，嚴重威脅患兒健康[1]。有研究證實[2-3]，支原體肺炎患兒免疫失衡現象較常見，嬰幼兒支原體肺炎患兒亦是如此。傳統(tǒng)的抗菌治療通過抑制局部炎癥反應而表現出較好的近期療效，但因于其無法糾正全身免疫功能的失衡，從而使病情反復，甚至遷延不愈。因此，對機體免疫平衡的調節(jié)可望成為治療嬰幼兒支原體肺炎的新思路。匹多莫德作為新型的免疫調節(jié)劑，可促進中性粒細胞及巨噬細胞增殖、活化，提高其趨化性，調節(jié)促炎因子及抗炎因子分泌，具有顯著的抗感染及抗病毒作用[4]。本研究在常規(guī)大環(huán)內酯類治療基礎上以匹多莫德佐治嬰幼兒支原體肺炎，并從患兒T淋巴細胞亞群、血清Th1/Th2相關細胞因子、血清免疫球蛋白等方面探討匹多莫德佐治嬰幼兒支原體肺炎的療效及初步機制，從而為臨床治療嬰幼兒支原體肺炎的藥物應用提供新的實驗依據。

1 資料與方法

1.1病例的一般資料收集100例經我院收治的嬰幼兒支原體肺炎患兒(2013年6月至2015年6月)，入選病例均經臨床體征、病史、X線檢查及實驗室檢查等明確診斷，臨床主要表現為咳嗽、發(fā)熱、肺部啰音等。病例納入標準：(1)完全符合嬰幼兒支原體肺炎診斷標準；(2)年齡10月～3歲。病例排除標準：(1)肺結核患兒；(2)細菌、病毒、衣原體肺炎的患兒；(3)嬰幼兒哮喘患兒及患其他免疫缺陷病患兒；(4)使用其他免疫調節(jié)劑治療者。按隨機數字表法將入組患兒分為對照組和觀察組，每組50例。對照組中男28例，女22例；年齡10～36個月，平均年齡(20.0±4.5)個月；病程1～7天，平均病程(4.5±2.1)天。觀察組中男26例，女24例；年齡10～36個月，平均年齡(20.2±4.0)個月；病程1～7天，平均病程(4.6±2.3)天。各組患兒年齡、性別和病程等一般資料無差異(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1 對照組 治療用藥為靜脈注射紅霉素按20～30 mg/kg·天，分2次/天使用，連續(xù)使用7天；隨后改為口服阿奇霉素(生產廠家：輝瑞制藥；規(guī)格：0.1 g/袋)，口服劑量為10 mg/kg，1次/天服3天停4天，連續(xù)用藥2周。

1.2.2 觀察組 在對照組用藥基礎上給予口服匹多莫德口服液(生產廠家：江蘇蘇州長征制藥廠；規(guī)格：400 mg/支)，400 mg/次，2次/天，連續(xù)用藥2周。

1.3血液采集所有患兒分別于治療前后空腹抽取肘靜脈血5 mL，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4觀察指標

1.4.1 T淋巴細胞亞群 取CD4、CD8、CD3單抗各20 μL，分別加抗凝全血100 μL，混勻后避光置室溫孵育15min，上流式細胞儀，分別檢測CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞、CD3+T淋巴細胞的百分比，并計算CD4+/CD8+比值。

1.4.2 免疫球蛋白 患兒入院當日采集(未治療前)清晨空腹抽取外周靜脈血5 mL，1.5 mL裝入微量EDTA抗凝管中，另3.5 mL裝入未抗凝管中，2 000 r/min離心置-30 ℃冰箱保存待檢。采用免疫透射比濁法檢測免疫球蛋白m(immunoglobulin m，IgM)、免疫球蛋白G(immunoglobulin g，IgG)、免疫球蛋白a(immunoglobulin a，IgA)水平。

1.4.3 細胞因子 選用Elisa kit(BD公司)檢測血清白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-8(interleukin-6，IL-8)、白介素-12(interleukin-12，IL-12)、干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)，所有操作嚴格按照試劑盒內附說明書進行。

1.4.4 療效判定 顯效：3天內體溫復常，1周內咳嗽癥狀消失，肺部啰音消失，2周內胸片好轉；有效：1周內體溫復常，咳嗽及肺部啰音明顯減輕，2周內胸片提示肺部炎癥減輕；無效：臨床癥狀及體征無明顯改善，甚至惡化者。

2 結 果

2.1 T淋巴細胞亞群經流式細胞儀檢測，T淋巴細胞亞群在治療前，觀察組和對照組患兒外周血中的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+細胞百分比之間差異無顯著性意義(P>0.05)，而經治療后，與對照組比較，觀察組患兒外周血中的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比例顯著升高，且CD8+比例明顯下降，其差異有顯著性意義(P<0.05)(見表1)。

2.2細胞因子水平以ELISA檢測細胞因子水平，結果發(fā)現，未經治療，對照組和觀察組患兒血清中IL-6、IL-8、IL-12和IFN-γ的水平差異無顯著性意義(P>0.05)，而治療后，觀察組患兒血清IL-12和IFN-γ水平顯著升高，但IL-6和IL-8水平則明顯降低，與對照組比較，差異具有顯著性意義(P<0.05)(見表2)。

表1流式細胞術分析患兒T淋巴細胞亞群(%)

組別nCD3+治療前治療后CD4+治療前治療后CD8+治療前治療后CD4+/CD8+治療前治療后觀察組5060.1±3.268.3±3.135.3±4.543.3±3.531.1±3.528.6±2.31.4±0.42.5±0.3對照組5059.8±3.861.6±3.034.9±4.336.2±3.331.3±2.429.5±1.21.4±0.31.9±0.2t值0.8563.160.3162.910.0332.8530.0482.951P值0.4130.0340.7680.0480.9750.0460.9640.043

表2兩組患兒細胞因子水平比較(ng/L)

組別nIL-6治療前治療后IL-8治療前治療后IFN-γ治療前治療后IL-12治療前治療后觀察組5079.8±5.738.5±4.768.2±4.432.6±4.980.0±7.6109.9±6.21.6±0.44.2±0.6對照組5080.2±6.565.0±5.068.4±4.250.1±4.579.5±6.289.4±7.51.6±0.32.6±0.7t值0.0833.1140.0952.8990.1413.1560.3142.947P值0.9290.0350.9170.0480.8720.0340.7950.042

2.3免疫球蛋白水平采用免疫透射比濁法檢測免疫球蛋白，結果顯示，治療前，觀察組與對照組比較，患兒血清中IgM、IgG和IgA的水平之間的差異無顯著性意義(P>0.05)；治療后，觀察組患兒血清中IgM、IgG和IgA的水平明顯升高，跟對照組比較，其差異具有顯著性意義(P<0.05)(見表3)。

表3兩組患兒免疫球蛋白水平比較(g/L)

組別nIgM治療前治療后IgG治療前治療后IgA治療前治療后觀察組501.3±0.31.9±0.314.2±4.730.6±5.61.0±0.31.5±0.2對照組501.3±0.41.4±0.213.9±5.219.1±4.01.0±0.21.1±0.2t值0.0672.7920.8413.1210.1862.912P值0.9500.0490.4320.0360.8620.047

2.4臨床療效通過臨床療效比較，結果發(fā)現，觀察組患兒的臨床療效顯著優(yōu)于對照組(92.0% vs 66.0%)，兩組之間比較，其差異有顯著性意義(P<0.05)(見表4)。

表4兩組患兒臨床療效比較(n/%)

組別n顯效有效無效總有效率觀察組5028(56.0)18(36.0)4(8.0)92.0%對照組508(16.0)25(50.0)16(34.0)66.0%Z值9.230P值0.010

3 討 論

肺炎支原體(M.Pneumonia)人類支原體肺炎的病原體，它感染宿主后，首先通過其頂端結構粘附在宿主細胞表面致病，并可損傷細胞膜，釋放核酸酶、過氧化氫等毒性代謝產物，進一步引起細胞損傷，甚至壞死，此外，它還可以通過改變宿主細胞表面抗原結構，改變宿主機體的免疫功能[5]。近年來，發(fā)現支原體肺炎具有較廣泛的耐藥性，有研究者則提出糾正機體免疫功能的異常，可能是提高嬰幼兒支原體肺炎臨床療效的可靠途徑[6]。

匹多莫德作為人工合成的免疫刺激調節(jié)劑，研究發(fā)現，它可通過刺激機體的非特異性免疫調節(jié)機制，對機體的體液免疫和細胞免疫產生調節(jié)作用，并在不同的免疫反應階段發(fā)揮著相應的作用。在免疫反應的快反應期，匹多莫德可增強巨噬細胞和中性粒細胞的趨化性，促進其吞噬作用及及殺滅感染細胞的作用，從而提高機體殺滅病原體的能力；在免疫反應中期，匹多莫德可明顯上調IL-2及IFN表達，誘導T淋巴細胞母細胞分化，調節(jié)T淋巴細胞亞群比例，最終糾正機體免疫功能異常，并發(fā)揮治療作用[7]。

按表型不同，T淋巴細胞可分為CD3+、CD4+和CD8+等亞群；其中CD3+的T淋巴細胞代表總T淋巴細胞，其數量直接反應機體參與免疫應答的免疫活性細胞的數量；CD8+則為殺傷性T細胞，它直接參與病毒等病原體的清除；CD4+為輔助性T細胞，可促進B淋巴細胞分泌抗體，從而調節(jié)體液免疫，并且可以調節(jié)CD8+細胞的增殖和活化，但CD4、CD8不能同時表達于成熟的T淋巴細胞表面，二者起著相互誘導和相互制約的作用[8]。研究提示，T淋巴細胞亞群比例的變化可引起機體正常免疫功能狀態(tài)的改變[9]。本研究發(fā)現，觀察組患兒T淋巴細胞亞群中，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著升高，而CD8+明顯下降，而通過匹多莫德佐治則可上調CD3+及CD4+/CD8+比例，進而糾正支原體肺炎所致的T淋巴細胞亞群比例失衡。

Th1/Th2免疫平衡在與嬰幼兒支原體肺炎的發(fā)生、發(fā)展過程密切相關。IL-12、IFN-γ作為Th1型細胞因子，可有效拮抗免疫球蛋白，如IgE等引起的變態(tài)反應；IL-6、IL-8作為Th2型細胞因子，則可誘導IgE介導的免疫反應，引發(fā)炎癥級聯反應[10-12]。我們在研究中亦發(fā)現，觀察組患兒血清IL-12、IFN-γ水平顯著升高，而IL-6和IL-8水平明顯降低(P<0.05)。這些結果提示，匹多莫德佐治可糾正支原體肺炎所致的機體Th1/Th2免疫失衡，減少IgE介導的炎癥級聯反應，降低氣道高反應性。

肺炎支原體感染與免疫球蛋白表達的異常存在著一定的相關性。金燕等[13]研究證實，支原體肺炎患兒血清IgM、IgG、IgA水平明顯低于健康兒童。而匹多莫德可通過上調血清IgM、IgG、IgA水平，提高機體免疫防護能力，而這對縮短病程、減少復發(fā)是極為有利的[14-15]。而我們在研究中也發(fā)現，觀察組患兒血清IgM、IgG、IgA水平顯著升高(P<0.05)，進一步證實肺炎支原體感染與免疫球蛋白表達異常之間的相關性。

綜上所述，匹多莫德佐治嬰幼兒支原體肺炎，可有效調節(jié)T淋巴細胞亞群比例，糾正Th1/Th2免疫失衡，提高血清免疫球蛋白水平，從而增強患兒免疫能力，提高臨床治療效果。

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EffectofPidotimodonInfantileMycoplasmaPneumoniaandImmunologicFunction

XU Kaihong,ZHOU Luogen,CHEN Baojin

(DepartmentofPediatrics,AffiliatedChangzhouSecondPeople'sHospital,NanjingMedicalUniversity,Changzhou,Jiangsu213003,China)

ObjectiveTo evaluate the effect of pidotimod on T cell subpopulations,cytokines and immune globulin in infantile Mycoplasma pneumonia.Methods100 infantile Mycoplasma pneumonia were randomly divided into control group (n=50) and observation group (n=50).Pidotimod combined with erythromycin were used in observation group and erythromycin alone was used in control group.The T cell subpopulations,serum cytokines,serum immune globulin and clinical efficacy were compared between the two groups.ResultsAfter treatment,the CD3+,CD4+,CD4+/CD8+of observation group significantly increased,and CD8+were significantly reduced,statistically significant difference compared with control group(P<0.05).The observation group serum IL-12,IFN-γ significantly increased,and IL-6,IL-8 were significantly reduced,statistically significant difference compared with control group(P<0.05).The levels of IgM,IgG and IgA in observation group were significantly increased,statistically significant difference compared with control group(P<0.05).The clinical efficacy of observation group was better than control group (92.0% vs 66.0%),showed significant differences between the two groups(P<0.05).ConclusionUsing pidotimod treatment infantile Mycoplasma pneumonia can improve immune function,enhance curative effect,worth clinical promotion.

infantile Mycoplasma pneumonia;Pidotimod;T cell subpopulations;Cytokines; Immune globulin

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.03.016

2015-11-29；

2016-04-06

*通訊作者，E-mail:cz2yzlg82168@sohu.com.

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