連梅顆粒對2型糖尿病大鼠胰島素敏感性及糖脂代謝的影響※

米佳王秀閣　陳曦　王國強　朱浩宇　樸春麗*

（1長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，長春130021；2長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院兒科，長春130021）

連梅顆粒對2型糖尿病大鼠胰島素敏感性及糖脂代謝的影響※

米佳1王秀閣1陳曦1王國強1朱浩宇2樸春麗1*

（1長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，長春130021；2長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院兒科，長春130021）

目的觀察連梅顆粒對2型胰島素抵抗大鼠胰島素敏感性及糖脂代謝的影響。方法將高脂飼料喂養(yǎng)的雄性SPF級ZDF大鼠30只，隨機分為模型組、連梅顆粒組、吡格列酮組3組，普通飼料喂養(yǎng)的雄性SPF級ZL大鼠為空白組，每組各10只。連梅顆粒組按照5.1 g/（kg·d）灌胃，吡格列酮組按照1.07 mg/（kg·d）灌胃。模型組和空白組灌服同體積10 mL·kg-1的生理鹽水，每天給藥1次，連續(xù)給藥12周。以血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1C）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）、血清胰島素（INS）等為觀察指標。結(jié)果與空白組ZL大鼠比較，模型組ZDF大鼠糖尿病狀態(tài)明顯，血清FBG、INS、HbA1C、TC、TG、LDL-C、HDL-C水平升高（P＜0.05）。與模型組比較，連梅顆粒組血清FBG、INS、HbA1C、TG、TC、LDL-C水平明顯降低（P＜0.05），但INS接近吡格列酮組。結(jié)論連梅顆?？梢杂行Ц纳芞DF大鼠糖脂代謝及胰島素抵抗，其改善2型糖尿病胰島素抵抗可能是其防治糖尿病的機制之一。

連梅顆粒；ZDF大鼠；胰島素抵抗；糖脂代謝；消渴

糖尿病是一種由多種原因引起的糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂綜合征［1］。近年來，糖尿病已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)日益嚴重的公共健康問題，中國成人糖尿病總數(shù)已超過9200萬，并且糖尿病前期患者約有1.48億［2］。根據(jù)預測到2025年患病率將達到5.4%［3］。胰島素抵抗及胰島功能受損是T2DM發(fā)病的兩個基本環(huán)節(jié)［4］。因此，深入研究能夠改善胰島素抵抗及胰島功能受損的藥物，對于防治糖尿病及其并發(fā)癥有重要意義。連梅顆粒是根據(jù)吳鞠通《溫病條辨》中連梅湯加減而成。連梅湯由黃連、烏梅、麥冬、生地黃、阿膠組成，主治暑熱傷陰而致的“心熱煩躁”，口渴引飲及筋失濡養(yǎng)而致的四肢麻痹，臨床上廣泛用于治療腹瀉、痢疾、胃炎、蛔蟲等熱盛陰虧疾病。近年來有學者應(yīng)用連梅湯治療陰虛熱盛型2型糖尿病取得了較好的療效［5］。課題組針對肥胖2型糖尿病“中滿內(nèi)熱”的病機特點，在臨床上應(yīng)用連梅顆粒治療肥胖2型糖尿病患者取得了良好的療效［6］。此次動物實驗旨在結(jié)合中醫(yī)古今文獻，在已有的前期研究基礎(chǔ)上，進一步深入探討該方對ZDF大鼠糖脂代謝的影響，探討本方治療T2DM的作用機制，為糖尿病的中醫(yī)治療提供新的思路和方法。

1　材料與方法

1.1材料連梅顆粒由黃連、烏梅、大黃、生地黃、麥冬、干姜組成，由長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院顆粒藥房提供。吡格列酮由江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)（批號：國藥準字H20040631）。雄性SPF級ZDF大鼠、雄性SPF級ZL大鼠，購自北京維通利華動物有限公司，許可證號：SCXK（京）2012-O001。血清胰島素放免試劑盒購自北京翔集科技發(fā)展有限公司。實驗所需全自動生化分析儀由長春中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科提供。

1.2模型制備雄性ZL大鼠10只，8～9周齡，予以普通飼料喂養(yǎng)，自由攝食、飲水；雄性ZDF大鼠30只，8～9周齡，平均體重359～439 g，予以高脂高糖飼料喂養(yǎng)。12周后，取大鼠尾靜脈血微量，用強生血糖儀檢測血糖，血糖達到16.7 mmol/L以上者，造模成功。將造模成功的ZDF大鼠隨機分為模型組、連梅顆粒組、吡格列酮組3組，ZL大鼠為正常對照組，每組10只。

1.3藥物制備及給藥將連梅顆粒和吡格列酮分別配置成混懸液，造模成功后，連梅顆粒使用時按照5.1 g/kg體重（前期工作已確定的最佳劑量）混懸液灌胃，吡格列酮組按照1.07 mg/kg體重灌胃，正常對照組和模型組均予等體積蒸餾水灌胃，各組大鼠分別連續(xù)灌胃12周。用藥治療期間正常對照組大鼠飼以普通飼料，其它組飼以高糖高脂飼料，自由進食、飲水，每周稱重，根據(jù)體重調(diào)整灌胃劑量。

1.4生化指標檢測在給藥的第12周末，禁食12 h，水合氯醛麻醉后，腹主動脈采血，靜置2 h，3000 r·min-1，4℃離心10 min，分離血清。使用全自動生化分析儀測定血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1C）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL）含量，放射免疫法測定血清胰島素（INS）水平。

1.5統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)計量資料均以（x±s）表示，采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件進行分析處理，前后比較則用配對t檢驗，多組間差異的顯著性檢驗采用方差分析，P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠一般狀態(tài)的比較在喂養(yǎng)期間，ZL組大鼠均較活躍，對抓取抵抗明顯，正常進食飲水，毛色亮澤。ZDF大鼠較ZF大鼠肥胖，體重增長迅速，活動遲緩、反應(yīng)有鈍，毛色干枯而無光澤。

2.2各組大鼠血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1C）、及胰島素（INS）測定情況給藥12周后，與正常組相比，模型組FBG、HbA1C、INS水平均明顯升高，有極顯著差異（P＜0.01）。與模型組相比，治療組血清胰島素、HbA1C、血糖有不同程度的降低，均有顯著性差別（P＜0.05，P＜0.01），但苦酸通調(diào)組與吡格列酮組的血清胰島素相比無顯著性差異（P＞0.05）。（見表1）。

表1　連梅顆粒對2型胰島素抵抗大鼠糖代謝的影響（±s）

表1　連梅顆粒對2型胰島素抵抗大鼠糖代謝的影響（±s）

注：與正常組相比，*P＜0.01；與模型組相比，△P＜0.01，△△P＜0.05；與吡格列酮組相比，#P＜0.01

分組FBG（mmol·L-1）INS（mU·L-1）HbA1C（%）正常對照組模型組吡格列酮組連梅顆粒組7.34±0.28 27.03±1.59*24.96±1.22*△△20.42±0.42*△#22.13±3.69 38.14±11.02*31.33±1.75*△30.57±1.02*△6.27±0.48 12.53±1.45*11.34±1.35*△△9.46±0.62*△#

2.3各組大鼠血脂測定的情況給藥12周后，與正常組相比，模型組血清TG、TC、LDL-C、HDL-C水平均明顯升高（P＜0.01）。與模型組相比，吡格列酮組TG、TC明顯降低（P＜0.01）；LDL-C、HDL-C雖有降低，但無統(tǒng)計學意義。連梅顆粒組TG、TC、HDL-C、LDL-C水平與模型組相比均下降，差異均有統(tǒng)計學意義（見表2）。

表2　連梅顆粒對2型胰島素抵抗大鼠血脂的影響（±s）

表2　連梅顆粒對2型胰島素抵抗大鼠血脂的影響（±s）

注：與正常組相比，*P＜0.01；與模型組相比，△P＜0.05

分組TC（mmol·L-1）HDL-C（mmol·L-1）正常對照組模型組吡格列酮組連梅顆粒組1.70±0.41 3.81±0.43*3.47±0.41*△2.35±0.33*△TG（mmol·L-1）0.74±0.13 4.29±1.52*3.19±1.05*△2.58±0.29*△LDL-C（mmol·L-1）0.63±0.16 1.45±0.32*1.47±0.21*1.13±0.17*△1.12±0.39 2.36±0.28*1.95±0.17*1.26±0.22△

3　討論

連梅顆粒主要由黃連、烏梅、大黃、麥冬、生地黃、干姜組成。黃連為君，其性大苦大寒，《本草衍義》云：“生物者氣也，成之者味也……氣堅則壯，故苦可以養(yǎng)氣?！薄端貑枴り庩枒?yīng)象大論》曰：“寒傷形，熱傷氣?！毕柿艋穑瑵u耗氣陰，氣因熱而傷，苦可養(yǎng)氣，取黃連苦寒之性以瀉熱，使邪去正安，其氣自復，故為君藥。臣用烏梅、大黃，烏梅性味酸溫，主收斂生津，與黃連相伍以苦酸制甜；大黃苦寒，助黃連瀉熱，并可除積行瘀。干姜辛溫，辛通入絡(luò)，合黃連辛開苦降以調(diào)暢氣機，使郁滯得除；且可反佐黃連、大黃苦寒之弊，以顧護陽氣；針對消渴陰虛為本的病機特點，佐以麥冬、生地黃養(yǎng)陰生津，三藥同為佐使。六藥合用，苦、酸、辛并施，通調(diào)結(jié)合，達到了燥濕瀉壅、養(yǎng)陰清熱、通調(diào)氣機的目的。

本研究顯示，與正常組相比，模型組大鼠FBG、INS、HbA1C、TG、TC、HDL-C、LDL-C水平明顯升高，提示模型組大鼠存在明顯的高糖、高脂及嚴重的胰島素抵抗。經(jīng)連梅顆粒治療后，可降低糖尿病大鼠TG、TC、LDL水平，說明其具有調(diào)節(jié)脂代謝作用；并且可顯著降低2型胰島素抵抗大鼠FBG、INS、HbA1C、INS水平，與其能夠增加胰島素敏感性、調(diào)節(jié)脂代謝相關(guān)。

總之，連梅顆?？梢杂行Ц纳芞DF大鼠糖脂代謝及胰島素抵抗，其改善2型糖尿病胰島素抵抗可能是其防治糖尿病的機制之一。

［1］陳艷芬，王春怡，李衛(wèi)民，等.黃芪葛根湯對糖尿病心肌病大鼠氧化應(yīng)激和NF-KB表達的影響［J］.中成藥，2012，34（8）:1428-1432.

［2］中華醫(yī)學會糖尿病學分會.中國2型糖尿病防治指南（2010年版）［S］.北京:北京大學醫(yī)學出版社，2011:1.

［3］ShawJ E，Sicree R A，Zimmet P Z.Global estimates of the prevalence of diabetes for 2010 and 2030［J］.DiabetRes ClinPract，2010，87（1）:4-14.

［4］Lanuza-Masdeu J，Arevalo mI，Vila C，et al.In vivo JNK activation in pancreatic β-cells leads to glucose intolerance caused by insulin resistance in pancreas［J］.Diabetes，2013，Jan 24.Epub ahead ofprint.

［5］梁蘋茂，甄紅晅，范春來，等.連梅湯對陰虛熱盛證2型糖尿病患者血清C反應(yīng)蛋白和白細胞介素-6的影響［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2006，13（5）:13-14.

［6］韓笑，林春麗，仝小林.連梅湯治療肥胖2型糖尿病40例［J］.中醫(yī)研究，2010，23（6）:26-27.

Effect of Lianmei Granule on Insulin Sensitibity and Glucolipid Metabolism in Type 2 Diabetes Rats

MI Jia1，WANG Xiuge1，CHEN Xi1，WANG Guoqiang1，ZHU Haoyu2，PIAO Chunli1*
（1.Department of Endocrinology，the Affiliated Hospital of Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130021，China；2.Department of Pediatrics，the Affiliated Hospital of Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130021，China）

Objective To investigate the effect of Lianmei granule on insulin sensitibity and glucolipid metabolism in type 2 diabetes rats.Methods The thirty male Zucker rats（Zucker Diabetic Fatty rats）were induced by feeding of high-fat and high-carbohydrate diet were randomly divided into the model group（MD），the Pioglitazone group（PG）and the Lianmei group（LG）.A normal control group（NG）was also set up by male Zucker Lean（ZL）rats which were feeding of normal diet.There were 10 rats in each group.The Lianmei group and the Pioglitazone group were given Lianmei decoction 5.1g/（kg·d）and Pioglitazone suspension 1.07mg/ （kg·d）gavage，respectively，while the normal group and the model group were given the same amount of normal saline.After twelve weeks，all rats were weighed and fasting blood glucose（FBG），fasting serum insulin（INS），glycosylated hemoglobin（HbA1c），total cholesterol（TC），triglyceride（TG），low-density lipotrotein cholesterol（LDL-C）and high-density lipotrotein cholesterol （HDL-C）levels were compared between each group.Results Comparing with NG，there were obvious symptoms of diabetes in MG，levels of FBG，INS，HbA1C，TC，TG，LDL-C and HDL-C significantly increased（P＜0.05）.Comparing with MG，levels of FBG，INS，HbA1C，TG，TC and LDL-C significantly decreased（P＜0.05），but INS closed to PG.Conclusion Lianmei formula can improve glucose and lipid metabolism and pancreatic islet function in type 2 diabetic rats，and relieve insulin resistance that may be the possible mechanism of Lianmei granule in preventing and controlling type 2 diabetes.

Lianmei granule；Zucker Diabetic Fatty rats；insulin resistance；glucolipid metabolism；consumptive thirst

10.3969/j.issn.1672-2779.2016.18.057

1672-2779（2016）-18-0128-03

（本文編輯：李海燕本文校對：李海燕2016-02-25）

吉林省教育廳課題（No：吉教科合字【2012】第65號）

pcl2013@sina.cn