邁瑞B(yǎng)C-6800測定MCV、MCH及MCHC參考區(qū)間的調(diào)查*

馬　驥，盧德志，陳　林，吳新忠，彭玉蓮，徐建華△

(1.廣東省中醫(yī)院檢驗科，廣州 510120；2.廣東省東莞市東坑醫(yī)院檢驗科　523443)

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邁瑞B(yǎng)C-6800測定MCV、MCH及MCHC參考區(qū)間的調(diào)查*

馬驥1，盧德志2，陳林1，吳新忠1，彭玉蓮1，徐建華1△

(1.廣東省中醫(yī)院檢驗科，廣州 510120；2.廣東省東莞市東坑醫(yī)院檢驗科523443)

目的調(diào)查邁瑞B(yǎng)C-6800測定健康成年人靜脈血紅細胞平均體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)及平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)的參考區(qū)間，以建立適合廣東省中醫(yī)院檢驗科的參考區(qū)間。方法參照美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)C28-A3文件推薦方法，選取600例健康成年人作為參考個體，采用邁瑞B(yǎng)C6800進行MCV、MCH及MCHC測定，構(gòu)建參考區(qū)間；另選取150例健康體檢者，收集MCV、MCH、MCHC檢測值，對所建立的參考區(qū)間進行驗證。結(jié)果健康成人MCV、MCH及MCHC檢測結(jié)果均呈正態(tài)分布。各年齡段MCV比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；參考區(qū)間：青年82.278～94.242 fL、中年83.032～94.608 fL、老年83.137～96.343 fL。不同性別及各年齡段MCH比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；參考區(qū)間：男性青年27.785～32.415 pg、男性中年28.324～32.456 pg、男性老年28.274～32.966 pg，女性青年27.367～31.973 pg、女性中年27.445～32.215 pg、女性老年27.532～32.468 pg。不同性別MCHC比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；參考區(qū)間：男328.611～352.810 g/L、女323.771～348.750 g/L。150例健康體檢者中，位于參考區(qū)間外者所占百分比均小于10.0%，新建立的參考區(qū)間適用于該實驗室。結(jié)論MCV、MCH和MCHC在成年人群存在性別或(和)年齡差異，按照實際情況分別建立了參考區(qū)間，且經(jīng)驗證均適用于該實驗室。

紅細胞；紅細胞平均體積；平均紅細胞血紅蛋白含量；平均紅細胞血紅蛋白濃度；參考區(qū)間

作為檢驗結(jié)果解釋、檢驗信息分析的基本尺度和依據(jù)，生物參考區(qū)間非常重要，其結(jié)果直接關(guān)系著臨床對患者健康情況的判斷及對應(yīng)的治療[1]。為了保證臨床對患者及健康體檢者的診療有明確的指引，檢驗報告必須提供一個準確可靠的生物參考區(qū)間[2]。而臨床檢驗對象來源于動態(tài)生物體，生物屬性的差異會帶來生物參考區(qū)間的差異，主要是由年齡、性別、民族、居住地等原因引起的差異；另外，許多實驗室往往同一檢測項目同時使用兩套或以上的檢測系統(tǒng)，由于檢驗方法的差異，同一項目采用不同的檢測方法也會導(dǎo)致結(jié)果不一致；而同一檢測方法，儀器試劑來源不同，檢驗結(jié)果也會產(chǎn)生系統(tǒng)誤差[3]。因此，建立一個適合本地區(qū)本實驗室的生物參考區(qū)間既是臨床診斷治療的強有力保證，也是臨床輔助實驗室的重要任務(wù)。本研究根據(jù)《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力認可準則(ISO 15189:2003)》，參照美國臨床實驗室標準化委員會(national committee for clinical laboratory standards，NCCLS)C28-A3文件提供的建立生物參考區(qū)間的具體操作程序，對廣州地區(qū)600例健康成年人全血細胞分析中的紅細胞平均體積(mean corpuscular volume，MCV)、平均紅細胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin，MCH)及平均紅細胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC)的生物參考區(qū)間進行了調(diào)查，從而建立上述指標適合本地區(qū)本實驗室的生物參考區(qū)間。

1　資料與方法

1.1一般資料參考個體均來自2014年6月至2014年10月在廣東省中醫(yī)院體檢健康的成年人，不包含未成年人群體。健康人群的選擇根據(jù)C28-A3文件，參考個體需符合以下條件：(1)年齡、性別等各種基本信息完整；(2)無異常體征及癥狀，大小便常規(guī)、血常規(guī)等檢查結(jié)果均在正常參考范圍內(nèi)；(3)血糖、血脂、血壓均正常；(4)婦女處于非妊娠期和非月經(jīng)期。同時應(yīng)考慮可能的排除標準：飲酒、近期患病、獻血、哺乳期、血壓異常、肥胖、吸毒、特定職業(yè)、正在服用處方藥物或自購藥物、口服避孕藥、近期手術(shù)、吸煙、遺傳因素、近期接受輸血、正在或近期住院治療、濫用維生素、環(huán)境因素等。共納入600例參考個體，男280例，女320例。

1.2儀器與試劑Mindray BC-6800全自動血細胞分析儀及9種原裝配套試劑，分別是M-68DS稀釋液(批號2014061902)、M-68DR稀釋液(批號2014051501)、M-68LD溶血劑(批號2014031501)、M-68LB溶血劑(批號2014061301)、M-68LN溶血劑(批號2014061701)，M-68LH溶血劑(批號2014050701)、M-68FN染色液(批號2014050701)、M-68FR染色液(批號2014030201)、M-68FD染色液(批號2014061101)。質(zhì)控品為Mindray公司生產(chǎn)，低值質(zhì)控品批號BC60914L，中值質(zhì)控品批號BC60914N，高值質(zhì)控品批號BC60914H。靜脈真空采血管為廣州陽普醫(yī)療科技股份有限公司生產(chǎn)的乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管。試驗前對檢測系統(tǒng)的分析性能進行有效性驗證、評價，確?？偛痪芏纫宰儺愊禂?shù)(CV)小于原衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評允許誤差的1/3。分析系統(tǒng)由廠家校準后，用配套在線質(zhì)控品做質(zhì)控，確保檢測系統(tǒng)在控。

1.3方法納入的所有參考個體均在上午安靜狀態(tài)下空腹采集外周靜脈血2 mL，EDTA-K2抗凝，常溫運送至實驗室，并在采血后2 h內(nèi)于Mindray BC-6800全自動血細胞分析儀上完成測定，記錄結(jié)果。

2　結(jié)　　果

2.1離群值的處理分別對600例參考個體的MCV、MCH及MCHC檢測結(jié)果進行探索性分析，判斷有無離群值和極端值，結(jié)果顯示：MCV、MCH及MCHC均有離群值，見圖1。去除離群值，再用同樣的統(tǒng)計方法進行分析，處理前后各指標參考值比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，則數(shù)據(jù)可以保留不作處理，見表1。

表1　　MCV、MCH及MCHC參考值數(shù)據(jù)處理前后比較

2.2頻數(shù)分布所有標本來源于健康成人，均在健康生理指標范圍內(nèi)，而且標本量足夠大(大于120例)。將600例參考個體MCV、MCH及MCHC檢測數(shù)據(jù)作頻數(shù)分布，均呈正態(tài)分布，見圖2。進一步采用百分位數(shù)圖圖示法進行正態(tài)性檢驗，散點呈直線分布，見圖3，說明參考個體MCV、MCH及MCHC檢測數(shù)據(jù)均服從正態(tài)分布。

圖1　　MCV、MCH及MCHC參考值離群值箱圖

圖2　　MCV、MCH及MCHC參考值頻數(shù)分布圖

圖3　　MCV、MCH、MCHC參考值正態(tài)分布Q-Q圖

2.3組間均值比較

2.3.1不同性別各指標檢測結(jié)果比較MCV、MCH及MCHC檢測數(shù)據(jù)經(jīng)方差齊性檢驗顯示，均方差齊(F=1.229，P=0.268；F=0.100，P=0.919；F=0.011，P=0.918)；采用兩獨立樣本t檢驗分別比較男、女兩組各指標，男、女兩組MCV比較，差異無統(tǒng)計學意義(t=1.705，P=0.089)；而男、女兩組MCH及MCHC比較，差異均有統(tǒng)計學意義(t=5.589，P=0.000；t=8.668，P=0.000)。說明MCH和MCHC需要分別設(shè)立男性與女性參考區(qū)間，而MCV則不需要。

表2　　MCV、MCH及MCHC檢測結(jié)果及參考區(qū)間

2.3.2不同年齡段各指標檢測結(jié)果比較方差分析顯示：各年齡組MCV及MCH比較，差異均有統(tǒng)計學意義(F=10.780，P=0.000；F=7.715，P=0.000)；而各年齡組MCHC比較，差異無統(tǒng)計學意義(F=0.198，P=0.821)。說明MCV和MCH在各年齡段需要分別設(shè)立參考區(qū)間，而MCHC則不需要。

2.4新參考區(qū)間的建立與驗證

2.4.2新建立參考區(qū)間的驗證隨機抽取150例健康體檢者的MCV、MCH及MCHC檢測結(jié)果進行驗證，位于參考區(qū)間外的體檢者所占百分比均小于10.0%，見表3。根據(jù)C28-A3文件，說明新建立的參考區(qū)間適用于本實驗室。

表3　　150例健康體檢者的檢測結(jié)果

3　討　　論

生物參考區(qū)間對臨床診斷至關(guān)重要，臨床實驗室必須保證給臨床提供的生物參考區(qū)間是正確可靠的，才能保證臨床的診療質(zhì)量，因此建立一個適合的生物參考區(qū)間意義重大[4]。而近年來隨著血細胞分析儀的普及，各個廠家、各種型別的血細胞分析儀開始廣泛使用，即使每個廠家都會對每個參數(shù)提供了一個生物參考區(qū)間，但是受地域、環(huán)境、民族、實驗條件、操作人員和技術(shù)熟練度等各種因素影響，不同地區(qū)之間各個參數(shù)的差異也較大[3]。同時，經(jīng)過查閱文獻，筆者發(fā)現(xiàn)人群的生理因素如飲酒[5]、妊娠[6]等，病理性因素如紅細胞冷凝集[7]、高白細胞[8]、乳糜血等及外界因素如儀器溫度[9]、濕度、電壓等，均會影響血細胞分析儀對MCV、MCH、MCHC等結(jié)果的測定。此外，何法霖等[10]研究指出，大部分實驗室MCV項目的上下項均高于行業(yè)標準，使用較為混亂。因此，建立一個適合本地區(qū)本實驗室的生物參考區(qū)間非常重要。因此，筆者首先根據(jù)NCCLS C28-A3文件中的篩選標準與排除指標，建立好參考個體的入選標準，并從體檢中心數(shù)據(jù)庫中選出600例符合標準的參考個體，然后記錄好相關(guān)的結(jié)果信息。其中，要求該部分參考個體的檢測過程與日常檢測程序保持完全一致，即使用Mindray BC-6800全自動血細胞分析儀及原裝配套試劑和在線質(zhì)控品，并且在試驗前對檢測系統(tǒng)的分析性能進行有效性驗證、評價，確?？偛痪芏鹊陀谠l(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評允許誤差的1/3。分析系統(tǒng)由廠家校準后，用配套在線質(zhì)控品做質(zhì)控，確保檢測系統(tǒng)在控。

本研究參照國際上公認的關(guān)于參考區(qū)間建立的NCCLS C28-A3文件，對MCV、MCHC、MCHC的參考區(qū)間進行調(diào)查。結(jié)果顯示，MCV、MCH及MCHC參考值在健康成年人中呈正態(tài)分布，與熊火梅等[11]研究中MCHC呈偏態(tài)分布的結(jié)果并不一致，可能是由于檢測儀器不同或納入的參考個體地域分布不同。本研究采取的是回顧性分析法，通過資料收集統(tǒng)計得出結(jié)果。而且本次所收集的數(shù)據(jù)中，所有標本來源于健康成人，均在健康生理指標范圍內(nèi)，而且標本量足夠大(大于120例)，所以將600例參考值數(shù)據(jù)進行頻數(shù)分布及采用百分位數(shù)圖圖示法進行正態(tài)性檢驗時，均顯示呈正態(tài)分布。另外，在對數(shù)據(jù)進行正態(tài)分布分析及檢驗后，也根據(jù)NCCLS C28-A3中的分組標準進行了性別及年齡的分組分析。結(jié)果顯示，男、女兩組MCV檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，參考區(qū)間可以合并；但男、女兩組MCH及MCHC檢測結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其參考區(qū)間必須分別建立。而在年齡分組上，根據(jù)中國成人年齡分段原則分為青年組(18～<40歲)、中年組(40～60歲)、老年組(>60歲)[11]，并對不同年齡組MCV、MCH、MCHC檢測結(jié)果進行方差分析。結(jié)果顯示，各年齡組MCHC檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，參考區(qū)間可以合并；但各年齡組MCV及MCH檢測結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其參考區(qū)間必須分別建立。這可能與納入研究的人群或使用的檢測設(shè)備不同有關(guān)。MCV、MCH及MCHC不能忽略性別與年齡因素而片面的設(shè)置單一參考區(qū)間，由于性別、年齡等因素而導(dǎo)致的某些生理指標的變化是值得關(guān)注和研究的。Wu等[12]研究表明，MCV、MCH及MCHC的參考區(qū)間在不同性別、年齡段無明顯差異，MCHC的參考區(qū)間研究與本研究一致，MCV、MCH存在部分差異。張云等[13]研究認為，男性的MCHC參考區(qū)間明顯高于女性，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；并且男性不同年齡段MCHC檢測結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而女性不同年齡段比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。MCHC男性參考區(qū)間明顯高于女性，與本研究結(jié)果一致，但是男性不同年齡段MCHC有明顯差異，與本次調(diào)查結(jié)果并不一致，說明還有待深入研究，可能也是地區(qū)、人群、儀器類型等不同而導(dǎo)致的差異。最后隨機抽取150例健康體檢者的MCV、MCH、MCHC檢測結(jié)果，對新建立的參考區(qū)間進行了驗證。結(jié)果顯示，在150例健康體檢者中，位于參考區(qū)間外者所占百分比均低于10.0%，參照C28-A3文件說明新建立的參考區(qū)間可以接受。

MCV、MCH及MCHC是3項重要的臨床診斷和治療指標，對于正常細胞性貧血、大細胞性貧血、小細胞低色素性貧血、單純小細胞性貧血等各類型貧血的鑒別診斷有著重要意義。其中，劉平方等[14]研究表明，珠蛋白生成障礙性貧血和缺鐵性貧血的MCV值明顯低于正常水平，另外MCHC對于缺鐵性貧血和巨幼紅細胞性貧血的鑒別診斷，以及珠蛋白生成障礙性貧血、溶血性貧血等的早期篩選也有著重要作用[15-16]。目前，國內(nèi)一般將MCV、MCH及MCHC作為浮動均數(shù)的參數(shù)[17]，應(yīng)用于血細胞分析儀的室內(nèi)質(zhì)控，其靶值為每個實驗室的參考范圍的均值。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，檢測結(jié)果會受到檢測系統(tǒng)、儀器、環(huán)境、地域、人群、標本等因素的影響，如米瑪央宗等[18]研究表明，在高原地區(qū)，除MCV外，成年男性的MCH和MCHC均高于女性，且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而且高原地區(qū)MCV及MCHC的檢測范圍上下限均高于平原地區(qū)，如果只是照搬其他地區(qū)或儀器的參考區(qū)間，并不能準確地反映出本地區(qū)患者和體檢人群的真實健康情況，而且容易給臨床造成誤診、漏診的風險。所以，建立一個準確的、適用于本地區(qū)本實驗的參考區(qū)間不僅是臨床輔助診斷實驗室的任務(wù)，更是臨床科室對于疾病診斷的一個迫切要求，具有非常重要的意義。本研究參照NCCLS C28-A3文件，建立了MCV、MCHC及MCHC的參考區(qū)間，并且通過驗證適合本地區(qū)本實驗室使用。

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Investigation on reference intervals of MCV,MCH and MCHC levels determined by Mindray BC-6800 hematology analyzer*

MaJi1，LuDezhi2，ChenLin1，WuXinzong1，PengYulian1，XuJianhua1△

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,GuangdongProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou,Guangdong510120,China；2.DepartmentofClinicalLaboratory,DongguanDongkengHospital,Dongguan,Guangdong523443,China)

ObjectiveTo investigate the reference intervals of mean corpuscular volume(MCV),mean corpuscular hemoglobin(MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration(MCHC) examined by the MindrayBC-6800 hematological analyzer to establish the reference intervals suitable for our laboratory.MethodsAccording to the method recommended by the NCCLS C28-A3,600 healthy adult individuals were selected as the reference individuals.MCV,MCH and MCHC levels were determined by the MindrayBC-6800 hematological analyzer for constructing the reference intervals;other 150 healthy persons undergoing the physical examination were selected and their MCH,MCV and MCHC detection results were collected for verifying the established reference intervals.ResultsThe detection results of MCV,MCH and MCHC in healthy adults showed a normal distribution,MCV had statistical difference among different age periods(P<0.05);the reference intervals:82.278-94.242 fL for young adults,83.032-94.608 fL for the middle-aged persons and 83.137-96.343 fL for the elderly.MCH had statistical differences between different sexes and among different age periods;the reference intervals:27.785-32.415 pg for male young adults,28.324-32.456 pg for male middle-aged persons and 28.274-32.966 pg for male elderly;27.367-31.973 pg for female young adults,27.445-32.215 pg for female middle-aged persons and 27.532-32.468 pg for female elderly.MCHC had statistical difference between different sexes (P<0.05) ;the reference intervals:328.611-352.810 g/L for male and 323.771-348.750 g/L for female.In 150 individuals undergoing the physical examination,the proportion of individuals locating at the outside of reference interval was less than 10.0%,therefore the newly established intervals were suitable for this laboratory.ConclusionThe sex difference or/and age differences of MCV,MCH and MCHC exist among adult populations.So the reference intervals are respectively established according to the practical situation,which are suitable for this laboratory by verification.

erythrocyte；mean corpuscular volume；mean corpuscular hemoglobin；mean corpuscular hemoglobin concentration；reference intervals

國家中醫(yī)藥行業(yè)科研專項項目(201007005)。作者簡介：馬驥(1978-)，副主任技師，碩士，主要從事臨床血液學與臨床生物化學檢驗方面的研究?！?/p>

，E-mail：jhxu1976@126.com。

R446

A

1671-8348(2016)20-2814-04

2016-01-02

2016-02-26)

·調(diào)查報告·doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2016.20.025