糖尿病酮癥酸中毒患兒外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及胰島B細(xì)胞功能改變的觀察

王鴻武+林麗敏+林廣裕

【摘要】 目的 探討糖尿病酮癥酸中毒（DKA）患兒外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）和胰島B細(xì)胞功能的變化情況及兩者的關(guān)系。方法 34例1型糖尿病患兒， 根據(jù)有無并發(fā)DKA分為DKA組（24例）、非DKA組（10例）， 20例正常健康兒童作為正常對(duì)照組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD4+CD25+ Treg百分率， 化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清空腹C肽（FC-P）、胰島素及糖化血紅蛋白（HbA1c）水平。結(jié)果 DKA組和非DKA組外周血CD4+CD25+ Treg百分率、胰島素、FC-P低于正常對(duì)照組， HbA1c高于正常對(duì)照組（P<0.05）；DKA組外周血CD4+CD25+ Treg百分率、胰島素和FC-P低于非DKA組， HbA1c高于非DKA組（P<0.05）。相關(guān)分析顯示， CD4+CD25+ Treg百分率與胰島素、FC-P呈正相關(guān)（r=0.627、0.532， P<0.05）， 與HbA1c水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.708， P<0.05）。結(jié)論 DKA患兒外周血CD4+CD25+ Treg百分率減低， 可能參與了兒童DKA的發(fā)生和發(fā)展， 與胰島B細(xì)胞功能相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 糖尿病酮癥酸中毒；CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；胰島B細(xì)胞；功能改變

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.20.031

CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells， Treg）是一類具有免疫調(diào)節(jié)功能的T淋巴細(xì)胞， 在維持機(jī)體免疫自穩(wěn)、調(diào)控免疫應(yīng)答方面起重要作用[1]。糖尿病酮癥酸中毒（diabetic ketoacidosis， DKA）是兒童1型糖尿病最常見的嚴(yán)重并發(fā)癥之一， Treg數(shù)量減少、功能障礙可能導(dǎo)致糖尿病及DKA的發(fā)生[2]。本研究通過檢測(cè)DKA患兒外周血Treg水平， 探討其在1型糖尿病及并發(fā)DKA中的機(jī)制及與胰島功能的相關(guān)性， 為DKA的防治提供理論依據(jù)， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2010年1月～2015年12月本院收治的34例1型糖尿病患兒， 男16例， 女18例， 年齡 0.5～14.7歲， 平均年齡（7.7±2.2）歲， 排除發(fā)熱、急性感染、應(yīng)激等并發(fā)癥。根據(jù)有無并發(fā)DKA分為DKA組（24例）[符合兒童DKA診療指南（2009年版） 診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]]及非DKA組（10例）；選擇同期在本院健康體檢兒童20例作為正常對(duì)照組， 男10例， 女10例， 年齡2～15歲， 平均年齡（8.2±3.7）歲， 無糖尿病家族史。1型糖尿病患兒和正常兒童一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 CD4+CD25+ Treg百分率測(cè)定 所有入選者均于夜間禁食12 h后清晨抽空腹血2 ml， EDTA抗凝， 并送流式細(xì)胞室進(jìn)行檢測(cè)， 所有步驟均嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行。結(jié)果以CD4+CD25+ Treg占CD4+ 的百分率（CD4+CD25+/CD4+）%表示。

1. 2. 2 血清FC-P、HbA1c、胰島素的檢測(cè) 均在醫(yī)院檢驗(yàn)科檢測(cè)， 檢測(cè)時(shí)所有步驟均嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組胰島功能比較 DKA組和非DKA組血胰島素、FC-P低于正常對(duì)照組， HbA1c高于正常對(duì)照組 （P<0.05）；DKA組血胰島素和FC-P低于非DKA組， HbA1c高于非DKA組 （P<0.05）。見表1。

2. 2 三組CD4+、CD4+CD25+ Treg比較 DKA組和非DKA組外周血CD4+、CD4+CD25+ Treg百分率低于正常對(duì)照組 （P<0.05）；DKA組低于非DKA組 （P<0.05）。見表2。

2. 3 DKA患兒外周血CD4+CD25+ Treg百分率與FC-P含量、HbA1c、胰島素的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)分析顯示， CD4+CD25+ Treg百分率與胰島素、FC-P呈正相關(guān)（r=0.627、0.532， P<0.05）， 與HbA1c水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.708， P<0.05）。

3 討論

1 型糖尿病是一種由T細(xì)胞介導(dǎo)的胰腺B細(xì)胞進(jìn)行性損傷的自身免疫性疾病， Treg在免疫穩(wěn)態(tài)的維持中有重要作用， Treg數(shù)量或功能的下降均可促進(jìn)自身免疫性疾病包括1型糖尿病的發(fā)生[4， 5]。Treg具有免疫負(fù)調(diào)節(jié)作用， CD4+CD25+ Treg作為一個(gè)獨(dú)立調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群， 在抑制自身免疫反應(yīng)中起重要作用， 與疾病的進(jìn)展相關(guān)[6， 7]。

本次作者對(duì)糖尿病患兒和正常對(duì)照組外周血Treg的檢測(cè)結(jié)果顯示糖尿病患兒外周血Treg百分率顯著低于正常對(duì)照組， DKA組外周血Treg百分率低于非DKA組， 提示糖尿病患兒外周血Treg百分率進(jìn)一步減少， 可能導(dǎo)致對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞的抑制能力持續(xù)降低， 進(jìn)而機(jī)體發(fā)生免疫功能紊亂， 同時(shí)檢測(cè)到胰島素、FC-P降低， HbA1c明顯升高， 提示胰島B細(xì)胞功能下降， 而引起酮癥酸中毒。相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)糖尿病患兒外周血Treg百分率與胰島素、FC-P呈正相關(guān)， 與HbA1c呈負(fù)相關(guān)， 推測(cè)Treg數(shù)量的減少， 可致使自身免疫反應(yīng)性T、B細(xì)胞活化、增殖， 胰島B細(xì)胞功能受損， 是導(dǎo)致1型糖尿病并發(fā)酮癥酸中毒的可能機(jī)制。

綜上所述， DKA患兒外周血Treg百分率減低與胰島B細(xì)胞功能密切相關(guān)， 可能參與了DKA的發(fā)生和發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

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[收稿日期：2016-04-08]