上海地區(qū)幽門螺桿菌的檢出率及耐藥性分析

胡玢婕， 趙付菊， 柴子嵐， 保志軍， 項　平， 楊長青， 王一飛， 方　毅， 張艷梅，趙　虎

?

上海地區(qū)幽門螺桿菌的檢出率及耐藥性分析

胡玢婕1， 趙付菊1， 柴子嵐1， 保志軍*， 項平*， 楊長青2， 王一飛2， 方毅1， 張艷梅1，趙虎1

摘要：目的 了解幽門螺桿菌的陽性檢出率及其影響因素，分析上海2所醫(yī)院幽門螺桿菌臨床分離菌株對一線治療幽門螺桿菌抗菌藥物的耐藥性，為臨床幽門螺桿菌根治提供用藥依據(jù)。方法 收集上海2所醫(yī)院2013年9月—2015年1月臨床胃組織活檢樣本，進(jìn)行幽門螺桿菌分離培養(yǎng)和鑒定；采用E試驗法對131株幽門螺桿菌臨床菌株分別進(jìn)行4種治療幽門螺桿菌的一線抗菌藥物克拉霉素、甲硝唑、阿莫西林和四環(huán)素的體外藥敏試驗。結(jié)果 共收集955例胃組織活檢樣本，分離出幽門螺桿菌248株，檢出率為26.0%。幽門螺桿菌對克拉霉素、甲硝唑、四環(huán)素和阿莫西林的耐藥率分別為14.5%、64.1%、0和0.8%，對上述藥物中的2種同時耐藥占10.7%（14/131），其中92.8%（13/14）為克拉霉素和甲硝唑同時耐藥。結(jié)論 幽門螺桿菌陽性檢出率較以前報道的陽性攜帶率低，且與性別、年齡與疾病類型等因素相關(guān)，而耐藥率則與之無明顯相關(guān)性。幽門螺桿菌的臨床治療應(yīng)根據(jù)體外藥敏結(jié)果進(jìn)行個體化用藥。

關(guān)鍵詞：幽門螺桿菌； 陽性檢出率； 耐藥性； 藥敏試驗

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori）是胃部感染最常見的病原體［1］，其在人類胃表面黏膜上皮細(xì)胞和黏液層的長期定植是慢性活動性胃炎和消化性潰瘍的主要發(fā)病原因，也是導(dǎo)致胃部惡性腫瘤以及黏膜相關(guān)性淋巴樣組織淋巴瘤的重要危險因子［2］。目前根除幽門螺桿菌的一線治療方案首選含質(zhì)子泵抑制劑（proton pump inhibitor， PPI）和2種抗菌藥物（克拉霉素+阿莫西林/甲硝唑）的三聯(lián)療法［3］。然而，隨著近年來抗菌藥物的廣泛使用以及治療的不規(guī)范，幽門螺桿菌的臨床根除率不斷下降［4］。幽門螺桿菌對不同抗菌藥物的耐藥率逐漸增長的同時，也在世界范圍內(nèi)呈現(xiàn)出明顯的地域差異?？死顾刈鳛榕R床治療幽門螺桿菌感染最常用的抗菌藥物之一，在美洲地區(qū)顯示出較高的耐藥率（29.3%），在部分亞洲地區(qū)則具有較低的耐藥水平（2.1%）［5］；而在全國范圍內(nèi)，廣東、廣西兩省臨床菌株的耐藥率（26%）［6-7］亦顯著高于北方省市（4%～9%）［8-9］。

因此，對某一地區(qū)幽門螺桿菌的耐藥性進(jìn)行檢測與分析，根據(jù)不同抗菌藥物的耐藥率指導(dǎo)本地區(qū)幽門螺桿菌的根除方案，具有重要的臨床價值。本研究采用E試驗法，選取克拉霉素、甲硝唑、阿莫西林和四環(huán)素4種一線抗菌藥物，對2所醫(yī)院臨床分離的幽門螺桿菌菌株進(jìn)行體外藥敏試驗，并對其培養(yǎng)影響因素和耐藥特點進(jìn)行分析，以更好地了解幽門螺桿菌的耐藥情況，避免反復(fù)治療和繼發(fā)性多重耐藥，為合理用藥提供臨床依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1 病例來源 選取2013年9月—2014年7月復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院和2014年8月—2015 年1月同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院接受胃鏡檢查患者955例，年齡19～88歲，平均（53.9±13.0）歲；其中男性444例（46.5%），年齡19～88歲，平均（54.0±14.3）歲；女性511例（53.5%），年齡19～87歲，平均（54.0±13.7）歲。

1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)［10-11］①年齡不限，性別不限；②有消化道癥狀，如腹痛、腹脹、反酸、噯氣、惡心等；③無消化道急癥，如胃穿孔、消化性潰瘍大出血、嘔血、急性胰腺炎等；④未接受胃大部切除術(shù)，胃黏膜組織完整；⑤近1個月內(nèi)未使用對幽門螺桿菌有殺滅作用的抗菌藥物、鉍劑、H2受體拮抗劑及PPI；⑥無同時服用非甾體抗炎藥（NSAID）或酗酒；⑦患者同意取胃黏膜組織標(biāo)本進(jìn)行幽門螺桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗；⑧能夠獲取患者的一般情況資料，并記錄年齡、性別、主訴和臨床診斷結(jié)果等。

1.1.3 質(zhì)控菌株 幽門螺桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC43504，NCTC11637（上海北諾生物科技有限公司）。

1.1.4 主要試劑 CM0331哥倫比亞瓊脂干粉、CM1135腦心浸液瓊脂干粉（OXOID LTD， UK）；新鮮無菌脫纖維綿羊血（上海諸翟路耀英羊血供應(yīng)站）；5%羊血+MH瓊脂培養(yǎng)基（上海科瑪嘉微生物技術(shù)有限公司）；萬古霉素、甲氧芐啶、多黏菌素B和兩性霉素B（Sigma-Aldrich LTD，America）；微需氧產(chǎn)氣袋及密封培養(yǎng)盒（Mitisubishi三菱化學(xué)株式會社）；克拉霉素、甲硝唑、阿莫西林和四環(huán)素的E試驗藥敏紙條（BioMérieux LTD，F(xiàn)rance）。

1.2方法

1.2.1 幽門螺桿菌的分離培養(yǎng)與鑒定 在獲得患者同意后，由內(nèi)鏡醫(yī)師在內(nèi)鏡直視下用滅菌活檢鉗取距幽門前2～3 cm大彎或小彎處約0.5 cm×0.5 cm胃黏膜組織1塊，進(jìn)行快速尿素酶試驗后置入0.9% NaCl溶液的離心管中，于4 h內(nèi)轉(zhuǎn)送至實驗室。胃黏膜組織經(jīng)全自動研磨儀充分研磨，制成組織勻漿后，用無菌滴管將混懸液接種于幽門螺桿菌選擇性培養(yǎng)基（8%無菌脫纖維羊血，0.5%選擇性抗菌藥物混合液），置于35℃，濕度＞95%的微需氧環(huán)境下（5% O2、10% CO2、85% N2），培養(yǎng)3～7 d。

培養(yǎng)72 h后觀察培養(yǎng)基上菌落形態(tài)，挑取疑似幽門螺桿菌菌落（透明細(xì)砂樣或水滴樣，針尖大小，直徑0.1～1 mm）進(jìn)行革蘭染色、鏡檢，顯微鏡下呈革蘭陰性句號狀、螺旋狀、海鷗狀或彎曲短桿狀菌，氧化酶、脲酶、觸酶均為陽性，即鑒定為幽門螺桿菌［12-14］，并分純進(jìn)行傳代增殖。

1.2.2 幽門螺桿菌的體外藥敏試驗 用無菌棉簽刮取傳代純培養(yǎng)72 h后、無污染、菌落形態(tài)良好、鏡下形態(tài)典型的幽門螺桿菌適量菌落于0.45% NaCl滅菌溶液中，調(diào)節(jié)菌懸液濃度為2.0麥?zhǔn)蠁挝唬?×108CFU/mL），吸取100 μL菌懸液均勻涂布于MH血瓊脂培養(yǎng)基上，分別貼上克拉霉素、甲硝唑、阿莫西林和四環(huán)素的E試驗條，置于35 ℃，濕度＞95%微需氧環(huán)境下培養(yǎng)72 h，讀取抑菌圈與E試驗紙條相交處的數(shù)值即為待檢幽門螺桿菌對該藥物的最低抑菌濃度（MIC）。

根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會（CLSI）2013年版［15］及相關(guān)文獻(xiàn)［16-17］的判斷標(biāo)準(zhǔn)：克拉霉素≥1 mg/L；甲硝唑≥8 mg/L；阿莫西林≥0.5 mg/L；四環(huán)素≥1 mg/L，判定為耐藥。

2.1幽門螺桿菌陽性檢出率及其影響因素

2.1.1 幽門螺桿菌培養(yǎng)檢出率 對收集的955份胃活檢組織進(jìn)行微需氧環(huán)境下分離培養(yǎng)，共獲得幽門螺桿菌248株，培養(yǎng)檢出率為26.0%。在幽門螺桿菌臨床菌株來源中，男性患者130例（52.4%），女性患者118例（47.6%），患者年齡19～87歲，平均（51.5±13.6）歲。

2.1.2 幽門螺桿菌培養(yǎng)檢出率與疾病類型的相關(guān)性 幽門螺桿菌在男性患者中的培養(yǎng)檢出率略高于女性患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.731，P=0.030）；且在不同年齡組之間亦存在差異（χ2=10.232，P=0.017）；另外，不同疾病類型的幽門螺桿菌培養(yǎng)檢出率之間有顯著差異（χ2=49.005，P=0.000）；其中，消化性潰瘍患者的幽門螺桿菌培養(yǎng)檢出率顯著高于慢性胃炎患者（χ2=37.888，P=0.000），而不同潰瘍類型之間的幽門螺桿菌培養(yǎng)檢出率略有差異，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.198，P=0.074）。幽門螺桿菌培養(yǎng)的檢出率與患者性別、疾病類型的關(guān)系見表1、圖1。 1.2.3 統(tǒng)計分析 應(yīng)用Stata 12.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計學(xué)分析，選用χ2檢驗，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

表1　幽門螺桿菌培養(yǎng)檢出率與性別、年齡、疾病診斷類型Table 1 Positive rate of H. pylori in gastric mucosa and characteristics of patients

2.2 體外藥敏試驗結(jié)果

2.2.1 幽門螺桿菌對不同抗菌藥物的耐藥率 對分離出的248株幽門螺桿菌臨床菌株復(fù)蘇、傳代，對其中的131株采用E試驗法進(jìn)行體外藥敏試驗（117株未測定菌株在保存期間死亡，無法成功復(fù)蘇），菌落形成的抑菌圈均清晰可讀，見圖2。

圖1　幽門螺桿菌陽性檢出率與不同疾病類型的關(guān)系Figure 1 Association between prevalence of H. pylori and clinical diagnosis GU： gastric ulcer； DU： duodenal ulcer； GA： gastric cancer； AG：chronic atrophic gastritis.

圖2　克拉霉素、甲硝唑E試驗紙條對待檢菌株的抑菌結(jié)果Figure 2 E-test results showing the inhibition zone formed by clarithromycin and metronidazole（A）Susceptibility of H.pylori to clarithromycin determind by the E-test； （B）Susceptibility of H.pylori to metronidazole determined by the E-test. The MIC is read from the intersection of the inhibition ellipse with the strip.

在131株菌株中，幽門螺桿菌對臨床常用的4種抗菌藥物產(chǎn)生不同程度的耐藥，其中對克拉霉素、甲硝唑的耐藥率分別為14.5%和64.1%，僅1株幽門螺桿菌對四環(huán)素耐藥（MIC=8 mg/L），而未發(fā)現(xiàn)對阿莫西林耐藥菌株。幽門螺桿菌對克拉霉素和甲硝唑的耐藥率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=67.592，P=0.001），見表2。

2.2.2 幽門螺桿菌耐藥率與性別的關(guān)系比較 不同性別之間幽門螺桿菌對克拉霉素和甲硝唑的耐藥率結(jié)果顯示，不同性別患者體內(nèi)分離的幽門螺桿菌菌株對2種抗菌藥物的耐藥率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（克拉霉素：χ2=1.147，P=0.284；甲硝唑：χ2=0.002，P=0.967），結(jié)果見表3。

表2　E試驗法檢測幽門螺桿菌對4種抗菌藥物的耐藥情況（n=131）Table 2 Susceptibility of 131 strains of H. pylori to four antibiotics determined by E-test

表3　不同性別患者幽門螺桿菌對抗菌藥物的耐藥情況Table 3 Susceptibility of H. pylori strains to 4 antibiotics by patient sex

2.2.3 幽門螺桿菌對抗菌藥物的耐藥率與疾病類型的關(guān)系 消化性潰瘍患者中幽門螺桿菌對甲硝唑與克拉霉素的耐藥率均略高于慢性胃炎患者（包括慢性萎縮性胃炎和淺表性胃炎），但差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），因胃癌患者例數(shù)較少，未進(jìn)行統(tǒng)計分析，見表4。

表4　不同疾病類型幽門螺桿菌對抗菌藥物的耐藥情況Table 4 Susceptibility of H.pylori strains to 4 antibiotics by disease type

表5　不同年齡組幽門螺桿菌對抗菌藥物的耐藥率Table 5 Susceptibility of H. pylori strains to 4 antibiotics by age group

表6　幽門螺桿菌多重耐藥患者基本情況Table 6 Basic information of the patients with a H. pylori strain resistant to at least two antibiotics

3　討論

自1985年幽門螺桿菌首次被成功分離培養(yǎng)以來，其在自然人群中的高感染率及在消化道疾患中的重要致病作用引起了日益廣泛的關(guān)注。世界范圍內(nèi)一半以上的人口（在部分發(fā)展中國家高達(dá)80%）攜帶此菌［18］，而我國幽門螺桿菌的平均感染率亦達(dá)到58.07%［10］。另外，諸多研究證實幽門螺桿菌感染是胃腸道疾病發(fā)生的重要危險因素，1994年，國際癌癥研究機構(gòu)（International Agency for Research on Cancer， IARC）將幽門螺桿菌列為胃癌的Ⅰ類致癌因子［19］，幽門螺桿菌感染已經(jīng)發(fā)展為嚴(yán)重危害人們健康的公共衛(wèi)生問題。由于陽性檢出率低、培養(yǎng)周期長、樣本對轉(zhuǎn)送時間要求嚴(yán)格、培養(yǎng)條件和培養(yǎng)環(huán)境相對特殊，幽門螺桿菌的分離培養(yǎng)和體外藥敏試驗在臨床上并不作為常規(guī)檢測；而經(jīng)驗性地制定治療方案及使用抗菌藥物導(dǎo)致了幽門螺桿菌的耐藥率呈逐年上升趨勢［20］，幽門螺桿菌感染的有效控制在臨床上仍是巨大挑戰(zhàn)。因此，分析幽門螺桿菌的陽性檢出率與影響因素，以及特定地區(qū)、特定疾病類型的幽門螺桿菌耐藥率，有助于進(jìn)行個體化治療，提高幽門螺桿菌根除率。

本研究顯示，幽門螺桿菌的培養(yǎng)檢出率為26.0%，與國內(nèi)外文獻(xiàn)報道基本一致［21-22］，但遠(yuǎn)低于以前報道的幽門螺桿菌攜帶率［10］。主要原因可能與樣本取材的部位、樣本運輸?shù)臈l件與方法、培養(yǎng)的條件與方法，以及胃部感染部位幽門螺桿菌的含菌量有關(guān)。下一步研究，我們會采集不同部位的胃黏膜樣本，并改進(jìn)樣本運輸與培養(yǎng)的條件，提高陽性檢出率。

本研究中，男性的幽門螺桿菌培養(yǎng)陽性率高于女性，同時中青年人群的幽門螺桿菌培養(yǎng)陽性率略高于老年人群。多數(shù)研究認(rèn)為，幽門螺桿菌的感染與年齡存在正相關(guān)性，而幽門螺桿菌的培養(yǎng)陽性率則在一定程度上受樣本取材部位的影響，幽門腺組織具有適宜幽門螺桿菌定植的pH條件，并且其主要構(gòu)成細(xì)胞黏液分泌細(xì)胞高表達(dá)幽門螺桿菌黏附素相關(guān)受體及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子；與中青年相比，老年人群幽門腺在胃體部出現(xiàn)率增加的幅度較胃竇胃角處更為明顯，即幽門腺隨年齡的增長向胃近端遷移，進(jìn)而導(dǎo)致幽門螺桿菌感染部位在不同年齡人群中亦存在差異［23］。另外，消化性潰瘍的幽門螺桿菌培養(yǎng)陽性率顯著高于慢性胃炎，表明上消化道疾病與幽門螺桿菌感染有著密切的關(guān)系，其中胃黏膜病變與幽門螺桿菌在胃表面黏膜上皮細(xì)胞和黏液層的長期定植具有較高的相關(guān)性［24］。幽門螺桿菌分泌的尿素酶水解尿素時產(chǎn)生的NH4+能夠直接損傷胃黏膜上皮細(xì)胞，并降低黏膜上的電位差，從而影響胃黏膜的離子轉(zhuǎn)運，導(dǎo)致H+反滲，從而加重了胃黏膜組織損傷。另外，幽門螺桿菌還能夠誘導(dǎo)各種炎性介質(zhì)及氧自由基的釋放，從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，形成消化性潰瘍［25］。本研究收取的惡性腫瘤患者胃黏膜組織標(biāo)本較少，幽門螺桿菌感染與惡性腫瘤發(fā)生之間的相關(guān)性有待進(jìn)一步研究。

在以往的幽門螺桿菌的根除方案中，克拉霉素、甲硝唑、阿莫西林與四環(huán)素常作為一線藥物。但一項關(guān)于上海地區(qū)10年內(nèi)幽門螺桿菌耐藥率變化的最新調(diào)查表明，克拉霉素的耐藥率由2000年的8.6%上升至2009年的20.7%；甲硝唑的耐藥率有小幅下降但仍高達(dá)42%［20］。本研究發(fā)現(xiàn)，2013—2014年，上海地區(qū)幽門螺桿菌對克拉霉素耐藥率為14.5%，較2009年有所下降，仍可作為治療首選藥物。然而，克拉霉素在呼吸系統(tǒng)疾病治療中的大量使用，可能加速了大環(huán)內(nèi)酯類耐藥菌株的出現(xiàn)，GAO等［26］研究認(rèn)為，克拉霉素的繼發(fā)耐藥率在10年間升高趨勢明顯，因此使用克拉霉素治療失敗的患者在沒有體外藥敏試驗的情況下反復(fù)治療，也容易導(dǎo)致幽門螺桿菌的難治性感染。 幽門螺桿菌對甲硝唑的耐藥率為64.1%，仍處于較高的耐藥水平。根據(jù)MaastrichtⅣ共識，甲硝唑耐藥率高于40%的地區(qū)，三聯(lián)療法的有效性顯著降低，但含甲硝唑的療法可以通過增加劑量、延長時間、聯(lián)合阿莫西林和使用鉍劑等方式改進(jìn)［20， 27］。本研究提示幽門螺桿菌對四環(huán)素的耐藥率較低，對阿莫西林無耐藥菌株。由于四環(huán)素存在較多臨床不良反應(yīng)，在無藥敏結(jié)果之前，阿莫西林可作為經(jīng)驗用藥。

國內(nèi)外報道的不同性別、年齡、疾病類型幽門螺桿菌分離株對甲硝唑和克拉霉素的耐藥率各異。DE FRANCESCO等［5］研究發(fā)現(xiàn)女性患者對甲硝唑及克拉霉素的耐藥率明顯高于男性，且克拉霉素的耐藥率在無潰瘍消化不良的患者中較高，甲硝唑耐藥率在消化性潰瘍患者中較高；而浙江義烏的一項研究認(rèn)為，隨著年齡的增長，克拉霉素的耐藥率逐漸增加［28］。本研究中，分別比較幽門螺桿菌對各抗菌藥物的耐藥率與性別、年齡、疾病類型之間的關(guān)系，各項差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。這可能與所獲取的菌株總量、疾病來源及地區(qū)差異有關(guān)。

本研究總結(jié)的幽門螺桿菌雙重耐藥情況顯示，雙重耐藥率為10.7%，多為對克拉霉素和甲硝唑耐藥，未發(fā)現(xiàn)對2種以上抗菌藥物耐藥的臨床菌株?？死顾睾图紫踹蜃鳛橛拈T螺桿菌臨床一線抗菌藥物外，克拉霉素常用于上呼吸道感染的治療，而甲硝唑廣泛用于婦產(chǎn)科疾病、牙科疾病以及寄生蟲感染，可能是幽門螺桿菌對兩種抗菌藥物耐藥的原因之一［26， 29］，同時這也可以解釋幽門螺桿菌對克拉霉素和甲硝唑的耐藥率與性別、年齡之間存在的相關(guān)性。

本研究采用E試驗法進(jìn)行體外藥敏試驗，CLSI推薦的幽門螺桿菌體外藥敏試驗為瓊脂稀釋法，但其方法學(xué)繁瑣，不適合臨床常規(guī)開展。而E試驗條抗菌藥物濃度梯度穩(wěn)定，預(yù)孵育、預(yù)擴散的時間及接種菌液量的變異對結(jié)果影響較小，操作簡便，可直接得出定量結(jié)果，且在實驗室間具有很高的重復(fù)性，其測定的MIC與瓊脂稀釋法所得的MIC相關(guān)性高，能夠很好地在臨床檢測中大量開展。

另外，有研究認(rèn)為幽門螺桿菌對左氧氟沙星的耐藥形勢同樣十分嚴(yán)峻，2009年上海地區(qū)該菌對左氧氟沙星耐藥率達(dá)到32.5%［30］，本研究未進(jìn)行包括左氧氟沙星、莫西沙星、呋喃唑酮等其他常用的幽門螺桿菌根除藥物的MIC檢測，這一結(jié)論需要更多的實驗進(jìn)行驗證和評價。

隨著幽門螺桿菌耐藥率的逐年變化，對比多種藥敏試驗方法的MIC結(jié)果進(jìn)行耐藥監(jiān)測，同時發(fā)展分子生物學(xué)檢測，使得臨床制定幽門螺桿菌個體化用藥時能有所依據(jù)，對更有效地防治幽門螺桿菌耐藥，提高治愈率具有非常重要的意義。

參考文獻(xiàn)：

［1］PERETZ A， PARITSKY M， NASSER O， et al. Resistance of Helicobacter pylori to tetracycline， amoxicillin， clarithromycin and metronidazole in Israeli children and adults［J］. J Antibiot （Tokyo）， 2014， 67（8）：555-557.

［2］YONEZAWA H， OSAKI T， KURATA S， et al. Outer membrane vesicles of Helicobacter pylori TK1402 are involved in bioflm formation［J］. BMC Microbiol， 2009， 9：197.

［3］MALFERTHEINER P， MEGRAUD F， O'MORAIN C， et al. Current concepts in the management of Helicobacter pylori infection： the Maastricht III Consensus Report［J］. Gut， 2007，56（6）：772-781.

［4］HOJO M， MIWA H， NAGAHARA A， et al. Pooled analysis on the efficacy of the second-line treatment regimens for Helicobacter pylori infection［J］. Scand J Gastroenterol， 2001，36（7）：690-700.

［5］DE FRANCESCO V， GIORGIO F， HASSAN C， et al. Worldwide Helicobacter pylori antibiotic resistance： a systematic review［J］. Gastrointestin Liver Dis， 2010，19（4）：409-419.

［6］張曉光，胡品津，李瑜元，等. 廣東城鄉(xiāng)病人中分離的幽門螺桿菌對常用3種抗菌藥物耐藥的調(diào)查［J］. 新醫(yī)學(xué)，2002，33（5）：275-277.

［7］李曉華，黃贊松，黃衍強，等. 桂西地區(qū)幽門螺桿菌多重耐藥現(xiàn)狀和治療方案分析［J］. 重慶醫(yī)學(xué)，2013，42（14）：1578-1580.

［8］張學(xué)英，焦健，李巖，等. 48例消化性潰瘍患者幽門螺桿菌的耐藥性調(diào)查［J］. 微生物學(xué)雜志，2003，23（2）：35-37.

［9］喬文，胡家露，彭道榮，等. 西安地區(qū)幽門螺桿菌臨床分離株耐藥性研究［J］. 中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2002，6（3）：48-49.

［10］項利娟，朱新建，黃德富，等. 幽門螺桿菌感染調(diào)查與耐藥性分析［J］. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25（8）：1710-1712.

［11］成虹，胡伏蓮，謝勇，等. 中國幽門螺桿菌耐藥狀況以及耐藥對治療的影響—全國多中心臨床研究［J］. 胃腸病學(xué)，2007，12（9）：525-530.

［12］SMITH SM， O'MORAIN C， MCNAMARA D. Antimicrobial susceptibility testing for Helicobacter pylori in times of increasing antibiotic resistance［J］. World J Gastroenterol， 2014，20（29）：9912-9921.

［13］LLANES R， FELICIANO O， GUZMAN D， et al. Use of a single biopsy specimen for diagnosing Helicobacter pylori infection by culture and two different PCR methods： report from Cuba［J］. Trop Gastroenterol， 2010， 31（2）：111-112.

［14］KHADEMI F， FAGHRI J， POURSINA F， et al. Resistance pattern of Helicobacter pylori strains to clarithromycin，metronidazole， and amoxicillin in Isfahan， Iran［J］. J Res Med Sci， 2013， 18（12）：1056-1060.

［15］Clinical and laboratory standards institute. Performance standards for antimocrobial susceptibility testing： twenty-third informational supplement［S］. 2013， M100-S23.

［16］MEGRAUD F， LEHN N， LIND T， et al. Antimicrobial susceptibility testing of Helicobacter pylori in a large multicenter trial： the MACH 2 study［J］. Antimicrob Agents Chemother， 1999，43（11）：2747-2752.

［17］ MEGRAUD F， LEHOURS P.Helicobacter pylori detection and antimicrobial susceptibility testing［J］. Clin Microbiol Rev， 2007，20（2）：280-322.

［18］CAMMAROTA G， SANGUINETTI M， GALLO A， et al. Review article： bioflm formation by Helicobacter pylori as a target for eradication of resistant infection［J］. Aliment Pharmacol Ther， 2012， 36（3）：222-230.

［19］ WONG BC， LAM SK， WONG WM， et al.Helicobacter pylori eradication to prevent gastric cancer in a high-risk region of China： a randomized controlled trial［J］. JAMA， 2004，291（2）：187-194.

［20］SUN QJ， LIANG X， ZHENG Q， et al. Resistance ofHelicobacter pylori to antibiotics from 2000 to 2009 in Shanghai［J］. World Gastroenterol， 2010， 16（40）：5118-5121.

［21］TANIH NF， NDIP LM， NDIP RN. Characterisation of the genes encoding resistance to metronidazole （rdxA and frxA） and clarithromycin （the 23S-RNA genes） in South African isolates of Helicobacter pylori ［J］. Ann Trop Med Parasitol， 2011，105（3）：251-259.

［22］張萬岱，胡伏蓮，蕭樹東，等. 中國自然人群幽門螺桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查［J］. 現(xiàn)代消化及介入診療，2010，15（5）：265-270.

［23］藺蓉，熊漢華，錢偉，等. 不同年齡人群幽門腺、幽門螺桿菌胃內(nèi)分布特點及其關(guān)系［J］. 中華消化雜志，2005，25（11）：680-681.

［24］ SUERBAUM S， MICHETTI P.Helicobacter pylori infection［J］. N Engl J Med， 2002， 347（15）：1175-1186.

［25］劉健波，張錦坤. 有關(guān)消化性潰瘍流行病學(xué)問題的近況與發(fā)展［J］. 臨床消化病雜志，1992，4（2）：55-59.

［26］GAO W， CHENG H， HU F， et al. The evolution ofHelicobacter pylori antibiotics resistance over 10 years in Beijing， China［J］. Helicobacter， 2010， 15（5）：460-466.

［27］ZHENG Q， CHEN W J， LU H， et al. Comparison of the effcacy of triple versus quadruple therapy on the eradication of Helicobacter pylori and antibiotic resistance［J］. J Dig Dis， 2010，11（5）：313-318.

［28］冀子中，金夏，韓豐，等. 不同年齡段臨床分離的幽門螺桿菌2311株多重耐藥性分析［G］. 2013第六屆浙江省消化病學(xué)術(shù)大會論文匯編：172.

［29］BIERNAT MM， PONIEWIERKA E， BLASZCZUK J， et al. Antimicrobial susceptibility of Helicobacter pylori isolates from Lower Silesia， Poland［J］. Arch Med Sci， 2014， 10（3）：505-509.

［30］YU C， LI L， CHEN W， et al. Levofoxacin susceptibility testing for Helicobacter pylori in China： comparison of E-test and disk diffusion method［J］. Helicobacter， 2011， 16（2）：119-123.

2.同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院消化內(nèi)科。

中圖分類號：R378

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1009-7708（2016）03-0346-07

DOI：10.16718/j.1009-7708.2016.03.017

收稿日期：2015-06-15 修回日期：2015-07-08

基金項目：上海市衛(wèi)生局重點課題基金（20134008）；上海申康醫(yī)院發(fā)展中心新興前沿技術(shù)聯(lián)合攻關(guān)項目基金（SHDC12013123）；上海市科委自然科學(xué)基金（14ZR1413100）；上海市科委引導(dǎo)項目基金（14411962800）。

作者單位：1. 復(fù)旦大學(xué)附屬華東醫(yī)院檢驗科，上海 200040；*消化內(nèi)科；

作者簡介：胡玢婕（1990—），女，碩士研究生，主要從事細(xì)菌耐藥機制研究。

通信作者：趙虎，E-mail：hubertzhao@163.com。

Prevalence and antibiotic resistance profle of Helicobacter pylori in Shanghai

HU Binjie， ZHAO Fuju， CHAI Zilan， BAO Zhijun， XIANG Ping， YANG Changqing， WANG Yifei， FANG Yi，ZHANG Yanmei， ZHAO Hu. （Department of Laboratory Medicine， Huadong Hospital of Fudan University，Shanghai 200040， China）

Abstract:Objective To examine the prevalence of Helicobacter pylori in Shanghai and relevant risk factors， evaluate the resistance profle of H. pylori isolates to antibiotics used in frst-line therapy in two hospitals in Shanghai. Methods H. pylori were isolated from the biopsy samples of gastric mucosa collected from September 2013 to January 2015. Antimicrobial susceptibility test was performed by E-test method for 131 H. pylori strains to 4 antibiotics， clarithromycin， metronidazole， amoxicillin and tetracycline. Results A total of 955 patients receiving gastroscopy were enrolled. And 248 （26.0%） H. pylori strains were isolated from the biopsy samples of gastric mucosa. Overall， 14.5%， 64.1%， 0 and 0.8% of the strains were resistant to clarithromycin， metronidazole，amoxicillin and tetracycline， respectively. Resistance to two drugs was found in 10.7%（14/131） of the strains， and majority （92.8%，13/14） of which were resistant to clarithromycin and metronidazole. Conclusions The prevalence of H. pylori in gastric mucosa is rather lower compared with the data reported previously. It is associated with the sex， age and clinical outcome of patients， however， antibiotic resistance profile is not related to these factors. H. pylori eradication therapy should be individualized according to the results of susceptibility test in Shanghai.

Key words:Helicobacter pylori； prevalence； antibiotic resistance； antimicrobial susceptibility test