97例ABO疑難血型鑒定的血標(biāo)本因素分析及其控制措施*

楊　琳，張勇萍#，楊世明△，安　寧，李　丹，穆士杰▲

(1.第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院輸血科，西安 710038；2.第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院輸血科，西安 710032)

·臨床研究·

97例ABO疑難血型鑒定的血標(biāo)本因素分析及其控制措施*

楊琳1，張勇萍1#，楊世明1△，安寧2，李丹1，穆士杰1▲

(1.第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院輸血科，西安 710038；2.第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院輸血科，西安 710032)

摘要:目的分析引起ABO疑難血型鑒定的血標(biāo)本因素及其控制措施。方法采用微柱凝膠法對(duì)患者血標(biāo)本進(jìn)行ABO血型正、反定型，對(duì)有疑問(wèn)的血標(biāo)本再用試管法進(jìn)行復(fù)檢，并做吸收放散試驗(yàn)、抗人球蛋白試驗(yàn)、不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定進(jìn)行確認(rèn)。結(jié)果在引起ABO疑難血型鑒定的97例血標(biāo)本中，生理因素血標(biāo)本14例(14.4%)，疾病因素血標(biāo)本27例(27.9%)，臨床治療因素血標(biāo)本16例(16.5%)，其他因素血標(biāo)本40例(41.2%)。在引起ABO血型正、反定型不相符的97例血標(biāo)本中，正定型不相符6例(6.2%)，反定型不相符71例(73.2%)，正 、反定型均不相符20例(20.6%)。結(jié)論血標(biāo)本因素可引起ABO疑難血型鑒定，在血標(biāo)本采集、保存及送檢過(guò)程中應(yīng)進(jìn)行規(guī)范化操作，保證血標(biāo)本采集的正確性和質(zhì)量要求，以確保ABO血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性和臨床輸血治療的安全有效。

關(guān)鍵詞:血液標(biāo)本；影響因素；ABO血型；疑難血型鑒定；控制措施；臨床輸血

ABO血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性是確保臨床輸血安全和有效的關(guān)鍵措施，符合試驗(yàn)要求的血標(biāo)本是獲得ABO血型鑒定結(jié)果正確性的前提條件[1]。因此，對(duì)ABO血型鑒定必須進(jìn)行正定型和反定型相結(jié)合，而且正、反定型相符才能確定ABO血型。在血型鑒定中血標(biāo)本因素可引起ABO正、反定型不相符等疑難血型，給判定結(jié)果和輸血及時(shí)性帶來(lái)不利影響[2]。本研究回顧性分析了引起97例血標(biāo)本ABO血型正、反定型不相符等疑難鑒定的原因及其相應(yīng)的控制措施，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1血標(biāo)本來(lái)源選取2010年1月1日至2014年12月31日由唐都醫(yī)院臨床護(hù)士采集送輸血科引起ABO疑難血型鑒定的血標(biāo)本97例。

1.2儀器與試劑抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H、抗-D、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-M、抗-N、抗-P1，ABO血型反定型細(xì)胞、抗體篩選細(xì)胞、抗體鑒定譜細(xì)胞、抗人蛋白試劑由上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供；ABO、RhD血型檢測(cè)卡及抗人球蛋白卡為瑞士迖亞美公司產(chǎn)品，KA-2200型免疫血液學(xué)離心機(jī)為久保田公司產(chǎn)品，恒溫水浴箱為金壇恒豐儀器廠產(chǎn)品。

1.3檢測(cè)方法

1.3.1ABO及亞型的檢測(cè)采用微柱凝膠法對(duì)患者進(jìn)行ABO血型正、反定型，正、反定型不相符時(shí)，正定型加入抗-AB、抗-A1及抗-H定型試劑，反定型增加A2細(xì)胞及作進(jìn)行吸收放散試驗(yàn)。

1.3.2冷凝集素的檢測(cè)將患者血清與自身或O型紅細(xì)胞混合置4 ℃冰箱4 h進(jìn)行冷凝集試驗(yàn)；用37 ℃生理鹽水將患者紅細(xì)胞洗滌3次后進(jìn)行ABO血型檢測(cè)，并在37 ℃條件下進(jìn)行試驗(yàn)及觀察結(jié)果；對(duì)高效價(jià)的冷凝集素，用O型紅細(xì)胞吸收患者血清中冷凝集素后再進(jìn)行反定型。

1.3.3自身抗體的檢測(cè)將患者紅細(xì)胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次后進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)；用洗滌或放散后的紅細(xì)胞將患者血清中的自身抗體吸收后再進(jìn)行反定型；用洗滌后的自身紅細(xì)胞吸收血清中的自身抗體后，再進(jìn)行同種抗體檢測(cè)。

1.3.4不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定對(duì)出現(xiàn)ABO血型正、反定型不相符的血標(biāo)本，采用抗體篩選細(xì)胞進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選，對(duì)結(jié)果陽(yáng)性的血標(biāo)本再采用10個(gè)譜細(xì)胞進(jìn)行抗體特異性鑒定，對(duì)檢出的特異性抗體再采用含有相應(yīng)抗原的紅細(xì)胞測(cè)定抗體效價(jià)。

2結(jié)果

在引起ABO疑難血型鑒定的97例血標(biāo)本中，生理因素血標(biāo)本14例(14.4%)，疾病因素血標(biāo)本27例(27.9%)，臨床治療因素血標(biāo)本16例(16.5%)，其他因素血標(biāo)本40例(41.2%)。在引起ABO血型正、反定型不相符的97例血標(biāo)本中，正定型不相符6例(6.2%)，反定型不相符71例(73.2%)，正、反定型均不相符20例(20.6%)，見(jiàn)表1。

表1　　97例血標(biāo)本因素對(duì)ABO血型鑒定結(jié)果的影響

注：(+)表示陽(yáng)性，(-)表示陰性；*表示37 ℃處理后。

3討論

輸血前血標(biāo)本采集的正確性和規(guī)范化操作是保證ABO血型鑒定結(jié)果準(zhǔn)確性和輸血安全有效的根本保證[3]。但血標(biāo)本可受采集、生理、疾病及治療等多種因素的影響而導(dǎo)致ABO疑難血型鑒定[4]。本研究引起ABO疑難血型鑒定的97例血標(biāo)本中，新生兒血清7例，新生兒剛出生時(shí)抗體尚未產(chǎn)生或效價(jià)很低，導(dǎo)致反定型時(shí)不凝集，可加大血清量、延長(zhǎng)孵育時(shí)間或置4 ℃冰箱5～10 min后觀察結(jié)果[5]。ABO亞型7例，因亞型紅細(xì)胞的抗原性較弱，與抗-A或抗-B有時(shí)不凝集。正定型中增加抗-A1、抗-AB及抗-H，或用吸收放散試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)[6]。

疾病因素中，高效價(jià)冷凝集素17例，健康人血清中的冷凝集素效價(jià)在16以下，超過(guò)28 ℃通常不凝集。但在病毒性肺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥及自身免疫性溶血性貧血患者血清中可含有高效價(jià)病理性冷凝集素，干擾血型鑒定結(jié)果。將紅細(xì)胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次，在37 ℃條件下進(jìn)行試驗(yàn)和觀察結(jié)果，可排除冷凝集素對(duì)血型鑒定的干擾[7]。自身抗體10例，自身免疫性溶血性貧血患者常伴有自身或同種抗體，與所有供血者或自身紅細(xì)胞均發(fā)生凝集[8]。將紅細(xì)胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次進(jìn)行正定型，用吸收自身抗體后的血清進(jìn)行反定型。

臨床治療因素中，大量輸液處采集血標(biāo)本3例，在大量輸液處采集的血標(biāo)本導(dǎo)致血液嚴(yán)重稀釋?zhuān)炊ㄐ蜁r(shí)不凝集或凝集很弱，引起正、反定型不相符[9]。在輸液對(duì)側(cè)肢體采集血標(biāo)本，防止血液被稀釋。異基因干細(xì)胞移植血標(biāo)本13例，白血病等患者在進(jìn)行異基因造血干細(xì)胞移植期間可出現(xiàn)嵌合體現(xiàn)象，使正定型呈混合凝集，導(dǎo)致血型判定困難[10]?？赏ㄟ^(guò)了解患者移植前血型鑒定資料和供者的血型或進(jìn)行基因檢測(cè)確認(rèn)。

其他因素中，不規(guī)則抗體血標(biāo)本20例，尤其以抗-M、抗-Lea及抗-E引起ABO血型正、反定型不相符者較多見(jiàn)。對(duì)患者血清進(jìn)行不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定，確定了抗體特異性，選擇不含相應(yīng)抗原的血液輸注[11]?？鼓獦?biāo)本12例，用抗凝血標(biāo)本作進(jìn)行反定型時(shí)，血漿中的纖維蛋白可導(dǎo)致試劑紅細(xì)胞出現(xiàn)弱凝集[12]。將血標(biāo)本置37 ℃水浴10 min，或用血清標(biāo)本進(jìn)行反定型。未抗凝血標(biāo)本6例，用從凝血塊上洗下的紅細(xì)胞進(jìn)行正定型可形成混合凝集[13]。采用抗凝血紅細(xì)胞進(jìn)行正定型。溶血標(biāo)本2例，溶血標(biāo)本反定型時(shí)上清液呈紫紅色、細(xì)胞顆粒小或凝集強(qiáng)度降低，導(dǎo)致血型判定困難[14]。采用新鮮血標(biāo)本進(jìn)行血型鑒定和交叉配血即可避免。

綜上所述，引起ABO疑難血型鑒定的原因較多，血標(biāo)本采集的正確性和質(zhì)量狀況是關(guān)鍵因素，首先應(yīng)確保血標(biāo)本來(lái)自受血者本人，堅(jiān)持血型初檢和復(fù)檢2次鑒定的對(duì)比制度[15]。輸血科技術(shù)人員在遇到ABO疑難血型鑒定時(shí)，應(yīng)結(jié)合臨床病例資料進(jìn)行綜合分析，并采用針對(duì)性試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，以確保血型鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性和臨床輸血治療的安全有效[16]。

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基金項(xiàng)目：陜西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2009JM4006)；陜西省社發(fā)公關(guān)資助項(xiàng)目(2010K15-03-07)。

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.033

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)11-1531-02

(收稿日期：2016-01-18修回日期：2016-03-22)

#同為第一作者。△通訊作者，E-mail：shxkyshm@fmmu.edu.cn；▲通訊作者，E-mail：musj1963@fmmu.edu.cn。