膠體金法檢測血清人絨毛膜促性腺激素用于宮外孕鑒別診斷的可行性研究

謝　暉，馬秀芝，張乃鍵，于小雨，胡靜濤

(1.解放軍第八二醫(yī)院檢驗科 江蘇淮安223001；2.徐州衛(wèi)生學(xué)校微生物教研室，江蘇徐州 221400)

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膠體金法檢測血清人絨毛膜促性腺激素用于宮外孕鑒別診斷的可行性研究

謝暉1，馬秀芝2，張乃鍵1，于小雨1，胡靜濤1

(1.解放軍第八二醫(yī)院檢驗科 江蘇淮安223001；2.徐州衛(wèi)生學(xué)校微生物教研室，江蘇徐州 221400)

摘要:目的 通過評價早早孕膠體金法的檢測性能，給臨床急腹癥——宮外孕排除提供及時準(zhǔn)確的輔助診斷信息。方法選取303例臨床門診急診血清標(biāo)本，采用早早孕紙條膠體金法檢測人絨毛膜促性腺激素(HCG)，同時采用ECIQ化學(xué)發(fā)光免疫法檢測β-HCG驗證。結(jié)果采用膠體金試紙法檢測303例標(biāo)本中，陰性108例，弱陽性89例，陽性29例，強(qiáng)陽性77例，化學(xué)發(fā)光免疫法檢測β-HCG發(fā)現(xiàn)膠體金試紙法檢測的89例弱陽性性標(biāo)本中有4例為假陽性,其余結(jié)果均一致。兩種檢測結(jié)果經(jīng)McNemar檢驗,兩種方法優(yōu)劣性差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論膠體金試紙法操作簡便快速，可作為急診宮外孕初篩的一項輔助指標(biāo)。

關(guān)鍵詞:膠體金試紙法；化學(xué)發(fā)光免疫法；人絨毛膜促性腺激素β亞型

人絨毛膜促性腺激素(HCG)是由胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞合成和分泌的糖蛋白激素，在受精卵著床5～7 d(約月經(jīng)第26天)即可測出[1]。血HCG臨床應(yīng)用多年，并且是一項非常有價值的指標(biāo)，特別是血HCG對診斷臨床急腹癥——宮外孕更需要及時性、準(zhǔn)確性，否則可能危急患者生命。為了更好地服務(wù)于臨床，力求找到更快、更好的方法檢測血清HCG，本研究分別采用膠體金試紙法與化學(xué)發(fā)光免疫法兩種常用的HCG檢測方法，觀察對比檢測結(jié)果，為更恰當(dāng)有效地選擇HCG檢測提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料2015年3～6月解放軍第八二醫(yī)院收治的門急診孕婦或其他婦科患者303例,年齡18～52歲，采集受試對象靜脈血3～4 mL,分離血清后立即進(jìn)行HCG檢測,無高膽紅素及溶血標(biāo)本。

1.2儀器與試劑藍(lán)十字生物藥業(yè)(北京)有限公司生產(chǎn)的藍(lán)夢孕知膠體金早早孕檢測試紙;美國強(qiáng)生公司ECIQ全自動發(fā)光免疫分析儀及配套β-HCG 檢測試劑盒。

1.3檢測方法

1.3.1膠體金試紙法將膠體金試紙插入前述采樣血清當(dāng)中，注意膠體金試紙標(biāo)志線MAX處必須位于血清表層以上，滯留15 s后將膠體金試紙取出放平，5 min以后觀察檢測結(jié)果。

1.3.2化學(xué)發(fā)光免疫法依據(jù)β-HCG試劑盒的IC卡建立測定參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，依照儀器標(biāo)準(zhǔn)操作方法進(jìn)行檢測。

1.4結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1膠體金試紙法判定標(biāo)準(zhǔn)(1)無效：僅僅在檢測線處出現(xiàn)一條紅色反應(yīng)線或沒有出現(xiàn)紅色反應(yīng)線。(2)陰性：僅僅在對照線處有一條紅色反應(yīng)線出現(xiàn)。(3)弱陽性：出現(xiàn)2條紅色反應(yīng)線，但檢測線處反應(yīng)線比對照線處顏色淺。(4)陽性：出現(xiàn)2條紅色反應(yīng)線，并且2條反應(yīng)線顏色深淺度一致。(5)強(qiáng)陽性：出現(xiàn)2條紅色反應(yīng)線，但是檢測線處反應(yīng)線比對照線處顏色深。

1.4.2化學(xué)發(fā)光免疫法判定標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)發(fā)光免疫法β-HCG檢測按照儀器及試劑說明書操作，室內(nèi)質(zhì)控物檢測結(jié)果均在控制范圍內(nèi)，線性范圍為2.39～15 000.00 mU/mL。β-HCG<5 mU/mL為陰性，5～25 mU/mL為弱陽性，>25 mU/mL為陽性。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理檢測結(jié)果采用配對χ2檢驗，采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

303例標(biāo)本中，采用膠體金試紙法檢測陰性108例，弱陽性89例，陽性29例，強(qiáng)陽性77例，之后經(jīng)化學(xué)發(fā)光免疫法檢測證實，89例弱陽性性標(biāo)本中有4例為假陽性?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法檢測β-HCG結(jié)果陰性者β-HCG<2.39 mU/mL，弱陽性者為3.00～435.34 mU/mL，陽性者為565.2～1 233.6 mU/mL，強(qiáng)陽性者為1 452.00～18 513.00 mU/mL。兩種方法檢測結(jié)果經(jīng)χ2檢驗，兩種方法優(yōu)劣性差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1　　兩種檢測方法結(jié)果比較

3討論

HCG由α和β二聚體的糖蛋白組成，由于 HCG 的a亞單位與促卵泡激素(FSH)、促黃體生成激素(LH)、促甲狀腺激素(TSH)的a亞單位相似，具有免疫交叉反應(yīng)，而β亞單位為HCG獨有，因此高特異性的β-HCG對早期妊娠、 流產(chǎn)、 異位妊娠等的診療及療效觀察具有更重要的臨床價值[1]?；瘜W(xué)發(fā)光免疫法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、精密度高等優(yōu)點。本研究使用的 ECIQ全自動發(fā)光免疫分析儀檢測靈敏度高、特異性較強(qiáng)、標(biāo)記物穩(wěn)定、操作簡便,不足之處在于檢測成本較高，檢測時間略長。膠體金試紙法方法簡便、快速且不需要儀器設(shè)備，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床尿液HCG的檢測，臨床上也用該試紙條檢測血清中得HCG[2-6]。

本研究中膠體金試紙法檢測的陽性和強(qiáng)陽性共106例標(biāo)本與ECIQ化學(xué)發(fā)光免疫法復(fù)檢結(jié)果相符，108例陰性標(biāo)本經(jīng)化學(xué)發(fā)光法檢測后也均為陰性，這3組一致率達(dá)到100%。而膠體金試紙法89例弱陽性中僅有4例標(biāo)本經(jīng)化學(xué)發(fā)光法檢測為陰性(<5 mU/mL)，其余85例標(biāo)本結(jié)果一致，以上數(shù)據(jù)說明膠體金試紙法檢測HCG的靈敏度并不遜色于ECIQ的化學(xué)免疫發(fā)光法，可以用來初步篩查HCG，這一結(jié)果與段秀群等[4]的結(jié)果相同。膠體金試紙法檢測出126例標(biāo)本經(jīng)微粒子全自動發(fā)光免疫分析儀復(fù)檢后也均為陰性。盧桂香[5]在2012年比較兩種方法檢測時膠體金試紙法的62例陰性標(biāo)本中有9例是陽性標(biāo)本；王志賢等[7]比較兩種方法，膠體金試紙法檢測18例標(biāo)本出現(xiàn)了3例假陰性。除去由于高濃度HCG值產(chǎn)生的鉤狀效應(yīng)，另外原因可能是不同批號不同公司膠體金試紙條敏感度有所差異造成。

本研究發(fā)現(xiàn)，膠體金試紙法檢測的4例假陽性標(biāo)本，其中有3例β-HCG<2.39 mU/mL，另外1例為4.55 mU/mL。造成假陽性的原因可能是膠體金試紙法檢測的是總HCG，與血清中的FSH、LH、TSH產(chǎn)生交叉反應(yīng)。如果按照化學(xué)發(fā)光法的說明書以5 mU/mL為診斷界值判斷，那膠體金試紙法的敏感度為100.0%，特異性為96.4%。雖然從統(tǒng)計學(xué)分析兩種方法優(yōu)劣性差異無明顯區(qū)別，可能是選取的標(biāo)本量還不夠大。從此次結(jié)果中可以看出，盡管膠體金試紙法的特異性不如ECIQ化學(xué)免疫發(fā)光法，但是靈敏度并不遜色于它，適合初步篩查。本試驗中有16例急診腹痛患者，13例最終確診為宮外孕，膠體金試紙法測得14例HCG陽性。由于本研究無葡萄胎等滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤標(biāo)本，結(jié)果并無假陰性出現(xiàn)，但臨床檢驗中要注意此類標(biāo)本，以防漏診、誤診。因此，臨床醫(yī)生遇到急腹癥患者排除宮外孕的時候可不必等待β-HCG定量結(jié)果，可先通過膠體金試紙法檢測血清HCG對患者進(jìn)行定性初篩，再結(jié)合B超檢查結(jié)果及臨床癥狀，使對宮外孕的診斷時間大大縮短，可從30 min縮短到1 min左右，從而及時挽救患者生命。

參考文獻(xiàn)

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[3]徐春泉,陳增強(qiáng),呂美艷,等.膠體金法檢測婦科腫瘤患者高濃度HCG所致鉤狀效應(yīng)的解決方案[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2010,33(5):462.

[4]段秀群,張偉,龔國富.膠體金法血清β-HCG檢測結(jié)果對發(fā)光免疫分析儀檢測程序選擇的價值[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2012,33(6):751-752.

[5]盧桂香.膠體金試紙法與化學(xué)發(fā)光免疫法檢測全分子HCG分析[J].當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2012,18(5):25-26.

[6]趙艷華,姜朝新,曾令恒，等.膠體金試紙條檢測血清HCG的性能評價及其在估算血清HCG水平中的應(yīng)用[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013,34(15):2016-2018.

[7]王志賢,馬玲.膠體金試紙法與化學(xué)發(fā)光免疫法測定HCG的比較[J].中國實用醫(yī)刊，2013,40(14):30-31.

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.11.058

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)11-1576-02

(收稿日期：2016-01-23修回日期：2016-03-22)