Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中的表達(dá)意義

馮靜喬

515000 廣東 汕頭，汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科

?

臨床研究

Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中的表達(dá)意義

馮靜喬

515000 廣東 汕頭，汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科

【摘要】目的探究Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中的表達(dá)意義。方法2010年2月至2014年10月汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科收治住院的急性白血病患兒100例為觀察組，又根據(jù)疾病類型分為3個(gè)亞組，即急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)組49例，急性非淋巴細(xì)胞白血病(ANLL)組21例，急性髓細(xì)胞白血病(AML)組30例。對(duì)照組30例，為同年齡正常健康兒童。采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)Daxx蛋白的表達(dá)。結(jié)果對(duì)照組兒童骨髓細(xì)胞中Daxx蛋白的表達(dá)陽性率與ALL組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.008 3)；對(duì)照組兒童骨髓細(xì)胞中Daxx蛋白的表達(dá)陽性率顯著低于ANLL組和AML組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.008 3)。對(duì)照組中Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓中的表達(dá)(6.01±1.13)μg/L，顯著高于ALL組(3.55±2.32)μg/L、ANLL組(3.54±2.47)μg/L、AML組(3.12±1.56)μg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中過度表達(dá)，可能對(duì)促進(jìn)白血病細(xì)胞的增殖、生長過程起到重要作用。

【關(guān)鍵詞】急性白血??；Daxx蛋白；兒童

急性白血病是一種造血組織的惡性腫瘤，在醫(yī)學(xué)上稱作為血癌[1]。是造血干細(xì)胞以及祖細(xì)胞中的一種或幾種惡變，從而失去正常細(xì)胞的增殖、分化的能力，這種細(xì)胞變的持續(xù)增殖無控制，慢慢的骨髓會(huì)被逐步取代，并且這種細(xì)胞經(jīng)過血液分布到全身組織器官[2]。Daxx是急性白血病中的一種新轉(zhuǎn)錄調(diào)控類型的蛋白，它與正常細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄分化、增殖生長等生理過程有密切的關(guān)系[3]。近年來，相關(guān)醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中起到了很大作用[4]。本研究主要對(duì)Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中的表達(dá)意義和預(yù)后的關(guān)系做出進(jìn)一步的研究探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料2010年2月至2014年10月汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院兒科收治住院的急性白血病患兒100例，為觀察組，又根據(jù)疾病類型分為3個(gè)亞組，即急性淋巴細(xì)胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)組49例，急性非淋巴細(xì)胞白血病(acute non lymphocytic leukemia，ANLL)組21例，急性髓細(xì)胞白血病(acute myeloid leukemia，AML)組30例。對(duì)照組30例，為同年齡正常健康兒童，同時(shí)排除血液系統(tǒng)疾病。觀察組和對(duì)照組受試對(duì)象在年齡、性別方面比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，3個(gè)亞組與對(duì)照組比較差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

表1　各組兒童一般資料比較

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《白血病的診斷與治療》中急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)及FAB分型診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。

1.3納入標(biāo)準(zhǔn)(1)符合急性白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)骨髓象檢查，增生Ⅰ～Ⅱ級(jí)，分類中原始細(xì)胞明顯增多，至少>30%；(3)年齡6～17歲；(4)病程為初發(fā)，體質(zhì)適合接受治療者；(5)事前經(jīng)過患者本人及其家屬同意，并經(jīng)過本院倫理部門研究予以肯定指示。

1.4排除標(biāo)準(zhǔn)(1)體質(zhì)十分虛弱不適宜接受治療者；(2)有精神病史者。

1.5檢測(cè)方法骨髓涂片時(shí)所用的玻片均經(jīng)過消毒處理，涂片涂好后，自然干燥，放在4 ℃的環(huán)境下用丙酮固定30 min，等待自然干燥，隨后置于-20 ℃的冷凍庫中凍存待檢[6]。采用免疫組織化學(xué)鏈霉素親和素-生物素-過氧化酶復(fù)合物(SABC)方法檢測(cè)Daxx蛋白的表達(dá)，蘇木精進(jìn)行染色，采用中性樹膠將玻片密封。判定結(jié)果：Daxx蛋白顏色為黃色，呈顆粒狀，分布于細(xì)胞核內(nèi)，陽性細(xì)胞散在分布。選擇20個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)細(xì)胞個(gè)數(shù)，比較陰陽性。

1.4觀察指標(biāo)觀察Daxx蛋白在各組兒童急性白血病骨髓中的表達(dá)，分析Daxx蛋白在骨細(xì)胞中為因變量的表達(dá)水平，Daxx蛋白在兒童骨髓細(xì)胞中的陽性率。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以表示，多組比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

各組兒童急性白血病骨髓中Daxx蛋白的表達(dá)比較見表2。

表2　各組兒童急性白血病骨髓中Daxx蛋白的表達(dá)比較

表2結(jié)果表明，各組Daxx蛋白在骨髓中的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。進(jìn)一步兩兩比較，ALL組、ANLL組、AML組Daxx蛋白在骨髓中的表達(dá)顯著低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=6.72,5.50,7.09，P<0.01)。

表2結(jié)果還表明，對(duì)照組與ALL組、ANLL組及AML組4組兒童骨髓細(xì)胞中Daxx蛋白的表達(dá)陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，進(jìn)一步兩兩比較，對(duì)照組與ALL組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.32，P=0.012>0.008 3)；ANLL組和AML組兒童骨髓細(xì)胞中Daxx蛋白的表達(dá)陽性率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.66,12.27，P<0.008 3)。ALL組兒童骨髓細(xì)胞中Daxx蛋白的表達(dá)陽性率顯著低于ANLL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=7.88，P<0.008 3)；AML組兒童骨髓細(xì)胞中Daxx蛋白的表達(dá)陽性率與ALL組和ANLL組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.06，2.00，P>0.008 3)。

3討論

兒童急性白血病極大危害孩子的健康成長，給家長和孩子都造成嚴(yán)重的身體、心理以及經(jīng)濟(jì)上的損害，必須及時(shí)進(jìn)行救治。一般平均存活壽命為2～4個(gè)月，甚至在就診數(shù)十天后就會(huì)失去生命。所以在平時(shí)的生活中就應(yīng)該重視起來。目前，臨床治療白血病總原則為滅殺患兒體內(nèi)白血病細(xì)胞[8]，控制病變細(xì)胞大量的增生繁殖，進(jìn)而放置白血病細(xì)胞浸潤，下面簡(jiǎn)單介紹治療的原則。首先，患兒應(yīng)注意多加休息[9]?；純簯?yīng)避免接觸過高的溫度，當(dāng)出現(xiàn)嚴(yán)重的貧血時(shí)應(yīng)及時(shí)臥床休息[10]。其次，患兒要避免感染發(fā)生。研究表明，臨床上感染是導(dǎo)致死亡的最大的原因，因此患者應(yīng)該做好充分的防止感染工作[11]。平時(shí)應(yīng)該注意口腔、手腳衛(wèi)生，防止出血、潰爛等發(fā)生；室內(nèi)要注意通風(fēng)良好，定期對(duì)室內(nèi)空氣消毒[12]。最后，患兒如果出現(xiàn)貧血，應(yīng)及時(shí)糾正。

近年來，相關(guān)醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中起到了很大作用[13]。Daxx蛋白在影響細(xì)胞轉(zhuǎn)錄、生長以及凋亡的機(jī)制以及作用還存在很大的爭(zhēng)議。Daxx蛋白是一種非常重要的信號(hào)分子，在細(xì)胞核中作為調(diào)控轉(zhuǎn)錄的分子發(fā)揮很重要的促進(jìn)凋亡的作用,可促進(jìn)白血病細(xì)胞的增殖、生長，在兒童的急性白血病中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。劉靜等[14]對(duì)Daxx蛋白在兒童急性白血病中的表達(dá)進(jìn)行了研究，并對(duì)其與急性白血病臨床分型和預(yù)后之間的關(guān)系進(jìn)行了探討，通過檢測(cè)50例兒童急性白血病患者骨髓細(xì)胞Daxx蛋白的表達(dá),Daxx在ALL組、ANLL組、AML組患兒骨髓細(xì)胞中的陽性表達(dá)率分別為26.5%、62.5%、38.0%，稍低于較本研究的30.61%、66.67%、46.67%，這可能與本研究選取樣本的數(shù)量有關(guān)，其研究結(jié)果表明Daxx蛋白在兒童急性白血病中異常表達(dá),并且與兒童急性白血病的某些臨床特征密切相關(guān),認(rèn)為在兒童急性白血病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要的作用。本研究發(fā)現(xiàn)其中ANLL組陽性率高達(dá)66.67%，這說明Daxx蛋白在ANLL細(xì)胞中調(diào)控異常；在100例急性白血病患兒中，其中有57例患者呈陽性，而對(duì)照組的30例患兒中僅有2例呈陽性，說明Daxx蛋白可對(duì)白血病細(xì)胞的增殖、生長起到一定的促進(jìn)作用，值得更進(jìn)一步的深入研究。

綜上所述，本研究Daxx蛋白在兒童急性白血病骨髓細(xì)胞中過度表達(dá)，可能對(duì)促進(jìn)白血病細(xì)胞的增殖、生長起到重要作用。

參考文獻(xiàn)

[1]黃禮彬,張曉莉,譚惠珍，等.兒童急性白血病耐藥相關(guān)microRNA的篩選[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2012,33(5):592-596.

[2]李曉輝,張劍白,王亞君，等.TRIP3基因與兒童急性白血病免疫分型關(guān)系的研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,45(3):272-274.

[3]周東風(fēng),翟麗娜,潘峰，等.樹突狀細(xì)胞與細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞共培養(yǎng)細(xì)胞過繼免疫治療兒童急性白血病[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2012,4(3):166-169.

[4]盧新天.兒童急性白血病預(yù)后影響因素[J].實(shí)用兒科臨床雜志,2011,26(15):1155-1158.

[5]李金梅,成秉林,周晉.白血病的診斷與治療[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,2008.

[6]岳志霞,鄭胡鏞.兒童急性白血病遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J].中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志,2013,21(3):791-795.

[7]方希敏,潘夏蓁,錢江潮，等.兒童急性白血病化療后感染的臨床分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2013，23(5):1087-1089.

[8]楊月明,劉伶.兒童白血病常規(guī)劑量環(huán)磷酰胺致心臟毒性1例報(bào)告[J].中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué)，2014，6(4):383-384.

[9]曲延章.兒童急性白血病影響因素分析[J].中國公共衛(wèi)生,2014,30(12):1606-1607.

[10]朱麗丹,孔佩艷,劉紅，等.52例急性白血病患兒長期存活分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2011，40(36)：3703-3704.

[11]Kent EE,Mitchell SA,Oakley-girvan I,et al.The importance of symptom surveillance during follow-up care of leukemia,bladder,and colorectal cancer survivors[J].Support Care Cancer，2014，22(1):163-172.

[12]Yujiri T,Tanaka M,Taguchi A,et al.Reactivation of hepatitis B virus in a hepatitis B surface antigen-negative patient with acute promyelocytic leukemia treated with arsenic trioxide[J].Ann Hematol，2014，93(2):351-352.

[13]翟元梅,石軍.白血病相關(guān)骨髓纖維異常的研究進(jìn)展[J].中國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)雜志，2014，22(1)：229-231.

[14]劉靜,張柳清,胡群，等.Daxx蛋白在兒童急性白血病中的表達(dá)及其臨床意義[J].中國當(dāng)代兒科雜志，2007，9(1):33-36.

(本文編輯：劉穎)

Expression significance of Daxx protein in bone marrow cells of children with acute leukemia

FENGJingqiao.

TheFirstAffiliatedHospitalofShantouUniversity，Shantou515000，China.

【Abstract】ObjectiveTo explore the expression significance of Daxx protein in bone marrow cells of children with acute leukemia.MethodsTotally 100 cases of children with acute leukemia were selected as the research object in this study from Feb.2010 to Oct.2014 in the First Affiliated Hospital of Shantou University Medical College and divided into 3 groups according to the type of disease,including acute lymphoblastic leukemia(ALL)group of 49 cases,acute non-lymphocytic leukemia(ANLL)group of 21 cases,acute myeloid leukemia(AML)group of 30 cases.The control group consisted of 30 cases,who were normal healthy children of the same age.The expression of Daxx protein was detected by immunohistochemical method.ResultsThe expression rate of Daxx protein in the control group(6.67%)was much smaller than that in ALL group(30.38%),ANLL group(66.67%)and AML group(46.67%),the difference being statistically significant(P<0.05).Expression of Daxx protein in the control group in the bone marrow of children with acute leukemia(6.01±1.13)μg/L was significantly higher than that in ALL group(3.55±2.32)μg/L,ANLL group(3.54±2.47)μg/L and AML group(3.51±2.53)μg/L,the difference being statistically significant(P<0.05).ConclusionThe overexpression of Daxx protein in bone marrow cells of children with acute leukemia may play an important role in promoting the proliferation and growth of leukemia cells.

【Keywords】Acute leukemia;Daxx protein;Children

作者簡(jiǎn)介：馮靜喬(1979-)，女，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師。研究方向：小兒血液病的基礎(chǔ)與臨床研究，E-mail：fengjingqiao2015@163.com

doi：10.3969/j.issn.1674-3865.2016.02.011

【中圖分類號(hào)】R725.5

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】1674-3865(2016)02-0161-03

(收稿日期：2015-08-25)