氣相色譜法測(cè)定氫化植物油中菊酯類農(nóng)藥

金悅敏 龔睿蓉

關(guān)鍵詞：氫化植物油 菊酯類農(nóng)藥 氣相色譜法

氫化植物油俗稱奶精、乳馬林或是人造奶油，是普通植物油在一定溫度和壓力下加氫催化的產(chǎn)物。它不但能延長(zhǎng)保質(zhì)期，還能讓糕點(diǎn)更酥脆；同時(shí)，由于熔點(diǎn)高，室溫下能保持固體形狀，因此被廣泛用于食品加工。氫化植物油中含有大量的反式脂肪酸，有可能增大人們患心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，并可能會(huì)引起老年癡呆癥的產(chǎn)生。這些危害一般已為人所熟知，但氫化植物油中有可能有農(nóng)藥的殘留，這一點(diǎn)絕大多數(shù)人有可能還不知道。

農(nóng)藥是一種化學(xué)物質(zhì)，用來(lái)殺滅妨礙植物和農(nóng)作物正常成長(zhǎng)的害蟲(chóng)、雜草等物質(zhì)。雖然它能使農(nóng)作物豐收，保證農(nóng)作物的產(chǎn)量，但它的毒性也很強(qiáng)，且不容易分解。大量散失的農(nóng)藥揮發(fā)到空氣中、流入水體中、沉降聚集在土壤中，嚴(yán)重污染了農(nóng)畜漁果產(chǎn)品，并通過(guò)食物鏈的富集作用轉(zhuǎn)移到人體，對(duì)人體產(chǎn)生危害。農(nóng)藥的種類不同對(duì)人體造成的危害也不同，而菊酯類農(nóng)藥主要對(duì)人的神經(jīng)系統(tǒng)造成危害。

我國(guó)已有比較成熟的方法來(lái)測(cè)定一般動(dòng)植物中的農(nóng)藥殘留量，主要為氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等。而對(duì)于氫化植物油中菊酯類農(nóng)藥殘留量的測(cè)定，國(guó)內(nèi)相關(guān)的方法卻不多見(jiàn)。本文建立了一套測(cè)定氫化植物油中菊酯類農(nóng)藥殘留量的方法，該方法采用液液分配進(jìn)行提取，固相萃取小柱用以凈化，氣相色譜儀配ECD檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定，操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確靈敏，所需器材簡(jiǎn)單，便于實(shí)施推廣。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器設(shè)備和試劑

Agilent7890A氣相色譜儀，配電子俘獲檢測(cè)器（ECD），HP-5石英毛細(xì)管氣相色譜柱，分流/不分流毛細(xì)管進(jìn)樣口；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（Buchi）；固相萃取裝置（Supelco）；氮吹儀。

正己烷（農(nóng)殘級(jí)）；乙腈（農(nóng)殘級(jí)）；丙酮（農(nóng)殘級(jí)）；無(wú)水硫酸鈉（分析純）；弗羅里硅土柱（1g，6mL，Supelco）。

甲氰菊酯（99.0%，Dr.Ehrenstorfer公司），氯氰菊酯（94.0%，Dr.Ehrenstorfer公司），氰戊菊酯（98.5%，Dr.Ehrenstorfer公司），溴氰菊酯（99.0%，Dr.Ehrenstorfer公司）。

1.2 色譜條件

色譜柱為HP-5石英毛細(xì)管柱，柱長(zhǎng)30m，內(nèi)徑0.32mm，膜厚度0.25μm；色譜柱初始溫度為180℃保持1min再以5℃/min升溫至250℃保持11min，檢測(cè)器溫度為320℃，進(jìn)樣口溫度為280℃；以氮?dú)鉃檩d氣，流速2.8mL/min，電子俘獲檢測(cè)器（ECD），不分流進(jìn)樣。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 樣品處理

稱取約1.00g氫化植物油于100mL燒杯中，用10mL正己烷加以溶解，轉(zhuǎn)移入125mL分液漏斗中，再分別用5mL正己烷洗滌燒杯兩次，洗滌液一并倒入125mL分液漏斗中，加入20mL用正己烷飽和過(guò)的乙腈，振搖1min，靜置分層，將下層溶液移入250mL分液漏斗中，上層溶液用乙腈再分別提取兩次，每次用乙腈15mL，合并乙腈層于250mL分液漏斗中，加入50mL4%硫酸鈉溶液和50mL正己烷，輕輕振搖1min，靜置分層，棄去下層溶液，再加入25mL4%硫酸鈉溶液洗滌上層溶液兩次，棄去水相，正己烷層過(guò)無(wú)水硫酸鈉柱脫水收集于100mL圓底燒瓶中，用10mL正己烷洗滌分液漏斗和無(wú)水硫酸鈉柱，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至2mL待凈化。

把弗羅里硅土柱（1g，6mL）裝在固相萃取裝置上，上面加入少許無(wú)水硫酸鈉，分別用5mL丙酮-正己烷（體積比為3：97），5mL正己烷預(yù)淋洗凈化柱，棄去淋洗液，加入待凈化樣品，再用9mL丙酮-正己烷（體積比為3：97）分次洗滌圓底燒瓶倒入凈化柱中，流出液用15mL刻度試管收集，蒸空抽干凈化柱，試管中溶液用氮吹儀在50℃下氮吹吹至2mL以下，再用正己烷定容至2mL，供色譜分析。

1.3.2 配制標(biāo)準(zhǔn)曲線

每種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)稱取約0.0250g分別用丙酮定容至25mL，再分別吸取5.00mL標(biāo)準(zhǔn)溶液于同一50mL容量瓶中用丙酮定容，作為儲(chǔ)備液。

使用時(shí)吸取儲(chǔ)備液1.00mL用丙酮定容至10mL，再分別吸0.2mL、0.4mL、0.6mL用丙酮定容至10mL，用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 結(jié)果計(jì)算

樣品中農(nóng)藥的含量按下列公式計(jì)算：

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 方法的線性

按1.3.2的方法配制標(biāo)準(zhǔn)序列，以1.2的色譜條件進(jìn)樣，得到表1中的線性回歸方程，從表中可知方法對(duì)幾種菊酯類農(nóng)藥都有著良好的線性，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖見(jiàn)圖1。

2.2 方法的精密度和檢出限

用同一氫化植物油樣品連續(xù)進(jìn)行8次平行測(cè)定，測(cè)得氫化植物油中所含各農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）見(jiàn)表2，說(shuō)明本方法的測(cè)定精密度是符合要求的。

2.3 方法回收率測(cè)定

在氫化植物油樣品中加入0.01μg、0.02μg、0.1μg3個(gè)水平濃度的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)，回收率結(jié)果見(jiàn)表4，從中可以看出方法對(duì)農(nóng)藥的加標(biāo)回收率都在80%～110%之間，說(shuō)明該方法是準(zhǔn)確可靠的。

3 討論

氫化植物油的主要成分是油脂，它沸點(diǎn)高不能在氣相色譜中被汽化，容易污染色譜柱，因此，必須在提取和凈化過(guò)程中被去除的雜質(zhì)。本方法采用液液分配對(duì)氫化植物油中的菊酯類農(nóng)藥進(jìn)行提取，是基于不同物質(zhì)在溶劑中的分配系數(shù)不同這一原理來(lái)考慮的。菊酯類農(nóng)藥能被乙腈所提取而油脂類則不溶于乙腈，這樣就能把農(nóng)藥和油脂很好的分離開(kāi)。但由于溶解氫化植物油的正己烷能一部分溶于乙腈，為了盡可能地少把油脂帶入到乙腈中，乙腈必須首先被正已烷所飽和。菊酯類農(nóng)藥被乙腈提取出來(lái)后，由于乙腈極性很大同時(shí)被提取出來(lái)的雜質(zhì)也很多，因此還必須加入硫酸鈉溶液和正己烷再進(jìn)行液液分配，乙腈和大多數(shù)雜質(zhì)都進(jìn)入了水層，而菊酯類農(nóng)藥則在正己烷層。經(jīng)過(guò)這樣幾次液液分配后，氫化植物油中的菊酯類農(nóng)藥被很好地提取了出來(lái)，同時(shí)也去除了一定的雜質(zhì)，起到了凈化的作用。

對(duì)樣液進(jìn)一步凈化采用的方法是固相萃取柱的正相凈化法，即固相萃取柱把雜質(zhì)吸附住而農(nóng)藥被洗脫下來(lái)。對(duì)于這種凈化方式，淋洗液的選擇非常重要，既要能把農(nóng)藥從小柱上洗脫下來(lái)，同時(shí)又要讓雜質(zhì)能保留在固相萃取柱上。通過(guò)使用幾種不同配比的淋洗液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)丙酮-正己烷（體積比為3：97）溶液要比無(wú)水乙醚-正己烷（體積比為15：85）溶液和乙酸乙酯-石油醚（體積比為5：95）溶液的進(jìn)化效果都要好，因此最終確定淋洗液為丙酮-正己烷（體積比為3：97）溶液，在這種淋洗液條件下菊酯類農(nóng)藥洗脫率能達(dá)到90%以上，而雜質(zhì)絕大多數(shù)還保留在固相萃取柱上。