高職高專病理生理學(xué)水腫實(shí)驗(yàn)方法改進(jìn)

馬文卓 蒲文靜 高蓉

摘要：水腫是過多的體液在組織間隙或體腔中積聚，其發(fā)病機(jī)制包括兩個(gè)方面，傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法只能驗(yàn)證血管內(nèi)膠體滲透壓下降引起水腫的機(jī)制。因此，我們對(duì)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行了改進(jìn)，教學(xué)效果好。

關(guān)鍵詞：高職高專；水腫實(shí)驗(yàn)；方法改進(jìn)

水腫是過多的體液在組織間隙或體腔中積聚，其發(fā)病機(jī)制分為兩大方面：①血管內(nèi)外液體交換失平衡，導(dǎo)致組織液生成大于回流；②體內(nèi)外液體交換失平衡，導(dǎo)致水鈉潴留。在實(shí)驗(yàn)中，我們常復(fù)制動(dòng)物水腫模型驗(yàn)證水腫的發(fā)生機(jī)制。

1 傳統(tǒng)蟾蜍下肢水腫實(shí)驗(yàn)方法

在實(shí)驗(yàn)中我們常用蟾蜍下肢灌流的方法復(fù)制水腫的動(dòng)物模型，驗(yàn)證教學(xué)中水腫的第一條發(fā)生機(jī)制。當(dāng)血液和組織間液體的動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)時(shí)，組織液的生成量大于回量，過多的液體潴留在組織間隙或體腔則形成水腫或積液，血管內(nèi)、外液體交換的平衡受以下因素的影響：①組織液生成力量與組織液回流力量對(duì)比，毛細(xì)血管壓和組織間液膠體滲透壓促進(jìn)組織液的生成，血管膠體滲透壓和組織間液流體靜壓促進(jìn)組織液的回流，②毛細(xì)血管通透性；③淋巴加流。上述一個(gè)或幾個(gè)因素同時(shí)或相繼失調(diào)，都可能成為水腫發(fā)生的重要原因。在實(shí)驗(yàn)中任氏液替代了血管中的血液，血管中液體膠體滲透壓下降；同時(shí)使血管中無紅細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞缺氧，微血管通透性升高；灌流速度快使微血管中的流體靜壓升高；剝皮時(shí)去掉了淋巴組織淋巴回流受阻；這些機(jī)制同時(shí)導(dǎo)致了蟾蜍下肢水腫。但用這一個(gè)實(shí)驗(yàn)解釋血管內(nèi)外液體交換失平衡引起水腫的機(jī)制尚有牽強(qiáng)之處。

1.1無論是人還是動(dòng)物淋巴管斷裂后會(huì)出現(xiàn)淋巴漏淋巴液從斷端流走，淋巴液大量流失。蟾蜍的皮膚中含有大量的淋巴組織，去除蟾蜍的皮膚也就是去掉了蟾蜍的大部分淋巴組織，造成淋巴管斷裂，淋巴液漏出，并不會(huì)造成淋巴回流受阻。因此，剝皮去掉蟾蜍的淋巴組織不能引起蟾蜍下肢水腫。

1.2在水腫形成的機(jī)制中毛細(xì)血管通透性升高，會(huì)造成血漿內(nèi)的血漿蛋白通過高通透性的毛細(xì)血管到達(dá)組織間隙，使組織膠體滲透壓升高血漿膠體滲透壓下降，從而導(dǎo)致組織液生成大于回流引起水腫。實(shí)驗(yàn)中任氏液替代了下肢血管中的血液后，的確會(huì)引起毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞因缺氧而出現(xiàn)損傷，毛細(xì)血管的通透性升高，但此時(shí)血管內(nèi)無血漿蛋白，這樣毛細(xì)血管的通透性升高不會(huì)造成織膠體滲透壓和血漿膠體滲透的變化，在此實(shí)驗(yàn)中毛細(xì)血管的通透性升高對(duì)水腫形成沒有影響。

1.3快速向蟾蜍下肢動(dòng)脈中灌注任氏液，可以加快血管內(nèi)液體流動(dòng)速度，從而增加流體靜壓，但水腫形成過程中流體靜壓的升高是由于靜脈血液回流受阻引起而非動(dòng)脈血液流入增多，在分析實(shí)驗(yàn)時(shí)容易給學(xué)生帶來水腫是由于動(dòng)脈血流入過多的誤解。

因此，水腫實(shí)驗(yàn)用蟾蜍下肢灌流的方法只能驗(yàn)證血管內(nèi)膠體滲透壓下降引起水腫的發(fā)生機(jī)制。

2 水腫實(shí)驗(yàn)方法改進(jìn)

我們?cè)谠袑?shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改進(jìn)，具體如下：①仍用制作蟾蜍下肢灌流標(biāo)本，制作方法與經(jīng)典實(shí)驗(yàn)方法相同[1]，只是在制作灌流標(biāo)本時(shí)不去掉蟾蜍的皮膚，直接穿刺蟾蜍的腹主動(dòng)脈，進(jìn)行任氏液和高滲糖的灌流。②取大白鼠一只，用20%烏拉坦麻醉后，使其仰臥在兔臺(tái)上，固定四肢及頭部，雙后腿脫毛，分別在大白鼠膝關(guān)節(jié)上0.5cm處做記號(hào)，并測(cè)量該處大鼠腿的周長(zhǎng)，打開大白鼠左下肢腹股溝處皮膚，找到該側(cè)股靜脈并結(jié)扎，使其靜脈回流受阻，同時(shí)找一條塑料管結(jié)扎大白鼠右側(cè)大腿根部，25min后觀察到大白鼠雙后爪明顯變成青紫色，分別測(cè)量大白鼠大腿記號(hào)處周長(zhǎng)。得出結(jié)果：大白鼠后腿直徑明顯增粗，尤其是右后腿增粗明顯。

改革后的實(shí)驗(yàn)保留了蟾蜍下肢灌流實(shí)驗(yàn)，用以驗(yàn)證血漿膠體滲透壓對(duì)水腫形成的影響，但省去了蟾蜍剝皮的操作使實(shí)驗(yàn)得到部分的簡(jiǎn)化，減少了實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)血管的損傷，提高了穿刺的成功率。灌注任氏液后蟾蜍下肢明顯腫脹、重量增加，主要機(jī)制是灌注任氏液后蟾蜍下肢血管內(nèi)血漿膠體滲透壓下降，組織液生成大于回流，發(fā)生水腫。同時(shí)增加了大白鼠下肢水腫的實(shí)驗(yàn)，結(jié)扎大白鼠左下肢股靜脈何用輸液軟管結(jié)扎大白鼠右下肢，操作也不難，在操作中鍛煉了學(xué)生的一些實(shí)驗(yàn)技能：大白鼠的抓持和腹腔注射、大白鼠肌肉的分離和血管的尋找、血管的結(jié)扎，5min后發(fā)現(xiàn)大白鼠雙下肢明顯腫脹，大白鼠右下肢腫脹較左下肢明顯。通過增加的實(shí)驗(yàn)可以驗(yàn)證蟾蜍下肢灌流實(shí)驗(yàn)不能很好解釋的三條水腫機(jī)制：

2.1結(jié)扎大白鼠股靜脈可使大白鼠下肢靜脈回流受阻，從而使毛細(xì)血管內(nèi)流體靜壓增大，使得組織液生成大于回流從而導(dǎo)致水腫。

2.2結(jié)扎大白鼠股靜脈可使大白鼠下肢靜脈回流受阻，毛細(xì)血管內(nèi)血液淤積從而導(dǎo)致毛細(xì)學(xué)管內(nèi)動(dòng)脈血進(jìn)入受阻，毛細(xì)血管內(nèi)缺乏氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞缺氧受損而使毛細(xì)血管管通透性增高，會(huì)造成血漿內(nèi)的血漿蛋白通過高通透性的毛細(xì)血管到達(dá)組織間隙，使組織膠體滲透壓升高血漿膠體滲透壓下降，從而導(dǎo)致組織液生成大于回流引起水腫。

2.3結(jié)扎大白鼠右后腿根部使其爪子變成青紫色，壓迫靜脈使靜脈回流受阻的同時(shí)也使淋巴管受壓淋巴回流受阻，組織液的淋巴回流減少，組織液增多從而導(dǎo)致水腫。這也導(dǎo)致了結(jié)扎根部的右后腿比比單純結(jié)扎股靜脈的左后腿腫脹（水腫）更明顯。

總之，本實(shí)驗(yàn)改進(jìn)后雖然增加了實(shí)驗(yàn)成本（每個(gè)實(shí)驗(yàn)小組多用了一只大白鼠），但是實(shí)驗(yàn)過程中，使學(xué)生學(xué)會(huì)了大白鼠的腹腔注射的方法、在大白鼠身上分離和結(jié)扎靜脈血管的方法，提高了他們的動(dòng)手能力，改變了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，更能驗(yàn)證理論課上學(xué)的血管內(nèi)外液體交換失平衡導(dǎo)致水腫的機(jī)制。

參考文獻(xiàn)：

[1]葉靜，邸紅軍，沈炳玲，等.探討蟾蜍下肢水腫教學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的改進(jìn)[J].醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2008，08.

[2]陳主初.病理生理學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005.

編輯/安樺