急性缺血性腦卒中與乙醛脫氫酶2基因多態(tài)性的關(guān)系

靳美　戴艷萍　張春媛　曹利　宋培蕓

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急性缺血性腦卒中與乙醛脫氫酶2基因多態(tài)性的關(guān)系

靳美戴艷萍張春媛曹利宋培蕓

【摘要】目的 探討急性腦卒中與乙醛脫氫酶2基因多態(tài)性的相關(guān)性。方法 選取自發(fā)性高血壓大鼠、腦卒中傾向高血壓大鼠進(jìn)行研究，對(duì)照均選用京都種大鼠。利用熒光電泳法，比較組織蛋白的表達(dá)。應(yīng)用乙醛脫氫酶2的激動(dòng)劑和抑制劑分別觀察神經(jīng)元凋亡的情況。結(jié)果 兩組有42個(gè)差異蛋白點(diǎn)，乙醛脫氫酶2激動(dòng)劑能夠減輕缺氧缺糖誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡；乙醛脫氫酶2抑制劑促進(jìn)缺氧缺糖誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡。結(jié)論 乙醛脫氫酶2在急性缺血性腦卒中表達(dá)較低，增加乙醛脫氫酶2對(duì)神經(jīng)有保護(hù)作用。

【關(guān)鍵詞】急性缺血性腦卒中；乙醛脫氫酶2；相關(guān)性

作者單位：150001哈爾濱，黑龍江省醫(yī)院

隨著社會(huì)環(huán)境的改變，工作壓力的增加以及人口老齡化等因素，腦卒中的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)[1]，增加了社會(huì)和經(jīng)濟(jì)壓力。因此，通過(guò)挖掘腦卒中的危險(xiǎn)因素并針對(duì)性采取有效的治療措施，降低腦卒中不良的社會(huì)影響與后果成為研究的重點(diǎn)。乙醛脫氫酶（AIDH）存在于真核生物和原核生物中，線粒體乙醛脫氫酶能轉(zhuǎn)化有害物質(zhì)，因此在細(xì)胞解讀研究中受到廣泛關(guān)注[2]。目前已有研究證實(shí)乙醛脫氫酶在酒精中毒、肝損傷、心血管疾病、腫瘤等的發(fā)病過(guò)程中扮演著重要的角色。本研究以乙醛脫氫酶2為研究中心，探討其與急性缺血性腦卒中的相關(guān)性，具體報(bào)道如下。

1　材料與方法

1.1基本資料

動(dòng)物模型是實(shí)驗(yàn)室自備模型，包括自發(fā)性高血壓大鼠與腦卒中傾向高血壓大鼠，后者均來(lái)自與前者，腦卒中傾向高血壓是在自發(fā)性高血壓大鼠到一定年齡而發(fā)生。對(duì)照組選用京都種大鼠。所有動(dòng)物采購(gòu)來(lái)自上海必凱動(dòng)物科技公司。

1.2 方法

培養(yǎng)原代神經(jīng)元細(xì)胞，建立缺糖缺氧模型誘導(dǎo)原代神經(jīng)元損傷，應(yīng)用Hoechst檢測(cè)細(xì)胞凋亡。利用熒光電泳法，比較自發(fā)性高血壓大鼠與腦卒中傾向高血壓大鼠腦組織蛋白的表達(dá)。應(yīng)用乙醛脫氫酶2的激動(dòng)劑和抑制劑來(lái)分別觀察神經(jīng)元凋亡的情況。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所得數(shù)據(jù)使用SPSS20.0進(jìn)行處理分析，計(jì)量資料用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1 熒光電泳結(jié)果

比較分析自發(fā)性高血壓與腦卒中高血壓大鼠腦組織的蛋白表達(dá)，結(jié)果有42個(gè)差異蛋白點(diǎn)，其中乙醛脫氫酶2在腦卒中高血壓大鼠腦組織中表達(dá)降低。

2.2乙醛脫氫酶2對(duì)神經(jīng)元的作用

感染預(yù)實(shí)驗(yàn)中，干擾乙醛脫氫酶2表達(dá)后神經(jīng)元對(duì)缺氧缺血損傷的易感性增加，而過(guò)表達(dá)乙醛脫氫酶2神經(jīng)元對(duì)缺氧缺血損傷的耐受力增加。乙醛脫氫酶2激動(dòng)劑能夠減輕缺氧缺糖誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡（20.32±1.78% vs 30.67±0.57%），P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；乙醛脫氫酶2抑制劑促進(jìn)缺氧缺糖誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡（42.33±4.29% vs 30.67±0.57%），P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3　討論

乙醛脫氫酶是一些列脂肪族醛，主要分為3類[3]：細(xì)胞質(zhì)乙醛脫氫酶，線粒體乙醛脫氫酶和細(xì)胞質(zhì)乙醛脫氫酶。人體的乙醛脫氫酶為多肽四聚體，共有7種不同編碼，目前天然的乙醛脫氫酶獲取率較低，大多存在于動(dòng)物肝臟和胰腺中。人類飲酒后會(huì)出現(xiàn)心跳加速、血壓升高等酒精中毒癥狀，主要是與血液中乙醛濃度的升高有關(guān)，研究顯示[4]，乙醛可以刺激人體分泌腎上腺素和去甲腎上腺素，引起酒精中毒反應(yīng)，這都?xì)w因于乙醛脫氫酶不足引起乙醛的體內(nèi)聚集。而乙醛與乙醇性肝損傷關(guān)系密切，當(dāng)干細(xì)胞線粒體中的乙醛脫氫酶活性降低后，大量乙醛進(jìn)入血液，產(chǎn)生丙二醛和壬烯這兩種過(guò)氧化終產(chǎn)物，破壞細(xì)胞膜，促進(jìn)肝損傷。研究顯示[5]，乙醛脫氫酶2可抑制心肌細(xì)胞的凋亡，保護(hù)心肌，還可延緩動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展，提高斑塊的穩(wěn)定性，降低心肌梗死不良事件的發(fā)生率。乙醇的大量攝入會(huì)增加口腔、咽、喉、等上消化腫瘤的發(fā)生率，乙醛通過(guò)誘導(dǎo)染色體交換和異常引起DNA突變。研究顯示[6]，攜帶乙醛脫氫酶2的亞洲人發(fā)生消化道腫瘤的概率是未攜帶者的3～50倍。而乙醛脫氫酶1被發(fā)現(xiàn)可用于預(yù)測(cè)環(huán)磷酰胺的治療效果，結(jié)直腸癌腫瘤干細(xì)胞中有乙醛脫氫酶1的表達(dá)。

研究發(fā)現(xiàn)[7-8]，酗酒會(huì)加重腦卒中的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，但適量飲酒可預(yù)防腦卒中的發(fā)生，乙醛脫氫酶2可能參與了酒精對(duì)腦缺血的保護(hù)。本研究通過(guò)電泳技術(shù)，對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠及腦卒中高血壓大鼠進(jìn)行比較后，發(fā)現(xiàn)存在42個(gè)差異蛋白，包括代謝相關(guān)蛋白、氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)分子等。腦卒中高血壓大鼠腦組織中，乙醛脫氫酶2的水平降低，在排除高血壓的影響后，腦卒中的發(fā)生與這些差異蛋白相關(guān)。感染預(yù)實(shí)驗(yàn)中，干擾乙醛脫氫酶2表達(dá)后神經(jīng)元對(duì)缺氧缺血損傷的易感性增加，而過(guò)表達(dá)乙醛脫氫酶2神經(jīng)元對(duì)缺氧缺血損傷的耐受力增加。乙醛脫氫酶2激動(dòng)劑能夠減輕缺氧缺糖誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡,乙醛脫氫酶2抑制劑促進(jìn)缺氧缺糖誘導(dǎo)的神經(jīng)元凋亡。

目前針對(duì)乙醛脫氫酶的研究越來(lái)越多，通過(guò)研究乙醛脫氫酶的基因形態(tài)、分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)，開(kāi)發(fā)了該酶的一系列激活劑和抑制劑。研究多數(shù)集中在分離和提取乙醛脫氫酶，及其基因多態(tài)性與各類疾病的相關(guān)性。而對(duì)于保健預(yù)防藥品的開(kāi)發(fā)鮮有報(bào)道，相信隨著分離純化技術(shù)的提升，針對(duì)乙醛脫氫酶的研發(fā)會(huì)走向一個(gè)新的階段。

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The Relationship of Acetaldehyde Dehydrogenase 2 Gene Polymorphism and Acute Ischemic Stroke

JIN Mei DAI Yanping ZHANG Chunyuan CAO Li SONG Peiyun, Heilongjiang Provincial Hospital, Harbin 150001, China

[Abstract]Objective To investigate of acetaldehyde dehydrogenase 2 gene polymorphism and acute ischemic stroke. Methods Selected hypertensive rats with spontaneous hypertension and cerebral apoplexy for study, the control group adopt jingdu rat. The expression of tissue protein was compared with fluorescence method. The apoptosis was observed by used the agonist and inhibitor of aldehyde dehydrogenase 2. Results Two groups had 42 differential protein spots, and aldehyde dehydrogenase 2 agonists were able to reduce the apoptosis induced by hypoxia and glucose deprivation. Conclusion The expression of aldehyde dehydrogenase 2 in acute ischemic stroke is low, and the effect of aldehyde dehydrogenase 2 is increased protective nerve.

[Key words]Acute ischemic stroke, Aldehyde dehydrogenase 2, Correlation

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.02.025

【文章編號(hào)】1674-9308（2016）02-0039-02

【中圖分類號(hào)】R742

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A