0者召回進(jìn)行基因確診。結(jié)果:檢出HbBarts>0共1932例,檢出率為10.73%;其中靜止型(0.2%~0.9%)608例,標(biāo)準(zhǔn)"/>
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    南寧市18005例新生兒α地中海貧血篩查結(jié)果分析

    2015-12-03 09:58羅超李東明玉晉武李旺林彩娟俸詩(shī)
    現(xiàn)代儀器與醫(yī)療 2015年2期
    關(guān)鍵詞:標(biāo)準(zhǔn)型毛細(xì)管電泳

    羅超 李東明 玉晉武 李旺 林彩娟 俸詩(shī)瀚 陳少科 鄭陳光

    [摘 要] 目的:了解南寧市新生兒α地貧篩查情況。方法:使用全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀對(duì)18005例新生兒血樣進(jìn)行篩查,篩查出Hb Barts>0者召回進(jìn)行基因確診。結(jié)果:檢出Hb Barts>0 共1932例,檢出率為10.73%;其中靜止型(0.2%~0.9%)608例,標(biāo)準(zhǔn)型(1%~6%)1259例,HbH?。?%~30%)53例。共召回647例陽(yáng)性患兒進(jìn)行基因檢測(cè),確診622例,確診率96.14%。結(jié)論:通過新生兒足跟血可以準(zhǔn)確快速地篩查出α地貧,為臨床提供參考。

    [關(guān)鍵詞] 新生兒疾病篩查;α地中海貧血;全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀

    中圖分類號(hào):R729 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):2095-5200(2015)02-029-02

    地中海貧血(簡(jiǎn)稱地貧)是廣西地區(qū)常見遺傳性疾病[1]。α地貧是由于α珠蛋白鏈缺失或合成不足導(dǎo)致的一種溶血性貧血,臨床上按照癥狀輕重不同分為:靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、HbH病和HbBarts水腫胎[2]。新生兒α地貧篩查意義在于及時(shí)發(fā)現(xiàn)HbH病地貧患兒,早發(fā)現(xiàn)早治療,提高地貧患兒生活質(zhì)量,同時(shí)也為下次妊娠提供資料。本研究對(duì)廣西南寧18005例新生兒α地貧篩查結(jié)果進(jìn)行分析,為臨床提供參考。

    1 對(duì)象和方法

    1.1 對(duì)象

    2013年1月1日至2014年5月31日在廣西區(qū)婦幼保健院、婦產(chǎn)醫(yī)院、兒童醫(yī)院出生及就診的新生兒疾病篩查血樣[3]18005例。血樣采集自出生72h后,經(jīng)充分哺乳6次以上新生兒的足跟血。每個(gè)新生兒采集3個(gè)血斑,滴于S&S 903濾紙上,每個(gè)血斑直徑需>8 mm,室溫下自然晾干后,24h內(nèi)送至廣西新生兒疾病篩查實(shí)驗(yàn)室。

    1.2 篩查方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)

    篩查所用儀器為法國(guó)Sebia Capillarys 2 neonat fast全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀,所用試劑均為該公司配套的新生兒地中海貧血檢驗(yàn)試劑盒,儀器維護(hù)及實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。

    以毛細(xì)管電泳法Hb Barts的含量將α地貧分為正常(無Hb Barts帶),靜止型(0.2%~0.9%),標(biāo)準(zhǔn)型(1%~6%),HbH?。?%~30%),Barts水腫胎(>60%)。對(duì)于非正常的電泳結(jié)果的新生兒召回進(jìn)行基因確診。

    1.3 確診方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)

    確診采用gap-PCR基因診斷技術(shù),基因診斷試劑盒為深圳益生堂生物公司提供,實(shí)驗(yàn)操作、質(zhì)量控制及結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。對(duì)3種常見的缺失型α地貧血基因 ( --SEA/-α3.7和-α4.2) 和HbCS(CD142TAA→CAA)、HbQS(125CTG→CCG)及HbWS(CD122CAA→CAG)進(jìn)行突變檢測(cè)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料采用x±s表示。

    2 結(jié)果

    18005例地貧篩查樣本中,檢出Hb Barts>0 共1932例,檢出率為10.73%;其中靜止型(0.2%~0.9%)608例,標(biāo)準(zhǔn)型(1%~6%)1259例,HbH病(6%~30%)53例,未發(fā)現(xiàn)Barts水腫胎(>60%)患兒。共召回647例陽(yáng)性患兒進(jìn)行基因檢測(cè),確診622例,確診率96.14%。其中靜止型召回205例,確診193例,確診率94.15%;標(biāo)準(zhǔn)型召回423例,確診412例,確診率97.40%;HbH病召回18例,確診17例,確診率94.44%(見表1)。根據(jù)基因型對(duì)應(yīng)毛細(xì)管電泳篩查數(shù)據(jù),得出靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、HbH病HbBarts平均含量分別為0.55±0.35、2.4±0.89、12.48±4.15。

    3 討論

    目前對(duì)于地中海貧血確診的主要方法是PCR基因診斷[4],該技術(shù)由于其費(fèi)用較高,操作方法繁瑣等原因不適合用于常規(guī)的新生兒疾病篩查,因此,毛細(xì)管電泳技術(shù)很好彌補(bǔ)了這一缺陷。目前常用的新生兒地貧篩查樣本是臍帶血[5-6],很少見到使用足跟血篩查的報(bào)道,因此本研究可以為毛細(xì)管電泳與基因檢測(cè)的符合率方面提供參考。

    18005例新生兒血樣中,α地貧初篩陽(yáng)性1932例,檢出率為10.73%,高于北海、柳州、玉林等[7-9]地區(qū)的新生兒血樣篩查結(jié)果?;驒z測(cè)與毛細(xì)管電泳篩查的α地貧符合率為96.14%,高于廣州、中山等[10-11]地區(qū)的新生兒臍血地貧篩查符合率,這可能與樣本類型、儀器情況等有關(guān)。有研究指出新生兒α地貧符合率較成人高[12],這是由于Hb Barts只特異的存在于新生兒時(shí)期,隨著年齡的增大該峰自然消失,因此可以說Hb Barts是新生兒α地貧篩查的金標(biāo)準(zhǔn)。本研究顯示南寧市α地貧患兒主要以標(biāo)準(zhǔn)型為主,未檢測(cè)到重型α地貧患兒,可以反映出南寧市產(chǎn)前地貧篩查的成效。Hb Barts水平與α-珠蛋白基因缺失數(shù)目成正相關(guān),Hb Barts水平越高α地貧的情況越嚴(yán)重。然而本研究中還是存在結(jié)果不符合的情況,因此需要根據(jù)臨床表型重新計(jì)算Hb Barts水平,經(jīng)計(jì)算靜止型、標(biāo)準(zhǔn)型、HbH病Hb Barts水平分別為:0.2%~0.9%、1.51%~3.29%、8.33%~16.63%。這個(gè)切值與之前新生兒臍血篩查地貧的研究結(jié)果[13-14]稍微有些出入,這可能與樣本類型、實(shí)驗(yàn)人群、篩查方法等有關(guān)[15],因此每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)建立自己的α地貧篩查切值。

    參 考 文 獻(xiàn)

    [1] 李東明,玉晉武,韋媛,等. 南寧地區(qū)14096例兒童地中海貧血篩查與基因診斷分析[J]. 中國(guó)小兒血液與腫瘤雜志. 2013,18(6):259-263

    [2] 陳方平主編. 臨床檢驗(yàn)血液學(xué)[M]. 北京:高等教育出版社, 2006:167-168.

    [3] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部. 新生兒疾病篩查規(guī)范[S]. 北京: 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部, 2010.

    [4] 張翠梅,王瑩,高建慧,等. 中山市戶籍人群中α-地中海貧血的分子流行病學(xué)調(diào)查[J]. 中國(guó)兒童保健雜志, 2010,5(18):361.

    [5] Munkongdee T, Pichanun D, Butthep P, et al. Quantitative analysis of Hb Barts in cord blood by capillary electrophoresis system[J]. Ann Hematol, 2011,90(7):741-746.

    [6] Liao C, Zhou JY, Xie XM, et al. Cord blood analysis for rapid prenatal confirmation of Hb Barts disease using sebia capillary electrophoresis system[J]. Hemoglobin. 2012,36(2):186-191.

    [7] 安家嘉. 北海地區(qū)新生兒臍血血紅蛋白電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析[J]. 西南國(guó)防醫(yī)藥. 2011,21(1):46-48.

    [8] 陳大宇,蔡稔,鄭敏,等. 全自動(dòng)毛細(xì)管電泳技術(shù)在柳州市新生兒地中海貧血篩查的應(yīng)用及價(jià)值[J]. 中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志. 2014,22(1):70-71.

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    [15] Xiong F, Sun M, Zhang X, et al. Molecular epidemiological survey of haemoglobinopathies in the Guangxi Zhuang Autonomous Region of southern China[J]. Clin Genet, 2010,78:139-148.

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