軟棗獼猴桃良種選育研究進展

馮健　曾凡順　王嘉　李程

摘要 論述了軟棗獼猴桃良種選育和苗木繁育現(xiàn)狀，提出軟棗獼猴桃良種選育存在的問題及對策，旨在為軟棗獼猴桃良種選育提供參考，促進軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

關(guān)鍵詞 軟棗獼猴桃；良種選育；組織培養(yǎng)

中圖分類號 S663.4 文獻標(biāo)識碼A 文章編號 0517-6611（2015）11-046-02

軟棗獼猴桃（Actinidia arguta），又名軟棗子、藤瓜、藤棗、獼猴梨，屬于獼猴桃科（Actinidiaceae）獼猴桃屬 （Actinidia）的多年生落葉藤本植物。軟棗獼猴桃是9種光果獼猴桃種類之一，珍貴的野生果中之王，被譽為“世界之珍果”。軟棗獼猴桃是獼猴桃屬植物中在中國地域分布最廣泛的野生果樹之一。軟棗獼猴桃生長于海拔150～900 m 之間的闊葉林或針闊葉混交林中，分布于我國的東北、山東、華北、西北地區(qū)及長江流域各地，以我國東北三省的野生資源最為豐富，其中，小興安嶺和長白山山區(qū)較多見。另外，朝鮮、日本、俄羅斯（遠東地區(qū)）也有分布。軟棗獼猴桃營養(yǎng)豐富，維生素C含量高，素有“VC之王”的美譽，是一種上好的保健食品，具有較高的經(jīng)濟價值。軟棗獼猴桃的根、莖、葉及果實均可入藥，具有一定的藥用價值。軟棗獼猴桃還是一種優(yōu)美的庭園觀賞樹，它的美觀奇特遠非一般花木可比，用于造園配景，可謂一絕。另外，軟棗獼猴桃花還可用來提取香料，也是豐富的蜜源植物[1]。

目前，由于資源保護、良種選育及配套豐產(chǎn)栽培技術(shù)等方面的原因，軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展進程相對遲緩，筆者通過對軟棗獼猴桃良種選育現(xiàn)狀進行論述，旨在為軟棗獼猴桃良種選育及產(chǎn)業(yè)化提供理論指導(dǎo)。

1 軟棗獼猴桃良種選育的現(xiàn)狀

國外對軟棗獼猴桃資源的開發(fā)利用較早，并且進行了大量研究工作。在軟棗獼猴桃資源開發(fā)利用中，日本處于領(lǐng)先地位，有學(xué)者對日本境內(nèi)分布的軟棗獼猴桃資源進行了詳細調(diào)查， 發(fā)現(xiàn)日本各州縣分布的軟棗獼猴桃有2倍體、4倍體、6倍體、7倍體和8倍體，倍性上有很大的變異性。日本利用這些資源培育的軟棗獼猴桃品種多達9 個（ 峰香、香粹、里泉、山形娘、雪娘、花之井、茂綠、光香、信山） 。韓國從20世紀(jì)90年代就開始了軟棗獼猴桃品種篩選工作，并且與美味獼猴桃品種雜交，培育出一些優(yōu)良品種。目前，韓國從野生軟棗獼猴桃中篩選出‘Chiak、‘Congsan和‘Gwangsan3個純軟棗獼猴桃品種，其具有抗寒、抗病和早熟的特點，適合北方寒冷地區(qū)栽培；以軟棗獼猴桃為父母本育成了‘Bidan、‘Bangwoori、‘Skinny Green、‘Book和‘Bohua5 個軟棗獼猴桃的雜交種，其果個大，且多數(shù)無毛，但耐寒性較差，生育期較長，適合較溫暖地區(qū)栽培[2]。

我國有豐富的軟棗獼猴桃基因資源，但開發(fā)利用的較少，至今選育出軟棗獼猴桃品種和優(yōu)良品系主要有：‘魁綠、‘豐綠、‘8401、 ‘9701、‘8134、‘遼丹-34、‘遼恒-8301、‘遼清8301、‘遼清8401、‘遼清8405、‘遼清8406、‘遼清8410、‘遼清8411、‘遼清8413、‘遼清8501、‘遼本-蘭1號、‘遼本-連焦1號、‘軟果二號、‘A-1、‘81-18等[3-6]。

隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展，分子標(biāo)記作為種質(zhì)資源遺傳多樣性檢測的有效工具，在探討種內(nèi)及其近緣種屬植物的起源、進化等方面應(yīng)用越來越多。樸一龍等對東北原生種獼猴桃的軟棗、狗棗及葛棗獼猴桃種質(zhì)進行了RAPD研究并建立了指紋圖譜，確定了種間親緣關(guān)系和種內(nèi)雄株與雌株之間遺傳距離[7]。有學(xué)者利用RAPD技術(shù)對長白山區(qū)8個縣市30個取樣點采集的軟棗獼猴桃樣品進行遺傳多樣性分析，結(jié)果表明，長白山區(qū)野生軟棗獼猴桃各居群樣品存在一定程度的地理區(qū)域聚類趨勢，遺傳變異與地理距離間沒有顯著的相關(guān)性。也有學(xué)者對遼寧地區(qū)5種野生軟棗獼猴桃進行RAPD遺傳多樣性分析，建立了親緣關(guān)系樹形圖。王佳卉基于NCBI公共數(shù)據(jù)庫中獼猴桃屬的EST為軟棗獼猴桃開發(fā)SSR，并對36份軟棗獼猴桃的雌株進行遺傳多樣性分析。將獲得的 141對有效性引物在36份軟棗獼猴桃材料上進行擴增，其中110對引物具有多態(tài)性，多態(tài)性頻率為78.01%。每對引物的等位基因有1～6個，平均2.35個。將110個多態(tài)性標(biāo)記的數(shù)據(jù)用于36份軟棗獼猴桃材料的遺傳多樣性分析，遺傳相似系數(shù)為0.58～0.95，平均為0.68。相似系數(shù)約為0.68時，36份軟棗獼猴桃材料被分為7組[8]。

2 軟棗獼猴桃苗木繁育技術(shù)現(xiàn)狀

目前，有關(guān)軟棗獼猴桃苗木繁育的研究主要集中在扦插和組織培養(yǎng)等無性繁殖技術(shù)方面。在扦插研究中，主要研究了基質(zhì)、激素種類和濃度、穗材等對扦插育苗的影響。在組織培養(yǎng)研究中，主要從培養(yǎng)基、外源激素種類和濃度、外植體等方面進行了研究。

2.1 軟棗獼猴桃扦插育苗技術(shù)研究進展 研究表明，影響軟棗獼猴桃扦插成功與否的關(guān)鍵因素包括穗材、基質(zhì)、激素種類和濃度。穗材是影響軟棗獼猴桃的重要因素之一。在穗材選取方面，如果采用嫩枝扦插，穗材要求粗度>0.5 cm，半木質(zhì)化新生枝條為最佳扦插材料；如果采用硬枝扦插，應(yīng)選取1年生枝條[9]。除了嫩枝和硬枝對軟棗獼猴桃扦插生根有影響外，穗材的選取部位、時間等也影響扦插生根率。龍茹等在研究不同部位的插穗對生根率的影響試驗中發(fā)現(xiàn)，軟棗獼猴桃枝條上部的插穗在生根率、生根數(shù)量、根長上都比枝條基部的插穗表現(xiàn)好，因此在軟棗獼猴桃大規(guī)模扦插中應(yīng)盡量采取枝條上部作為插穗[10]。在基質(zhì)選取方面，黃祥童等研究表明，扦插基質(zhì)以浮石30.0% 、草炭土40.0%、枯葉粉碎物27.5%、木炭2.5%為最佳基質(zhì)[11]。趙淑蘭等研究表明，細爐灰也是軟棗獼猴桃扦插的理想基質(zhì)，以細爐灰為基質(zhì)，插條生根率可達71.6%[12]。外源激素能顯著提高軟棗獼猴桃插穗的生根能力，且對提早生根有一定的作用，但不同種類、不同濃度的外源激素處理的插穗之間生根情況不同。研究表明，ABT生根粉是軟棗獼猴桃扦插的最佳外源激素。黃祥童等研究表明，200 mg/L ABT1號生根粉處理0.5 h生根率最高[11]。龍茹等研究了12個激素處理組合，以100 mg/L ABT處理的生根率最高， 而綜合生根率、不定根數(shù)量和最長根的長度等3項指標(biāo)，以200 mg/L ABT處理和200 mg/L IAA處理的效果最佳[10]。王占勤采用不同濃度的奈乙酸、3721生根液和258ABT生根粉分別處理軟棗獼猴桃插穗，之后進行扦插試驗。結(jié)果表明，用3721生根液200倍浸穗2 h，50倍浸穗30 s處理的野生軟棗獼猴桃插穗發(fā)芽率、成活率及當(dāng)年新條生長量、生根數(shù)量和根系生長量均優(yōu)于其他處理，發(fā)芽率均達40%以上，成活率分別為23.83%、21.33%； 成活發(fā)芽率分別為58.04%、46.95%，平均新條生長量分別為13.8、13.5 cm；平均生根數(shù)分別為22.3、21.3條；平均根系長度分別為10.3、9.0 cm。因此，3721生根液可作為軟棗獼猴桃扦插繁育的優(yōu)良生根劑[13]。

2.2 軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)技術(shù)研究進展 目前，已基本建立起軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)技術(shù)體系，研究內(nèi)容主要集中在外植體、培養(yǎng)基、外源激素等影響組織培養(yǎng)的關(guān)鍵因素。在外植體選取上，已有學(xué)者分別以莖段、葉塊、葉柄、腋芽、莖尖和未成熟胚等作為外植體進行組織培養(yǎng)并獲得了成功。在培養(yǎng)基的選擇上，主要使用MS培養(yǎng)基，也有學(xué)者使用1/2MS培養(yǎng)基。在激素使用方面，多使用IBA、NAA、2，4-D、BA、ZT等外源激素，根據(jù)外植體、培養(yǎng)階段的不同，選擇一種或者幾種激素及相應(yīng)的濃度。劉延吉等以5個野生軟棗獼猴桃品種（H1、H2、H3、H4和H5）莖段為外植體，采用6-BA和NAA的組合進行研究，篩選適宜于野軟棗獼猴桃各品種快繁的最佳培養(yǎng)基，建立起軟棗獼猴桃離體培養(yǎng)快繁體系[14]。胡皓等研究了軟棗獼猴桃“魁綠”的試管苗增殖、生根移栽技術(shù)。結(jié)果表明，試管苗繼代增殖適宜培養(yǎng)基為MS+BA 4.0 mg/L+IBA 0.01 mg/L，30 d增殖系數(shù)達5.8；適宜生根的培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 1.0 mg/L，生根率達87.11%[15]。鄭小華研究表明，軟棗獼猴桃莖段愈傷組織誘導(dǎo)中的基本培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為最佳。莖段愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為MS+BA 3.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L，愈傷組織再生芽分化的最佳培養(yǎng)基為MS+BA 3.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L，生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.2 mg/L，生根率高達85.89%，增殖培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L +GA3 0.1 mg/L，月增殖系數(shù)達5.33[16]。張喜春以軟棗獼猴桃葉片為試材，以MS為基本培養(yǎng)基，附加生長素（2，4-D、NAA）和玉米素（ZT）成功地誘導(dǎo)出愈傷組織。軟棗獼猴桃葉片在MS+ZT 1 mg/L+2，4-D 3 mg/L的情況下能誘導(dǎo)出適合于建立懸浮細胞系的愈傷組織。另外，張喜春還研究了愈傷組織生長年齡、激素濃度、肌醇和蔗糖濃度4個方面對建立慈浮細胞系的影響，結(jié)果表明愈傷組織以生長10 d時接種活細胞率最高，以MS培養(yǎng)基附加ZT 1 mg/L+ 2，4-D 3 mg/L較好，肌醇以200 mg/L圓形細胞頻率最高，蔗糖以5%最適。另外，秦永華[17]、朱道圩等[18]、李昌禹等[19]、田新華等[20]、劉長江等[21]、樸一龍等[22]、牛曉林[23]等也報道了軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)成功的例子。

3 軟棗獼猴桃良種選育存在問題及對策

軟棗獼猴桃在我國分布較廣，東北三省的資源最為豐富， 是東北的優(yōu)勢資源。其果實營養(yǎng)豐富，可生食亦可做成果醬、果酒等，同時還具有一定的藥用價值。另外，其樹體具有觀賞價值。所以，軟棗獼猴桃是很有開發(fā)利用前景的野生漿果類果樹。然而，軟棗獼猴桃良種選育進程遲緩，嚴(yán)重制約了軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。主要表現(xiàn)在以下幾個方面。

（1）資源豐富，但是遺傳資源收集和保存力度不夠。軟棗獼猴桃在我國分布范圍廣，資源豐富，但是對其遺傳資源保護和利用的研究少。因此，應(yīng)對資源進行全面系統(tǒng)調(diào)查，建立品種資源庫，收集和保存種質(zhì)資源，查明其分布、種類，加強生物多樣性方面的研究。為今后育種打下堅實的基礎(chǔ)。

（2）良種選育進程無法滿足生產(chǎn)需求。目前，軟棗獼猴桃已經(jīng)選育出一批良種，如“魁綠”、‘8134、‘遼丹-34、‘遼恒-8301、‘遼清8301、‘遼本一蘭1號、 ‘軟果二號、 ‘81-18等品種，但是，上述品種大部分是20世紀(jì)80～90年代選育的品種，品種數(shù)量和質(zhì)量已無法滿足生產(chǎn)上對品種的多樣性需求。因此，應(yīng)利用資源調(diào)查發(fā)現(xiàn)并篩選優(yōu)良株系，培育新品種。同時，在進行生物多樣性研究的基礎(chǔ)上，利用各種資源設(shè)置雜交組合，培育出優(yōu)良品種。

（3）苗木繁育技術(shù)較單一。目前，軟棗獼猴桃苗木繁育主要依靠扦插進行繁殖。雖然在實驗室已經(jīng)建立起軟棗獼猴桃的組織培養(yǎng)技術(shù)體系，但是在生產(chǎn)上采用組織培養(yǎng)技術(shù)的仍未見報道。因此，應(yīng)加強軟棗獼猴桃苗木繁育技術(shù)的研究和推廣工作，使軟棗獼猴桃苗木生產(chǎn)達到規(guī)?；?、設(shè)施化技術(shù)水平，從而滿足生產(chǎn)實踐對苗木的需求。

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責(zé)任編輯 喬利利 責(zé)任校對 李巖