大蒜素抗運(yùn)動(dòng)性氧應(yīng)激和DNA損傷的作用研究

蘇美華　楊多多　許慶忠

摘要：目的：觀察補(bǔ)充大蒜素對(duì)人體力竭運(yùn)動(dòng)后外周血細(xì)胞DNA的損傷效應(yīng)及血清中SOD、GSH和MDA活性的影響，探討大蒜素抗DNA氧化損傷的作用機(jī)制。方法：選取16名健康男運(yùn)動(dòng)員（年齡21.06±1.02歲），隨機(jī)分為兩組包括對(duì)照組8名（C組，補(bǔ)充淀粉安慰劑膠囊）和實(shí)驗(yàn)組8名（T組，補(bǔ)充大蒜素膠囊），運(yùn)動(dòng)前14天各組每天分別口服安慰劑和大蒜素膠囊，補(bǔ)劑后所有被試均參加Bruce力竭運(yùn)動(dòng)方案，并分別在補(bǔ)劑前、補(bǔ)劑后和運(yùn)動(dòng)后即刻這三個(gè)階段對(duì)兩組受試者進(jìn)行采血抗凝，采用單細(xì)胞凝膠電泳（SCGE）技術(shù)檢測(cè)人體外周血細(xì)胞DNA損傷情況，并測(cè)定血漿中超氧化物岐化酶（SOD）活性、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）含量。結(jié)果：補(bǔ)劑前和補(bǔ)劑后，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的DNA損傷水平與氧化應(yīng)激水平無(wú)顯著性差異（P>0.05）；運(yùn)動(dòng)后即刻實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞的DNA損傷水平顯著低于對(duì)照組力竭運(yùn)動(dòng)后的水平，其MDA水平、SOD和GSH含量較力竭對(duì)照組亦出現(xiàn)顯著降低（P<0.001， P<0.05， P<0.05）；而對(duì)照組運(yùn)動(dòng)后即刻SOD、GSH和 MDA水平較運(yùn)動(dòng)前均出現(xiàn)顯著上升，DNA損傷值明顯加?。≒<0.001）。結(jié)論：力竭運(yùn)動(dòng)可誘導(dǎo)人體外周血細(xì)胞DNA損傷值增加及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA水平的升高，介導(dǎo)SOD和GSH抗氧化酶活性的過(guò)量表達(dá)，大蒜素能夠提高機(jī)體抗氧化能力，降低自由基水平，減輕和預(yù)防運(yùn)動(dòng)性氧應(yīng)激所致的DNA損傷。

關(guān)鍵詞：大蒜素；DNA損傷；氧化應(yīng)激；力竭運(yùn)動(dòng)

中圖分類號(hào)：G804.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1006-2076（2014）06-0087-05

Abstract：Objective：This study was performed to determine the effect of allicin against DNA damage and oxidative stress on human peripheral blood cell after exhaustive exercise， and discuss the protective mechanism of allicin. Methods：16 male athletes （aged 21.06±1.02 years）， in a randomized and double-blind design were allocated in two equal supplement and placebo groups （80mg/day allicin for 14 days）. After supplementation， all participants were participated in Bruce test. The blood samples were taken in three phases （before and after the supplementation and after the exercise）. The DNA damage was investigated on human peripheral blood cell by using the single cell gel

收稿日期：2014-09-20

基金項(xiàng)目：福建省自然基金青年項(xiàng)目（2013J05055），福建省教育廳A類項(xiàng)目（JA13199）。

作者簡(jiǎn)介：蘇美華（1983-），女，福建泉州人，博士，講師，研究方向運(yùn)動(dòng)生理與體育健康促進(jìn)。

作者單位：1.閩南師范大學(xué)體育學(xué)院，福建 漳州3630001；2.畢節(jié)學(xué)院體育與健康科學(xué)學(xué)院，貴州 畢節(jié)551700

1. School of Physical Education， Minnan Normal University， Zhangzhou 363000， Fujian， China；2. College of P. E. and Health Sciences， Bijie University， Bijie 551700， Guizhou， Chinaelectrophoresis （SCGE） and the level of SOD， GSH and MDA was detected in serum.Results：During the first two phases（before and after the supplementation）， the level of DNA damage and the status of SOD，GSH and MDA between supplement and placebo groups did not show significant difference（P>0.05）. Moreover， exercise-induced decrease of DNA damage and the level of SOD， GSH and MDA in the supplement group were significantly more in comparison with those in the placebo group （P<0.001），instead，the DNA damage and the level of SOD， GSH and MDA increased significantly after exercise. Conclusions： The exhaustive exercise could result in the DNA damage on human peripheral blood cell and induce high level of oxidative stress. However， the allicin could reduce free radicals and prevent DNA damage from oxidative stress induced by exhaustive exercise.

Key words：allicin； DNA damage； oxidative stress； exhaustive exercise

大蒜是食藥兩用的蔬菜之一，也是日常飲食中的重要調(diào)味品。中醫(yī)認(rèn)為其具有“除寒濕、辟陰邪、袪毒氣、破惡血、消痛腫、化肉食”之功效。大蒜素則是從大蒜中提取出來(lái)的一種有效成分，其主要成分的化學(xué)名稱為二烯丙基二硫醚?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，大蒜素具有很高的營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值，特別是大蒜素具有降血脂、降血壓、保護(hù)血管、調(diào)節(jié)免疫功能、抗疲勞、抗輻射、抗腫瘤、抗病菌等作用，并能清除自由基，抗脂質(zhì)過(guò)氧化減輕活性氧對(duì)機(jī)體造成的氧化損傷[1-3]。大強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng)可引起體內(nèi)過(guò)量自由基產(chǎn)生及氧化應(yīng)激，并對(duì)機(jī)體產(chǎn)生一系列危害[4-5]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明過(guò)量運(yùn)動(dòng)可誘發(fā)心肌、血細(xì)胞的DNA損傷[6]。但目前關(guān)于大蒜素對(duì)劇烈運(yùn)動(dòng)引起機(jī)體組織DNA損傷所具有的保護(hù)效應(yīng)如何，其相關(guān)研究報(bào)道還較少，而運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑和營(yíng)養(yǎng)干預(yù)對(duì)于提高運(yùn)動(dòng)成績(jī)和促進(jìn)體能康復(fù)具有重要的作用，也是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。為此，本研究擬采用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)（single cell gel electrophoresis， SCGE）[7]，檢測(cè)力竭運(yùn)動(dòng)后人體外周血細(xì)胞的DNA損傷情況，通過(guò)補(bǔ)充大蒜素觀察其對(duì)人體外周血細(xì)胞DNA損傷的保護(hù)作用和抗氧化效應(yīng)，并探討其作用機(jī)制，為運(yùn)動(dòng)疲勞的預(yù)防與消除提供一種新方法，為開(kāi)發(fā)具有抗氧化活性的保健食品提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。

山東體育學(xué)院學(xué)報(bào)第30卷第6期2014年12月 蘇美華，等大蒜素抗運(yùn)動(dòng)性氧應(yīng)激和DNA損傷的作用研究No.6 20141研究對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選取閩南師范大學(xué)體育學(xué)院體育專業(yè)男生16名，隨機(jī)分為兩組包括實(shí)驗(yàn)組8名（T組，補(bǔ)充大蒜素膠囊）和對(duì)照組8名（C組，補(bǔ)充淀粉安慰劑膠囊），均無(wú)吸煙史，體檢健康狀態(tài)良好，自愿參與此次實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)期間遵守規(guī)律的合理膳食。

1.2研究方法

1.2.1運(yùn)動(dòng)方案

受試者在Lode Valiant 醫(yī)用電動(dòng)跑臺(tái)上采用Bruce方案[8]進(jìn)行力竭運(yùn)動(dòng)。力竭標(biāo)準(zhǔn)為：1）受試者經(jīng)再三鼓勵(lì)，也無(wú)法保持該運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度；2）運(yùn)動(dòng)過(guò)程中心率達(dá)到180次/min以上；3）RPE數(shù)值達(dá)到19或20。

1.2.2血樣采集及服用補(bǔ)劑方法

對(duì)照組受試對(duì)象從運(yùn)動(dòng)前2 周開(kāi)始每天口服安慰劑，劑量為每天80 mg；實(shí)驗(yàn)組受試對(duì)象同時(shí)間每天口服大蒜素膠囊，劑量為每天80 mg[9]。實(shí)驗(yàn)的第一天，對(duì)所有被試進(jìn)行身高、體重和體成分的測(cè)定；在補(bǔ)劑之前、補(bǔ)劑第14天、第15天運(yùn)動(dòng)后即刻分別采集兩組受試者外周靜脈血1 mL，放入含有0.1 mg肝素的抗凝管，取每個(gè)被試抗凝血10～15 μL用于SCGE檢測(cè)，余下的抗凝血立即冷凍離心后用于抗氧化酶與脂質(zhì)過(guò)氧化水平的測(cè)定。

1.2.3血細(xì)胞DNA損傷檢測(cè)

膠片制作參照Hartmann[10]的方法稍加改進(jìn)。將制好的載玻片置于水平電泳槽中，倒入新配置的堿性電泳緩沖液約覆過(guò)膠面0.25 cm左右，解旋20 min，以便使DNA解螺旋成單鏈，使DNA斷片在電泳場(chǎng)中易于遷移。解旋后在25 V、250 mA的條件下電泳30 min。停止電泳后小心地將玻片放入中和緩沖液中中和15 min。取出玻片，滴加30～50 μL 濃度為5μg/ mL的EB染液到膠體表面，蓋上蓋玻片，染色15～20 min后熒光顯微鏡觀察。

1.2.4抗氧化酶與脂質(zhì)過(guò)氧化水平的測(cè)定

SOD測(cè)定采用黃嘌呤氧化酶法，MDA測(cè)定采用硫代巴比妥酸比色法，GSH測(cè)定采用比色定量法。試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3主要儀器和試劑

DYY-6C型三恒電泳儀和DYZC-24B型電泳槽（北京，六一）；BX-51型熒光顯微鏡和E-330型數(shù)碼像機(jī)（OLYMPUS）；721可見(jiàn)光分光光度計(jì)；ECOM-F6124型半自動(dòng)生化分析儀。肝素抗凝劑、低熔點(diǎn)瓊脂糖（LMA）、正常熔點(diǎn)瓊脂糖（NMA）、肌氨酸鈉、Triton X -100二甲基亞砜（DMSO）及溴化已錠（EB）等均購(gòu)自Amresco公司；大蒜素膠囊購(gòu)于江蘇正大清江制藥有限公司（國(guó)藥準(zhǔn)字H32025683），其它試劑均為優(yōu)級(jí)分析純。

1.4統(tǒng)計(jì)分析

熒光顯微鏡下用515～560 nm 的激發(fā)光觀察，在200 ×下，每張涂片上隨機(jī)觀察5個(gè)視野，每個(gè)視野多于5個(gè)細(xì)胞，每組6張載波片。用IMI1.0（深圳良正軟件開(kāi)發(fā)有限公司）彗星分析軟件測(cè)定彗星長(zhǎng)、尾長(zhǎng)、尾部DNA百分?jǐn)?shù)、彗星分布矩、尾慣量、Olive尾矩等指標(biāo)， 用EXCELL和SPSS軟件對(duì)所獲得數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)檢驗(yàn)（1-Sample K-S）和單因數(shù)方差分析（One-Way ANOVA），結(jié)果以mean±SD表示。P< 0.05表示組間差異顯著性。

2結(jié)果

2.1受試者身體形態(tài)指標(biāo)簡(jiǎn)況

受試者的基本情況見(jiàn)表1，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組受試者身體特征基本一致，表現(xiàn)在身體形態(tài)指標(biāo)身高、體重、BMI值、體脂百分比無(wú)顯著差異，而對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組在各自補(bǔ)充補(bǔ)劑后，實(shí)驗(yàn)組補(bǔ)充大蒜素后力竭時(shí)間顯著長(zhǎng)于對(duì)照組（P< 0.01）。表1受試者基本情況一覽表

組別年齡身高（cm）體重（kg）BMI 體脂%力竭時(shí)間（min）對(duì)照組21.37±1.06172.3±1.6664.87±2.1021.78±0.9813.98±2.4315.87±1.12實(shí)驗(yàn)組20.75±1.03172.25±1.8365.37±1.8321.69±0.5114.03±1.3816.87±0.83**注：與對(duì)照組相比，**P<0.01。

2.2服用大蒜素前后對(duì)人體外周血細(xì)胞DNA損傷的形態(tài)學(xué)觀察

染色后的涂片在熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)劑前安靜狀態(tài)下對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞絕大部分表現(xiàn)為一圓形熒光團(tuán)，熒光強(qiáng)度均勻，邊緣光滑，即彗星頭部，無(wú)明顯拖尾現(xiàn)象（圖A1和A2）；對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組連續(xù)14天服用補(bǔ)劑后，安靜狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞絕大部分也表現(xiàn)為一圓形熒光團(tuán)，熒光強(qiáng)度均勻，邊緣光滑，即彗星頭部，無(wú)明顯拖尾現(xiàn)象（圖B1和B2）；實(shí)驗(yàn)組在進(jìn)行Bruce力竭運(yùn)動(dòng)方案后即刻，運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞尾部的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，只有部分細(xì)胞出現(xiàn)“彗星尾”， “彗星尾”尾長(zhǎng)并無(wú)明顯加長(zhǎng) （圖C1） ；而對(duì)照組在進(jìn)行Bruce力竭運(yùn)動(dòng)方案后即刻，運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞尾部的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，“彗星”尾部逐漸變長(zhǎng)變大，彗星頭部的直徑隨著尾部的加長(zhǎng)而減小，彗星樣細(xì)胞的出現(xiàn)率明顯升高 （圖C2）。

圖1服用大蒜素后運(yùn)動(dòng)員

外周血細(xì)胞DNA彗星圖（×100）2.3服用大蒜素后人體外周血細(xì)胞DNA損傷的SCGE檢測(cè)指標(biāo)變化情況

彗星圖像用彗星分析軟件并選取國(guó)際通用指標(biāo)[7，10]尾長(zhǎng)、尾分布矩和Olive尾矩等指標(biāo)進(jìn)行分析的結(jié)果見(jiàn)表2。補(bǔ)劑前安靜狀態(tài)下對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞的彗星檢測(cè)指標(biāo)尾長(zhǎng)、Olive尾矩、 尾分布矩并無(wú)顯著差異（P>0.05）；對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組連續(xù)14天服用補(bǔ)劑后，運(yùn)動(dòng)前大蒜素補(bǔ)劑組運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞的彗星檢測(cè)指標(biāo)尾長(zhǎng)、Olive尾矩、 尾分布矩均顯示較對(duì)照組有降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)上的顯著差異（P>0.05）；運(yùn)動(dòng)后即刻，對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞的彗星檢測(cè)指標(biāo)尾長(zhǎng)、Olive尾矩、 尾分布矩均顯示較運(yùn)動(dòng)前有非常顯著的升高（P<0.001），而大蒜素補(bǔ)劑組運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞的彗星檢測(cè)指標(biāo)尾長(zhǎng)、Olive尾矩、 尾分布矩較對(duì)照組有顯著地降低（P<0.01），提示大蒜素顯著地降低了力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞的DNA損傷程度。

2.4服用大蒜素后運(yùn)動(dòng)員機(jī)體血清中SOD酶活性、GSH與MDA含量的變化

從表3可知，補(bǔ)劑前安靜狀態(tài)下對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員機(jī)體血清中SOD酶活性、GSH與MDA含量并無(wú)顯著差異（P>0.05）；補(bǔ)劑后安靜狀態(tài)下對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員機(jī)體血清中SOD酶活性、GSH與MDA含量也無(wú)顯著性差異（P>0.05）；而力竭運(yùn)動(dòng)后對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員機(jī)體血清中SOD酶活性、GSH與MDA含量與補(bǔ)劑前安靜狀態(tài)下的水平相比，均呈顯著性提高（P<0.05， P<0.05，P<0.001），與此同時(shí)，力竭運(yùn)動(dòng)后實(shí)驗(yàn)組運(yùn)動(dòng)員機(jī)體血清中SOD酶活性、GSH與MDA含量較對(duì)照組運(yùn)動(dòng)后的水平相比，均呈不同程度地顯著性降低（P<0.05， P<0.05，P<0.001），而與補(bǔ)劑前安靜狀態(tài)下的對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組水平相比并無(wú)顯著差異（P>0.05），提示大蒜素有效降低脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物水平。表2大蒜素對(duì)運(yùn)動(dòng)員外周血細(xì)胞DNA損傷指標(biāo)的影響

組別N尾長(zhǎng)Olive 尾矩尾分布矩C組補(bǔ)劑前835.12±10.1214.56±3.2678.94±24.78T組補(bǔ)劑前835.92±8.6214.61±4.9779.38±17.64C組補(bǔ)劑后834.88±10.0814.48±4.75 77.85±18.42T組補(bǔ)劑后834.16±7.24 14.38±3.78 75.17±21.45C組運(yùn)動(dòng)后862.90±12.61***21.15±4.61***95.00±27.58***T組運(yùn)動(dòng)后842.60±11.29▲▲15.81±3.82*▲▲83.16±19.71▲▲注：與C組補(bǔ)劑前相比，*P<0.05，**P<0.01， ***P<0.001； 與C組運(yùn)動(dòng)后相比， ▲▲P<0.01， ▲▲▲ P<0.001。

表3大蒜素干預(yù)后運(yùn)動(dòng)員血清中SOD、GSH和MDA的變化

組別NSOD（U/ml）GSH（mg/L）MDA （nmol/ml）C組補(bǔ)劑前790.37±13.64103.75±14.214.34±0.92T組補(bǔ)劑前788.63±14.11105.38±16.464.56±1.03C組補(bǔ)劑后798.25±12.10107.13±18.064.29±0.93T組補(bǔ)劑后799.63±17.62100.75±14.27 4.16±1.07C組運(yùn)動(dòng)后122.63±15.09*127.13±19.56*7.74±1.11***T組運(yùn)動(dòng)后102.13±11.89▲106.38±24.64▲5.40±1.04▲▲▲注：與C組補(bǔ)劑前相比，*P<0.05， ***P<0.001； 與C組運(yùn)動(dòng)后相比， ▲P<0.05， ▲▲▲P<0.001。

3討論

近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)大蒜素具有抗衰老、抗腫瘤、抗病毒、抗感染、清除自由基、預(yù)防心腦血管疾病等多種功效[1-3]。已有臨床研究證實(shí)，大蒜素可有效降低糖尿病大鼠的MDA水平，減輕氧化應(yīng)激損傷的程度[11]。劇烈運(yùn)動(dòng)可使體內(nèi)活性氧產(chǎn)生，脂質(zhì)過(guò)氧化增強(qiáng)如MDA水平升高，導(dǎo)致運(yùn)動(dòng)能力下降和引發(fā)運(yùn)動(dòng)疲勞，其產(chǎn)生機(jī)制之一是由于運(yùn)動(dòng)過(guò)程中呼吸頻率的增加，致使空氣污染物NO2和O3等隨著呼吸攝入增多而增多，而這些自由基正是通過(guò)呼吸道增加了氧化損傷的機(jī)率[12]。然而機(jī)體細(xì)胞擁有一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)工作機(jī)制來(lái)抵抗活性氧（ROS）自由基的產(chǎn)生進(jìn)而來(lái)保護(hù)大分子物質(zhì)免遭侵害，這些工作通常由抗氧化物質(zhì)SOD、GSH、AA和VE等來(lái)完成，通過(guò)攝入抗氧化物質(zhì)也是一個(gè)非常重要的渠道[13]。DNA是活性氧（ROS）自由基攻擊的重要靶分子，自由基氧化還原反應(yīng)可引起DNA分子的堿基修飾或鏈斷裂等多種后果，導(dǎo)致一系列生理功能紊亂和組織病理學(xué)改變，甚至是癌變，且DNA的損傷程度與疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[14]。國(guó)外一些研究報(bào)道了大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致DNA的損傷，其損傷程度與運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度、時(shí)間和個(gè)體水平有關(guān)[15-16]。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)性氧應(yīng)激參與介導(dǎo)了組織細(xì)胞的DNA損傷，且DNA的損傷程度與氧化應(yīng)激水平呈正相關(guān)[17-18]。因此本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步采用SCGE檢測(cè)技術(shù)發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充大蒜素運(yùn)動(dòng)員力竭運(yùn)動(dòng)后外周血細(xì)胞的DNA損傷水平顯著低于對(duì)照組力竭運(yùn)動(dòng)后的水平?？梢?jiàn)，大蒜素對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)所致的DNA損傷具有明顯的保護(hù)效應(yīng)。Hassan Farhad[19]等研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充大蒜素能夠明顯降低人體運(yùn)動(dòng)后DNA氧化損傷的修飾物之一即8-羥基鳥(niǎo)苷（8-OHDG）的含量，這與本研究結(jié)果相類似。

SOD和GSH 是體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)中主要的抗氧化生物標(biāo)志物，MDA是氧自由基對(duì)多價(jià)不飽和脂肪酸引發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的最終產(chǎn)物，它們的含量高低可反映機(jī)體組織細(xì)胞脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的強(qiáng)度及體內(nèi)自由基代謝的情況[20]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，對(duì)照組力竭運(yùn)動(dòng)后血清MDA水平顯著上升，SOD和GSH抗氧化酶活性也出現(xiàn)顯著地代償性升高，且DNA損傷水平較對(duì)照組運(yùn)動(dòng)前水平亦呈顯著增加趨勢(shì)，說(shuō)明力竭運(yùn)動(dòng)使脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA水平顯著升高，導(dǎo)致DNA氧化損傷程度加深，同時(shí)機(jī)體組織以過(guò)量表達(dá)SOD和GSH來(lái)提高機(jī)體抗氧化系統(tǒng)能力，清除羥基，降低過(guò)氧化壓力，減少劇烈運(yùn)動(dòng)負(fù)荷引起的大量毒性的活性氧[2]。然而，力竭運(yùn)動(dòng)后補(bǔ)充大蒜素組運(yùn)動(dòng)員機(jī)體血清中SOD酶活性、GSH與MDA含量較對(duì)照組運(yùn)動(dòng)后的水平相比，均呈不同程度地顯著性降低，且DNA損傷水平較對(duì)照組運(yùn)動(dòng)后水平呈顯著降低趨勢(shì)，說(shuō)明補(bǔ)充的大蒜素直接參與了清除運(yùn)動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，并顯著降低了機(jī)體的脂質(zhì)過(guò)氧化程度，從而降低了人體外周血細(xì)胞的DNA損傷值。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其他研究[9]發(fā)現(xiàn)大蒜素較其它抗氧化劑更能有效降低運(yùn)動(dòng)員機(jī)體氧化應(yīng)激水平的結(jié)論相一致。而大蒜素的補(bǔ)充劑量效應(yīng)還有待進(jìn)一步研究。

4結(jié)論

力竭性跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)可誘導(dǎo)人體外周血細(xì)胞DNA損傷值增加及脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA水平的升高，介導(dǎo)機(jī)體組織SOD和GSH抗氧化酶活性的過(guò)量表達(dá)，大蒜素能夠提高機(jī)體抗氧化能力，穩(wěn)定細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，降低自由基水平，減輕和預(yù)防運(yùn)動(dòng)性氧應(yīng)激所致的DNA損傷，對(duì)防治運(yùn)動(dòng)疲勞具有較好的營(yíng)養(yǎng)保健功效。

參考文獻(xiàn)：

[1]張?zhí)炝粒?顏燕， 姚文環(huán)，等. 大蒜素亞慢性染毒對(duì)大鼠抗氧化系統(tǒng)的影響[J]. 毒理學(xué)雜志， 2011， 25（3）： 226-229.

[2]劉重斌， 王瑞， 董繆武， 等. 大蒜素對(duì)慢性鐵中毒大鼠氧化應(yīng)激與肝細(xì)胞自噬的抑制作用[J]. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志， 2012， 26（4）： 515-521.

[3]Bautista DM，Movahed P，Hinman A，et al.Pungent products from garlic activate the sensory ion channel TRPA1 [J]. Proc Natl Acad Sci USA，2005， 102（ 34）：12248-12252.

[4]Phaneuf S， Leeuwenburgh C. Apoptosis and exercise [J]. Med Sci Sports Exerc， 2001， 3：393-396.

[5]Kyto V， Lapatto R， Lakkisto P，et.al.Glutathione depletion and cardiomyocyte apoptosis in viral myocarditis [J]. European Journal of Clinical Investigation， 2004， 34（3）：167-175.

[6] Selman C， McLaren JS， Collins AR，et al.Antioxidant enzyme activities， lipid peroxidation， and DNA oxidative damage： the effects of short-term voluntary wheel running [J].Arch Biochem Biophys， 2002， 401（2）： 255-261.

[7] Roy， Marc D. Approach for assessing total cellular DNA damage [J]. Biotechniques， 2007， 42 （4）： 425-429.

[8] Bruce RA， McDonough JR. Sress testing in screening for cardiovascular disease[J]. Bull N Y Acad Med， 1970， 45（12）： 1288-1305

[9] 趙廣高，蘇全生，李新建，等. 大蒜素與聯(lián)合抗氧化劑對(duì)一次大強(qiáng)度離心運(yùn)動(dòng)后運(yùn)動(dòng)員血清T-AOC 等水平的影響[J]. 首都體育學(xué)院學(xué)報(bào)， 2012， 24（2）：189-192.

[10] Hartmann A， Agurll E， Beevers C，et al.Recommendations for conducting the in vivo alkaline Comet assay [J]. Mutagenesis， 2003， 18 （1）：45-51.

[11] 段玉敏， 王 賓. 大蒜素對(duì)2型糖尿病大鼠氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2010， 19（18）：2240-2241.

[12] Powers SK， Jackson MJ. Exercise-Induced Oxidative Stress： Cellular Mechanisms and Impact on Muscle Force Production[J]. Physiol Rev， 2008， 88（4）：1243-1276.

[13 ] R John Aitken ， Shaun D R. Antioxidant systems and oxidative stress in the testes [J]. Oxid Med Longev， 2008， 1（1）：15-24.

[14 ] Best， Benjamin P. Nuclear DNA damage as a direct cause of aging[J]. Rejuvenation Research， 2009， 12 （3）： 199–208.

[15] Tsai K， Hsu TG， Hsu KM，et al.Oxidative DNA damage in human peripheral leukocytes induced by massive aerobic exercise [J]. Free Radic. Biol. Med， 2001， 31：1465-1472.

[16] Demirbag R.， Yilmaz R， Güzel S，et al. Effects of treadmill exercise test on oxidative/ antioxidative parameters and DNA damage[J]. Anadolu Kardiyoloji Dergisi， 2006， 6（2）：135- 140.

[17] 劉曉莉， 蘇美華， 喬德才. 運(yùn)動(dòng)疲勞誘導(dǎo)小鼠心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激與DNA損傷[J]. 中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志， 2008， 27（5）：621-623.

[18] 劉曉莉， 蘇美華， 沈飛， 等. 馬拉松運(yùn)動(dòng)對(duì)人體外周血細(xì)胞DNA損傷和氧化應(yīng)激的影響[J]. 北京體育大學(xué)學(xué)報(bào)， 2009，32（7）：60-62.

[19] Hassan Farhadi， Marefat Siakuhian， Homayun Dolatkhah，et al.Effect of short-term garlic supplementation on DNA damage after exhaustive exercise in non-athlete men[J].European Journal of Experimental Biology， 2013， 3（1）：455-459.

[20] Etsuo Niki .Assessment of Antioxidant Capacity in vitro and in vivo[J].Free Radical Biology and Medicine， 2010， 49（4）：503-515.第30卷第6期2014年12月山東體育學(xué)院學(xué)報(bào)Journal of Shandong Institute of Physical Education and SportsVol.30 No.6December 2014