脾多肽改善重癥登革熱患者免疫功能的觀察

黃楨，吳英松，莊斯慧，潘競鏘，劉天才

（1.南方醫(yī)科大學生物技術學院，廣州510515；2.廣州市中醫(yī)醫(yī)院，廣州510130；3.廣州市中醫(yī)中藥研究所，廣州510130）

0 引言

登革熱是由登革病毒引起的急性傳染病，登革熱病毒通過蚊蟲叮咬侵入人體后在單核-巨噬細胞及毛細血管內(nèi)皮細胞中增殖，經(jīng)血流播散，登革病毒屬黃病毒科黃病毒屬，登革病毒共有4個血清型（DENV-1、DENV-2 DENV-3和DENV-4），4種血清型均可感染人.陳偉烈等［1］發(fā)現(xiàn)，登革熱會引起患者的免疫系統(tǒng)紊亂，急性期登革熱患者外周血T細胞、CD4+細胞數(shù)量顯著降低，CD4/CD8比值明顯下降.重癥登革熱的早期識別和及時救治是降低病死率的關鍵.現(xiàn)對在我院就診的病例進行統(tǒng)計分析，分析重癥登革熱的免疫功能改變，以及使用脾多肽治療重癥登革熱后的免疫指標觀察，希望對臨床診斷以及治療有指導作用.

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院登革熱門診患者80例，無心腎肝疾病以及傳染病等疾病.所有診斷依據(jù)國家衛(wèi)生計生委辦公廳關于印發(fā)登革熱診療指南（2014年版），重癥感染依據(jù)臨床觀察診斷，主要由二次感染和老年重癥患者組成，其中二次感染為發(fā)病1周內(nèi)，在患者血清中檢出高水平特異性IgG抗體；初次感染患者，發(fā)病3～5 d檢出IgM抗體，無IgG抗體，用萬孚膠體金法試劑檢測登革熱IgG、IgM抗體.二次感染25例，老年重癥患者15例，年齡為（50±3.5）歲，初次感染40例，年齡為51±4.5，以及健康體檢標本40例，年齡為50±5.5，作為對照組.脾多肽注射液為豐生制藥.

1.2 實驗室檢查 入選者進行免疫相關檢查：1）采用貝克曼FC500流式細胞儀以及原裝配套試劑，檢測患者外周血T淋巴細胞亞群；2）日立7600生化儀，利德曼免疫比濁法試劑，檢測免疫球蛋白IgG、IgA、IgM.

1.3 治療方法 重癥登革熱80例隨機分為治療組和對照組，對照組用普通對癥治療，治療組用普通對癥治療加脾多肽調(diào)節(jié)劑，告知病人并與病人簽定知情同意書.普通治療：臥床休息，清淡飲食；防蚊隔離至退熱及癥狀緩解；監(jiān)測神志、生命體征、尿量，血小板，HCT等.對癥治療：退熱、補液、鎮(zhèn)靜止痛、抗休克等對癥處理.營養(yǎng)心肌，護肝，在循環(huán)支持治療及出血治療的同時，預防并及時治療各種并發(fā)癥.對出現(xiàn)嚴重血漿滲漏、休克、ARDS、嚴重出血或其他重要臟器功能障礙者應積極采取相應治療.治療組在普通對癥治療的基礎上加脾多肽，一日1次脾多肽，靜脈滴注，一次6 mL，溶于250 mL的0.9%氯化鈉注射液，用藥7天檢測免疫指標觀察.

1.4 臨床觀察 重癥登革熱的診斷，有下列情況之一者：嚴重出血包括皮下血腫、嘔血、黑便、陰道流血、肉眼血尿、顱內(nèi)出血等；休克；重要臟器功能障礙或衰竭：肝臟損傷、ARDS、急性心功能衰竭、急性腎功能衰竭、腦病（腦炎、腦膜腦炎）等；普通登革熱患者為檢測到登革熱IgM，無重癥臨床表現(xiàn)，治愈者以患者熱退24 h以上同時臨床癥狀緩解.

1.5 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，P＜0.05為數(shù)據(jù)統(tǒng)計差異的顯著性，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(χˉ±s)表示.計量資料，兩組比較采用組間兩兩比較t檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，組間差異采用SNK檢驗比較.計數(shù)資料用χ2檢驗；P＜0.05為數(shù)據(jù)差異有統(tǒng)計學意義.

2 結(jié)果

2.1 重癥患者、普通感染患者和正常人T淋巴細胞免疫和體液免疫比較 感染患者IgG、IgA高于正常人，且病情越嚴重越高，IgM、CD4+、CD4+/CD8都低于正常人，病情越嚴重越低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），CD8+無統(tǒng)計差異，見表1.

表1 登革熱重癥患者、普通感染患者、正常人免疫各指標測定結(jié)果比較（n=40，s）

表1 登革熱重癥患者、普通感染患者、正常人免疫各指標測定結(jié)果比較（n=40，s）

與正常人比較，*P＜0.05；重癥患者與普通感染患者比較，**P＜0.05.

項目IgG/(g/L) IgA/(g/L) IgM/(g/L) CD4+/% CD8+/% CD4+/CD8+正常人7.31±1.04 1.31±0.21 1.27±0.19 37.48±2.37 26.34±1.41 1.42±0.09登革熱重癥患者15.10±0.99** 1.58±0.25** 0.79±0.14** 26.27±1.69** 26.47±1.64 0.99±0.02**普通感染患者11.48±0.52* 1.32±0.22* 1.57±0.27* 33.90±2.85* 26.28±1.40 1.29±0.12*

2.2 重癥患者40例隨機分為治療組和對照組，治療組為普通對癥治療加脾多肽，靜脈滴注，一次6 mL，溶于250 mL的0.9%氯化鈉注射液；對照組用普通對癥治療，兩組治療前免疫各指標無差異，治療組和對照組治療前后分別比較IgG、IgM、CD4+、CD4+/CD8分別有差異（P＜0.05）.治療組和對照組治療后免疫指標比較，治療組IgG、CD4+、CD4+/CD8明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2.

表2 重癥登革熱患者治療組和對照組治療前后免疫各指標結(jié)果比較（n=20，χˉ±s）

3 討論

細胞免疫和體液免疫是機體抵御致病原侵襲的重要機制，在正常狀態(tài)下各司其職保護人體健康，而免疫系統(tǒng)功能易受感染、心理、神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂等因素影響，導致免疫功能失衡.很多研究證明當病毒與細菌等成功入侵人體細胞后，會導致機體免疫功能出現(xiàn)失調(diào)，最終導致整個機體免疫系統(tǒng)功能紊亂［2-4］.登革熱是由登革病毒引起的急性傳染病，登革熱患者細胞免疫及體液免疫功能均存在失調(diào)，細胞免疫CD4+細胞數(shù)量的減少，體液IgG增加可能是免疫紊亂的關鍵，可見免疫系統(tǒng)的檢測可作為登革熱的輔助診斷，同時疾病的嚴重性與免疫功能的紊亂有相關性.若再次感染登革熱異型或多個不同血清型病毒，體內(nèi)預先存在的非中和抗體或亞中和濃度的中和抗體將促進淋巴的允許細胞對登革熱病毒的攝取，增加登革熱病毒在細胞內(nèi)的復制，從而導致感染的加強，這種現(xiàn)象稱之為抗體依賴增強（ADE）效應.ADE是重癥的登革出血熱（DHF）和登革休克綜合癥（DSS）的易發(fā)因素，從而導致嚴重的臨床表現(xiàn)［5-6］.對于老年人來說，其個體免疫細胞不僅增殖能力下降，而且易發(fā)生凋亡，造成活性免疫細胞數(shù)目減少，增加登革熱感染的易感性和嚴重程度，較年輕患者有更高的血漿滲漏發(fā)生率及病死率［7］.本研究結(jié)果顯示，重癥登革熱常常見于老人和二次感染患者，與初次感染患者比較，IgG、IgA越來越高，而IgM、CD4+、CD4+/CD8越來越低，并且病情越嚴重，免疫指標變化越大，可見免疫功能紊亂，是導致登革熱病毒直接入侵引起嚴重感染的重要發(fā)病機制.江瀾［8］認為登革熱的主要致病機制與宿主機體不恰當?shù)拿庖邞鹩嘘P.在二次感染的早期.ADE可能對促進病毒的侵入起著重要的促進作用：而干擾素抗病毒反應的抑制和首次感染引起的低親和力T細胞的擴增阻礙了適當?shù)腡細胞應答；同時，高水平的交叉反應性抗體誘導了血小板及T細胞的凋亡；高滴度的細胞因子和介導子又對組織造成損傷.這些介質(zhì)的迅速增加導致了血漿滲出、休克、循環(huán)衰竭和出血等表現(xiàn).

脾多肽作為免疫調(diào)節(jié)藥，對機體免疫機能有雙向調(diào)節(jié)作用，能夠糾正機體免疫功能紊亂，具有激活和增強機體非特異性免疫功能的作用，能夠促進T淋巴細胞成熟并可使未致敏淋巴細胞激活成為致敏淋巴細胞，從而提高了淋巴細胞免疫功能，觸發(fā)和增強機體對感染的抵抗力；還可誘生干擾素，直接阻止病毒蛋白質(zhì)的合成與復制，并能增強細胞表面抗原表達，促進NK細胞的細胞毒活性，調(diào)節(jié)淋巴細胞和巨噬細胞功能，可明顯改善機體細胞免疫功能.很多研究顯示，當機體的免疫功能出現(xiàn)紊亂，可以用免疫調(diào)節(jié)藥改善機體的免疫功能［9-10］.本研究結(jié)果顯示，初次感染，病情較輕，患者的免疫功能改變不大，其體內(nèi)的免疫系統(tǒng)通過各種調(diào)節(jié)因素的共同作用，最終可以改善而愈好.而當病情嚴重時，其免疫功能紊亂嚴重，可以通過用脾多肽的免疫調(diào)理和干預功能，來治療危重登革熱病患者.通過治療組和對照組觀察，在治療后它們的免疫指標的改變有統(tǒng)計差異，脾多肽的治療，可以更好地恢復重癥患者的免疫功能.可見，脾多肽在治療重癥登革熱患者，增加了患者效應細胞激活和數(shù)量，促進了細胞免疫功能，提高了淋巴細胞活性，增強了體液免疫功能，促使機體免疫功能激活，增加了免疫應答活力.在登革熱的患者中，一般患者在患病10 d左右，進行補液以及一些普通治療可以自行恢復，對于患病嚴重引起免疫系統(tǒng)嚴重紊亂，可以增加免疫調(diào)節(jié)藥脾多肽，來調(diào)節(jié)登革熱感染患者免疫功能.總之脾多肽可以改善細胞免疫和體液免疫功能，糾正免疫動態(tài)平衡漂移，有利于登革熱患者提高療效，可以降低嚴重患者病死率.

［1］陳偉烈，袁小珍，唐小平，等.登革病毒感染者外周血T淋巴細胞亞群數(shù)量的變化及其臨床意義［J］.中國人獸共患病學報，2006，22（11）：1042-1044.

［2］韓莉，林昭春，付柏林.帶狀皰疹44例及體液免疫功能變化與臨床分析［J］.四川醫(yī)學，2014，35（3）：336-337.

［3］柯江維，陳強，段榮，等.EV71病毒引起手足口病患兒免疫狀態(tài)變化的研究［J］.實驗與檢驗醫(yī)學，2014，32（1）：5-7.

［4］趙晟珣，王樺，楊帆，等.高齡老年肺部感染患者免疫功能變化與免疫調(diào)節(jié)治療臨床研究［J］.中華臨床醫(yī)師雜志:電子版，2014，8（6）：1026-1030.

［5］胡冬梅，李潔，王大虎，等.Ⅰ型登革病毒初次感染患者血清中和抗體的動態(tài)反應分析［J］.南方醫(yī)科大學學報，2012，32（12）：1773-1791.

［6］Weiskopf D，Angelo M A，Sidney J，et al.Immunodominance changes as a function of the infecting dengue virus serotype and primary versus secondary infection［J］.J Virol，2014，88（19）:11383-11394.

［7］Lee C C，Hsu H C，Chang C M，et al.Atypical presentations of dengue disease in the elderly visiting the ED［J］.Am J Emerg Med，2013，31（5）:783-787.

［8］江瀾.宿主異常免疫反應與登革熱病毒致病的關系［J］.熱帶醫(yī)學雜志，2008，8（3）：281-284.

［9］周紅衛(wèi)，張農(nóng).胸腺五肽治療穩(wěn)定期重度慢性阻塞性肺疾病的療［J］.四川醫(yī)學，2014，35（7）：871-873.

［10］伍國勝，宿永康，孟男，等.脾多肽對油船燒傷患者免疫調(diào)節(jié)作用的臨床觀察［J］.中華航海醫(yī)學與高氣壓醫(yī)學雜志，2013，20（5）：318-320.