γ—干擾素、腺苷脫氨酶在結(jié)核性腹膜炎診治中的臨床價值

黃錫坤+肖玲+黃福達(dá)

[摘要] 目的 探討腹水γ-干擾素（IFN-γ）、腺苷脫氨酶（ADA）在結(jié)核性腹膜炎診治中的臨床價值。 方法 分別檢測29例結(jié)核腹膜炎患者、22例癌性腹水患者的腹水γ-干擾素、腺苷脫氨酶水平，并進(jìn)行比較。 結(jié)果 結(jié)核性腹膜炎組中γ-干擾素、腺苷脫氨酶的水平及活性均高于癌性腹水組（P值均<0.05）。2項指標(biāo)聯(lián)合檢測對結(jié)核性腹膜炎診斷的靈敏度為86.2%，特異度95.5%，與單獨檢測ADA比較，敏感度相近，其特異度明顯增高。 結(jié)論 γ-干擾素、腺苷脫氨酶的檢測對結(jié)核性和癌性腹腔積液的鑒別有臨床意義，可用于兩者的鑒別診斷，同時進(jìn)行IFN-γ與ADA檢測可提高結(jié)核性腹腔積液的診斷特異度。

[關(guān)鍵詞] 結(jié)核性腹膜炎；γ-干擾素（IFN-γ）；腺苷脫氨酶（ADA）

[中圖分類號] R526 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）30-0013-03

結(jié)核病是全球嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題之一，我國也是世界22個結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家之一，其病例總數(shù)位居第二[1]，僅次于印度，目前結(jié)核病感染人群有近5.5億人，對人民健康的危害遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出其他傳染病，由結(jié)核感染而死亡的人數(shù)是其他傳染性疾病總死亡人數(shù)的2倍以上[1]。結(jié)核病的臨床表現(xiàn)呈多樣性，可累及全身多個臟器。近年來，結(jié)核病無論在發(fā)病率還是在復(fù)發(fā)率方面均有逐漸上升趨勢，其中結(jié)核性腹膜炎的發(fā)病率也有難以忽視之勢，但由于其癥狀缺乏特異性，且體征常以腹水為主要表現(xiàn)，在診斷方面要獲取細(xì)胞學(xué)或病理學(xué)證據(jù)較為困難，故常易造成誤診，因此腹水作為最容易得到的標(biāo)本，其生物標(biāo)志物檢測的意義顯得甚為重要。本文我們將腹水γ-干擾素（IFN-γ）、腺苷脫氨酶（ADA）進(jìn)行聯(lián)合檢測，旨在進(jìn)一步探討上述指標(biāo)在結(jié)核性腹膜炎診治中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本實驗選取2012年8月～2013年12月在本院住院的腹腔積液患者51例作為病例資料，分為結(jié)核性腹膜炎組及癌性腹水組。結(jié)核性腹膜炎組29例：男16例，女13例，年齡17～68歲，平均38.8歲。診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]： ①有結(jié)核病史，伴有其他器官結(jié)核病證據(jù)；②不明原因長期發(fā)熱，伴有腹痛、腹脹、腹水、腹部包塊或腹壁柔韌感；③腹水性質(zhì)為滲出液，以淋巴細(xì)胞為主，普通細(xì)菌培養(yǎng)陰性，細(xì)胞學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)癌細(xì)胞；④放射線胃腸鋇餐發(fā)現(xiàn)腸粘連等征象；⑤PPD試驗（結(jié)核菌素試驗）呈強(qiáng)陽性；⑥抗結(jié)核治療有效。癌性腹水組22例：男13例，女9例，年齡41～76歲，平均58.6歲。22例病例均最終由影像學(xué)及病理學(xué)確診為惡性腫瘤。

1.2 儀器與方法

上述檢測對象均無菌穿刺留取腹水5 mL進(jìn)行檢測。離心（離心半徑16 cm ，3000 r/min離心10 min），取上清液分裝，置液氮-20℃保存待測。IFN-γ檢測采用ELISA法，應(yīng)用Wellscan MK3型酶標(biāo)分析儀，試劑盒購自上海研輝生物科技有限公司的γ-干擾素ELISA進(jìn)口分裝試劑盒（批號20120901A，有效期：2013年12月），嚴(yán)格按試劑盒的說明書進(jìn)行操作，酶標(biāo)儀自動打印出標(biāo)準(zhǔn)曲線及各孔IFN-γ濃度，設(shè)雙標(biāo)準(zhǔn)和空白對照。ADA測定用速率法。儀器使用西門子ADVIA1650全自動生化分析儀，試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供，按試劑盒說明操作。

1.3 觀察指標(biāo)

以上述方法分別檢測出結(jié)核性腹膜炎組及癌性腹水組患者各自的腹水γ-干擾素、腺苷脫氨酶水平，并進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 12.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，率的比較采用χ2檢驗。兩種實驗方法的診斷效果評價采用靈敏度、特異度、假陽性率、假陰性率及Youden指數(shù)比較。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 γ-干擾素、腺苷脫氨酶檢驗結(jié)果

見表1。結(jié)核腹膜炎組腹水的γ-干擾素（IFN-γ）、腺苷脫氨酶（ADA）活性均比癌性腹水組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 IFN-γ、ADA陽性檢出結(jié)果

見表2。分別以IFN-γ>250 pg/mL、ADA>40 U/L為陽性檢出標(biāo)準(zhǔn)，26例結(jié)核性腹腔積液及4例惡性腹腔積液IFN-γ>250 pg/mL；25例結(jié)核性腹腔積液中ADA>40 U/L，2例惡性腹腔積液的ADA>40 U/L。

從表2可以看出，IFN-γ與另外兩組在對結(jié)核性腹腔積液中的靈敏度相近（P>0.05），其結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但特異度及Youden指數(shù)，與ADA結(jié)果比較，其結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），提示ADA特異度比IFN-γ高；而IFN-γ及ADA聯(lián)合檢驗，雖然其靈敏度與單獨檢測ADA相同，但特異度及Youden指數(shù)均明顯增高，兩者比較，P<0.05，其結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義。提示聯(lián)合檢測IFN-γ、ADA，盡管診斷結(jié)核的敏感度相近，但特異度較單項檢測有明顯提高。

3 討論

近年來，由于多重耐藥結(jié)核分枝桿菌的出現(xiàn)、HIV感染的傳播、貧困、移民等多種因素，目前全球結(jié)核病疫情出現(xiàn)回升趨勢[3]。在結(jié)核性腹膜炎患者中腹水征是最常見的臨床表現(xiàn)，通常起病較為緩慢、隱襲，臨床癥狀不典型，導(dǎo)致結(jié)核性腹膜炎診斷困難，使其較難與其他病因引起的滲出性腹水鑒別。結(jié)核性腹膜炎的早期診斷和合理治療對患者的病情起著至關(guān)重要的作用。取得細(xì)菌學(xué)和病理學(xué)的檢查結(jié)果是診斷的金指標(biāo)，但陽性率太低，結(jié)核性腹水涂片找抗酸桿菌和結(jié)核菌培養(yǎng)結(jié)果檢出率低至10%[4]，有研究報道[5，6]，非選擇性腹膜活檢對不明原因腹腔積液的確診率僅為6.7%～46.4%，外科腹腔鏡檢查及腹膜活檢對結(jié)核性腹膜炎的確診率為93%，但檢查具有創(chuàng)傷性，不宜常規(guī)開展。故常常對胸腹腔積液中的其他實驗室指標(biāo)進(jìn)行檢測[7]，本組資料通過檢測腹水IFN-γ含量、ADA活性，探討其對結(jié)核性腹膜炎的診斷價值。

結(jié)核性腹膜炎是在結(jié)核分支桿菌感染機(jī)體后侵犯腹膜，隨之而引起的一系列免疫變態(tài)反應(yīng)性疾病，而其中在結(jié)核病免疫中起著中心主導(dǎo)作用的是淋巴細(xì)胞，腺苷脫氨酶（ADA）是嘌呤腺苷分解代謝過程中的一種重要酶類，為特異性催化水解核苷生成肌苷核氨，在人體各器官、組織中廣泛分布，尤其以淋巴細(xì)胞，特別是T淋巴細(xì)胞中含量最高。結(jié)核菌感染機(jī)體后刺激單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)使淋巴細(xì)胞增多，結(jié)核分枝桿菌在感染人體后產(chǎn)生抗體為非保護(hù)性抗體，故在結(jié)核病患者中抗感染免疫仍主要依賴細(xì)胞免疫起作用。細(xì)胞免疫作用是指結(jié)核菌激活T淋巴細(xì)胞并促使其產(chǎn)生增殖，隨之引起巨噬細(xì)胞的活化，而活化的巨噬細(xì)胞胞體內(nèi)溶酶體酶繼而大量增多，從而起到增強(qiáng)對細(xì)胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。有研究表明，在胸腹水檢測中，結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性無顯著差異[8]。本研究結(jié)果顯示，結(jié)核性腹膜炎組腺苷脫氨酶值較癌性腹水組顯著升高，如以ADA活性40 U/L為臨界值，結(jié)核性腹膜炎中腺苷脫氨酶對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度86.2%，特異度90.9 %，與文獻(xiàn)報道基本一致[9]。

在結(jié)核病患者中，細(xì)胞免疫是結(jié)核分枝桿菌感染后激活機(jī)體的主要免疫機(jī)制，人類抗結(jié)核菌感染后產(chǎn)生的主要免疫效應(yīng)細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞CD4+，其中以輔助T細(xì)胞1（Th1細(xì)胞）為主，Th1細(xì)胞在被結(jié)核菌活化后產(chǎn)生的細(xì)胞因子主要以γ-干擾素為主，有研究表明在結(jié)核性胸膜炎局部免疫應(yīng)答反應(yīng)中占主要地位[10]的是由Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，而Th2細(xì)胞是惡性腫瘤中的主要效應(yīng)細(xì)胞，Th1細(xì)胞活性受抑制，故結(jié)核性胸水中IFN-γ的水平明顯高于癌性胸水，因此胸水中IFN-γ增高對結(jié)核性胸水的診斷效能及意義也非常高。國內(nèi)外有文獻(xiàn)報道，檢測胸液中IFN-γ水平有助結(jié)核性胸腔積液的診斷[11]，由此可推檢測腹水中IFN-γ可能有助于結(jié)核性腹膜炎的診斷。通過該研究實驗發(fā)現(xiàn)，結(jié)核性腹膜炎腹水中γ-干擾素的含量較癌性腹水顯著升高，提示結(jié)核分枝桿菌感染漿膜腔后的機(jī)體免疫應(yīng)答類型存在一致性。同時發(fā)現(xiàn)若以250 ng/L為γ-干擾素的含量的臨界值，對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度和特異度分別為89.7%和81.8%。

本研究結(jié)果顯示，在結(jié)核性腹腔積液中IFN-γ、ADA均明顯升高，二者對診斷結(jié)核的敏感度、特異度均很高，聯(lián)合檢測γ-干擾素（IFN-γ）、腺苷脫氨酶（ADA），對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感性為86.2%，特異性為95.5%，盡管診斷結(jié)核的敏感度相近，但特異度較單項檢測有明顯提高，結(jié)果提示若同時檢測腹液腺苷脫氨酶、γ-干擾素，結(jié)核性腹膜炎的診斷效能可得到極大的提高。綜上所述，在結(jié)核性腹膜炎的診斷與鑒別診斷中，腹水γ-干擾素與ADA兩者均起著重要作用。對于惡性腹腔積液的診斷，二者也能幫助鑒別。因此2項指標(biāo)聯(lián)合檢測大大地提高了結(jié)核性腹腔積液的診斷效能。而且方法簡便、快速，適用于臨床。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 李成娟. 老年肺結(jié)核病人生活滿意度及影響因素分析[J].中國公共衛(wèi)生，2010，26（2）：153-154.

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[11] 黃錫坤，黃福達(dá). 干擾素-γ與腺苷脫氨酶聯(lián)合檢測診斷結(jié)核性胸腔積液價值[J]. 中華實用診斷與治療雜志，2013，27（8）：791-792.

（收稿日期：2014-04-11）

結(jié)核性腹膜炎是在結(jié)核分支桿菌感染機(jī)體后侵犯腹膜，隨之而引起的一系列免疫變態(tài)反應(yīng)性疾病，而其中在結(jié)核病免疫中起著中心主導(dǎo)作用的是淋巴細(xì)胞，腺苷脫氨酶（ADA）是嘌呤腺苷分解代謝過程中的一種重要酶類，為特異性催化水解核苷生成肌苷核氨，在人體各器官、組織中廣泛分布，尤其以淋巴細(xì)胞，特別是T淋巴細(xì)胞中含量最高。結(jié)核菌感染機(jī)體后刺激單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)使淋巴細(xì)胞增多，結(jié)核分枝桿菌在感染人體后產(chǎn)生抗體為非保護(hù)性抗體，故在結(jié)核病患者中抗感染免疫仍主要依賴細(xì)胞免疫起作用。細(xì)胞免疫作用是指結(jié)核菌激活T淋巴細(xì)胞并促使其產(chǎn)生增殖，隨之引起巨噬細(xì)胞的活化，而活化的巨噬細(xì)胞胞體內(nèi)溶酶體酶繼而大量增多，從而起到增強(qiáng)對細(xì)胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。有研究表明，在胸腹水檢測中，結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性無顯著差異[8]。本研究結(jié)果顯示，結(jié)核性腹膜炎組腺苷脫氨酶值較癌性腹水組顯著升高，如以ADA活性40 U/L為臨界值，結(jié)核性腹膜炎中腺苷脫氨酶對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度86.2%，特異度90.9 %，與文獻(xiàn)報道基本一致[9]。

在結(jié)核病患者中，細(xì)胞免疫是結(jié)核分枝桿菌感染后激活機(jī)體的主要免疫機(jī)制，人類抗結(jié)核菌感染后產(chǎn)生的主要免疫效應(yīng)細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞CD4+，其中以輔助T細(xì)胞1（Th1細(xì)胞）為主，Th1細(xì)胞在被結(jié)核菌活化后產(chǎn)生的細(xì)胞因子主要以γ-干擾素為主，有研究表明在結(jié)核性胸膜炎局部免疫應(yīng)答反應(yīng)中占主要地位[10]的是由Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，而Th2細(xì)胞是惡性腫瘤中的主要效應(yīng)細(xì)胞，Th1細(xì)胞活性受抑制，故結(jié)核性胸水中IFN-γ的水平明顯高于癌性胸水，因此胸水中IFN-γ增高對結(jié)核性胸水的診斷效能及意義也非常高。國內(nèi)外有文獻(xiàn)報道，檢測胸液中IFN-γ水平有助結(jié)核性胸腔積液的診斷[11]，由此可推檢測腹水中IFN-γ可能有助于結(jié)核性腹膜炎的診斷。通過該研究實驗發(fā)現(xiàn)，結(jié)核性腹膜炎腹水中γ-干擾素的含量較癌性腹水顯著升高，提示結(jié)核分枝桿菌感染漿膜腔后的機(jī)體免疫應(yīng)答類型存在一致性。同時發(fā)現(xiàn)若以250 ng/L為γ-干擾素的含量的臨界值，對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度和特異度分別為89.7%和81.8%。

本研究結(jié)果顯示，在結(jié)核性腹腔積液中IFN-γ、ADA均明顯升高，二者對診斷結(jié)核的敏感度、特異度均很高，聯(lián)合檢測γ-干擾素（IFN-γ）、腺苷脫氨酶（ADA），對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感性為86.2%，特異性為95.5%，盡管診斷結(jié)核的敏感度相近，但特異度較單項檢測有明顯提高，結(jié)果提示若同時檢測腹液腺苷脫氨酶、γ-干擾素，結(jié)核性腹膜炎的診斷效能可得到極大的提高。綜上所述，在結(jié)核性腹膜炎的診斷與鑒別診斷中，腹水γ-干擾素與ADA兩者均起著重要作用。對于惡性腹腔積液的診斷，二者也能幫助鑒別。因此2項指標(biāo)聯(lián)合檢測大大地提高了結(jié)核性腹腔積液的診斷效能。而且方法簡便、快速，適用于臨床。

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[11] 黃錫坤，黃福達(dá). 干擾素-γ與腺苷脫氨酶聯(lián)合檢測診斷結(jié)核性胸腔積液價值[J]. 中華實用診斷與治療雜志，2013，27（8）：791-792.

（收稿日期：2014-04-11）

結(jié)核性腹膜炎是在結(jié)核分支桿菌感染機(jī)體后侵犯腹膜，隨之而引起的一系列免疫變態(tài)反應(yīng)性疾病，而其中在結(jié)核病免疫中起著中心主導(dǎo)作用的是淋巴細(xì)胞，腺苷脫氨酶（ADA）是嘌呤腺苷分解代謝過程中的一種重要酶類，為特異性催化水解核苷生成肌苷核氨，在人體各器官、組織中廣泛分布，尤其以淋巴細(xì)胞，特別是T淋巴細(xì)胞中含量最高。結(jié)核菌感染機(jī)體后刺激單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)使淋巴細(xì)胞增多，結(jié)核分枝桿菌在感染人體后產(chǎn)生抗體為非保護(hù)性抗體，故在結(jié)核病患者中抗感染免疫仍主要依賴細(xì)胞免疫起作用。細(xì)胞免疫作用是指結(jié)核菌激活T淋巴細(xì)胞并促使其產(chǎn)生增殖，隨之引起巨噬細(xì)胞的活化，而活化的巨噬細(xì)胞胞體內(nèi)溶酶體酶繼而大量增多，從而起到增強(qiáng)對細(xì)胞內(nèi)結(jié)核菌的殺傷作用。有研究表明，在胸腹水檢測中，結(jié)核性胸腹水ADA活性顯著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性無顯著差異[8]。本研究結(jié)果顯示，結(jié)核性腹膜炎組腺苷脫氨酶值較癌性腹水組顯著升高，如以ADA活性40 U/L為臨界值，結(jié)核性腹膜炎中腺苷脫氨酶對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度86.2%，特異度90.9 %，與文獻(xiàn)報道基本一致[9]。

在結(jié)核病患者中，細(xì)胞免疫是結(jié)核分枝桿菌感染后激活機(jī)體的主要免疫機(jī)制，人類抗結(jié)核菌感染后產(chǎn)生的主要免疫效應(yīng)細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞CD4+，其中以輔助T細(xì)胞1（Th1細(xì)胞）為主，Th1細(xì)胞在被結(jié)核菌活化后產(chǎn)生的細(xì)胞因子主要以γ-干擾素為主，有研究表明在結(jié)核性胸膜炎局部免疫應(yīng)答反應(yīng)中占主要地位[10]的是由Th1細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，而Th2細(xì)胞是惡性腫瘤中的主要效應(yīng)細(xì)胞，Th1細(xì)胞活性受抑制，故結(jié)核性胸水中IFN-γ的水平明顯高于癌性胸水，因此胸水中IFN-γ增高對結(jié)核性胸水的診斷效能及意義也非常高。國內(nèi)外有文獻(xiàn)報道，檢測胸液中IFN-γ水平有助結(jié)核性胸腔積液的診斷[11]，由此可推檢測腹水中IFN-γ可能有助于結(jié)核性腹膜炎的診斷。通過該研究實驗發(fā)現(xiàn)，結(jié)核性腹膜炎腹水中γ-干擾素的含量較癌性腹水顯著升高，提示結(jié)核分枝桿菌感染漿膜腔后的機(jī)體免疫應(yīng)答類型存在一致性。同時發(fā)現(xiàn)若以250 ng/L為γ-干擾素的含量的臨界值，對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感度和特異度分別為89.7%和81.8%。

本研究結(jié)果顯示，在結(jié)核性腹腔積液中IFN-γ、ADA均明顯升高，二者對診斷結(jié)核的敏感度、特異度均很高，聯(lián)合檢測γ-干擾素（IFN-γ）、腺苷脫氨酶（ADA），對結(jié)核性腹膜炎診斷的敏感性為86.2%，特異性為95.5%，盡管診斷結(jié)核的敏感度相近，但特異度較單項檢測有明顯提高，結(jié)果提示若同時檢測腹液腺苷脫氨酶、γ-干擾素，結(jié)核性腹膜炎的診斷效能可得到極大的提高。綜上所述，在結(jié)核性腹膜炎的診斷與鑒別診斷中，腹水γ-干擾素與ADA兩者均起著重要作用。對于惡性腹腔積液的診斷，二者也能幫助鑒別。因此2項指標(biāo)聯(lián)合檢測大大地提高了結(jié)核性腹腔積液的診斷效能。而且方法簡便、快速，適用于臨床。

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（收稿日期：2014-04-11）