月乃湯中肉桂的鑒別及桂皮醛的含量測(cè)定

鐘宇富等

摘要：目的：建立月乃湯中肉桂的鑒別和桂皮醛含量測(cè)定方法。方法：進(jìn)行月乃湯的定性鑒別；采用HPLC法對(duì)月乃湯中桂皮醛進(jìn)行含量測(cè)定，色譜條件：Welch Ultimate C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分離；乙腈-水（35：75）為流動(dòng)相；流速為1.0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為290 nm。結(jié)果：月乃湯樣品溶液的薄層色譜中，在與肉桂對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。桂皮醛質(zhì)量濃度在3.52～35.2μg/mL范圍內(nèi)，線形關(guān)系良好，r=0.9998，平均回收率為100.7%，RSD為2.81%。結(jié)論：薄層鑒別試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)月乃湯中有肉桂和桂皮醛；通過HPLC法測(cè)定月乃湯中桂皮醛含量為11.68±2.92μg/mL；本法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，適用于月乃湯中桂皮醛的含量測(cè)定。

關(guān)鍵詞：月乃湯 定性鑒別 桂皮醛 含量測(cè)定 HPLC

中圖分類號(hào)：R151 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）06-0029-02

月乃湯是廣禾堂經(jīng)多年從事女性產(chǎn)后調(diào)理實(shí)踐開發(fā)出的產(chǎn)品，是用來烹煮月子飲食的湯頭。該湯由米之精華液（米酒水提取物）、香櫞、肉桂、干姜、小薊、白芷、甘草組成，能充分結(jié)合食材中的營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)產(chǎn)后女性進(jìn)行滋補(bǔ)調(diào)養(yǎng)。

肉桂具有補(bǔ)火助陽，引火歸元，散寒止痛，溫通經(jīng)脈之功[1]。肉桂的主要成分為桂皮醛、肉桂酸、醋酸苯丙酯、肉桂醇等，桂皮醛具有抗菌、消炎、鎮(zhèn)靜、止痛的功效[2]。本文采用薄層色譜法，進(jìn)行月乃湯中肉桂的鑒別；以乙腈-水為溶劑，建立桂皮醛含量測(cè)定的高效液相色譜法，操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確，穩(wěn)定。

1 儀器與試藥

ZF-20D暗箱式紫外分析儀（上海寶山顧村電光儀器廠）；Dionex Ultimate 3000型高效液相色譜儀（泵ISO-3100SD，助溫箱TCC-3000SD，檢測(cè)器VWD-3100，自動(dòng)進(jìn)樣器WPS-3000SL，色譜工作站Chromeleon Chromatography Data System），Welch Ultimate C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5μm），Sartorius BS110S萬分之一天平（北京賽多利斯天平有限公司）。

肉桂對(duì)照藥材（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)120983-201203）；桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)110710-201217）；乙腈（重慶迪馬，色譜純）；水為娃哈哈純凈水；月乃湯（批號(hào)：20121012、20121114、20121220，廣禾堂草本生物科技（上海）有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜法鑒別[1]

2.1.1 肉桂對(duì)照藥材溶液

取肉桂對(duì)照藥材粉末0.5g，加乙醇10mL，冷浸20分鐘，時(shí)時(shí)振搖，濾過，即為對(duì)照藥材溶液。

2.1.2 桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液

取桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品，加乙醇制成每1mL含1μl的溶液，作為標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.1.3 樣品溶液

取月乃湯批號(hào)20121012、20121114、20121220各20mL，70℃減壓濃縮，稠浸膏加乙醇溶解，微孔濾膜濾過，乙醇定容成10mL。

照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗(yàn)，吸取對(duì)照藥材及樣品溶液2～5μl、標(biāo)準(zhǔn)品溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）- 乙酸乙酯（17：3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%二硝基苯肼乙醇試液。在樣品溶液色譜中，與對(duì)照藥材溶液相應(yīng)的位置上，顯相同的淡紅色斑點(diǎn)；與標(biāo)準(zhǔn)品溶液相應(yīng)的位置上，顯相同的淡紅色斑點(diǎn)。

2.2 含量測(cè)定

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

取桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含35.2μg的溶液，即得。

2.2.2 樣品溶液的制備

取月乃湯100mL，70℃減壓濃縮，稠浸膏加甲醇定容成50mL，0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2.3 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Welch UltimateC18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（35：75）；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：290nm。分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品、樣品溶液各10μL注入液相色譜儀，理論塔板數(shù)以桂皮醛計(jì)不低于3000；桂皮醛的拖尾因子為0.97，保留時(shí)間約為16min，與其他組分峰的分離度大于1.5。見圖1。

2.2.4 線性關(guān)系的考察

精密吸取桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液1、2、3、4、5、7.5 mL，分別置于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，得系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液。精密吸取上述各標(biāo)準(zhǔn)品溶液20μL，分別進(jìn)樣2次，測(cè)定峰面積。以桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸分析，得回歸方程Y=1.6136X+0.1746，r=0.9998。結(jié)果表明桂皮醛質(zhì)量濃度在3.52～35.2μg/mL范圍內(nèi)，濃度與峰面積線性關(guān)系良好。

2.2.5 精密度試驗(yàn)

精密吸取質(zhì)量濃度為17.6μg/mL的桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品溶液20μL，按“2.2.3”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣8次，記錄峰面積并計(jì)算。結(jié)果桂皮醛峰面積RSD為0.86%，表明儀器精密度良好。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)（批號(hào)20121114）月乃湯5份，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備樣品溶液，按“2.2.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果桂皮醛平均質(zhì)量含量為11.37μg/mL，RSD值為4.92%。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液20μL，分別于0、1、2、4、8 h進(jìn)樣，測(cè)定峰面積。結(jié)果桂皮醛峰面積RSD為1.21%，表明樣品溶液在8h內(nèi)基本穩(wěn)定。

2.2.8 加樣回收率試驗(yàn)

取20121114批次月乃湯100mL，加入一定量的桂皮醛標(biāo)準(zhǔn)品，70℃減壓濃縮，稠浸膏加甲醇定容成50 mL，0.45μm微孔濾膜濾過，按“2.3”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率（%）。結(jié)果見表1。

3 討論與結(jié)論

肉桂作為傳統(tǒng)的中藥材，含有豐富的活性成分，對(duì)消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)疾病具有良好的療效，具有鎮(zhèn)痛、抗菌和抗腫瘤等作用，為《中華人民共和國(guó)藥典》收載品種。同時(shí)，肉桂在食品和日用化工產(chǎn)品方面用途較為廣泛[3]。

本文通過高效液相色譜方法測(cè)定月乃湯中桂皮醛的含量，對(duì)流動(dòng)相的組成，流速等條件進(jìn)行了比較，確定以乙腈-水（35：75）為流動(dòng)相，流速1.0mL/min為色譜條件時(shí)，桂皮醛的分離效果好，分離度大于1.5。桂皮醛檢測(cè)波長(zhǎng)選擇有不同的文獻(xiàn)報(bào)道[4-6]，本文用乙腈-水（35：75）作為溶劑，采用分光光度法進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，測(cè)得在290nm處有最大吸收。

該方法操作簡(jiǎn)單，線性關(guān)系好、精密度高、重復(fù)性好，可以作為月乃湯的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

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