自噬與神經(jīng)退行性疾病

姜 凌 常 誠(chéng)

自噬是細(xì)胞通過(guò)單層或雙層膜包裹待降解物形成自噬體，然后運(yùn)送到溶酶體形成自噬溶酶體并進(jìn)行多種酶的消化及降解，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新，細(xì)胞對(duì)這種合成與降解的精細(xì)調(diào)節(jié)，對(duì)維持細(xì)胞的自身穩(wěn)態(tài)有重要意義。自噬分為三種類型：巨自噬、微自噬、分子伴侶介導(dǎo)的自噬。細(xì)胞的自噬清除或降解異常聚集的蛋白對(duì)神經(jīng)退行性疾病有重要作用。

19世紀(jì)50年代末在電子顯微鏡研究溶酶體時(shí)發(fā)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物的自噬，當(dāng)時(shí)自噬體并沒(méi)有與溶酶體結(jié)合起來(lái)，只是被單純地定義為一個(gè)內(nèi)含未降解胞質(zhì)的雙側(cè)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)［1］。1962年Ashford和Porten通過(guò)在肝灌流液中加入高血糖素，發(fā)現(xiàn)肝細(xì)胞的溶酶體增多，并發(fā)生自食現(xiàn)象［2］。之后很長(zhǎng)時(shí)間自噬并沒(méi)有引起人們的關(guān)注。直到隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，20世紀(jì)90年代首先在酵母中發(fā)現(xiàn)了參與自噬的分子機(jī)制，隨后在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)有相似機(jī)制，自噬的研究才有了重大進(jìn)步。自噬是廣泛存在于真核細(xì)胞中的生命現(xiàn)象，貫穿于正常細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和生理病理過(guò)程，能清除細(xì)胞內(nèi)過(guò)量或受損細(xì)胞器和蛋白質(zhì)，參與抗原提呈及抵抗微生物胞內(nèi)感染，對(duì)于維持蛋白質(zhì)代謝平衡及細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定起重要作用，對(duì)防止如神經(jīng)退行性病變、腫瘤、心肌病、病原微生物侵入感染等疾病以及對(duì)防止老化、延長(zhǎng)壽命有積極作用［3］。本研究就細(xì)胞自噬與神經(jīng)退行性疾病的相互關(guān)系以及如何調(diào)控細(xì)胞的自噬做個(gè)綜述。

1 自 噬

1.1 自噬的概念

自噬是細(xì)胞通過(guò)單層或雙層膜包裹待降解物形成自噬體，然后運(yùn)送到溶酶體形成自噬溶酶體并進(jìn)行多種酶的消化及降解，以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞本身的代謝需要和某些細(xì)胞器的更新，細(xì)胞對(duì)這種合成與降解的精細(xì)調(diào)節(jié)，對(duì)維持細(xì)胞的自身穩(wěn)態(tài)有重要意義［3］。自噬主要分為4個(gè)環(huán)節(jié)：即底物誘導(dǎo)自噬前體的形成、自噬體形成、自噬體與溶酶體融合和自噬體內(nèi)容物被降解［4］。自噬也是細(xì)胞對(duì)內(nèi)外界環(huán)境壓力變化的一種反應(yīng)，在某些情況下自噬還可導(dǎo)致細(xì)胞死亡，被認(rèn)為是區(qū)別于細(xì)胞凋亡（I型程序性死亡）的另一種細(xì)胞程序性死亡形式（Ⅱ型程序性死亡）［5］。

1.2 自噬的分類

自噬的過(guò)程中自噬體的形成是關(guān)鍵［6］。自噬被誘導(dǎo)后細(xì)胞開(kāi)始在胞漿中形成300～900 nm大小的雙層膜，其雙層膜包囊泡內(nèi)常見(jiàn)的包含物有胞漿成分和某些細(xì)胞器如線粒體、內(nèi)吞體、過(guò)氧化物酶體等［7］。根據(jù)待降解物質(zhì)進(jìn)入溶酶體途徑不同，通常將自噬分為三種類型：巨自噬、微自噬及分子伴侶介導(dǎo)的自噬，與巨自噬和微自噬比較，分子伴侶介導(dǎo)的自噬的主要特點(diǎn)是細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的蛋白質(zhì)直接經(jīng)溶酶體膜轉(zhuǎn)運(yùn)入溶酶體腔，不需形成自噬體［8］。

1.3 自噬的發(fā)生過(guò)程

20世紀(jì)90年代人們通過(guò)利用酵母模式來(lái)研究自噬，迄今為止二十余個(gè)與自噬有關(guān)的基因被發(fā)現(xiàn)，其中將近一半的基因在果蠅、線蟲(chóng)、哺乳動(dòng)物等多細(xì)胞物種中都十分保守［9］?，F(xiàn)已被統(tǒng)一命名為酵母自噬相關(guān)基因ATG。而哺乳動(dòng)物自噬基因的命名與酵母相似，但也存在個(gè)別差異，如酵母的Atg8在哺乳動(dòng)物稱為L(zhǎng)C3，酵母的Atg6在哺乳動(dòng)物則稱為Beclinl［1］。自噬在相關(guān)條件刺激下可以被誘導(dǎo)，除了饑餓誘導(dǎo)，細(xì)胞自噬也可以在其他條件下被激活。如生理壓力刺激下 （如低氧、能量缺失、高溫、胞質(zhì)成分積聚、高密度條件）、激素作用、藥理成分作用（如雷帕霉素）、自身免疫行為、某些疾病的刺激如病毒、細(xì)菌、寄生蟲(chóng)感染、急性胰腺炎、心臟病以及蛋白質(zhì)聚集［1］。

酵母自噬體的發(fā)生過(guò)程可分為（1）自噬的誘導(dǎo)：雷帕霉素作用的靶位點(diǎn)（TOR）是氨基酸、ATP和激素的感受器，在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和自噬的發(fā)生過(guò)程有門控作用。Beclin－1可促進(jìn)酵母細(xì)胞中的自噬作用；此外，GDP結(jié)合的G蛋白亞基Gαi3是自噬的活化因子，高濃度c AMP也會(huì)誘導(dǎo)自噬的發(fā)生；（2）自噬體的形成：在酵母中發(fā)現(xiàn)此過(guò)程依賴于兩個(gè)泛素樣結(jié)合系統(tǒng)Atgl2－Atg5和Atg8系統(tǒng)。這種蛋白系統(tǒng)的高度保守性已被實(shí)驗(yàn)證明，在人類發(fā)現(xiàn)的自噬基因有Beclin－1，h Atg5，h Atgl2。1）Atg5－Atg12系統(tǒng)：首先 Atg7（E1樣酶）將ATP連接到Atg12甘氨酸殘基羧基端上，然后將其傳遞給Atg10（E2樣酶）；Atg10使Atg12與 Atg5共價(jià)結(jié)合；Atg5－Atg12復(fù)合體與成對(duì)的Atg16L二聚體共同形成Atg5－Atg12－Atg16L多聚體，此多聚體能使 LC3－Ⅱ不對(duì)稱的結(jié)合于自噬體膜內(nèi)外，從而使自噬體膜彎曲延伸；一旦自噬體完全形成后多聚體即脫落；2）LC3／Atg8系統(tǒng)：在Atg4作用下LC3形成LC3－Ⅰ并暴露出羧基端甘氨酸殘基；LC3－Ⅰ在Atg7和Atg3（E2樣酶）的作用下與磷脂酰乙醇胺（PE）結(jié)合形成LC3－Ⅱ，磷脂化后的LC3－Ⅱ緊密附著于自噬體膜上，伴隨著自噬體內(nèi)涵體、溶酶體融合［10］；（3）自噬體的運(yùn)輸、融合：Rho家族涉及細(xì)胞骨架，與自噬體的運(yùn)輸有關(guān)。自噬體的融合機(jī)制與SNARE蛋白 Vam3，Vam7，Vtil，Sec19等密切相關(guān)。Atg7p通過(guò)Atg2p附著于微管Aut2p，并與導(dǎo)管素Tublp，Tub2p相互作用，完成自噬體向溶酶體的運(yùn)輸；（4）自噬體的裂解：在此起重要作用的有Atgl5和Atg22，Atgl5通過(guò)多囊泡小體途徑向小囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)，這種蛋白最終起著脂肪酶相似的作用。與Atg15相比，Atg22是一種囊泡內(nèi)膜蛋白，其只對(duì)自噬體降解起作用［11］。

2 自噬與神經(jīng)退行性疾病

有人通過(guò)敲除小鼠大腦的 Atg5［12］與 Atg7［13］基因，發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)大量神經(jīng)元退化而死亡，泛素化蛋白包涵體的堆積增多。絕大多數(shù)神經(jīng)退行性疾病共同病理特征是神經(jīng)元內(nèi)存在易聚集蛋白，如突變的α－突觸核蛋白（α－synuclein）、淀粉樣前體蛋白、Tau蛋白、Huntingtin蛋白等，它們對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生毒性作用，最終導(dǎo)致神經(jīng)元的死亡，從而出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀。Williams等研究證實(shí)，突變的易聚集蛋白主要靠自噬清除［14］。而神經(jīng)元的死亡是不可逆的，所以細(xì)胞的自噬清除或降解異常聚集的蛋白對(duì)這些疾病就有重要的作用。

2.1 神經(jīng)退行性疾病

神經(jīng)退行性疾病是一類由于神經(jīng)元進(jìn)行性變性死亡，導(dǎo)致人體中樞神經(jīng)系統(tǒng)等受損，影響患者的認(rèn)知功能和運(yùn)動(dòng)功能，包括阿爾茨海默AD、亨廷頓病HD、帕金森病PD等。

2.1.1 阿爾茲海默病AD

阿爾茨海默?。ˋD）是一種老年人中常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，起病隱襲，是老年期癡呆最常見(jiàn)的類型，主要表現(xiàn)為緩慢進(jìn)展的記憶力下降，言語(yǔ)、視空間和認(rèn)知功能障礙。AD的病理改變主要表現(xiàn)為細(xì)胞外的神經(jīng)炎性斑，細(xì)胞內(nèi)的神經(jīng)原纖維纏結(jié)和海馬神經(jīng)元丟失。炎性斑主要是一命名為β淀粉樣蛋白（Aβ）的異常折疊后聚集所形成，而神經(jīng)原纖維纏結(jié)（NFTs）則是命名為tau的細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白的高度磷酸化后的聚集體。臨床上通過(guò)研究AD患者的腦皮層活檢標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)自噬小體及其他前溶酶體自噬小泡顯著增加［15］。

2.1.2 帕金森病PD

帕金森病又稱震顫麻痹，是以靜止性震顫、肌強(qiáng)直、運(yùn)動(dòng)遲緩及姿勢(shì)步態(tài)異常為臨床特征的神經(jīng)變性疾病，特點(diǎn)是黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元的進(jìn)行性、廣泛性丟失。Polymeropoulos等對(duì)一個(gè)意大利Contursi家族（常染色體顯性遺傳）進(jìn)行家系連鎖分析，這個(gè)家系患者的臨床表現(xiàn)符合典型的PD，病理檢查發(fā)現(xiàn)路易小體（Lewybody）［16］。研究發(fā)現(xiàn)PD是以細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)主要含有聚集α－突觸核蛋白的包涵體－lewy小體（LBs）為病理標(biāo)志的神經(jīng)變性疾病。黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的死亡與包涵體－lewy小體中的α－突觸核蛋白的累積有關(guān)。

2.1.3 亨廷頓病（HD）

HD是一種遲發(fā)性神經(jīng)退行性遺傳病，該病主要侵害基底節(jié)和大腦皮質(zhì)，屬常染色體顯性遺傳性疾病。致病基因?yàn)镮T－15，由IT－15基因編碼的蛋白（由3144個(gè)氨基酸組成）被命名為亨廷頓蛋白（Htt）。從Htt氨基末端第17位氨基酸殘基開(kāi)始有一段重復(fù)的CAG序列，該序列重復(fù)次數(shù)大于35就會(huì)產(chǎn)生HD病癥。HD的主要病理改變是在中樞神經(jīng)的神經(jīng)元中出現(xiàn)由突變的Htt（m HTT）形成的包涵體和聚集體，其主要成分是由含延長(zhǎng)Poly Q的Htt多片段聚集形成的纖維狀蛋白質(zhì)，從而導(dǎo)致神經(jīng)元變性丟失、認(rèn)知進(jìn)行性損害、舞蹈樣不自主運(yùn)動(dòng)等改變［17］。所以，也有把HD定義為一種蛋白質(zhì)異常折疊性疾病。

2.2 自噬相關(guān)基因與神經(jīng)退行性疾病

在AD早期進(jìn)程中Beclin－1作為自噬中的重要角色，在受病變影響的區(qū)域中是減少的。在AD轉(zhuǎn)基因鼠體內(nèi)Beclin－1表達(dá)水平降低70%，神經(jīng)元自噬減少，溶酶體裂解，細(xì)胞內(nèi)外Aβ累積增加，加劇了神經(jīng)元變性［18］。在表達(dá)淀粉樣蛋白前提蛋白（APP）的轉(zhuǎn)基因小鼠中基因性的Beclin－1表達(dá)的減少增加了神經(jīng)元內(nèi)淀粉樣蛋白的聚集；反之，如果我們上調(diào)Beclin－1水平，增加其表達(dá)，相應(yīng)的神經(jīng)元內(nèi)淀粉樣蛋白的聚集就會(huì)減少。PINK1作為PD的一種致病基因，在常染色體隱性遺傳PD中發(fā)生突變，在此之前正常的全長(zhǎng)的PINK1與Beclin－1相互作用，作為一個(gè)正性介質(zhì)，調(diào)節(jié)細(xì)胞的自噬，而突變后的PINK1（突變位點(diǎn)位于 W437X）使Beclin－1的活性下降，抑制了自噬。常染色體隱性遺傳的PD中突變的另一種基因Parkin，作為功能失調(diào)線粒體的選擇性自噬信號(hào)而出現(xiàn)［19］。而在HD中可發(fā)現(xiàn)自噬分隔膜中Htt大量聚集，在動(dòng)物模型中通過(guò)乳胞素或敲除Beclin－1基因阻斷自噬，可增加Htt的聚集［20］。研究表明，突變亨廷頓（Htt）的轉(zhuǎn)錄后修飾，增加賴氨酸殘基444乙?；纱龠M(jìn)突變Htt形成自噬體，這大大提高了巨噬清除蛋白突變體的作用。

2.3 自噬的調(diào)控與神經(jīng)退行性疾病

自噬的調(diào)控有以下幾個(gè)途徑，即（1）m TOR途徑：TOR激酶對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有重要調(diào)節(jié)作用哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的核糖體蛋白質(zhì)S6（p70S6）抑制自噬的發(fā)生，它位于TOR信號(hào)途徑下游，其活性受m TOR調(diào)節(jié)。雷帕霉素通過(guò)抑制m TOR的活性，發(fā)揮抑制p70S6活性、誘導(dǎo)自噬發(fā)生的作用。在酵母細(xì)胞TOR激酶可能通過(guò)抑制ATG1激酶的活性來(lái)抑制自噬的發(fā)生；（2）ClassⅠ PI3K／PKB途徑：ClassⅠ PI3K是自噬的負(fù)調(diào)節(jié)分子，它可去磷酸化PtdIns4P和PtdIns（4，5）P2，生成PtdIns（3，4）P2和 PtdIns（3，4，5）P3，然后結(jié)合Akt／PKB和它的活化分子PDK1，抑制自噬的發(fā)生。結(jié)節(jié)性硬化復(fù)合物1（TSC1）和TSC2蛋白位ClassI PI3K／PKB途徑的下游，可通過(guò)抑制小G蛋白R(shí)heb，抑制TOR激酶的活性，對(duì)自噬發(fā)揮正向調(diào)節(jié)作用。PTEN磷酸酶也是自噬的正向調(diào)節(jié)分子，它使PtdIns（3，4，5）P3去磷酸化，從而解除ClassI PI3K／PKB途徑對(duì)自噬的抑制；（3）Gαi3蛋白途徑：GTP結(jié)合的G蛋白亞基Gαi3是自噬的抑制因子，而GDP結(jié)合的Gαi3蛋白則是自噬的活化因子。GAIP作為RGS家族成員之一，通過(guò)Gαi3蛋白加速GTP的水解，促進(jìn)自噬的發(fā)生。另外，AGS3也能正向調(diào)控自噬效應(yīng)。氨基酸作為自噬過(guò)程蛋白降解物的終產(chǎn)物，可負(fù)性反饋調(diào)節(jié)自噬。外源性氨基酸的去除可以阻斷TOR信號(hào)途徑，而自噬產(chǎn)生的內(nèi)源性氨基酸可補(bǔ)足氨基酸缺陷，恢復(fù)TOR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)；（4）其他途徑：激素在自噬的調(diào)控中也起重要作用。胰島素可抑制自噬，而胰高血糖素則促進(jìn)自噬。酪氨酸激酶受體、PKA、casein激酶Ⅱ、MAP激酶、calcium也存在于自噬過(guò)程錯(cuò)綜復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中，但其機(jī)制還不甚清楚［21］。

對(duì)于神經(jīng)退行性疾病，自噬可以清除積聚的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)外錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)，可降低神經(jīng)功能的損害，而有些小分子誘導(dǎo)劑可以誘導(dǎo)自噬，通過(guò)上調(diào)自噬水平，達(dá)到治療神經(jīng)退行性疾病的目的。如雷帕霉素，它是一種親脂性大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，作用的一個(gè)下游靶點(diǎn)m TOR是一種分子質(zhì)量為289ku的絲／蘇氨酸蛋白激酶，是磷脂酰肌醇激酶3／蛋白激酶B（PI3K／Akt）和絲／蘇氨酸激酶11（LKB1）能量敏感型通路的節(jié)點(diǎn)［22］；另一個(gè)下游靶點(diǎn)是空泡膜蛋白1（VMP1），后者可募集微管相關(guān)蛋白LC3［23］；還有一種作為雷帕霉素的受體的親免蛋白，如FKBP，分子質(zhì)量小，易于通過(guò)血腦屏障，對(duì)神經(jīng)起到保護(hù)作用［24］。雷帕霉素通過(guò)這三者調(diào)控著自噬。研究發(fā)現(xiàn)鋰鹽也具有降低突變蛋白的聚集和細(xì)胞死亡率作用，引起哺乳細(xì)胞的細(xì)胞自噬［25］。用鋰鹽處理發(fā)現(xiàn)能夠有效地清除可溶性的HDQ74（huntingtin poly Q突變體），并且減少HDQ74的聚集，而且對(duì)α－synucleins具有相同的作用。研究表明鋰鹽通過(guò)抑制IMPase活性，致inositol和IP3的減少，產(chǎn)生細(xì)胞自噬的作用，在加入肌醇和PEI后IP3的含量提高，自噬作用也被同時(shí)減弱，說(shuō)明鋰鹽引起細(xì)胞自噬的作用主要是由IP3的含量進(jìn)行調(diào)控的。同樣具有調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)IP3含量的藥物如2－苯基戊酸納、氨酰咪嗪也具有引起細(xì)胞自噬的作用。此外，鋰鹽通過(guò)抑制IMPase引起的細(xì)胞自噬作用并不依賴于對(duì)m TOR的抑制，而且當(dāng)鋰鹽和雷帕霉素一起作用時(shí)能夠提高清除huntingtin和α－synucleins突變體的作用，說(shuō)明兩種作用途徑具有協(xié)同作用［26］。另外，最近有研究發(fā)現(xiàn)海藻糖也有清除突變的huntingtin蛋白和α－synuclein蛋白的能力，并且阻止隨后發(fā)生的細(xì)胞凋亡，其引起自噬的具體機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

3 結(jié)束語(yǔ)

隨著社會(huì)老齡化趨勢(shì)越來(lái)越嚴(yán)重，神經(jīng)退行性疾病發(fā)病率日益增加，目前的治療很難根治神經(jīng)退行性疾病。雖然目前對(duì)細(xì)胞的自噬的研究尚處于初級(jí)階段，但自噬對(duì)于神經(jīng)退行性疾病的重要性不可或缺。我們可以通過(guò)應(yīng)用本研究中提到的一些小分子誘導(dǎo)劑以及激活自噬的有利條件（如饑餓）等，誘導(dǎo)細(xì)胞的自噬，上調(diào)自噬水平，從而清除更多的異常積聚的蛋白質(zhì)，爭(zhēng)取達(dá)到治愈神經(jīng)退行性疾病的目的。但是，需要注意的是，自噬是一把雙刃劍，既參與降解異常蛋白質(zhì)，有利于防止神經(jīng)元內(nèi)異常蛋白質(zhì)的蓄積；另一方面，如果自噬過(guò)度活躍會(huì)損傷細(xì)胞器，如造成線粒體功能障礙，過(guò)度激活自噬體可能會(huì)加速神經(jīng)退行性疾病的致病過(guò)程［3］。總之，通過(guò)調(diào)節(jié)自噬來(lái)治療神經(jīng)退行性疾病，甚至是更多的其他疾病（如腫瘤、心肌病、病原微生物侵入感染）有廣闊的前景，但仍然需要大量的臨床試驗(yàn)。

1 Mizushima1 N，Yoshimorim T，LevineCell B.Methods in Mammalian Autophagy Research.Cell，2010，140（3）：313－326.

2 Ashford TP，Porter KR.J Cell Biol，1962，12：198－202.

3 Shintani T，Klionsky DJ.Autophagy in health and disease：a dourble－edgeds word.Science，2004，306（5698）：990－995.

4 Reggiori F，Klionsky DJ.Autophagy in the eukaryotic cell.Eukaryotic Cell，2002，1（1）：11－21.

5 Bras M，Queenan B，Susin SA.Programmed cell death via mitochondria：different modes of dying.Biochemistry（Mosc），2005，70（2）：231－239.

6 張發(fā)仁，許麗艷，沈忠英，等.自噬的概述.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2005，18（4）：250－252.

7 Mizushima N，Ohsumi Y，Yoshimori T.Autophagosome formation in mammalian cells.Cell Struct Funct，2002，27（6）：421－429.

8 王海杰，譚玉珍.細(xì)胞自噬的形態(tài)學(xué)特征和功能意義.解剖學(xué)報(bào)，2009，10（5）：844－849.

9 Klionsky DJ.Cell biology：regulated selfcannibalism.Nature，2004，431（7004）：31－32.

10 楊 志，趙 斌，自噬與神經(jīng)退行性疾病.海南醫(yī)學(xué)，2011，22（4）：119－122.

11 張志才，邵增務(wù).自噬分子機(jī)制的研究進(jìn)展.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，8（1）：177－179.

12 H ara T，Nakam ura K，M atsu iM，et al.Suppression of basal autophagy in neural cells causes neurodegenerative disease in mice.Nature，2006，441（7095）：885－889.

13 Komtsu M，Waguri S，Chiba T，et al.Loss of autophagy in the central nervous system causes neurodegeneration in mice.Nature，2006，441（7095）：880－884.

14 Williams A，Sarkar S.Novel targets for Huntington’s disease in an m TOR independent autophagy pathway.Nat Chem Biol，2008，4（5）：295－305.

15 Nixon RA，Wegiel J，Kumar A，et al.Extensive involvement of autophagy in Alzheimer disease：an immuno－electron microscopy study.Neuropathol Exp Neurol，2005，64（2）：113－122.

16 Polymeropoulos MH ，Lavedan C，Leroy E，et al.Mutation in the alpha－synuelein gene identified in families with Parkinson＇s disease.Science，1997，276（5321）：2045－2047.

17 Kegel KB，Kim M，Sapp E，et al.Huntingtin expression stimulates endosomal－lysosomal activity，endosome abulation，and autophagy.J Neurosci，2000，20（19）：7268－7278.

18 Spencer B，Potkar R，Trejo M，et al.Beclin 1 gene transfer activates autophagy and ameliorates the neurodegenerative pathology in alpha－synuclein models of Parkinson＇s and Lewy body disea－ses.J Neurosci，2009，29（43）：13578－13588.

19 Narendra D，Tanaka A，Suen DF，et al.Parkin is recruited selectively to impaired mitochondria and promotes their autophagy.J Cell Biol，2008，183（5）：795－803.

20 Shibata M，Lu T，F(xiàn)uruya T，et al.Regulation of in tracellular accumulation of mutant Huntingtin by Beclin 1.J BiolChem，2006，281（20）：14474－14485.

21 鄧錦波，牛艷麗，皇甫超申，等.神經(jīng)細(xì)胞凋亡在腦發(fā)育和神經(jīng)退行性疾病中的作用.醫(yī)學(xué)研究雜志，2012，39（8）：9－16.

22 Xiaolin Wan，Helman LJ.The biology behind m TOR inhibition in sarcoma.Oncologist，2007，12（8）：1007－1018.

23 Ropolo A，Grasso D，Pardo R，et al.The pancreatitis－induced vacuole membrane protein 1 triggers autophagy in mammalian cells.J Biol Chem，2007，282（51）：37124－37133.

24 Jin S，WhiteE.Role of autophagy in cancer：management of metabolic stress.Autophagy，2007，3（1）：28－31.

25 Manji HK，Lenox RH.Neuropsychopharmacology，1998，19（3）：161－166.

26 楊雯雋，溫龍平.小分子細(xì)胞自噬誘導(dǎo)劑用于治療神經(jīng)退行性疾病.化學(xué)進(jìn)展，2007，19（12）：2012－2016.