• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    樂胃飲顆粒制備工藝研究

    2013-12-31 00:00:00汪靜宜朱飛葉徐珊
    中國現(xiàn)代醫(yī)生 2013年13期

    [摘要] 目的 研究樂胃飲顆粒的水提醇沉制備工藝。 方法 以尿囊素、陳皮苷含量和浸膏得率為考察指標,通過L9(34)正交實驗設(shè)計優(yōu)選水提工藝條件,并單因素考察醇沉質(zhì)量分數(shù),以確定樂胃飲顆粒的最佳制備工藝。 結(jié)果 水提工藝影響因素依次為:提取時間(C)>提取次數(shù)(D)>加水量(B)>浸泡時間(A),最佳水提工藝條件為A3B3C1D2,即處方藥材加10倍量水、浸泡1.5 h、提取2次、提取時間為1 h。醇沉質(zhì)量分數(shù)以75%為佳。 結(jié)論 該制備工藝合理,有效成分提取率高。

    [關(guān)鍵詞] 樂胃飲顆粒;正交設(shè)計;尿囊素;陳皮苷;高效液相色譜法

    [中圖分類號] R283 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701(2013)13-0094-03

    樂胃飲顆粒由臨床經(jīng)驗效方化裁而來,是以山藥、薏苡仁、陳皮等中藥組成的純中藥制劑,具有健脾益氣、疏肝理氣的功效,臨床用于治療腸易激綜合征(IBS)、功能性消化不良(FD)等消化道疾病。然而,傳統(tǒng)水煎方法不僅耗時,而且煎煮方法難以規(guī)范。因此,為了優(yōu)化制備工藝,使之服用方便,并進行有效的質(zhì)量控制,確保臨床療效,我們采用水提醇沉制備工藝,并用正交實驗法和單因素考察方法對其進行了研究。

    1 材料

    日本島津高效液相色譜儀;G02色譜工作站(綠綿安特分析系統(tǒng)裝備公司);尿囊素對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號111501-200202);陳皮苷對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號110721-200613);處方中所有藥材均由浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二門診部提供,經(jīng)鑒定符合中國藥典2005年版一部標準;甲醇(色譜純);乙腈(色譜純);水(純化水);實驗所用其他試劑為分析純。

    2 制備方法

    取藥材山藥60 g、薏苡仁60 g、陳皮30 g,將1/4山藥粉碎成細粉(6號篩)備用,其余藥材加水提取2次,第1次加10倍量水,浸泡90 min,提取60 min,第2次加8倍量水提取30 min,合并兩次煎液,過濾,濾液減壓濃縮至0.8 g/mL的清膏。取清膏,攪拌加入95%的乙醇,使乙醇最終濃度為75%,靜置48 h,取上清液,濾過,濾液減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.35(70~80℃)的稠膏,按等量遞加法加入山藥粉末,混勻、制粒、過篩,70℃干燥,分裝即得。

    3 制備工藝

    3.1 水提工藝條件

    3.1.1 正交實驗設(shè)計 為了符合中醫(yī)湯劑的特點,保持處方中水溶性成分的有效性,本實驗在制備工藝上采取水提醇沉法??紤]到浸泡時間(A)、加水量(B)、提取時間(C)、提取次數(shù)(D)是與提取效果相關(guān)的主要因素,因此,水提工藝的考察對象是以上4因素,以尿囊素、陳皮苷含量和浸膏得率為評價指標得出綜合評分,按L9(34)正交實驗設(shè)計優(yōu)選樂胃飲顆粒最佳水提工藝條件。因素水平見表1。

    3.1.2 浸膏得率的測定 用L9(34)正交表安排試驗,稱取2倍處方量藥材90 g,按設(shè)定方案進行煎煮、濾過、濃縮,定容至100 mL。精密吸取20 mL,放置到蒸發(fā)皿中(已干燥至恒重),水浴揮干,并在105℃烘箱內(nèi)干燥3 h,置干燥器中冷卻0.5 h,迅速稱重W,按下式計算浸膏得率,結(jié)果見表4。

    浸膏得率(%)=■×100%

    3.1.3 尿囊素含量的測定 ①色譜條件 色譜:HypersilBDS C18,4.6 mm×250 mm;流動相:甲醇-氯仿-水(0.2:0.012:100);流速:0.6 mL/min;柱溫:30℃;檢測波長:224 nm;進樣量:20 μL;檢測靈敏度為0.01AUFS。①對照品溶液的制備 取尿囊素對照品,精密稱取5 mg,放置于5 mL量瓶中,加熱水(50℃)溶解并稀釋至刻度,制成1.0 mg/mL的溶液,備用。③標準曲線的制作 精密取對照品儲備液適量,加重蒸水稀釋成(0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125)mg/mL的溶液。精密吸取上述對照品溶液20 μL進樣,按上述色譜條件測定,以尿囊素峰面積(Y)為縱坐標,進樣量(X)為橫坐標,進行線性回歸,得回歸方程:Y = 395.95 X+89.331,相關(guān)系數(shù)r = 0.9995,結(jié)果表明,尿囊素在0.25~4 μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。④供試品溶液的制備 精密取樣品溶液10 mL,精密加入10 mL甲醇,超聲30 min,離心15 min(4000 r/min),取上清液,濃縮至干,用重蒸水溶解并定容至10 mL量瓶中,用0.45 μm微孔濾膜濾過,即得。⑤陰性樣品溶液的制備 按處方比例及供試品溶液制備方法配制缺山藥的陰性樣品溶液。分別精密量取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各20 μL注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積,根據(jù)上述回歸方程計算尿囊素含量。陰性樣品色譜無干擾。見圖1。⑥精密度試驗 精密吸取同一樣品溶液,連續(xù)進樣5次,在上述色譜條件下測定,并按上述回歸方程測定峰面積,計算RSD=1.74%,表明精密度良好。⑦穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一樣品溶液,在上述色譜條件下于0、2、4、6、8、10 h分別進樣。測定峰面積,計算RSD=3.80%(n = 6),表明樣品在10 h內(nèi)是穩(wěn)定的。⑧重復(fù)性試驗 取樣品溶液5份,按樣品溶液制備方法操作,測定其峰面積,計算RSD=4.44%(n = 5)。⑨加樣回收率試驗 將高、中、低含量的尿囊素對照品分別加入精密稱取的已知含量的3份樣品中,充分混勻,按上述色譜條件測定,每份樣品測定3次,計算平均回收率及RSD,結(jié)果見表2。⑩樣品含量測定 按正交設(shè)計制備9份樣品,精密取樣品適量,按上述色譜條件測定,每一樣品測定3次,記錄峰面積平均值,代入回歸方程計算尿囊素含量,結(jié)果見表4。

    3.1.4 陳皮苷含量的測定 ①色譜條件 色譜柱:HypersilBDS C18,4.6 mm×250 mm;流動相:乙腈-水-磷酸(20:80:0.1);流速:1 mL/min;柱溫:30℃;檢測波長:283 nm;進樣量:20 μL;檢測靈敏度為0.01AUFS。②對照品溶液的制備 精密稱取陳皮苷對照品10 mg,置5mL量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,制成2.0 mg/mL的溶液,備用。③標準曲線的制作 精密取對照品儲備液適量,加甲醇稀釋成(0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125)mg/mL的溶液。精密吸取上述對照品溶液20 μL進樣,按上述色譜條件測定,以陳皮苷峰面積(Y)為縱坐標,進樣量(X)為橫坐標,進行線性回歸,得回歸方程:Y = 1798.5 X + 3.2237,相關(guān)系數(shù)r=0.9999,結(jié)果表明,陳皮苷在0.25~4 μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。④供試品溶液的制備 精密取樣品溶液5 mL,精密加入20 mL甲醇,超聲30 min,離心15 min(4000 r/min),取上清液,用0.45 μm微孔濾膜濾過,即得。⑤陰性樣品溶液的制備 按處方比例及供試品溶液制備方法配制缺陳皮的陰性樣品溶液。分別精密量取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各20 μL注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積,根據(jù)上述回歸方程計算陳皮苷含量。陰性樣品色譜無干擾。見圖2。⑥精密度試驗 精密吸取同一樣品溶液,連續(xù)進樣5次,在上述色譜條件下測定,并按上述回歸方程測定峰面積,計算RSD=3.0%,表明精密度良好。⑦穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一樣品溶液,在上述色譜條件下于0、2、4、6、8、24h分別進樣。測定峰面積,計算RSD=2.76%(n = 6),表明樣品在24h內(nèi)是穩(wěn)定的。⑧重復(fù)性試驗 取樣品溶液5份,按樣品溶液制備方法操作,測定其陳皮苷峰面積,計算RSD=3.65%(n = 5)。⑨加樣回收率試驗 將高、中、低含量的陳皮苷對照品分別加入精密稱取的已知含量的3份樣品中,充分混勻,按上述色譜條件測定,每份樣品測定3次,計算平均回收率及RSD,結(jié)果見表3。⑩樣品含量測定 按正交設(shè)計制備9份樣品,精密取樣品適量,按上述色譜條件測定,每一樣品測定3次,記錄峰面積平均值并計算陳皮苷含量,結(jié)果見表4。

    由表4、表5可見,以浸膏得率為考察指標,浸膏得率越低者越佳,由表中極差R值大小顯示,各因素作用主次為C>D>B>A,以A3B1C1D1為佳。以尿囊素含量為考察指標,由表中極差R值大小顯示,各因素作用主次為B>A>D>C,以A3B3C1D2為佳。以陳皮苷含量為考察指標,由表中極差R值大小顯示,各因素作用主次為D>A>B>C,以A2B3C3D2為佳。實際生產(chǎn)中應(yīng)盡量提高有效成分的含量,故以綜合評分為考察指標,由表中極差R值大小顯示,各因素作用主次為A>B>D>C;方差分析結(jié)果表明:A、B、D因素影響具有顯著性意義(P < 0.05),C因素無顯著性意義(P > 0.05),以A3B3C1D2為佳,即浸泡1.5 h,加10倍量水,提取時間為1h,提取2次為佳。

    3.2 醇沉質(zhì)量分數(shù)的考察

    按處方比例稱取山藥、薏苡仁、陳皮5份,分別加10倍量水,浸泡1.5 h,煎煮2次,第1次1 h,第2次加8倍量水,煎煮0.5 h,合并煎液,過濾,濾液濃縮至0.8 g/mL(即每毫升藥液含生藥0.8 g)。分別加入不同體積的95%乙醇,使乙醇濃度達到30%、45%、60%、75%、90%,攪勻,靜置48 h,濾取上清液,回收乙醇并濃縮至0.45 g/mL。以尿囊素、陳皮苷含量及浸膏得率(操作方法同上)為指標得出綜合評分,結(jié)果見表6。結(jié)果表明,以75%乙醇醇沉濃度最佳。

    3.3 工藝驗證

    根據(jù)上述正交實驗結(jié)果和醇沉質(zhì)量分數(shù)考察的結(jié)果分別制備3批樂胃飲顆粒進行驗證,結(jié)果表明樂胃飲顆粒各種客觀指標較好,該制備工藝條件合理,符合顆粒劑質(zhì)量要求,每克顆粒劑含尿囊素為(3.62~3.88)mg/g,陳皮苷為(5.57~5.97)mg/g。

    4 討論

    樂胃飲顆粒處方中淮山藥補脾氣而益胃陰,培補脾胃,性質(zhì)平和;薏苡仁健脾滲濕,性微寒而不傷胃,益脾而不滋膩;陳皮理氣運脾,調(diào)中快膈,性溫和且燥而不烈,全方清補脾胃,健運中州?,F(xiàn)代藥理研究證實,山藥有緩解腸管平滑肌痙攣及對抗神經(jīng)介質(zhì)的作用,還能增強小腸吸收功能,抑制血清淀粉酶的分泌[1]。而山藥中所含尿囊素具有抗菌消炎作用,且能修復(fù)上皮組織,促進皮膚潰瘍面和傷口愈合,具有生肌作用,可用于胃及十二指腸潰瘍[2]。陳皮對腸平滑肌的作用是雙向的,既能抑制胃腸運動,又能興奮胃腸運動,主要與消化道的機能狀態(tài)及陳皮不同有效部位有關(guān)[3]。此外,陳皮水煎劑對離體唾液淀粉酶活性有明顯促進作用[4]。陳皮的活性成分陳皮苷具有利膽、抗?jié)兊茸饔肹5]。但是,研究表明,煎煮時間不同,其藥理作用也不盡相同[6],傳統(tǒng)煎煮方法難以嚴格按照規(guī)范執(zhí)行,保證藥效。因而,本實驗以君藥山藥中的尿囊素為主要考察指標,同時將陳皮苷和浸膏得率納入評價范圍,將發(fā)揮樂胃飲顆粒的最佳功效。根據(jù)樂胃飲顆粒中的有效成分,我們采用分步考察的制備工藝路線,通過正交試驗優(yōu)選水提最佳工藝,并以單因素考察醇沉質(zhì)量分數(shù)。結(jié)果顯示,所制定的制備工藝合理、可行,為保證該制劑穩(wěn)定的臨床療效提供了基礎(chǔ)理論依據(jù)。

    [參考文獻]

    [1] 張云芳,蔣孟良. 山藥的藥理作用與炮制工藝研究進展[J]. 實用藥物與臨床,2012,15(1):49-51.

    [2] 趙彥青,王愛鳳. 山藥的藥理研究進展[J]. 中醫(yī)研究,2000,13(5):49-51.

    [3] 李慶耀,梁生林,褚洪標,等. 陳皮促胃腸動力有效部位的篩選研究[J]. 中成藥,2012,34(5):941-943.

    [4] 張志海,王彩云,楊天鳴,等. 陳皮的化學(xué)成分及藥理作用研究進展[J]. 西北藥學(xué)雜志,2005,20(1):47.

    [5] 于輝,李春香,甘慶賢. 陳皮的藥理作用[J]. 生物磁學(xué),2005,5(1):44-45.

    [6] 黃瑞平,陳菲菲,滕俊,等. 陳皮煎藥方法的定量研究[J]. 中國藥物與臨床,2011,11(10):1189.

    (收稿日期:2013-03-18)

    黔西县| 平原县| 霸州市| 嘉义县| 壶关县| 塘沽区| 武宁县| 大兴区| 陇川县| 闽清县| 山阳县| 治县。| 鄱阳县| 乌什县| 平潭县| 房产| 胶南市| 班戈县| 盐津县| 云浮市| 历史| 普安县| 乌苏市| 延长县| 蒙山县| 浦城县| 仁寿县| 宕昌县| 宣汉县| 庆元县| 章丘市| 乐至县| 上林县| 临泽县| 阆中市| 潜江市| 进贤县| 讷河市| 胶南市| 新沂市| 穆棱市|