異位性皮炎患者血清白細(xì)胞介素—13與干擾素—γ水平變化及意義

[摘要] 目的 檢測異位性皮炎患者外周血中IL-13與IFN-γ的水平，探討其在異位性皮炎中的發(fā)病機(jī)制及意義。 方法 選擇2011年1月～2012年1月在我院皮膚科進(jìn)行治療的異位性皮炎患者35例及同期入我院進(jìn)行健康體檢的35例正常人。取兩組的清晨外周血，采用免疫吸附試驗(yàn)測定兩組外周血IL-13和IFN-γ的水平，并進(jìn)行比較。 結(jié)果 異位性皮炎組外周血中的IL-13水平比健康組顯著增高（P < 0.05），異位性皮炎組外周血中IFN-γ水平比健康組顯著降低（P < 0.05）。 結(jié)論 異位性皮炎患者的Th1/Th2水平與健康人群不同，Th1/Th2水平變化很可能是異位性皮炎的發(fā)病機(jī)制之一。

[關(guān)鍵詞] 異位性皮炎；白細(xì)胞介素-13；干擾素-γ

[中圖分類號] R758.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）13-0088-02

異位性皮炎屬慢性炎癥性皮膚病，以慢性濕疹性皮膚腫塊為臨床特征。其病因可能與遺傳、環(huán)境因素、感染、皮膚屏障功能異常、Th1/Th2失衡及神經(jīng)免疫異常等多種因素有關(guān)，但具體發(fā)病機(jī)制與病因尚不明確[1，2]。從顯微鏡觀察患者皮膚破損處，可見活化的T細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等免疫細(xì)胞浸潤，提示異位性皮炎的發(fā)病機(jī)制可能與免疫機(jī)制異常有關(guān)。干擾素-γ（IFN-γ）是Th1細(xì)胞分泌的特征性細(xì)胞因子，其作用是抑制Th2細(xì)胞表型的分化[3，4]。白細(xì)胞介素-13（IL-13）主要由Th2細(xì)胞分泌，其作用是誘導(dǎo)B細(xì)胞免疫球蛋白亞型的轉(zhuǎn)化以及誘導(dǎo)抗體IgE的合成。本研究目的是探討IL-13與IFN-γ這兩種細(xì)胞因子在異位性皮炎發(fā)病機(jī)制中的作用，特選擇正常健康人群與異位性皮炎患者進(jìn)行對照，比較兩組人群的外周血IL-13與IFN-γ水平，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年1月～2012年1月在我院皮膚科進(jìn)行治療的異位性皮炎患者35例，均符合《臨床皮膚病學(xué)》中關(guān)于異位性皮炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。入選患者需滿足在確診前1個月內(nèi)未服用過糖皮質(zhì)激素類藥物或免疫抑制劑；無其他慢性疾病或內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病。其中男22例，女13例，年齡15～22歲，平均（16.7±5.1）歲。另選擇同期入我院進(jìn)行健康體檢的35例正常人，其中男23例，女12例，年齡14～21歲，平均（17.3±3.2）歲。兩組的平均年齡、性別比例比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 方法[5]

于清晨患者未進(jìn)食時取外周靜脈血5 mL，將血樣靜置20 min，在4℃環(huán)境下以3 000 r/min的速度進(jìn)行離心，持續(xù)10 min，吸取上清液置于EP管中，分別在EP管表面標(biāo)記好后放置于-70℃的冰箱中保存。再將樣品中的免疫細(xì)胞進(jìn)行分離。采用免疫吸附試驗(yàn)檢測標(biāo)本血清IL-13和IFN-γ的含量，所用材料為IL-13試劑盒（美國RD公司）、IFN-γ試劑盒（深圳晶美生物工程有限公司）。先將分離后的細(xì)胞放置在蓋玻片上，用10%福爾馬林固定20 min，蒸餾水洗兩次，3%雙氧水室溫5～10 min以滅活內(nèi)源性酶，蒸餾水洗3次，PBS溶液洗2次，滴加5%BSA封閉液。加一抗液體，于4℃冰箱中保存過夜，加SABC，將片子從溫箱中取出，放入PBS溶液中洗3次，每次5 min，擦干組織周圍的PBS后加上SABC，然后置于37℃溫箱中半小時。用中性樹膠滴封好片子后置于通風(fēng)柜中晾干。觀察到細(xì)胞質(zhì)黃染的細(xì)胞即為陽性細(xì)胞。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察兩組的外周血IL-13與IFN-γ水平，并分別計(jì)算平均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)以SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)行兩組間比較，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

異位性皮炎組外周血中的IL-13水平比健康組顯著增高（P < 0.05），異位性皮炎組外周血中IFN-γ水平比健康組顯著降低（P < 0.05）。

3 討論

近年來，異位性皮炎的發(fā)病比例有明顯增加的趨勢。異位性皮炎的病因非常復(fù)雜，可能是多因素共同作用的結(jié)果?；颊叱０閭€人或家族特應(yīng)性病史，例如哮喘、過敏性鼻炎等，目前醫(yī)學(xué)界認(rèn)為異位性皮炎是多種環(huán)境因素引起人體免疫系統(tǒng)異常造成的[6，7]。國外有研究[8]顯示，其發(fā)病機(jī)制可能是樹突狀細(xì)胞亞類影響炎癥細(xì)胞的活動，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞聚集、T細(xì)胞的活化、細(xì)胞因子和趨化因子的釋放等共同作用的結(jié)果。異位性皮炎患者與正常健康人群不同，其皮膚的天然屏障不能正常發(fā)揮其功能，微生物極易侵入皮膚，故皮膚常發(fā)生感染。對皮膚感染處進(jìn)行抗感染治療效果明顯，這提示其發(fā)病可能與感染導(dǎo)致Th1/Th2失衡有關(guān)。還有研究報道[9]，Th1/Th2型細(xì)胞因子與異位性皮炎的皮損發(fā)生關(guān)系較密切，例如在本病發(fā)病的急性期，皮損部位的細(xì)胞因子主要以Th2為主，而在病程的慢性期則以Th1為主?；颊叱８杏X病損部位瘙癢嚴(yán)重，這給患者帶來了極大的痛苦。

Th1細(xì)胞主要分泌白細(xì)胞介素-2（IL-2）、干擾素-γ（IFN-γ）等細(xì)胞因子；Th2細(xì)胞主要分泌白細(xì)胞介素-4（IL-4）、白細(xì)胞介素-13（IL-13）等細(xì)胞因子。Th1細(xì)胞的主要功能是介導(dǎo)細(xì)胞免疫，Th1細(xì)胞功能異?？蓪?dǎo)致炎癥慢性遷延、特異性自身免疫病等[10]。Th2細(xì)胞作為體內(nèi)的重要免疫細(xì)胞，其主要功能是促進(jìn)B細(xì)胞的生長、活化與分化，另外一項(xiàng)重要功能是分泌IgE、IgG等抗體，從而介導(dǎo)體液免疫，Th2細(xì)胞功能異常則會導(dǎo)致速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)及嗜酸性粒細(xì)胞增多癥等疾病。本研究的目的即是通過研究異位性皮炎患者及正常人群外周血中IL-13與IFN-γ的水平，來探討此病可能的發(fā)病機(jī)制，因?yàn)檫@兩種細(xì)胞因子的水平在一定程度上代表了Th1細(xì)胞與Th2細(xì)胞的水平[11]。IL-13作為人體內(nèi)最重要的細(xì)胞因子之一，其主要作用是促進(jìn)B細(xì)胞的分化并誘導(dǎo)B細(xì)胞進(jìn)行同型之間的轉(zhuǎn)化，促進(jìn)體內(nèi)合成更多的IgE。IL-13還能夠激活嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子、單核細(xì)胞趨化蛋白等眾多趨化因子。IFN-γ則具有免疫調(diào)節(jié)作用，且調(diào)節(jié)作用非常強(qiáng)大，它能促進(jìn)Th細(xì)胞分化為Th1細(xì)胞[12]。

本研究結(jié)果顯示，異位性皮炎組外周血中的IL-13水平比健康組顯著增高（P < 0.05），異位性皮炎組外周血中IFN-γ水平比健康組顯著降低（P < 0.05）。提示異位性皮炎患者的Th1/Th2水平與健康人群不同，Th1/Th2水平變化很可能是異位性皮炎的發(fā)病機(jī)制之一。

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（收稿日期：2013-02-01）