對川渝兩地市售白芍飲片質(zhì)量的調(diào)研

楊榮平， 嚴倩茹， 韓 麗， 王云紅， 黃 娟， 張小梅， 秦 劍

(1．重慶市中藥研究院，重慶400065;2．成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川成都611137;3．重慶市食品藥品檢驗所，重慶401121)

白芍為毛茛科植物芍藥Paeonia lactiflora Pall．的干燥根，具有養(yǎng)血斂陰、柔肝止痛、平抑肝陽等作用。其主要有效成分為芍藥苷，近年來研究表明芍藥苷具有抗傷害性疼痛、神經(jīng)保護及調(diào)節(jié)離子通道等作用［1］，2010年版《中國藥典》 (以下簡稱藥典)以芍藥苷含有量作為評價白芍質(zhì)量好壞的指標之一，規(guī)定白芍藥材含芍藥苷不得低于1.6%，飲片不得低于1.2%。筆者因課題需要購買了白芍飲片，實驗過程中發(fā)現(xiàn)所含芍藥苷低于藥典的規(guī)定，因此特意在四川和重慶兩地采購27批白芍飲片，以中國藥品生物制品檢定所提供的白芍藥材為對照，測定其中芍藥苷，對川渝兩地市售白芍飲片質(zhì)量進行調(diào)研。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Waters 2695高效液相色譜儀，Waters 2996檢測器，Waters Empower化學(xué)工作站;KQ-50B型超聲波清洗器 (昆山市超聲儀器有限公司);AEG-45SM電子天平 (十萬分之一，日本島津公司)，BS224S(萬分之一，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)。

1.2 試藥 芍藥苷對照品 (中國藥品生物制品檢定所，批號110736-201035);白芍對照藥材 (中國藥品生物制品檢定所，批號120905-200508);乙腈、甲醇為色譜純 (美國TEDIA天地試劑公司);磷酸為分析純 (重慶申渝化學(xué)試劑廠);水為雙蒸水 (自制)。

1.3 藥材 市售白芍飲片購自成都荷花池中藥材市場、重慶桐君閣中藥批發(fā)商廠及桐君閣藥房等各大藥店，經(jīng)重慶市中藥研究院李泉森研究員鑒定為毛茛科植物芍藥的根。為免造成不必要的商業(yè)利益沖突，本研究不公開生產(chǎn)廠家的名稱、批號及藥店名稱，下文中各樣品統(tǒng)一采用編號。

2 試驗方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 采用Diamonsil C18色譜柱 (250 mm×4.6 mm，5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)為流動相;體積流量為1 mL/min;柱溫25℃;檢測波長為230 nm。

2.2 對照品溶液的制備 精密稱取干燥至恒定質(zhì)量的芍藥苷對照品14.56 mg至10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密移取0.5 mL至10 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，制成72.8 μg/mL的芍藥苷對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 取白芍樣品1～27號中粉及對照藥材各約0.1 g，精密稱定，各置50 mL量瓶中，加稀乙醇35 mL，超聲處理20 min，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 線性關(guān)系的考察 精密吸取上述對照品溶液3、6、9、12、15、18μL，分別注入高效液相色譜儀，以對照品量 (μg)為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程Y=1.0×106X－28 154，r=0.999 8。結(jié)果表明芍藥苷在0.218 4～1.310 4μg范圍內(nèi)進樣量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。

2.5 樣品測定 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，測定，結(jié)果表明27批樣品中僅有1批合格，見表1。

表1 白芍飲片芍藥苷的測定結(jié)果Tab.1 Resu lts of content assay for paeoniflorin in Paeoniae Radix alba

2.6 指紋圖譜的建立 采用國家藥典委員會中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件 (2004A)對全部供試品HPLC色譜圖進行疊加比較 (結(jié)果見圖1)，對其中16批芍藥苷量不合格但峰檢出樣品的HPLC色譜圖進行擬合并與對芍藥苷對照品、對照藥材、合格藥材的比較 (結(jié)果見圖2)。

圖1 供試品HPLC指紋譜圖Fig.1 Fingerprints of sam ples

由圖1、圖2可見，對照藥材 (S28)5號峰較大，1、2、3、4號峰均較小，合格的藥材(S27)1、2、4、5號峰的大小比例與對照藥材類似，而不合格的藥材 (S1～S26)5號峰所占比例顯著減小或未檢出，同時2號峰所占比例顯著增大。此外芍藥苷峰檢出的16批不合格樣品HPLC圖譜經(jīng)擬合后含有1、2、4、5號4個共有峰與合格樣品的相同，而此27批樣品與對照藥材相比均未檢測出3號峰。造成上述現(xiàn)象的可能原因見下文的討論。

3 討論

3.1 對市售白芍飲片中芍藥苷低于中國藥典規(guī)定的討論 上述調(diào)研結(jié)果表明，市售的27批白芍飲片中僅有1批芍藥苷的量符合藥典規(guī)定。經(jīng)過文獻查閱，發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致這種現(xiàn)象的因素較多，現(xiàn)對可能的幾點因素進行如下分析。

3.1.1 炮制不當 藥典規(guī)定的白芍飲片的炮制方法為“除去頭尾和細根，置沸水中煮后除去外皮或去皮后再煮，曬干”“洗凈，潤透，切薄片，干燥”［2］，芍藥苷有一定的水溶性，炮制過程中水洗、煮等程序均有水參與，若操作不當如浸潤過透、煮的時間過久，均易造成芍藥苷的流失。有研究報道在白芍炮制過程中，加熱、加水浸泡等對白芍中芍藥苷的量影響較大［3］。李外等［4］得出了浸潤12 h切制芍藥苷的量高于浸潤24 h的結(jié)論。李玲等［5］也研究表明不同切制工藝對白芍中芍藥苷量有影響，干品浸潤切制芍藥苷的量約為鮮品切制的一半。

圖2 部分供試品的HPLC色譜圖Fig.2 HPLC chromatogram s

3.1.2 硫磺熏蒸 硫磺熏制是一項傳統(tǒng)的中藥材產(chǎn)地加工技術(shù)，雖然藥典中未收載白芍飲片的加工炮制需用硫磺熏制，一些生產(chǎn)者為了片面的追求白芍飲片色澤的潔白美觀，在加工過程中使用硫磺熏制。硫磺燃燒不完全產(chǎn)生的SO2是一種很強的還原劑，可使芍藥苷轉(zhuǎn)化另一種成分——芍藥苷亞硫酸酯，從而導(dǎo)致芍藥苷的大幅度降低［6］。孟祥松等［7］研究報道，硫磺熏制白芍24 h芍藥苷損失50%以上，劉靜靜等［8］在《對市售白芍飲片芍藥苷含量低于中國藥典標準的深入討論》一文中也表明硫磺熏蒸可使包括芍藥苷在內(nèi)的6種單貼苷類有效成分發(fā)生化學(xué)轉(zhuǎn)化并導(dǎo)致市售白芍飲片芍藥苷的量顯著降低。

3.1.3 生長年限短 白芍為多年生植物，一般3年采收入藥，但是現(xiàn)在藥農(nóng)提前采收加工，加工成白芍飲片的原藥材因生長年限不夠而芍藥苷量不符合規(guī)定［9］。

3.1.4 貯存條件的影響 萬穎等［10］對貯藏條件對芍藥苷的影響進行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)白芍隨貯存時間的延長，芍藥苷的量呈下降趨勢，溫度、濕度越低芍藥苷的量降低的趨勢越小。

3.1.5 非法提取 樣品13中與芍藥苷相應(yīng)的峰未檢出，其樣品在外觀上與其他的樣品相比具有明顯的膨脹狀，表面沒有光澤，顏色泛黃而無粉性。目前，中藥飲片存在提取后再次出售的現(xiàn)象，芍藥苷有一定的水溶性，樣品13極有可能是經(jīng)過提取后再次出售的。

3.2 對中藥品質(zhì)和療效的討論 近些年來，在商品經(jīng)濟浪潮中，藥物這一具有特殊意義的商品也受到了沖擊，常有市售偽劣藥材的報道［11-13］，不合格的藥材不但浪費了資源影響了臨床療效，而且嚴重威脅到了人民的健康和生命安全。曾經(jīng)有中醫(yī)無效及廢除中醫(yī)的風(fēng)波，在這場風(fēng)波中藥材質(zhì)量差異大應(yīng)擔當一定的責(zé)任，偽劣藥材治療疾病是天方夜譚，只有合格的藥材才可能取得良好的臨床效果。而市場上合格的藥材往往需要衛(wèi)生監(jiān)督部門強有力的監(jiān)管及法律法規(guī)的完善。

3.3 對中藥飲片規(guī)范化生產(chǎn)的討論 本研究采購的27批樣品中部分為藥材市場流通的白芍飲片統(tǒng)貨，部分為含有飲片廠出廠合格證的包裝飲片，而芍藥苷定量測定結(jié)果表明27批樣品中僅有1批樣品符合藥典的規(guī)定，此種現(xiàn)象不得不發(fā)人深思:飲片生產(chǎn)廠家在飲片出廠前是否真的對其中的成分進行了定量測定，測定的結(jié)果是否真的合格!

國家食品藥品監(jiān)督管理局在2004年的《關(guān)于推進中藥飲片等類別藥品監(jiān)督實施GMP工作通知》中提出“從2008年1月1日開始，所有的中藥飲片生產(chǎn)企業(yè)必須在符合GMP條件下進行生產(chǎn)”，至今現(xiàn)存的中藥飲片生產(chǎn)廠家基本已通過GMP認證，但其是否在按照相關(guān)的操作規(guī)程執(zhí)行以及執(zhí)行的力度如何不得不引人深思。

4 小結(jié)

在此，我們強烈呼吁有關(guān)管理監(jiān)督部門加強中藥材的種植、炮制、加工等監(jiān)督管理工作以及對法律法規(guī)的完善，規(guī)范中藥飲片市場，為臨床用藥提供保障。此外，藥典是否需要增加包括白芍飲片在內(nèi)的若干中藥材的二氧化硫殘留限量檢查項也值得深思。

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