內(nèi)分泌干擾物對(duì)雌激素受體信號(hào)通路的影響

張育輝，肖 寧，李忻怡

（陜西師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，陜西 西安710062）

隨著化學(xué)工業(yè)的快速發(fā)展，化學(xué)產(chǎn)品向環(huán)境中 的排放量隨著生產(chǎn)總產(chǎn)量的上升在急劇增加．環(huán)境中部分化合物可通過(guò)干擾機(jī)體內(nèi)源激素的某些信號(hào)途徑影響動(dòng)物或人體正常的激素平衡，此類化合物稱內(nèi)分泌干擾物（endocrine disruptive chemicals，EDCs）．不同EDCs的作用途徑存在差異，但它們最終均通過(guò)干擾正常的激素水平，產(chǎn)生激素效應(yīng)．在機(jī)體中，與其他類固醇激素一樣，雌激素反應(yīng)由雌激素受體（estrogen receptor，ER）介導(dǎo)，雌激素與ER結(jié)合后進(jìn)入胞核內(nèi)，最終激活靶基因的轉(zhuǎn)錄．在人類，ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)紊亂可增加患激素依賴性癌癥的風(fēng)險(xiǎn)，或?qū)е律芰ο陆?，或造成胎兒生長(zhǎng)和發(fā)育異常，還可改變脂肪組織的代謝水平［1］．ER具有α和β兩個(gè)亞型，二者在雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮著既重疊又獨(dú)特的生理作用．研究表明，除內(nèi)源性的雌激素17β－雌二醇（E2）能與ER結(jié)合外，許多外源性配體具有類似于E2與ER的親和力，它們同樣能夠選擇性地與ERα或ERβ結(jié)合［2］．目前已知，EDCs既可以通過(guò)與ER直接作用，也可以通過(guò)與芳香烴受體（aryl hydrocarbon receptor，AhR）等轉(zhuǎn)錄因子作用，間接改變基因組或非基因組途徑中ER的促轉(zhuǎn)錄活性．如雙酚A（bisphenol A，BPA）和二乙基己烯雌酚（diethyl stilbestrol，DES）等已知的EDCs均可誘導(dǎo)快速的雌激素信號(hào)，對(duì)基因組或非基因組途徑中ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)生影響［3］．雖然EDCs可借助多種途徑干擾正常激素的功能活動(dòng)，但多數(shù)EDCs的干擾機(jī)制是作為配體和ER直接結(jié)合，對(duì)ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)生影響．

1 雌激素受體

1．1 ERα和ERβ的基本特征

ER與核受體家族的其他成員有著相類似的結(jié)構(gòu)，從氨基端到羧基端，ER在結(jié)構(gòu)上可分為A／B、C、D、E、F 5個(gè)功能區(qū)：（1）氨基端A／B區(qū)，主要為轉(zhuǎn)錄激活功能域（transcription activation function－1，AF－1），是受體兩個(gè)轉(zhuǎn)錄激活域之一，屬于異變區(qū)，參與調(diào)節(jié)雌激素應(yīng)答基因的轉(zhuǎn)錄，負(fù)責(zé)配體非依賴的轉(zhuǎn)錄激活功能；（2）C區(qū)為DNA結(jié)合域（DNA－binding domain，DBD），包含兩個(gè)與識(shí)別激素應(yīng)答元件和受體二聚體化形成有關(guān)鋅指結(jié)構(gòu)，能夠與靶基因中的雌激素反應(yīng)元件（estrogen response element，ERE）結(jié)合；（3）D區(qū)為鉸鏈域，受體在該區(qū)能彎曲、旋轉(zhuǎn)以改變構(gòu)象，保證以最佳的構(gòu)型與配體結(jié)合，例如可與熱休克蛋白結(jié)合，并具有核定位信號(hào)及穩(wěn)定DNA結(jié)合功能；（4）E區(qū)為配體結(jié)合域（ligand binding domain，LBD），該功能區(qū)主要是調(diào)節(jié)配體與ER的結(jié)合、受體的二聚化、應(yīng)答基因表達(dá)的激活及與輔助激活因子或輔助抑制因子的結(jié)合等；（5）羧基末端的F區(qū)是激素依賴轉(zhuǎn)錄激活功能域（transcription activation function－2，AF－2），AF－2的結(jié)構(gòu)和功能因結(jié)合的配體類型不同而不同，負(fù)責(zé)配體依賴的轉(zhuǎn)錄激活功能．

ERα曾被認(rèn)為是唯一介導(dǎo)雌激素信號(hào)的受體．自從在大鼠前列腺癌和卵巢中克隆出ERβ以來(lái)，對(duì)介導(dǎo)雌激素信號(hào)的受體有了新認(rèn)識(shí)［4］．編碼ERα和ERβ的基因在不同的染色體上［5］．ERα和ERβ的激活功能域（AF）、配體結(jié)合域（LBD）和DNA結(jié)合域（DBD）的主要差異體現(xiàn)在：（1）激活功能域（AF）．激活功能域AF－1和AF－2與輔助激活因子相互作用來(lái)調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄．N末端AF－1調(diào)控的轉(zhuǎn)錄不依賴于配體，但配體結(jié)合域中的AF－2以配體依賴的方式調(diào)控轉(zhuǎn)錄，ERα與ERβ的AF－1顯著不同，二者N端氨基酸序列只有18%的同源性，與ERβ相比較，ERα的AF－1更能增強(qiáng)雌激素誘導(dǎo)的基因表達(dá)［6］．AF－2由4個(gè)α螺旋（H3，H4，H5，和H12）組成，這4個(gè)α螺旋形成疏水性凹槽，有利于與輔助調(diào)節(jié)因子的結(jié)合．（2）配體結(jié)合域（LBD）．ERα和ERβ的配體結(jié)合域氨基酸序列有59%的同源性，ER的配體結(jié)合域包含與雌激素類化合物結(jié)合的口袋結(jié)構(gòu)，即配體結(jié)合口袋，但是這兩個(gè)亞型在配體結(jié)合口袋中僅有兩個(gè)氨基酸不同：ERα的Leu 384，Met 421分別與ERβMet 336，Ile 373不同，在與雌激素類化合物結(jié)合時(shí)，配體結(jié)合口袋的這種略微差異有助于亞型對(duì)一些化合物的選擇［2］．（3）DNA結(jié)合域（DBDs）．ER在雌激素反應(yīng)元件（EREs）上結(jié)合DNA后調(diào)控靶基因表達(dá)．ERα與ERβ的DBD有97%的相似性，顯示其同源性很高，基因組結(jié)合位點(diǎn)有顯著的重疊，所以ER的這兩個(gè)亞型可共同調(diào)控靶基因表達(dá)．需要注意的是結(jié)合配體的ERα和ERβ能形成同源二聚體或異源二聚體，與ER同源二聚體一樣，異源二聚體也能夠和EREs結(jié)合［7－8］．ER異源二聚體作用的特殊性仍不清楚，因而，EDCs對(duì)ER異源二聚體活性的影響也未知．

ERα與ERβ在功能上具有既重疊又獨(dú)特的生理特性，這種生理作用的差異主要表現(xiàn)為對(duì)細(xì)胞類型依賴性的不同，ERα在肝細(xì)胞和腦內(nèi)的海馬中特異表達(dá)，ERβ主要在前列腺、陰道和小腦中表達(dá)［9］．通過(guò)分別敲除小鼠ERα或ERβ的實(shí)驗(yàn)表明，ERα是乳腺發(fā)育中具有調(diào)控作用的主要受體，而ERβ不是這一過(guò)程和生殖發(fā)育調(diào)節(jié)的關(guān)鍵受體［10－11］，但它具有抑制乳腺組織細(xì)胞中ERα高表達(dá)的作用［12］．

1．2 ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

雌激素通過(guò)ERs調(diào)控靶基因表達(dá)發(fā)揮效應(yīng)，ER對(duì)雌激素靶基因表達(dá)的調(diào)控方式有配體依賴型和非依賴型，調(diào)控雌激素靶基因表達(dá)的途徑分為基因組途徑和非基因組途徑．基因組途徑包括ER和DNA的直接作用和通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子與DNA的間接作用；非基因組途徑是指雌激素所導(dǎo)致的激酶信號(hào)通路的快速激活．ER能調(diào)節(jié)多個(gè)信號(hào)通路，每個(gè)亞型可與不同的配體反應(yīng)，這使EDCs對(duì)由ER介導(dǎo)的雌激素信號(hào)通路的作用變得相當(dāng)復(fù)雜．在EDCs影響ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究中，目前對(duì)配體依賴的ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的比較清楚，配體非依賴的ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑非常復(fù)雜，并涉及多種信號(hào)通路的激活，如ER與生長(zhǎng)因子、共調(diào)解因子等通路［13］．

在基因組途徑中，ER通過(guò)直接結(jié)合到EREs或借助Sp1（stimulating protein－1），AP－1（activating protein－1）等轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到EREs介導(dǎo)靶基因的轉(zhuǎn)錄［14－15］．在經(jīng)典的基因組信號(hào)途徑中，配體與雌激素受體LBD結(jié)合后改變ER空間構(gòu)象，使ER發(fā)生二聚化，二聚化的ER結(jié)合到靶基因啟動(dòng)子EREs上，同時(shí)ER的兩個(gè)激活功能域AF－1和AF－2結(jié)合輔助激活因子，促進(jìn)靶基因的轉(zhuǎn)錄．研究表明，ERα和ERβ的結(jié)構(gòu)特征類似，該結(jié)構(gòu)有利于輔助激活因子的募集和轉(zhuǎn)錄輸出［16－17］．內(nèi)源性雌激素E2等激活因子與受體結(jié)合后，受體的構(gòu)象發(fā)生改變，輔助調(diào)節(jié)因子結(jié)合位點(diǎn)被暴露，可見(jiàn)配體通過(guò)誘導(dǎo)受體構(gòu)象的改變，使受體能募集特異性輔助調(diào)節(jié)因子，進(jìn)而引起不同的反應(yīng)．目前，在輔助調(diào)節(jié)因子復(fù)合物的研究中最多的核受體輔助調(diào)節(jié)因子是共激活因子p160家族，即SRC－1，SRC－2和SRC－3，調(diào)解ER活性的輔助調(diào)節(jié)因子復(fù)合物非常復(fù)雜，已有文獻(xiàn)中描述的輔助調(diào)節(jié)因子已超過(guò)300個(gè)［18］．

在非基因組途徑中，ER參與某些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活，這些通路在幾分鐘之內(nèi)即可對(duì)雌激素產(chǎn)生應(yīng)答．ER非基因組途徑的機(jī)制仍不清楚，目前研究設(shè)想與ERα和ERβ不同的膜結(jié)合ERs（membrane－associated ERs）介導(dǎo)非基因組途徑［19］．在細(xì)胞膜上的孤兒G蛋白偶聯(lián)受體30（GPR30）可介導(dǎo)雌激素的快速非基因組效應(yīng)［20］，GPR30在結(jié)構(gòu)上與ERα和ERβ不同，它能介導(dǎo)MAPK或PI3激酶信號(hào)通路的激活［21－22］，以及細(xì)胞內(nèi)鈣的波動(dòng)［23］或cAMP量的增加［24］．

2 EDCs對(duì)ER的作用

2．1 EDCs對(duì)ER的直接作用

EDCs通過(guò)與內(nèi)源性雌激素競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合ERα和ERβ的配體結(jié)合域，從而直接影響ER促轉(zhuǎn)錄的活性，引起雌激素效應(yīng)．由于ER亞型組織分布的廣泛性和雌激素作用的復(fù)雜性，使得研究EDCs對(duì)正常雌激素信號(hào)干擾的方法是多種多樣的，其中最常見(jiàn)的是用EDCs直接影響類固醇激素受體活性，然后檢測(cè)雌激素信號(hào)的變化．大部分EDCs是ER的配體，它們可以和E2競(jìng)爭(zhēng)配體結(jié)合位點(diǎn)，與ER結(jié)合后，使原來(lái)結(jié)合在受體上的伴侶蛋白從受體上解離，配體的結(jié)合使ER的構(gòu)象發(fā)生改變，形成二聚體，二聚化的受體與靶基因上的ERE結(jié)合，同時(shí)受體的兩個(gè)功能域被激活后可結(jié)合輔助調(diào)節(jié)因子，最終介導(dǎo)基因的轉(zhuǎn)錄．研究報(bào)道，將雄性羊頭鯉（Cyprinodon variegatus）暴露于辛基酚（OP）中，OP作為內(nèi)分泌干擾物可直接與ER結(jié)合并激活卵黃蛋白原基因的表達(dá)，致使血漿卵黃蛋白原濃度升高［25］．通常，EDCs需要高于內(nèi)源性激素100—1000倍的濃度，才能顯示出與內(nèi)源性激素相似的生理效應(yīng)［2］．然而，EDCs在很低的濃度暴露后，可以在組織中累積，從而引起雌激素效應(yīng)［26］．由于EDCs潛在的生物學(xué)作用非常復(fù)雜，并且還受組織特異性輔助因子和受體等因素的影響，所以低濃度的EDCs在有機(jī)體即可作用于ER，對(duì)機(jī)體內(nèi)分泌功能產(chǎn)生影響．另外，EDCs也可影響ER的表達(dá)，壬基酚（NP）可激活魚(yú)類肝細(xì)胞ER基因轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)ER mRNA合成，增加ER的表達(dá)［27］．

2．2 EDCs對(duì)ER的間接作用

芳香烴受體（AhR）是一種配體激活轉(zhuǎn)錄因子，是細(xì)胞對(duì)外源雌激素應(yīng)答的調(diào)解點(diǎn)，屬于bHLHPAS蛋白家族，在進(jìn)化上非常保守．多環(huán)芳烴類化合物（PAHs）屬于一類EDCs，可作為AhR的配體激活A(yù)hR，AhR可間接影響ER促轉(zhuǎn)錄活性［28］．與配體結(jié)合的AhR還可能調(diào)控代謝酶基因的表達(dá)，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑與ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑有許多相似之處［29］．研究表明，多氯二苯并二惡英、二苯呋喃、聯(lián)苯、多環(huán)芳香碳?xì)浠衔锏扔袡C(jī)化合物可以活化AhR［30］．

2．2．1 促進(jìn)ER泛素化修飾并降解 泛素化修飾的靶蛋白被26S的蛋白酶體所降解的途徑稱之為泛素蛋白酶體途徑，該途徑是真核生物體內(nèi)最為重要的蛋白質(zhì)降解途徑．泛素蛋白酶體降解途徑可以調(diào)控機(jī)體ER水平．卡林4B泛素連接酶（cullin 4B ubiquitin ligase，）是參與靶蛋白與蛋白酶體結(jié)合的多蛋白復(fù)合物，AhR和芳香烴受體核轉(zhuǎn)位蛋白（ARNT）是卡林4B泛素連接酶復(fù)合物的組成部分．二惡英與AhR結(jié)合可促進(jìn)泛素連接酶E3復(fù)合物（CUL4BAhR）的形成，導(dǎo)致ER的泛素化修飾，形成泛素鏈，從而被26S的蛋白酶體降解．在這個(gè)復(fù)合物中，AhR起到連接酶與ER的作用，促進(jìn)了ER的泛素化修飾和降解［31］．可見(jiàn)泛素連接酶復(fù)合物的形成依賴芳香烴受體的配體［32］，這表明EDCs作為AhR配體，可通過(guò)與AhR的作用導(dǎo)致ER的泛素化修飾，并促進(jìn)ER降解．早期的研究還認(rèn)為AhR的配體二惡英可降解ERα蛋白質(zhì)［33］．

2．2．2 與ER競(jìng)爭(zhēng)輔助激活因子 輔助激活因子由多種蛋白家族組成，如p300、P／CAF和SRC等蛋白家族，它們可與配體激活的受體結(jié)合，從而增強(qiáng)受體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄．ER和AhR介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄依賴于與轉(zhuǎn)錄輔助激活因子的結(jié)合，并且許多輔助激活因子通常為這兩個(gè)受體共用，活化的ER和AhR可競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合輔助激活因子，于是EDCs通過(guò)活化AhR，使其與ER競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合輔助激活因子，間接影響ER的促轉(zhuǎn)錄活性，干擾類固醇激素信號(hào)．研究表明，哺乳動(dòng)物細(xì)胞中ER和AhR輔助激活因子結(jié)合域的過(guò)度暴露會(huì)直接導(dǎo)致ER和AhR活性的減弱［34］．ARNT不是經(jīng)典的轉(zhuǎn)錄輔助激活因子，但是它卻具有輔助激活因子SRC家族的許多特性，而且還是雌激素受體尤其是ERβ的輔助激活因子［35］．研究表明，二惡英的抗雌激素效應(yīng)與ER和AhR對(duì)ARNT的競(jìng)爭(zhēng)有關(guān)［35－36］．此外，核受體家族其它成員間也競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合輔助激活因子，核受體中參與外源物質(zhì)代謝的組成型雄烷受體（constitutive androstane receptor，CAR）被激活后，可通過(guò)降低p160輔助激活因子GRIP－1的水平抑制ER促轉(zhuǎn)錄活性［37］．

2．2．3 干擾ER介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)錄 對(duì)ER靶基因啟動(dòng)子區(qū)的研究表明，AhR與ER之間還存在更為復(fù)雜的作用．活化的AhR能與ER靶基因啟動(dòng)子上游靠近ER結(jié)合位點(diǎn)的序列結(jié)合，把這段序列稱之為抑制性外源性反應(yīng)元件（inhibitory XREs）．未活化的AhR也能與ER靶基因啟動(dòng)子上游靠近ER結(jié)合位點(diǎn)的序列結(jié)合，把這段序列稱之為外源性反應(yīng)元件（XREs），這種結(jié)合對(duì)ER介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄的激活是必需的［38］．抑制性外源性反應(yīng)元件與外源性反應(yīng)元件的堿基組成略微不同，堿基的差異導(dǎo)致活化的AhR與抑制性外源性反應(yīng)元件結(jié)合后不能激活ER介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄［29］．但未結(jié)合配體的AhR與外源性反應(yīng)元件結(jié)合后，可激活ER介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄．上述表明EDCs可通過(guò)活化AhR，使其與ER靶基因上的抑制性外源性反應(yīng)元件結(jié)合，干擾ER介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄活動(dòng)．

EDCs通過(guò)AhR對(duì)ER的間接作用涉及AhR與ER間的交互對(duì)話（cross－talk）．AhR與ER間的作用非常復(fù)雜，例如，3－甲基膽蒽（3－MC）是AhR的配體，但它誘導(dǎo)的雌激素效應(yīng)卻依賴ERα而不是AhR［39］．3－MC激活ERα轉(zhuǎn)錄的能力與具有雌激素活性的代謝產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化相關(guān)．在細(xì)胞中3－MC沒(méi)有參與代謝，它起著抗雌激素的效應(yīng)，這與二惡英的作用類似［40］，對(duì)苯并芘（BaP）等其他AhR配體的研究也得到相似的結(jié)果［41］．細(xì)胞能把3－MC、BaP等外源物質(zhì)轉(zhuǎn)化成雌激素化合物，可見(jiàn)AhR配體的雌激素效應(yīng)仍需要進(jìn)一步研究．

3 總結(jié)與展望

當(dāng)今，人類和動(dòng)物通過(guò)空氣、食物和水接觸到數(shù)以千計(jì)的化學(xué)殘留物，這些化學(xué)產(chǎn)品里有許多是EDCs，可干擾機(jī)體內(nèi)源性激素的信號(hào)途徑，影響動(dòng)物和人體正常的激素平衡，這使EDCs受到了人們的廣泛關(guān)注．EDCs可通過(guò)與ER作用影響雌激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，其作用方式有與ER的直接作用和通過(guò)AhR等轉(zhuǎn)錄因子對(duì)ER的間接作用，從而改變基因組和非基因組途徑中ER的促轉(zhuǎn)錄活性．雌激素或類雌激素通過(guò)ER發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)，ER和EDCs對(duì)配體依賴的ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的作用盡管已有許多的研究成果，但是其中一些機(jī)制仍不清楚，如AhR的激活物二惡英抑制ERα信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的分子機(jī)制．EDCs通過(guò)AhR對(duì)ER的間接作用涉及了AhR與ER間的交互對(duì)話，由于交互對(duì)話中受到細(xì)胞環(huán)境、輔助調(diào)節(jié)因子等的影響，其分子機(jī)制目前仍不明了．EDCs對(duì)配體非依賴的ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的作用非常復(fù)雜，涉及多種信號(hào)通路的激活，這些途徑的具體過(guò)程還不清楚．由于EDCs可能通過(guò)配體依賴或非依賴的多種信號(hào)通路直接或間接地干擾基因轉(zhuǎn)錄，最終影響正常的內(nèi)分泌活動(dòng)，所以未來(lái)的研究思路應(yīng)對(duì)多種信號(hào)通路進(jìn)行探討．

ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的紊亂可引起腫瘤、心血管病、骨質(zhì)疏松癥等疾病的發(fā)生，因此，研究EDCs對(duì)ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響為相關(guān)疾病的治療可提供理論依據(jù)，具有十分重要的理論意義實(shí)踐價(jià)值．但是，目前EDCs對(duì)ER影響的研究大多在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行，而實(shí)際情況是人和動(dòng)物往往長(zhǎng)期接觸低劑量EDCs，因而在ER信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑方面的理論是否與實(shí)際一致，也仍需多方面的驗(yàn)證．

［1］Diamanti－Kandarakis E，Bourguignon J P，Giudice L C，et al．Endocrine－disrupting chemicals：an endocrine society scientific statement［J］．Endocrine Reviews，2009，30：293－342．

［2］Kuiper G，Carlsson B，Grandien K，et al．Comparison of the ligand binding specificity and transcript tissue distribution of estrogen receptors alpha and beta［J］．Endocrinology，1997，138：863－870．

［3］Nadal A，Ropero A B，Laribi O，et al．Nongenomic actions of estrogens and xenoestrogens by binding at a plasma membrane receptor unrelated to estrogen receptor alpha and estrogen receptor beta［J］．Proceedings of the National Academy of Sciences，2000，97：11603－11608．

［4］Kuiper G G，Enmark E，Pelto－Huikko M，et al．Cloning of a novel receptor expressed in rat prostate and ovary［J］．Proceedings of the National Academy of Sciences，1996，93：5925－5930．

［5］Enmark E，Pelto－Huikko M，Grandien K，et al．Human estrogen receptor beta－gene structure，chromosomal localization，and expression pattern［J］．The Journal of Clinical Endocrinology ＆Metabolism，1997，82：4258－4265．

［6］Zwart W，de Leeuw R，Rondaij M，et al．The hinge region of the human estrogen receptor determines functional synergy between AF－1and AF－2in the quantitative response to estradiol and tamoxifen［J］．Journal of Cell Science，2010，123：1253－1261．

［7］Pettersson K，Grandien K，Kuiper G G，et al．Mouse estrogen receptor beta forms estrogen response elementbinding heterodimers with estrogen receptor alpha［J］．Molecular Endocrinology，1997，11：1486－1496．

［8］Powell E，Xu W．Intermolecular interactions identify ligand－selective activity of estrogen receptor alpha／beta dimers［J］．Proceedings of the National Academy of Sciences，2008，105：19012－19017．

［9］Taylor A H，Al－Azzawi F．Immunolocalisation of oestrogen receptor beta in human tissues［J］．Molecular Endocrinology，2000，24：145－155．

［10］Hewitt S C，Harrell J C，Korach K S．Lessons in estrogen biology from knockout and transgenic animals［J］．Annual Review of Physiology，2005，67：285－308．

［11］Harris H A．Estrogen receptor－beta：recent lessons from in vivo studies［J］．Molecular Endocrinology，2007，21：1－13．

［12］Paruthiyil S，Parmar H，Kerekatte V，et al．Estrogen receptor beta inhibits human breast cancer cell proliferation and tumor formation by causing a G2cell cycle arrest［J］．Cancer Research，2004，64：423－428．

［13］Heldring N，Pike A，Andersson S，et al．Estrogen receptors：how do they signal and what are their targets［J］．Physiological Reviews，2007，87：905－931．

［14］Kushner P J，Agard D A，Greene G L，et al．Estrogen receptor pathways to AP－1［J］．The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology，2000，74：311－317．

［15］Saville B，Wormke M，Wang F，et al．Ligand－，cell－，and estrogen receptor subtype（alpha／beta）－dependent activation at GC－rich（Sp1）promoter elements［J］．The Journal of Biological Chemistry，2000，275：5379－5387．

［16］Brzozowski A M，Pike A C，Dauter Z，et al．Molecular basis of agonism and antagonism in the oestrogen receptor［J］．Nature，1997，389：753－758．

［17］Pike A C，Brzozowski A M，Hubbard R E，et al．Structure of the ligand－binding domain of oestrogen receptor beta in the presence of a partial agonist and a full antagonist［J］．The EMBO Journal，1999，18：4608－4618．

［18］Lonard D M，O＇Malley B W．Nuclear receptor coregulators：Judges，juries，and executioners of cellular regulation［J］．Journal of Cell Science，2007，27：691－700．

［19］Bj rnstrom L，Sjoberg M．Mechanisms of estrogen receptor signaling：convergence of genomic and nongenomic actions on target genes［J］．Molecular Endocrinology，2005，19：833－842．

［20］Revankar C M，Cimino D F，Sklar L A，et al．A transmembrane intracellular estrogen receptor mediates rapid cell signaling［J］．Science，2005，307：1625－1630．

［21］Migliaccio A，Di Domenico M，Castoria G，et al．Tyrosine kinase／p21ras／MAP－kinase pathway activation by estradiol－receptor complex in MCF－7cells［J］．The EMBO Journal，1996，15：1292－1300．

［22］Chen Z，Yuhanna I S，Galcheva－Gargova Z，et al．Estrogen receptor alpha mediates the nongenomic activation of endothelial nitric oxide synthase by estrogen［J］．Journal of Clinical Investigation，1999，103：401－406．

［23］Improta－Brears T，Whorton A R，Codazzi F，et al．Estrogen－induced activation of mitogen－activated protein kinase requires mobilization of intracellular calcium［J］．Proceedings of the National Academy of Sciences，1999，96：4686－4691．

［24］Aronica S M，Kraus W L，Katzenellenbogen B S．Estrogen action via the cAMP signaling pathway：stimulation of adenylate cyclase and cAMP regulated gene transcription［J］．Proceedings of the National Academy of Sciences，1994，91：8517－8521．

［25］Karels A A，Manning S，Brouwer T H，et al．Reproductive effects of estrogenic and antiestrogenic chemicals on sheephead minnows（Cyprinodon variegatus）［J］．Environmental Toxicology and Chemistry，2003，22：855－865．

［26］Bigsby R M，Caperell－Grant A，Madhukar B V．Xenobiotics released from fat during fasting produce estrogenic effects in ovariectomized mice［J］．Cancer Research，1997，57：865－9．

［27］Yadetic F，Arukwe A，Goksoyr A，et al．Induction of hepatic estrogen receptor in juvenile Atlantic salmon in vivo by the environmental estrogen，4－nonylphenol［J］．Science of the Total Environment，1999，233：201－210．

［28］Beischlag T V，Morales J L，Hollingshead B D，et al．The aryl hydrocarbon receptor complex and the control of gene expression［J］．Critical Reviews in Eukaryotic Gene Expression，2008，18：207－250．

［29］Safe S，Wormke M．Inhibitory aryl hydrocarbon receptor－estrogen receptor alpha cross－talk and mechanisms of action［J］．Chemical Research in Toxicology，2003，16：807－816．

［30］Poland A，Knutson J C．2，3，7，8－tetrachlorodibenzo－pdioxin and related halogenated aromatic hydrocarbons：examination of the mechanism of toxicity［J］．Annual Review of Pharmacology and Toxicology，1982，22：517－554．

［31］李淑晶，劉文棟，伍會(huì)?。河?duì)雌激素受體的干擾作用［J］．生命科學(xué)，2008，20（5）：764－767．

［32］Ohtake F，Baba A，Takada I，et al．Dioxin receptor is a ligand－dependent E3ubiquitin ligase［J］．Nature，2007，446：562－566．

［33］Wang X，Porter W，Krishnan V，et al．Mechanism of 2，3，7，8－tetrachl orodibenzo－p－dioxin（TCDD）－mediated decrease of the nuclear estrogen receptor in MCF－7 human breast cancer cells［J］．Molecular Cellullar Endocrinology，1993，96：159－166．

［34］Reen R K，Cadwallader A，Perdew G H．The subdomains of the transactivation domain of the aryl hydrocarbon receptor（AhR）inhibit AhR and estrogen receptor transcriptional activity［J］．Archives of Biochemistry and Biophysics，2002，408：93－102．

［35］Rüegg J，Swedenborg E，Wahlstrom D，et al．The transcription factor ARNT functions as an estrogen receptor beta－selective coactivator，and its recruitment to alternative pathways mediates antiestrogenic effects of dioxin［J］．Molecular Endocrinology，2007，22：304－316．

［36］Brunnberg S，Pettersson K，Rydin E，et al．The basic helix－loop－h(huán)elix－PAS protein ARNT functions as a potent coactivator of estrogen receptor－dependent transcription［J］．Proceedings of the National Academy of Sciences，2003，100：6517－6522．

［37］Min G，Kim H，Bae Y，et al．Inhibitory cross－talk between estrogen receptor（ER）and constitutively activated androstane receptor（CAR）．CAR inhibits ER－mediated signaling pathway by squelching p160coactivators［J］．Journal of Biological Chemistry，2002，277：34626－34633．

［38］Hockings J K，Thorne P A，Kemp M Q，et al．The ligand status of the aromatic hydrocarbon receptor modulates transcriptional activation of BRCA－1promoter by estrogen［J］．Cancer Research，2006，66：2224－2232．

［39］Ohtake F，Takeyama K，Matsumoto T，et al．Modulation of oestrogen receptor signalling by association with the activated dioxin receptor［J］．Nature，2003，423：545－550．

［40］Swedenborg E，R egg J，Hillenweck A，et al．3－Methylcholanthrene displays dual effects on estrogen receptor（ER）alpha and ER beta signaling in a cell－type specific fashion［J］．Molecular Pharmacology，2008，73：575－586．

［41］Arcaro K F，O′Keefe P W，Yang Y，et al．Antiestrogenicity of environ－mental polycyclic aromatic hydrocarbons in human breast cancer cells［J］．Toxicology，1999，133：115－127．