• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    液態(tài)甲醛對雄性小鼠生殖毒性的研究

    2012-08-14 08:01:48李亞琳
    動物醫(yī)學進展 2012年12期
    關(guān)鍵詞:生精染毒睪丸

    李亞琳

    (渭南師范學院化學與生命科學學院,陜西渭南714000)

    甲醛(formaldehyde)是一種無色、有刺激性氣味的 氣體,是重要的化工原料和有機溶劑,廣泛用于制造樹脂、塑料、橡膠、染料和油漆等。由于甲醛揮發(fā)度低,易從家具與裝飾材料中緩慢釋放而污染室內(nèi)空氣,經(jīng)呼吸道進入人體,并對機體健康產(chǎn)生各種危害[1]。室內(nèi)裝修中使用含有污染物的劣質(zhì)建筑裝飾材料,使居民的室內(nèi)空氣也受到了嚴重的污染[2],而且已成為危害公共健康的重要環(huán)境因素之一。甲醛作為一種常見的裝修型化學性室內(nèi)空氣污染物,以其來源廣,污染水平高,持續(xù)時間長,毒性大,毒害作用種類繁多等特點,受到人們的廣泛關(guān)注,世界衛(wèi)生組織(WHO)已將甲醛列為A1類化合物——人類致癌物[3]。甲醛對動物染毒的試驗研究表明,甲醛引起的危害是多方面的,如致雄性小鼠的DNA單鏈斷裂、染色體異常、姐妹染色體交換、基因突變、呼吸道和眼部刺激作用、致敏作用和免疫毒性、遺傳毒性[4-5],并能導致癌癥、肺及肝功能損害、神經(jīng)行為改變等[6-7]。隨著對甲醛的廣泛使用,關(guān)于甲醛污染對人體造成的危害已經(jīng)引起人們的高度重視。

    本試驗將采用液態(tài)甲醛染毒的方法,通過給小鼠腹腔注射不同濃度的甲醛溶液,觀察小鼠行為變化,測定小鼠睪丸的臟器系數(shù)、精子總數(shù)、精子存活率,并通過組織切片觀察生殖系統(tǒng)的病理變化,來探討甲醛對成年雄性小鼠生殖系統(tǒng)的毒性效應,為研究甲醛引起的人類疾病提供一定的試驗資料。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 實驗動物 成年雄性小鼠,體重為25g±2g,購于第四軍醫(yī)大學實驗動物中心,自由飲水和進食。

    1.1.2 試劑 生理鹽水,福爾馬林溶液,700、800、950mL/L乙醇,無水乙醇,二甲苯,伊紅,蘇木精,蛋白甘油,鹽酸乙醇,切片石蠟,中性樹膠。

    1.1.3 儀器 移液槍,恒溫水浴箱,電子分析天平,切片機,顯微鏡等。

    1.2 方法

    1.2.1 分組 雄性小鼠16只,試驗前先觀察1周,然后隨機分成4組,包括對照組和3個染毒組,每組4只。

    1.2.2 染毒方法 在無菌條件下,用生理鹽水配置成不同濃度的甲醛溶液,其濃度分別為2、20、200 mL/kg,臨用時配制。用不同濃度的甲醛溶液腹腔注射染毒,給藥量為每只小鼠0.1mL,對照組腹腔注射等體積的生理鹽水。每天上午10:00注射1次,持續(xù)3周,同時觀察行為變化。

    1.2.3 行為的觀察 每日觀察并記錄小鼠的飲食變化,外觀體征,行為活動,糞便性狀。

    1.2.4 睪丸臟器系數(shù)的測定 每組小鼠脫頸椎處死后稱其體重,并迅速取出睪丸,用電子天平準確稱重并記錄。計算睪丸臟器系數(shù)。臟器系數(shù)=睪丸質(zhì)量(mg)/小鼠體重(g)。

    1.2.5 精子懸液的制備 頸椎脫臼處死小鼠后,立即取出附睪,用預溫的37℃生理鹽水沖洗2次,用眼科剪縱向剪開附睪,置于加有3mL 37℃的生理鹽水的試管中,在恒溫箱中孵育20min,使精子充分游離。

    1.2.6 精子的存活率 取出一定量的精子懸液,與等體積的伊紅迅速充分混勻,使其染色后,取出10μL加入紅細胞記數(shù)板中,400倍鏡下觀察一個視野中的精子存活情況,活細胞染成紅色,死細胞為無色(鏡下觀察為透明)。精子存活率=活精子數(shù)/(活精子數(shù)+死精子數(shù))×100%。

    1.2.7 生殖系統(tǒng)的病理觀察 睪丸形態(tài)的肉眼觀察:將各組雄性小鼠脫頸椎處死后,取出兩側(cè)睪丸,并觀察顏色及形態(tài)的變化。

    精子畸形變化的觀察:按照以上的精子觀察的方法,計數(shù)精子數(shù)量并觀察不同染毒組的小鼠精子的形態(tài)變化。

    睪丸組織形態(tài)觀察:將各組雄性小鼠脫頸椎處死后,取睪丸,立即放入100mL/L的福爾馬林溶液中固定,梯度乙醇脫水,透明后常規(guī)石蠟包埋,間斷均勻切片5張~10張,切片厚度為7μm,蘇木精-伊紅(HE)染色,光鏡下觀察組織形態(tài)變化。

    1.2.8 統(tǒng)計學分析 表中數(shù)據(jù)代表4次重復試驗的平均值(±sD),結(jié)果用雙樣本t檢驗分析,P<0.05為差異顯著。

    2 結(jié)果

    2.1 行為的變化

    液態(tài)甲醛染毒后可以引起小鼠的食量減少,飲水量減少;初期,小鼠有抓嘴、抓鼻、撓耳朵等行為,隨后小鼠出現(xiàn)高度興奮、躁動不安、站立,攀爬等行為;最后,出現(xiàn)群聚、懶惰、個別的鼠則出現(xiàn)走路拖曳、搖擺等現(xiàn)象,并且高濃度組中有幾只小鼠有毛發(fā)缺少光澤,糞便不成形且變成黃白色等現(xiàn)象。

    2.2 睪丸的臟器系數(shù)

    由表1表明隨染毒劑量的增加,睪丸的臟器系數(shù)呈降低趨勢。與對照組相比,低劑量(2mg/kg)組具有顯著性差異(P<0.05),而中劑量(20mg/kg)組與高劑量(200mg/kg)組差異極顯著(P<0.01)。

    表1 甲醛對睪丸臟器系數(shù)的影響Table 1 Effect of formaldehyde on testicle organ coefficient

    2.3 精子總數(shù)、存活率

    由表2表明隨著染毒劑量的增加,精子總數(shù)逐漸減少,精子存活率逐漸降低。與對照組相比較,低劑量組具有顯著性差異(P<0.05),而中、高劑量組差異極顯著(P<0.01)。

    表2 甲醛對精子存活率的影響Table 2 Effect of formaldehyde on survive rates of the sperms

    2.4 生殖系統(tǒng)的病理觀察變化

    2.4.1 精子畸形的觀察 在400倍顯微鏡下觀察精子的頭部、體部和尾部的形態(tài)變化,出現(xiàn)雙頭狀、香蕉狀、無定形狀、肥胖以及雙尾、無尾、尾巴折疊等現(xiàn)象,這些精子均為畸形的精子,并隨染毒劑量的增加,精子畸變程度顯著升高,畸形的精子數(shù)量也逐漸增加。

    2.4.2 肉眼觀察 經(jīng)過解剖后,取出兩側(cè)睪丸觀察其顏色變化,對照組的顏色白色而有光澤;低濃度組與對照組接近;而中、高濃度組的顏色泛黃而無光澤,且表面可見紅色的毛細血管。

    2.4.3 組織形態(tài)觀察 對照組小白鼠的睪丸生精小管內(nèi)生精細胞豐富,層次分明,發(fā)育正常,管腔內(nèi)有許多精子,分布于支持細胞頂端(圖1A);低劑量組的各階段生精細胞基本正常,與對照組沒有顯著差異,但有部分細胞稀疏、變性、脫落,個別的小管內(nèi)可見精子出現(xiàn)水腫(圖1B);中劑量組小鼠睪丸病變進一步加重,出現(xiàn)廣泛性的生精細胞層次稀疏,生精細胞明顯水腫,生精細胞及支持細胞變性、壞死、脫落,小管內(nèi)可見個別變性水腫的精子(圖1C);高劑量組睪丸生精細胞層崩解減少,生精細胞廣泛脫落,小管內(nèi)生精上皮大多數(shù)水腫或皺縮,個別小管內(nèi)未見精子,僅見殘存的支持細胞(圖1D)。

    3 討論

    甲醛具有毒性,能對小鼠的生理及行為產(chǎn)生一定的影響,且甲醛溶液的濃度越高,染毒時間越長,其效果越明顯[8-9]。小鼠的行為變化與小鼠機體的生理活動和神經(jīng)支配有密切的聯(lián)系,有試驗已經(jīng)證明,當給小鼠注射甲醛溶液后,溶液滲入機體并對機體產(chǎn)生毒性效應,機體會通過周圍神經(jīng)和中樞神經(jīng)的相互作用而發(fā)出相應的信號,從而支配相應的行為變化[10]。本試驗通過對小鼠腹腔注射甲醛溶液后觀察其行為的變化,染毒后,小鼠的食量、飲水量均減少,由高度興奮、躁動逐漸變?yōu)槿壕?、懶惰,最后出現(xiàn)走路拖曳、搖擺等行為。

    甲醛對雄性小鼠的生殖器官有毒害作用,染毒后甲醛進入并作用于睪丸組織,對睪丸的生長及生理活動產(chǎn)生影響,從而造成睪丸組織的病理性變化,造成睪丸萎縮而使臟器系數(shù)降低[11-12]。本試驗研究表明隨著染毒劑量的升高,甲醛對小鼠生殖器官的毒性也增大,睪丸的臟器系數(shù)也變小,說明甲醛使小鼠睪丸發(fā)生了不同程度的萎縮。

    成年雄性小鼠的正常精子的產(chǎn)生、分化及成熟有賴于睪丸的生精細胞、支持細胞和間質(zhì)細胞之間的密切協(xié)調(diào),并受到下丘腦-垂體-性腺軸的控制,其中的任一環(huán)節(jié)出現(xiàn)障礙時,都會使生殖系統(tǒng)發(fā)生障礙。生精小管(seminiferous tubule)是精子的發(fā)生地,主要由生精上皮構(gòu)成,生精上皮由支持細胞和生精細胞構(gòu)成。成年的雄鼠生精細胞不斷發(fā)育為精子,其順序為精原細胞-初級精母細胞-次級精母細胞-精子細胞-精子。生精細胞沿著生精小管的管腔由內(nèi)向外依次排列,睪丸間質(zhì)是生精小管之間的富含血管的疏松結(jié)締組織,生精小管與血液之間存在血-睪屏障,血睪屏障能阻止某些物質(zhì)進入生精上皮,從而維持精子形成的微環(huán)境,而支持細胞主要為生精過程提供營養(yǎng)、分泌激素等,同時也是生精細胞的附著場所。當給小鼠腹腔注射甲醛溶液時,毒物會通過血液滲入睪丸組織,進而破壞了血-睪屏障,進入生精小管,破壞了生精細胞的正常生長發(fā)育過程,同時,支持細胞的功能也受到了阻礙,從而出現(xiàn)生精細胞層次減少、稀疏、脫落的現(xiàn)象,支持細胞也變性、壞死、脫落,整個過程將影響了精子的發(fā)生,從而使精子數(shù)量減少[13],并引起睪丸細胞DNA的損傷[14]。本試驗研究表明,經(jīng)過染毒后的小鼠睪丸組織發(fā)生病變,低濃度組的睪丸組織的生精細胞稀疏,中濃度組的變性、壞死、脫落,精子出現(xiàn)水腫,高濃組的壞死、脫落,并且隨著染毒劑量的增大,受損程度更加明顯。

    圖1 不同濃度甲醛處理的睪丸組織病理切片觀察(400×)Fig.1 Observation of testicle tissue section treated by different formaldehyde concentrations(400×)

    足夠的精子數(shù)量是維持正常生育力的重要前提,在評價有害因素對雄性生殖健康的影響時,精子數(shù)量的改變比其他指標更為敏感。精子計數(shù)是評價生殖毒性效應的重要指標,可反映生精細胞的功能[15]。本試驗研究發(fā)現(xiàn),小鼠經(jīng)甲醛染毒后,隨著染毒劑量的增加,各染毒組的精子數(shù)量、精子存活率均明顯降低,與對照組比較有極顯著性差異,表明甲醛能抑制精子的發(fā)生,干擾精子的形成和生長過程。

    目前認為,精子形態(tài)由多基因遺傳控制,常染色體上的基因控制精子畸形的類型,性連鎖基因Y-基因控制畸形精子的數(shù)量,因此,精子畸形率的增加在一定程度上反映出雄性生殖細胞的遺傳損傷。有研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)甲醛能使精子畸形的數(shù)目增加,引起嚴重的生殖毒性作用[9,15]。本試驗通過使小鼠染毒,并觀察不同劑量組的精子畸形的變化,表明甲醛溶液染毒后能影響精子的形成及生長發(fā)育過程,使精子發(fā)生不同程度的畸變,并隨染毒劑量的增加,精子畸變程度顯著升高,畸形的精子數(shù)量也逐漸增加。

    本研究通過甲醛腹腔注射使小鼠染毒,證明了甲醛能夠滲透并作用于睪丸組織,造成生殖器官萎縮,影響雄性小鼠的生精過程,造成睪丸組織的病理損傷,使精子生成數(shù)目減少,同時對精子的成熟過程造成一定的影響,使精子形態(tài)發(fā)生異常改變,畸變精子數(shù)目增加,直接影響生殖系統(tǒng)正常功能的發(fā)揮。

    [1] 趙 暉,王 地,于 萍,等.建筑環(huán)境中甲醛毒性的早期生物效應[J].建筑科學,2011(11):67-70.

    [2] 張曉勇,黃 衛(wèi),司 蔚,等.室內(nèi)空氣污染現(xiàn)狀及控制研究[J].環(huán)境科學與管理,2006(6):48-50.

    [3] WHO.International agency for research on cancer,classifies formaldehyde as carcinogenic to humans[M].Press Release,2004.

    [4] 吳成秋.居室空氣甲醛與苯污染的生殖和胚胎發(fā)育毒性及其作用機制研究[D].湖南長沙,中南大學,2010.

    [5] 武 陽.甲醛遺傳毒性與氧化損傷研究[D].湖北武漢,華中師范大學,2010.

    [6] Paget-Bailly S,Cyr D,Luce D.Occupational exposures and cancer of the larynx-systematic review and meta-analysis[J].J Occup Environ Med,2012,54(1):71-84.

    [7] National Toxicology Program.Final Report on Carcinogens Background Document for Formaldehyde[D].Rep Carcinog Backgr Doc,2010,(10-5981):i-512.

    [8] 程文文,李 蘭,胡傳祿,等.氣態(tài)甲醛致小鼠骨髓細胞DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)的研究[J].生態(tài)毒理學報,2010(2):112-117.

    [9] Duong A,Steinmaus C,McHale C M,et al.Reproductive and developmental toxicity of formaldehyde:a systematic review[J].Mutat Res,2011,728(3):118-138.

    [10] 童志前,韓嬋帥,苗君葉,等.內(nèi)源性甲醛異常蓄積與記憶衰退[J].生物化學與生物物理進展,2011(6):95-99.

    [11] Zhou D X,Qiu S D,Zhang J,et al.Reproductive toxicity of formaldehyde to adult male rats and the functional mechanism concerned[J].Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban,2006,37(4):566-569.

    [12] Ozen O A,Kus M A,Kus I,et al.Protective effects of melatonin against formaldehyde-induced oxidative damage and apoptosis in rat testes:an immunohistochemical and biochemical study[J].Syst Biol Reprod Med,2008,54(4-5):169-176.

    [13] Zhou D,Zhang J,Wang H.Assessment of the potential reproductive toxicity of long-term exposure of adult male rats to low-dose formaldehyde[J].Toxicol Ind Health,2011,27(7):591-598.

    [14] 董杰影,樓哲豐,鄭 重,等.用單細胞凝膠電泳技術(shù)檢測甲醛對小鼠睪丸細胞的DNA損傷[J].癌變·畸變· 突變,2004(3):21-23.

    [15] Wang H X,Zhou D X,Zheng L R,et al.Effects of paternal occupation exposure to formaldehyde on reproductive outcomes[J].J Occup Environ Med,2012,54(5):518-524.

    猜你喜歡
    生精染毒睪丸
    超聲診斷睪丸腎上腺殘余瘤1例并文獻復習
    大生產(chǎn)
    香煙煙霧染毒改良方法的應用*
    睪丸“犯擰”,趕快就醫(yī)
    染毒的臍帶
    PM2.5毒理學實驗染毒方法及毒理學效應
    精杞膠囊對大鼠生精功能損傷的保護作用
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:20
    生精細胞發(fā)育相關(guān)lncRNA的研究進展
    高脂飲食誘導大鼠生精功能障礙
    補腎利濕生精方治療少精或弱精癥的效果觀察
    两人在一起打扑克的视频| 不卡一级毛片| 国产欧美日韩一区二区三| 久久中文字幕人妻熟女| 黄色片一级片一级黄色片| 欧美精品av麻豆av| 亚洲精品成人av观看孕妇| 免费少妇av软件| 大陆偷拍与自拍| 久久九九热精品免费| 黑人猛操日本美女一级片| 精品卡一卡二卡四卡免费| 欧美亚洲日本最大视频资源| avwww免费| 国产日韩欧美亚洲二区| 精品国产一区二区久久| 99精品久久久久人妻精品| 日韩大码丰满熟妇| 国产成人精品久久二区二区91| 1024视频免费在线观看| 夫妻午夜视频| 国产视频一区二区在线看| 日韩欧美一区视频在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 男人操女人黄网站| 色婷婷av一区二区三区视频| 新久久久久国产一级毛片| 五月天丁香电影| av国产精品久久久久影院| 国产精品国产高清国产av | 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久久久水蜜桃国产精品网| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 无遮挡黄片免费观看| 成人特级黄色片久久久久久久 | 99久久人妻综合| 午夜视频精品福利| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲专区中文字幕在线| 久久久精品区二区三区| 日日夜夜操网爽| 中文字幕高清在线视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 下体分泌物呈黄色| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 久久久久久久久久久久大奶| 色尼玛亚洲综合影院| 成年人午夜在线观看视频| 国产在线观看jvid| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产精品久久电影中文字幕 | 精品国产亚洲在线| 在线天堂中文资源库| tocl精华| 国产av国产精品国产| 丝袜在线中文字幕| 90打野战视频偷拍视频| 精品国产一区二区久久| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 色综合婷婷激情| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 免费观看人在逋| 成人国语在线视频| 亚洲一区中文字幕在线| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲国产欧美一区二区综合| av天堂久久9| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国产成人精品无人区| 91麻豆av在线| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲男人天堂网一区| 在线观看免费日韩欧美大片| 国精品久久久久久国模美| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 国产亚洲精品第一综合不卡| 精品免费久久久久久久清纯 | 无限看片的www在线观看| videos熟女内射| 亚洲人成77777在线视频| 极品人妻少妇av视频| 亚洲欧美一区二区三区久久| 国产又色又爽无遮挡免费看| 电影成人av| 免费av中文字幕在线| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 桃红色精品国产亚洲av| 国产1区2区3区精品| 男人舔女人的私密视频| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲精品在线美女| 露出奶头的视频| 性少妇av在线| 色老头精品视频在线观看| 国产高清激情床上av| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | www.自偷自拍.com| cao死你这个sao货| 国产精品一区二区在线不卡| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产成人精品久久二区二区91| 免费av中文字幕在线| 天堂俺去俺来也www色官网| 欧美日本中文国产一区发布| 久久久久视频综合| 成人特级黄色片久久久久久久 | 色尼玛亚洲综合影院| 久久精品国产综合久久久| 久久久久久免费高清国产稀缺| 啦啦啦免费观看视频1| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产精品一区二区在线不卡| 午夜视频精品福利| 最近最新中文字幕大全免费视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产在线视频一区二区| 首页视频小说图片口味搜索| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 美女主播在线视频| www日本在线高清视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 18在线观看网站| 免费在线观看日本一区| 美女午夜性视频免费| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| av天堂久久9| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 人妻一区二区av| 大香蕉久久成人网| 免费在线观看日本一区| 亚洲国产看品久久| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲色图av天堂| 亚洲,欧美精品.| 精品国产乱码久久久久久小说| 一本久久精品| 久热这里只有精品99| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 亚洲av成人一区二区三| 欧美午夜高清在线| 免费不卡黄色视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产精品二区激情视频| 国产区一区二久久| 老司机深夜福利视频在线观看| 久久久精品区二区三区| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲性夜色夜夜综合| 日韩人妻精品一区2区三区| 久久午夜亚洲精品久久| 在线观看免费午夜福利视频| 国产亚洲欧美精品永久| 色综合婷婷激情| 久久久久久久大尺度免费视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 国产午夜精品久久久久久| 久久久久久久精品吃奶| 久久久久久久大尺度免费视频| 久热这里只有精品99| 亚洲一码二码三码区别大吗| 夜夜夜夜夜久久久久| 美女福利国产在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产午夜精品久久久久久| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产精品1区2区在线观看. | 欧美在线一区亚洲| 午夜日韩欧美国产| 在线永久观看黄色视频| 99热网站在线观看| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产精品 欧美亚洲| 欧美 日韩 精品 国产| 久久人妻熟女aⅴ| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 少妇精品久久久久久久| 久久香蕉激情| 国产精品1区2区在线观看. | 99riav亚洲国产免费| 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美av亚洲av综合av国产av| 久久香蕉激情| 亚洲五月色婷婷综合| 五月开心婷婷网| 高清av免费在线| 久久久久久久大尺度免费视频| 69av精品久久久久久 | 天堂中文最新版在线下载| 黑人欧美特级aaaaaa片| 午夜福利乱码中文字幕| 久久久国产成人免费| 色婷婷久久久亚洲欧美| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲avbb在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 男女边摸边吃奶| 午夜日韩欧美国产| 十八禁网站网址无遮挡| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜视频精品福利| 亚洲五月婷婷丁香| 老司机在亚洲福利影院| 国产男女超爽视频在线观看| 脱女人内裤的视频| 午夜福利欧美成人| 国产成人av教育| 欧美日韩av久久| 成人免费观看视频高清| 青青草视频在线视频观看| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产精品免费大片| 久久国产精品影院| 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 热re99久久国产66热| 精品人妻1区二区| 精品久久久久久久毛片微露脸| 久久久久视频综合| 久久久久网色| 天堂动漫精品| 人人妻人人澡人人看| 大片免费播放器 马上看| 亚洲第一av免费看| a级毛片在线看网站| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲伊人色综图| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 无限看片的www在线观看| 精品亚洲成a人片在线观看| 男女边摸边吃奶| 精品久久久精品久久久| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 黑人操中国人逼视频| 黄片小视频在线播放| 性少妇av在线| 亚洲全国av大片| 18在线观看网站| 又黄又粗又硬又大视频| 国产精品一区二区在线观看99| 两个人看的免费小视频| 午夜福利一区二区在线看| 人人妻人人澡人人看| 国产日韩欧美视频二区| 母亲3免费完整高清在线观看| 一区二区三区国产精品乱码| 久久久水蜜桃国产精品网| 成人18禁在线播放| 精品一区二区三卡| 性少妇av在线| 悠悠久久av| 母亲3免费完整高清在线观看| 9191精品国产免费久久| 深夜精品福利| 中文字幕最新亚洲高清| 国产免费av片在线观看野外av| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 一本综合久久免费| 成人永久免费在线观看视频 | 丁香六月天网| 五月开心婷婷网| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久久久精品国产欧美久久久| 九色亚洲精品在线播放| 日韩欧美三级三区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 99国产精品99久久久久| 一个人免费看片子| 中亚洲国语对白在线视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 久久久久久人人人人人| 亚洲九九香蕉| www.精华液| 另类精品久久| 老司机影院毛片| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久久国产一级毛片高清牌| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲中文av在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 老司机靠b影院| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产福利在线免费观看视频| 国产精品久久久久成人av| 亚洲中文av在线| 亚洲情色 制服丝袜| 亚洲 国产 在线| 深夜精品福利| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产福利在线免费观看视频| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 不卡一级毛片| 黄色视频,在线免费观看| 黄色丝袜av网址大全| 成人手机av| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 精品第一国产精品| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲国产欧美网| 国产在线免费精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产又爽黄色视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 97在线人人人人妻| 黑丝袜美女国产一区| 在线播放国产精品三级| 国产日韩欧美视频二区| 国产在线免费精品| 亚洲综合色网址| 在线观看免费视频日本深夜| 精品一区二区三卡| 欧美日韩视频精品一区| 色播在线永久视频| 欧美午夜高清在线| 日本av免费视频播放| 黑人操中国人逼视频| 少妇精品久久久久久久| 一级,二级,三级黄色视频| 日日夜夜操网爽| 国产深夜福利视频在线观看| 欧美在线一区亚洲| 欧美久久黑人一区二区| 亚洲精品在线美女| 99精国产麻豆久久婷婷| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久99一区二区三区| 我的亚洲天堂| 国产一区有黄有色的免费视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 热re99久久国产66热| 精品人妻在线不人妻| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 欧美日韩av久久| 久久久国产精品麻豆| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 日本黄色视频三级网站网址 | 在线看a的网站| av不卡在线播放| 免费高清在线观看日韩| 欧美乱码精品一区二区三区| 国产有黄有色有爽视频| 女性被躁到高潮视频| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 岛国毛片在线播放| 黑人操中国人逼视频| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 国产男靠女视频免费网站| 亚洲人成伊人成综合网2020| 97在线人人人人妻| 女人精品久久久久毛片| 欧美在线黄色| 免费av中文字幕在线| 少妇被粗大的猛进出69影院| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 午夜福利欧美成人| 国产片内射在线| 国产一卡二卡三卡精品| 精品少妇久久久久久888优播| 十八禁网站免费在线| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲男人天堂网一区| 淫妇啪啪啪对白视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 怎么达到女性高潮| 成人亚洲精品一区在线观看| 美女福利国产在线| 国产有黄有色有爽视频| 国产精品久久久久久精品电影小说| 欧美精品一区二区大全| 亚洲欧美激情在线| 99香蕉大伊视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 国产成人av教育| 亚洲伊人色综图| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 亚洲成人免费av在线播放| 精品久久蜜臀av无| 欧美黑人精品巨大| 国产在线精品亚洲第一网站| 99国产精品免费福利视频| 日本av手机在线免费观看| 亚洲精品美女久久av网站| 真人做人爱边吃奶动态| 欧美激情高清一区二区三区| 免费日韩欧美在线观看| 久久久久国内视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| av福利片在线| 在线观看人妻少妇| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 国产免费av片在线观看野外av| 欧美大码av| 午夜福利,免费看| 黄色a级毛片大全视频| 国产欧美亚洲国产| av电影中文网址| 满18在线观看网站| 午夜两性在线视频| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 一级片免费观看大全| 少妇 在线观看| 久久九九热精品免费| 老熟妇仑乱视频hdxx| 极品人妻少妇av视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产男女内射视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 黄色毛片三级朝国网站| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产精品国产高清国产av | 国产一区二区 视频在线| 99在线人妻在线中文字幕 | 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲精品乱久久久久久| 午夜福利一区二区在线看| 91老司机精品| 天天添夜夜摸| 成年人午夜在线观看视频| 国产黄色免费在线视频| 纯流量卡能插随身wifi吗| 99热网站在线观看| 日韩欧美一区视频在线观看| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产精品 国内视频| 手机成人av网站| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产高清视频在线播放一区| 成人国语在线视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色| 精品久久久久久久毛片微露脸| 热99国产精品久久久久久7| 母亲3免费完整高清在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 十八禁人妻一区二区| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲七黄色美女视频| 91九色精品人成在线观看| 五月开心婷婷网| 高潮久久久久久久久久久不卡| 久久天堂一区二区三区四区| 狂野欧美激情性xxxx| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 久9热在线精品视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| av网站免费在线观看视频| 午夜福利影视在线免费观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产精品电影一区二区三区 | 蜜桃在线观看..| av一本久久久久| 一区福利在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲美女黄片视频| 免费不卡黄色视频| 乱人伦中国视频| 亚洲国产av影院在线观看| 欧美+亚洲+日韩+国产| av福利片在线| 纯流量卡能插随身wifi吗| 男人操女人黄网站| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 成人国语在线视频| 欧美激情 高清一区二区三区| 在线观看免费高清a一片| 性色av乱码一区二区三区2| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 免费观看a级毛片全部| 无遮挡黄片免费观看| 正在播放国产对白刺激| 91成年电影在线观看| 欧美日韩av久久| 久久香蕉激情| 99re在线观看精品视频| 看免费av毛片| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲精品国产区一区二| 一本色道久久久久久精品综合| 久久毛片免费看一区二区三区| 一级毛片精品| cao死你这个sao货| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 男女床上黄色一级片免费看| 咕卡用的链子| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 亚洲伊人色综图| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产精品九九99| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产野战对白在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 丁香欧美五月| 国产精品一区二区免费欧美| 日韩欧美免费精品| 动漫黄色视频在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 久久久久国内视频| 十八禁高潮呻吟视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 色94色欧美一区二区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 69精品国产乱码久久久| 精品一区二区三卡| 亚洲色图综合在线观看| 天天操日日干夜夜撸| 丝袜在线中文字幕| 国产亚洲欧美精品永久| 美女高潮到喷水免费观看| a级毛片黄视频| 亚洲人成电影免费在线| 欧美黑人精品巨大| 午夜日韩欧美国产| 日韩大码丰满熟妇| 色在线成人网| 日本av手机在线免费观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 不卡一级毛片| 久久久国产一区二区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 欧美激情久久久久久爽电影 | 免费少妇av软件| 免费在线观看日本一区| 亚洲黑人精品在线| www.自偷自拍.com| 国产高清国产精品国产三级| 大陆偷拍与自拍| 激情视频va一区二区三区| 首页视频小说图片口味搜索| 精品少妇黑人巨大在线播放| 久久久久网色| 99久久国产精品久久久| 久久天堂一区二区三区四区| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美日韩视频精品一区| 国产不卡一卡二| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 新久久久久国产一级毛片| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 性色av乱码一区二区三区2| 12—13女人毛片做爰片一| 国产精品久久电影中文字幕 | 母亲3免费完整高清在线观看| 丝瓜视频免费看黄片| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产精品免费大片| 天天添夜夜摸| 不卡一级毛片| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产免费现黄频在线看| 亚洲欧美激情在线| 婷婷丁香在线五月| 国产午夜精品久久久久久| 国产精品98久久久久久宅男小说| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 一本一本久久a久久精品综合妖精| www日本在线高清视频| 一进一出抽搐动态| 国产主播在线观看一区二区| 大片免费播放器 马上看| 国产黄频视频在线观看| 国产不卡一卡二| 9191精品国产免费久久| 欧美乱妇无乱码| h视频一区二区三区| 午夜日韩欧美国产| 欧美精品一区二区免费开放| 91成人精品电影| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 天天操日日干夜夜撸| 精品人妻1区二区| 亚洲精品久久午夜乱码| 中亚洲国语对白在线视频| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产成人影院久久av| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产1区2区3区精品| 一区二区三区精品91| 免费少妇av软件| 亚洲国产欧美网| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产高清激情床上av| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 欧美日韩一级在线毛片|