高效液相色譜法測定鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素的含量

朱曦　劉引蘭　董文婷

摘要:獸藥鹽酸林可霉素預混劑含量測定收載于《進口獸藥質量標準》1999年版,是采用生物效價管碟法測定,該方法操作步驟復雜,影響因素多,檢測時間長。參考《中國獸藥典》2010年版收載的鹽酸林可霉素檢測方法,利用HPLC法進行檢測,使用C18色譜柱,柱溫(30±5)℃,以0.05mol/L硼砂溶液∶甲醇(1∶1)為流動相,檢測波長為214nm。林可霉素峰與林可霉素B峰分離良好,林可霉素峰與相鄰雜質峰的分離度符合要求,變異系數(RSD)小于1.5%。結果表明通過高效液相色譜法(HPLC)能快速準確地測定獸藥鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素的含量。

關鍵詞:高效液相色譜;鹽酸林可霉素預混劑;含量測定

中圖分類號:S859.79+6文獻標識碼:B文章編號:1007-273X(2012)10-0004-02

鹽酸林可霉素(Lincomycin Hydrochloride)又稱潔霉素,化學式C18H34N2O6S,為林可胺類藥物,屬窄譜抗生素。作用機理為抑制細菌細胞蛋白質的合成,有較好的抗革蘭氏陽性菌作用,特別是對葡萄球菌、溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌有較強的抑制作用,但其作用效果不及青霉素類和頭孢類[1]。臨床主要用于敏感菌引起的各種感染,如呼吸系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、皮膚及泌尿系統(tǒng)等組織的感染。用作飼料添加劑時可促進肉雞和育肥豬生長,提高其飼料利用率。隨著獸藥行業(yè)的發(fā)展,其監(jiān)督制度日益完善,為了適應獸藥生產單位質量自控與監(jiān)督檢驗機構逐漸增加的監(jiān)督檢驗任務的需要,本試驗利用高效液相色譜(HPLC)檢測原理,建立了快速、準確的用高效液相色譜(HPLC)法測定獸藥鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素含量的方法。

1材料與方法

1.1主要儀器與試劑

2結果

2.1適應性試驗結果

適應性試驗結果表明林可霉素與林可霉素B兩峰完全分離,相鄰之間的分離度為4.35(表1)。色譜峰峰形較好,兩峰系統(tǒng)適應性良好(圖1)。積分基線在同一水平,表明其積分穩(wěn)定,樣品主峰保留時間與標準品主峰保留時間一致,說明所測物質相同。由于樣品是預混劑,物質成分復雜,雜質峰容易影響主物質峰,此方法中樣品主峰與雜質峰分離較好(圖2)。空白溶液中主峰出峰時間無雜質峰和溶劑峰,表明流動相及溶劑對本方法無干擾。

3結論

本試驗建立了高效液相色譜(HPLC)法測定獸藥鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素的含量。試驗結果表明,樣品溶液與對照品溶液出峰時間一致,積分穩(wěn)定,林可霉素峰與林可霉素B峰分離度達到規(guī)定要求,與雜質峰完全分離,系統(tǒng)穩(wěn)定性好。該方法測出樣品峰面積的對數與濃度呈良好的線性關系,平均回收率為97.9%,相對標準偏差(RSD)為1.0%。采用本法檢測與國內現行的《進口獸藥質量標準》所采用的抗生素微生物測定法(生物效價法)相比,檢測結果相對一致,且本法具有快速、簡便、準確、穩(wěn)定性和重現性好、能夠批量檢驗等優(yōu)點。適用于實際生產、質量監(jiān)督等過程中對鹽酸林可霉素預混劑中林可霉素含量的測定,為該產品的質量控制與分析提供了有力的技術保障。

參考文獻:

[1]中國獸藥典委員會.獸藥使用指南化學藥品卷[S].北京:中國農業(yè)出版社,2005.

[2]中華人民共和國農業(yè)部.進口獸藥質量標準[S].北京:中國農業(yè)出版社,1999.

[3]中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典[S].北京:中國農業(yè)出版社,2010.