晚期前列腺癌組織中Caspase-3、survivin的表達(dá)變化及意義

許學(xué)文，由 凱，卜仁戈，費(fèi) 翔，殷 波，宋永勝

(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院，沈陽110004)

目前研究認(rèn)為［1，2］，前列腺癌(PCa)的發(fā)生發(fā)展過程中有Caspase-3和survivin參與，但其具體機(jī)制及其相互作用不明。2000年12月～2010年12月，我們對(duì)晚期PCa組織中Caspase-3及survivin的表達(dá)變化進(jìn)行觀察，探討其在PCa的發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 46例晚期PCa組織均為我院病理存檔標(biāo)本。46例患者的年齡為60～87歲，平均72．2歲。臨床分期:Ⅲ期10例，Ⅳ期36例;其中38例行經(jīng)尿道電切術(shù)，8例前列腺穿刺活檢術(shù)。另選良性前列腺增生癥(BPH)組織24例為對(duì)照，BPH患者的年齡為54～86歲，平均71．8歲;11例行經(jīng)尿道電切術(shù)，13例行恥骨上前列腺切除術(shù)。所有病例均經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)并有完整的臨床資料，在術(shù)前均未接受過內(nèi)分泌治療、放化療，如期出院。

1．2 Caspase-3及survivin檢測(cè)方法 所有標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片。兔抗人Caspase-3多克隆抗體為美國(guó)Santa Cruz生化技術(shù)公司產(chǎn)品。兔抗人survivin多克隆抗體為北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。所有切片均采用免疫組化SP法染色，按試劑說明書操作。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒者為 Caspase-3、survivin陽性細(xì)胞。

高倍鏡下(×400)隨機(jī)觀察5個(gè)視野，計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，以陽性細(xì)胞數(shù)及染色強(qiáng)度計(jì)分:陽性細(xì)胞10%為0分、～50%為1分、～80%為2分、＞80%為3分，細(xì)胞質(zhì)無著色為0分、淡黃色為1分、棕黃色為2分、棕褐色為3分，兩分之和，0～1分為陰性(－)，2～6分為陽性，其中2～4分為弱陽性(+)，5～6分為強(qiáng)陽性(++)。

1．3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)軟件，數(shù)據(jù)分析用χ2檢驗(yàn)和Spearman相關(guān)分析法。α=0．05。

2 結(jié)果

晚期PCa及BPH組織中Caspase-3陽性表達(dá)率分別為58．7%和83．3%(P ＜0．05)，survivin 陽性表達(dá)率分別為45．7%和 20．8%(P ＜0．05)。其中高分化與低分化的PCa組織中Caspase-3陽性表達(dá)率分別為66．7%(20/30)和 43．8%(7/16)，P ＞0．05。高分化和低分化的PCa組織中survivin表達(dá)分別為36．7%(11/30)和68．8%(11/16)，P ＜0．05。

46例晚期PCa組織中，12例呈Caspase-3陽性表達(dá)者，survivin均呈陰性表達(dá)。Caspase-3與survivin 表達(dá)無相關(guān)性(r=0．028，P=0．852)。

3 討論

細(xì)胞凋亡缺失或減少在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展中起到非常重要的作用。很多晚期惡性腫瘤中存在細(xì)胞凋亡失調(diào)［3］，使其治療變得更加棘手，預(yù)后不佳。

Caspase-3是一種細(xì)胞內(nèi)半胱氨酸蛋白水解酶，被Caspase-9等家族成員激活后，Caspase-3全部或部分負(fù)責(zé)底物的蛋白水解，在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過程中起著關(guān)鍵作用。研究發(fā)現(xiàn)［1］，Caspase-3在PCa組織中的表達(dá)低于BPH組織。我們發(fā)現(xiàn)，晚期PCa組織中Caspase-3表達(dá)下調(diào)，提示Caspase-3在PCa的發(fā)展中發(fā)揮一定作用。

survivin是一種結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的凋亡抑制蛋白。其過度表達(dá)可以引起腫瘤細(xì)胞的抗凋亡作用。有研究發(fā)現(xiàn)［2］，PCa組織中survivin的表達(dá)明顯高于BPH。本研究結(jié)果顯示，晚期PCa組織中survivin表達(dá)明顯高于BPH組織，這與文獻(xiàn)［4］所報(bào)道的結(jié)果近似。提示survivin在晚期PCa中發(fā)揮一定凋亡抑制作用。

survivin主要通過直接抑制細(xì)胞凋亡的執(zhí)行酶Caspase-3和Caspase-7的活性來阻斷細(xì)胞凋亡過程。在宮頸癌、肺癌組織中Caspase-3與survivin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系［5］，而在乳腺癌組織中未發(fā)現(xiàn)明顯相關(guān)性。有學(xué)者認(rèn)為，早期PCa中抑制survivin表達(dá)可上調(diào) Caspase-3表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡［6］。本研究中我們發(fā)現(xiàn)，在晚期 PCa組織中Caspase-3與 survivin的表達(dá)無相關(guān)性，提示晚期PCa中survivin可能通過其他途徑發(fā)揮抗凋亡作用。

綜上，晚期 PCa組織中存在 Caspase-3與 survivin的表達(dá)失調(diào)，Caspase-3與survivin的表達(dá)無相關(guān)性，兩者均在Pca發(fā)展中發(fā)揮作用。

［1］ Winter RN，Kramer A，Borkowski A．Loss of Caspase-1 and Caspase-3 protein expression in human prostate cancer［J］．Cancer Reserch，2001，61(3):1227-1232．

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［3］Chen P，Li J，Ge LP．Prognostic value of survivin，X-linked inhibitor of apoptosis protein and second mitochondria-derived activator of caspases expression in advanced non-small-cell lung cancer patients［J］．Respirology，2010，15(3):501-509．

［4］Kaur P，Kallakury BS，Sheehan CE．Survivin and Bcl-2 expression in prostatic adenocarcinomas［J］．Arch Pathol Lab Med，2004，128(1):39-43．

［5］Lu H，Gan M，Zhang G，et al．Expression of survivin，Caspase-3 and p53 in cervical cancer assessed by tissue microarray:correlation with clinicopathology and prognosis［J］．Eur J Gynaecol Oncol，2010，31(6):662-666．

［6］朱翔，寧鈞宇，由江峰．應(yīng)用RNA干擾技術(shù)研究激素非依賴性高轉(zhuǎn)移潛能前列腺癌細(xì)胞中survivin的表達(dá)及意義［J］．中華病理學(xué)雜志，2006，35(9):549-554．