轉基因動物及其食品安全評價技術研究進展＊

宋社果，安小鵬，楊明明，曹斌云

（1.西北農(nóng)林科技大學食品科學與工程學院，陜西楊陵 712100；2.西北農(nóng)林科技大學動物科技學院，陜西楊陵 712100）

轉基因動物食品（transgenic animal food）是指利用分子生物學手段，將備選生物的外源基因轉移到特定受體動物體內(nèi)，使其出現(xiàn)與原品種不同的性狀或產(chǎn)物。將以轉基因動物及其產(chǎn)品為原料加工生產(chǎn)的食品稱為轉基因動物食品。通過這種技術可獲得更符合人們要求的食品，具有產(chǎn)量高、營養(yǎng)豐富、保健作用強等優(yōu)勢，但必須對其可能造成的遺傳基因污染等安全性進行可靠的評價才能推廣應用［1］。

1 國內(nèi)外轉基因動物及其食品安全評價的發(fā)展趨勢

1.1 我國非常重視轉基因動物及其食品安全評價問題

我國非常重視轉基因動物及其食品的研究，其理由是由于轉基因技術與傳統(tǒng)育種技術的本質(zhì)都是通過獲得優(yōu)良基因進行遺傳改良，而兩者不同的是，傳統(tǒng)常規(guī)雜交育種是將整條的基因組（染色體）轉移，而轉基因育種是選取基因組中最有用的一小段特定基因進行轉移?？梢?，轉基因比常規(guī)雜交具有更高的選擇性和目的性。因此，將轉基因技術與傳統(tǒng)育種技術緊密結合，能培育出多抗、優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高效新品種，大大提高動物品種的改良效率，并可降低糧食消耗，在保障食品安全、保護生態(tài)環(huán)境、拓展動物農(nóng)業(yè)功能等方面潛力巨大［2］。

目前，我國在轉基因動物育種及其食品開發(fā)利用方面出現(xiàn)了兩個不容忽視的問題，一方面是國家高度重視轉基因動植物育種工作，投入巨資開展研究，成績斐然；另一方面是部分科技工作者及其廣大民眾對轉基因動植物的安全性質(zhì)疑聲日益高漲，其影響程度已遠遠超過技術體系本身范疇?？梢?，很好地解決這些問題的關鍵是要設計出讓廣大消費者放心的轉基因動物安全評價技術體系。近幾年來，我國在轉基因動物研究方面進展很快，先后有牛、羊、豬、魚等轉基因動物產(chǎn)生，其中有多種轉基因動物相繼進入環(huán)境釋放，乃至安全證書認證階段。盡管我國政府及其主管部門對于轉基因動物的安全評價極其慎重，國務院于2001年5月23日頒布了《農(nóng)業(yè)轉基因生物安全管理條例》，并在農(nóng)業(yè)部專門建立了國家轉基因動物評價安全委員會，制定了相關評價標準和框架體系，每年定期精心組織開展對申報的轉基因動物及其產(chǎn)品進行安全評價，對于我國轉基因動物的安全起到了非常重要的作用，也為進一步完善我國轉基因動物安全評價體系積累了豐富的經(jīng)驗，并奠定了相當堅實的基礎。但由于我國轉基因動物安全評價體系的建立仍然處于初創(chuàng)階段，不可避免的存在著重國外引進，輕自主研究；重定性判斷，輕定量裁定；重主觀標準，輕客觀測量；重宏觀體系，輕微觀細則；重標準制定，輕操作要求；重單一技術，輕配套技術；重體系構建，輕標準銜接；重書面審查，輕現(xiàn)場查驗等問題。以上這些問題的存在，盡管是發(fā)展中逐步完善的課題，但在我國將動植物種業(yè)提高到國家戰(zhàn)略層面，高度重視轉基因動物安全的前提下，尤其是在廣大民眾普遍關切我國轉基因動物安全的大背景下，迫切需求加快轉基因動物安全評價體系的研究，盡快為國家、為民族、為廣大城鄉(xiāng)消費者研制出具有中國特色，黨和國家及廣大人民群眾十分放心的轉基因動物安全評價體系，為我國轉基因動物的安全、健康的可持續(xù)發(fā)展保駕護航，為廣大城鄉(xiāng)消費者放心消費轉基因動物產(chǎn)品提供安全的技術壁壘和屏障［3］。

1.2 轉基因動物及其食品的潛在危害性

隨著轉基因技術的發(fā)展，人們對轉基因技術的弊端也有了更為深刻的認識，對轉基因生物安全性爭論主要集中在以下幾個方面：

1.2.1 轉基因動物通過食物鏈對人類產(chǎn)生直接影響 由于轉基因動物的分子和生化機制改變，通過食物鏈可能對人健康造成的危害總結為4點：一是轉基因動物中的毒素可引起急、慢性中毒或產(chǎn)生致癌、致畸、致突變作用；二是動物中免疫或致敏物質(zhì)可使人類機體產(chǎn)生變態(tài)或過敏反應；三是基因產(chǎn)品中的主要營養(yǎng)成分、微量營養(yǎng)成分及抗營養(yǎng)因子的變化，會降低食品的營養(yǎng)價值，使其營養(yǎng)結構失衡；四是人們在食用轉抗性基因的食物后，食物會在人體內(nèi)將抗藥性基因傳給致病的細菌，使人體細菌產(chǎn)生抗藥性［4－5］。

1.2.2 通過生態(tài)鏈對環(huán)境產(chǎn)生影響 轉基因產(chǎn)品可能對環(huán)境質(zhì)量、生態(tài)系統(tǒng)或生態(tài)平衡產(chǎn)生不利影響。轉基因生物可能在自然界中釋放，將污染自然基因庫，打破原有的生態(tài)平衡，對生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生難以預料的沖擊。轉基因動物通過與野生物種雜交，會出現(xiàn)野生物種瘋長并難以控制。有些轉基因動物進入自然環(huán)境或生態(tài)系統(tǒng)后，通過動物雜交，會將轉基因特性傳給其他動物，使其他動物產(chǎn)生病蟲害，嚴重的會因此攪亂原有的生態(tài)平衡、生態(tài)秩序。

1.2.3 轉基因產(chǎn)品有助于制造生物武器 生物武器可能對人類帶來毀滅性的危險，克隆技術、遺傳工程等也沖擊人類傳統(tǒng)道德、破壞人類秩序。轉基因產(chǎn)品與倫理道德等問題也引起世界各國的廣泛重視。

1.3 不同國家對轉基因動物及其食品的評價態(tài)度

對于轉基因動物及其產(chǎn)品的潛在性風險，各國政府的出發(fā)點都是在保證人類健康、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和環(huán)境安全的基礎上，促進其發(fā)展。但由于各國農(nóng)業(yè)資源情況、文化背景、轉基因技術水平，民眾風險意識、政府態(tài)度不同而對轉基因動物及其產(chǎn)品態(tài)度不一。美國政府認為轉基因產(chǎn)品非常安全，因為該產(chǎn)品是生物技術創(chuàng)新和發(fā)展的應用，從本質(zhì)上說是經(jīng)過生物科技加速的自然選擇過程，動物基因工程與目前的動物培育技術并無巨大差異。歐盟則認為轉基因產(chǎn)品對人類健康和生態(tài)環(huán)境可能造成一定的危害并大力宣傳轉基因作物的風險甚至稱其為“魔鬼食品”或“自殺食品”，這大大影響了歐洲消費者對轉基因產(chǎn)品的看法［3］。日本政府對轉基因產(chǎn)品的態(tài)度既不像美國那樣寬松，也不像歐盟那樣謹慎。黨中央、國務院高度重視轉基因技術研究與應用。2006年，將轉基因生物新品種培育重大專項列入《國家中長期科學和技術發(fā)展規(guī)劃綱要》（2006－2020年）。2008年7月，國務院批準啟動了轉基因生物新品種培育重大專項。2009年6月，國務院發(fā)布《促進生物產(chǎn)業(yè)加快發(fā)展的若干政策》，提出“加快把生物產(chǎn)業(yè)培育成為高技術領域的支柱產(chǎn)業(yè)和國家的戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)”。2010年中央1號文件提出，“繼續(xù)實施轉基因生物新品種培育科技重大專項，抓緊開發(fā)具有重要應用價值和自主知識產(chǎn)權的功能基因和生物新品種，在科學評估、依法管理基礎上，推進轉基因新品種產(chǎn)業(yè)化。”盡管我國相繼頒發(fā)了《新食品資源衛(wèi)生管理辦法》、《基因工程安全管理辦法》、《農(nóng)業(yè)生物工程安全管理實施辦法》、《動植物轉基因安全條例》等一系列法規(guī)文件，但是與發(fā)達國家相比，我國轉基因生物及其產(chǎn)品安全管理工作處于初創(chuàng)階段，轉基因動物及其產(chǎn)品安全評價技術體系仍需進一步完善。

轉基因生物不確定的危害性威脅著全人類生活環(huán)境和人類健康，并且由轉基因生物引起的國際爭端也愈演愈烈。一方面，如果放任轉基因生物越境轉移，一國轉基因生物造成的生態(tài)環(huán)境和人類健康問題將迅速全球化；另一方面，如果放任各國對轉基因生物采取不同的限制措施，扼殺對促進農(nóng)業(yè)發(fā)展和人類進步頗具前途的基因技術，甚至阻礙非轉基因產(chǎn)品的正常貿(mào)易。在這種情況下，來自130多個國家的代表在經(jīng)過長達5年的談判之后，《生物安全議定書》于2000年1月28日獲得通過。議定書規(guī)定，對于轉基因生物實行風險預防原則（precautionary principle），即對于新生事物，當還不能確定它的出現(xiàn)將會產(chǎn)生怎樣的后果時，一定要以非常謹慎的態(tài)度來對待它。應當首先認真考察它的安全性，只有在完全確認了它是安全的之后，才能夠讓其得到進一步的發(fā)展。

目前，食品價格上漲和全球食品短缺為各國政府、食品企業(yè)以及消費者帶來新的壓力，促使人們重新審視對轉基因技術的態(tài)度，至是在最反對轉基因食品的歐洲，一些主要的政府官員和商業(yè)領袖也開始呼吁批準進口轉基因作物。因此，對轉基因生物及其產(chǎn)品的安全性進行合理評價尤為重要。

1.4 國內(nèi)外轉基因動物的安全評價標準的研究趨勢

轉基因動物及其產(chǎn)品的研發(fā)對于構建人類疾病模型、基因治療、生產(chǎn)轉基因藥物、提高動物產(chǎn)量和動物產(chǎn)品品質(zhì)等不可或缺。雖然其潛在的風險尚未顯現(xiàn)，但從人類自身健康和社會生態(tài)環(huán)境安全方面出發(fā)，除了對轉基因動物及其產(chǎn)品的研究和利用采取嚴格的安全審查和管理制度外，對其安全檢測與評價也顯得尤為重要。但目前為止，與轉基因植物相比，我國和世界上對轉基因生物及其產(chǎn)品安全的數(shù)據(jù)和市場監(jiān)管經(jīng)驗都相對較少［1］，對轉基因動物及其產(chǎn)品的安全性能評價體系也相對不完善。2001年，加拿大政府一份臨時性報告認為，盡管對轉基因動物的安全性評估仍需要指定詳盡的規(guī)劃，但對轉基因植物的評估原則可以用來轉基因動物的評估［3，6］。綜上所述，建立可靠、高效的轉基因動物及其食品的安全評價體系，有助于在針對我國現(xiàn)有國情條件下及時有效地對轉基因動物及其產(chǎn)品風險進行正確評估，在轉基因動物及其產(chǎn)品在促進人類社會和諧健康發(fā)展，快速提高人民生活質(zhì)量，降低生活成本的基礎上得到健康快速的可持續(xù)發(fā)展。

2 轉基因動物及其食品安全評價技術的研究進展

目前，發(fā)達國家對于轉基因動物產(chǎn)品安全性的評估主要集中在有實質(zhì)等同性，是否具有應變原性，是否會發(fā)生基因轉移，是否具有毒性，是否會引起外源激素攝入，是否會產(chǎn)生破壞性基因或者導致破壞性基因的蔓延、對生態(tài)環(huán)境的破壞性，完善后期市場的監(jiān)控等方面。我國借鑒發(fā)達國家的經(jīng)驗，也對轉基因動物安全性評價做出了相應的規(guī)定，包括受體動物的安全性評價，基因操作的安全性評價，轉基因動物的安全性評價和轉基因動物產(chǎn)品的安全性評價4個方面?？v觀世界各國對于轉基因動物安全評價的研究重點及趨勢，結合我們直接從事轉基因動物安全評價的實踐，我們認為對轉基因動物的體內(nèi)安全性評估應當包括以下幾個方面。

2.1 轉移的外源基因本身安全性評價的技術

轉移的外源基因本身安全性評價的關鍵技術外源基因分為三類，即輔助轉化的基因（如報告基因、抗生素抗性篩選基因），改良性狀的目的基因（如抗病、品質(zhì)性狀改良）和調(diào)控目的基因表達的序列（如啟動子、終止子和增強子序列）。轉基因生物所含外源基因的釋放必須經(jīng)過嚴格的審批，因此對外源基因的鑒定及其安全性評價是轉基因動物安全性評估的一個重要方面。

DNA測序技術結合生物信息學的預測技術是被國內(nèi)外研究者證明可廣泛的應用于核酸鑒定、分類及功能預測的重要成熟技術和方法。通過序列測序結果與各生物信息中心數(shù)據(jù)庫中已經(jīng)發(fā)布的序列比對，根據(jù)與其相似度高的序列的序列信息驗證外源基因的功能和特性，并結合相關研究報道進行已轉入基因的安全性評價。

2.2 外源基因插入位點核定的關鍵技術

將外源基因導入受體動物細胞時，因外源基因插入動物基因組的形式、位置和拷貝數(shù)具有差別，所以得到的轉基因動物并不相同，同一轉化過程往往能獲得多個獨立的轉基因動物類型。因此，對不同轉基動物進行篩選評價，確定其插入位點是國內(nèi)外評價轉基因動物體內(nèi)安全的重要方面［7］。

2.2.1 反向PCR技術 通過對外源基因插入位點兩側序列進行克隆分析是確定外源基因插入位點的一個重要方法，其中反向PCR技術（Inverse PCR，IPCR）是最早提出的基于PCR的染色體步移技術之一，操作簡單，且可同時獲得已知序列兩側的未知序列并已成功用于轉座子整合位點的分析、啟動子的克隆等。此種方法具有較高的靈敏度，因此容易導致假陽性和假陰性結果［8］。

2.2.2 熒光原位雜交技術 可通過熒光雜交信號對外源DNA序列在染色體或DNA纖維上進行定位、定性、相對定量分析。與反向PCR技術相比，熒光原位 雜 交 技 術 （fluorescent in situ hybridazation，F(xiàn)ISH）具有安全性高，周期短，信號強，較低的假陽性假陰性等優(yōu)點，目前已經(jīng)成功用于馬鈴薯進行重復序列的定位和抗蟲基因準確的染色體定位等?；谇叭搜芯砍晒?，應用FISH技術可對外源基因在轉基因動物體內(nèi)進行定位、定性和相對定量分析具有很大可行性［9］。

2.2.3 鋅 指 核 酸 酶 技 術 （zinc finger nuclease，ZFN）技術 該技術是近年來發(fā)展起來的一種對基因組DNA實現(xiàn)靶向修飾的新技術。它通過作用于基因組DNA上特異的靶位點產(chǎn)生DNA雙鏈切口（double strand break，DSB），然后經(jīng)過非同源末端連接（non－h(huán)omologous end joining，NHEJ）或同源重組（homologous recombination，HR）途徑實現(xiàn)對基因組DNA的靶向敲除或者替換，無物種特異性。采用鋅指核酸酶技術針對插入序列兩側序列設計兩個或多個鋅指核酸酶，實現(xiàn)外源基因的定點刪除，對檢測出的插入位點進行驗證。目前該技術已經(jīng)被廣泛應用于基因靶向修飾的研究［10］。

2.2.4 外源插入基因對上下游基因影響測定的技術

基因表達系列分析 （serial analysis of gene expression，SAGE）可以高通量且快捷有效的研究基因表達，研究由細胞轉錄變化引起的生物現(xiàn)象，而無須對基因性質(zhì)和生物系統(tǒng)預先有所了解。它不但能快速、詳細地同時檢測成千上萬個基因轉錄本的豐富信息，并且能對這些轉錄本的表達拷貝數(shù)進行定量分析，還發(fā)現(xiàn)潛在的未知基因［11］。此項技術可用于檢測轉基因山羊體內(nèi)由于外源基因的導入對上下游基因表達的影響。規(guī)模化蛋白質(zhì)表達譜研究的主要任務和目標就是研究一個完整的生物體（個體、組織或細胞）所表達的全套蛋白質(zhì)隨時間和空間的變化，包括蛋白質(zhì)的表達豐度、表達差異、與基因組和轉錄組的關系等，應用此項技術可在蛋白質(zhì)水平上獲得對轉基因山羊體內(nèi)基因表達變化的全面認識［12］。目前，研究蛋白質(zhì)表達譜的技術路線主要有兩條，一條是傳統(tǒng)的基于凝膠電泳的（gel－based）蛋白質(zhì)鑒定技術，如雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳（2－DE）結合質(zhì)譜技術，在比較蛋白質(zhì)組學研究中廣泛被運用；另一條是基于非膠體系的多維液相層析分離與生物質(zhì)譜相結合的技術路線（MudPIT），數(shù)據(jù)產(chǎn)出通量高、速度快和Top－Down策略，鑒定蛋白質(zhì)的序列覆蓋率高，可以分析蛋白質(zhì)的翻譯后修飾位點。由于動物結構的復雜性，該項技術主要運用于某個器官或者組織中的蛋白質(zhì)組，并被成功用于小鼠腦蛋白質(zhì)組、小鼠上皮神經(jīng)組織的蛋白質(zhì)表達譜、人乳腺上皮細胞蛋白質(zhì)等［13－14］。

2.2.5 轉基因動物的遺傳穩(wěn)定性檢測技術 轉基因動物的遺傳穩(wěn)定性指紋圖譜檢測技術是指能夠鑒別生物個體之間差異的電泳圖譜，可靠方便、準確快速、不受環(huán)境影響，反映了個體間的內(nèi)在差異，適合于親子代之間遺傳差異性的鑒定工作，可以用于轉基因動物體內(nèi)遺傳穩(wěn)定性的檢測。目前在品種鑒定中應用較多的指紋圖譜主要有兩種，一種是較早開始研究的生化指紋圖譜，包括同工酶電泳指紋圖譜和蛋白電泳指紋圖譜；另一種是20世紀90年代之后發(fā)展起來的DNA指紋圖譜。目前用于生物品種鑒定的主要有4種，即RFLP、RAPD、SSR和 AFLP。該4項技術操作體系成熟，簡單方便，有很強的可操作性。

2.2.6 轉基因動物免疫性檢測技術 轉基因動物免疫性檢測技術是指利用免疫反應特異性的原理，建立各種檢測與分析的技術。常規(guī)免疫檢測技術主要是用于檢測抗原或抗體的體外免疫血清學反應或免疫血清學技術。免疫血清學技術是建立在抗原抗體特異性反應基礎上的檢測技術?，F(xiàn)代免疫檢測技術的發(fā)展非?？欤延性S多新的方法和技術出現(xiàn)。在基因的分離、克隆的篩選，表達產(chǎn)物的定性與定量分析，表達產(chǎn)物的純化等均涉及到免疫技術。如通常用免疫沉淀方法分離mRNA基因，酶標抗體核酸探針（地高辛核酸探針）檢測篩選克隆，免疫轉印技術分析表達產(chǎn)物的分子量、ELISA或RIA分析表達量、免疫親和層析純化表達產(chǎn)物，免疫方法分析表達產(chǎn)物的性質(zhì)如免疫原性。免疫檢測技術已是評價轉基因安全性研究中必不可少的方法［15－16］。

2.2.7 轉基因動物生物學特性檢測技術 張甫英等人對采食轉"全魚"基因黃河鯉的小鼠的生理和病理研究證明，對照組小鼠和試驗組小鼠其生長、血液常規(guī)、血液生化、組織病理等方面沒有顯著差異，從而得出，轉“全魚”基因黃河鯉魚與普通黃河鯉魚在食品安全方面具實質(zhì)等同性［17－18］。但一份轉基因動物的制備過程中，會用到逆轉錄病毒序列，采用逆轉錄病毒序列可能會出現(xiàn)與野生病毒發(fā)生重組的危險，從而產(chǎn)生一種新型的逆轉錄病毒［19－20］。插入的 DNA片段會激活潛在的病毒，但是也有人認為動物細胞可以抑制內(nèi)源病毒序列的活性［19］。以轉基因動物作為食物，對其消化不足將會導致外源激素的攝入，外源激素的添加對動物體或者人體正常功能的運行有何影響尚且未知。英國《獨立報》披露了轉基因食品巨頭孟山都公司的一份秘密報告，給小鼠喂食轉基因玉米后，發(fā)現(xiàn)其血液發(fā)生變化，腎臟出現(xiàn)異常［20］。

2.2.8 基因芯片檢測技術 基因芯片技術是鑒別微生物和轉基因成分最有效的手段之一，為全面、快速、準確地進行食品安全檢測提供了一個嶄新的平臺?；蛐酒―NA芯片、DNA微陣列）技術是近十幾年來在生命科學領域迅速發(fā)展起來的一項高新技術，是一項基于基因表達和基因功能研究的革命性技術，它綜合了分子食品工程 、微生物學、半導體微電子、激光、化學染料等領域的最新科學技術，在生命科學和信息科學之間架起了一道橋梁，是當今世界上高度交叉、高度綜合的前沿學科和研究熱點。目前基因芯片正在成為食品和食品原料檢測中一種較新的方法，檢測食品的營養(yǎng)成分，監(jiān)督食品的衛(wèi)生、安全和食品質(zhì)量，保證人類健康，并且將對整個食品領域產(chǎn)生深刻的影響。與傳統(tǒng)的檢測方法（細菌培養(yǎng)、生化鑒定、血清分型等）相比，基因芯片技術的先進性主要體現(xiàn)在：①基因芯片可以實現(xiàn)微生物的高通量和并行檢測，一次實驗即可得出全部結果；②操作簡便快速，整個檢測只需4h基本可以出結果（而傳統(tǒng)方法一般需4d～7d）；③特異性強，敏感性高。

盡管基因芯片技術的研究和應用前景十分誘人，但作為一項新技術，仍有一些問題需要解決：①該技術需要大量的已測知的、準確的DNA、cDNA片段的信息，它們使該技術成為大規(guī)模、集成化和整體獲取生物信息的有效手段；②由于芯片制作工藝復雜，信號檢測也需專門的儀器設備，一般實驗室難以承擔其高昂的費用；③樣品制備和標記比較復雜，沒有一個統(tǒng)一的質(zhì)量控制標準；④實驗室不能共享數(shù)據(jù)和資料庫等。這些都在一定程度上限制了基因芯片技術在食品檢測中應用。為使基因芯片成為實驗室研究或實踐中可以普遍采用的技術，須從以下幾方面著手解決問題：①提高基因芯片的特異性、重復性；②簡化樣品制備和標記操作；③增加信號檢測的靈敏度；④ 研制和開發(fā)高度集成化的樣品制備、基因擴增、核酸標記及檢測儀。

2.2.9 轉基因動物食品的安全性檢測

（1）轉基因動物的健康狀況檢測 一般應用傳統(tǒng)動物的健康指標被用作食物安全評估的參照物。評估應包括以下內(nèi)容：①一般的健康特性指示，包括行為、生長、發(fā)育，解剖、生殖功能等；②生理生化健康指標，主要是血液常規(guī)指標，包括臨床和分析參數(shù)；③轉基因動物特異性指標，這種指標與健康動物相比沒有實質(zhì)性差異。

（2）用作轉基因動物食品的潛在毒性或生物活性物質(zhì)的評估 一是應證明在供體生物體中的已知毒素或抗營養(yǎng)素的編碼基因沒有轉移到轉基因動物中，與供體生物有關的常規(guī)食品加工技術，可能使其抗營養(yǎng)素或毒素失活、降解或消除。二是對蛋白質(zhì)而言，對潛在毒性評估的重點應放在分析該蛋白質(zhì)與已知蛋白毒素和抗營養(yǎng)素物質(zhì)的氨基酸序列相似性、熱穩(wěn)定性或加工穩(wěn)定性以及在典型胃腸道模式。當證明食物中的蛋白質(zhì)與常規(guī)食物中安全食用蛋白質(zhì)無序列相似時，則需要進行適當?shù)目诜拘匝芯窟M行進一步的證明［21］。

未曾安全食用的非蛋白物質(zhì)的潛在毒性，應根據(jù)對該物質(zhì)的識別和動物的生物學功能及膳食接觸情況進行個案評估。根據(jù)傳統(tǒng)的毒理學方法開展檢測，主要包括代謝、毒物動力學、亞慢性毒性、慢性毒性、致癌性、生殖及發(fā)育毒性等。若有表達的生物活性物質(zhì)存在，應當評估這些物質(zhì)對轉基因動物健康的潛在效應。若這些物質(zhì)在食用后存在生物活性，應考慮對人類的潛在影響。

潛在毒素的評估需要從轉基因動物中分離這些新物質(zhì)，或者合成這些物質(zhì)。如果是合成的物質(zhì)，這些物質(zhì)應被證明在生化、結構和功能方面與轉基因動物產(chǎn)生的相同。

（3）轉基因動物食品（蛋白質(zhì)）的致敏性評估在轉基因動物的最終食物中，應評估所有新表達的蛋白質(zhì)是否會引起過敏反應，或者食物中的某種新的蛋白質(zhì)會對某些人群引發(fā)過敏反應。目前還沒有試驗可以準確預測人類對新表達蛋白質(zhì)的過敏反應，因此應采取整合的、逐步、個案的方法來評估新表達蛋白質(zhì)的潛在致敏性［22］。

除了對于轉基因動物食品致敏性評估以外，還必須進行胃蛋白酶抗性測定，如果存在胃蛋白酶，某蛋白質(zhì)在適當?shù)臈l件下呈現(xiàn)降解抗性，提示需要進一步分析，以確定新表達的蛋白質(zhì)是否有致敏的可能性。

對來源于已知致敏原的蛋白質(zhì)，或與某一致敏原的序列同源的蛋白質(zhì)，若能獲得血清，應進行免疫學分析。經(jīng)臨床驗證對該蛋白質(zhì)來源過敏個體的血清，可以用于體外測定該蛋白質(zhì)對IgE類抗體的特別結合。對非已知致敏原來源的蛋白質(zhì)和沒有呈現(xiàn)與已知致敏原序列同源的蛋白質(zhì)，可以考慮用于篩選目標血清。來自某個已知致敏原的新表達的蛋白質(zhì)，若體外免疫測定為陰性，還應進行其他試驗，比如皮試和離體試驗等，該試驗的陽性結果就會提示它是一個潛在致敏原。

（4）轉基因動物食品的關鍵組分分析 轉基因動物關鍵組分的含量分析，特別是食物的典型組分的含量，應與在同等條件下飼養(yǎng)的傳統(tǒng)對照物（近親系）的等效組分進行比較，確定變化參數(shù)應在自然變異范圍內(nèi)。除此以外，在致敏性的評估中，還應確定引入的蛋白質(zhì)的來源，包括：供篩選用的血清，記錄在案的過敏反應的種類、程度和頻率；結構特性和氨基酸序列；同一來源的已知為致敏蛋白的理化屬性和免疫特性。

（5）轉基因動物食品的儲藏和加工測定 應考慮食品加工（包括在家庭制備食品）對轉基因動潛在影響，例如在加工后，內(nèi)源性有毒物對熱的穩(wěn)定性及重要營養(yǎng)素的生物有效性都可能發(fā)生改變，因此應提供該動物配料加工生產(chǎn)條件的信息。若遺傳修飾的目的是為了改變儲藏性狀，應評估該修飾對食物安全和營養(yǎng)品質(zhì)的影響。

（6）轉基因動物食品的預期的營養(yǎng)修飾評估 對特殊人群，像嬰兒、孕婦、哺乳期婦女、老年人及患慢性病或免疫功能低下的人群，應特別關注其生理特點和代謝要求。當修飾導致某種食物產(chǎn)品的成分構成與其傳統(tǒng)對照物差異極大時，應利用其他的傳統(tǒng)食品或食物成分（例如，與轉基因動物動物食物的營養(yǎng)成分相近的食品或食物組分）作為對比物來評價營養(yǎng)修飾。若轉基因動物食品的營養(yǎng)素的期望效應發(fā)生改變，或者其組成成分與傳統(tǒng)食物不能相比，則需要進行動物飼養(yǎng)試驗來研究［22－23］。

（7）轉基因動物食品的非預期效應的評估 可能因插入DNA序列或重組DNA動物通過隨后的傳統(tǒng)育種而引起非預期效應。安全性評估應包括降低來自轉基因動物食品對人類產(chǎn)生非預期不良反應的可能性方面的數(shù)據(jù)和信息。某些轉基因動物表現(xiàn)的一些特征可能導致一些外源化學物質(zhì)累積，例如獸藥殘留，重金屬積累等，在轉基因動物中通過改變?nèi)祟惒≡ǖ溃蛘吆托碌漠a(chǎn)毒生物共生，潛在的改變移植，這些都可能影響食物安全。安全性評估應重點評估這些方面的變化。

3 結束語

轉基因動物及其食品是解決未來人類社會資源短缺，食物不足的主要方法，對于轉基因動物及其食品對人體的無害和有害評估，目前還只是根據(jù)現(xiàn)有知識和技術水平的一種推測和判別，因此，我們必須在借鑒發(fā)達國家經(jīng)驗的基礎上，根據(jù)我國的國情特點，加快轉基因動物及其食品安全評價技術的自主研發(fā)和創(chuàng)新。在保證轉基因動物及其食品安全的條件下，促進轉基因動物及其食品的開發(fā)和推廣應用。

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