基于數(shù)據(jù)挖掘和網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究徐昌偉治療腰椎間盤突出癥的用藥規(guī)律及作用機(jī)制

摘要：目的" 探討徐昌偉教授治療腰椎間盤突出癥的用藥規(guī)律及作用機(jī)制。方法" 搜集徐昌偉教授2010-2018年于荊州市中醫(yī)醫(yī)院門診治療腰椎間盤突出癥的病例資料，運(yùn)用“中醫(yī)傳承輔助平臺（V3.5）”對數(shù)據(jù)進(jìn)行頻數(shù)分析和關(guān)聯(lián)分析，獲得核心處方，并對其進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析。運(yùn)用TCMSP數(shù)據(jù)庫獲取核心組方中藥活性成分，利用Gene Cards、OMIM數(shù)據(jù)庫篩選疾病靶點(diǎn)并生成韋恩圖，使用Cytoscape3.9.2軟件構(gòu)建核心網(wǎng)絡(luò)。運(yùn)用Metascape在線數(shù)據(jù)庫對獲得的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行GO、KEGG功能富集分析。運(yùn)用Autodock程序進(jìn)行對接，通過PyMOL實(shí)現(xiàn)結(jié)果的可視化。結(jié)果" 共錄入200個病例，處方涉及179味中藥，高頻藥物10味，溫、平性藥物運(yùn)用最多，多歸肝、脾、腎三經(jīng)，性味以辛、苦、甘多見；關(guān)聯(lián)規(guī)則得到60條數(shù)據(jù)，聚類分析得到3組核心組合。4種核心藥物（川芎、當(dāng)歸、杜仲、牛膝）中核心活性成分共59個，靶點(diǎn)基因144個，疾病靶點(diǎn)613個，藥物-疾病共同靶點(diǎn)共40個。GO功能富集條目3346條，其中生物過程（BP）2929條，細(xì)胞組成（CC）158條，分子功能（MF）259條；KEGG富集通路共198條。核心組方中的β-谷甾醇、6′-甲氧基-（9R）-9-醛金雞聚糖-9-醛、黃芩苷、漢黃芩素、肉豆蔻酮等主要活性成分通過AGE-RAGE、IL-17、TNF等信號通路作用于TNF、IL6、AKT1等靶點(diǎn)蛋白。分子對接結(jié)果顯示主要活性成分與核心靶點(diǎn)有著強(qiáng)烈結(jié)合活性。結(jié)論" 徐昌偉教授治療腰椎間盤突出癥重在補(bǔ)益肝腎、活血化瘀、祛風(fēng)除濕，兼顧護(hù)脾胃，用藥以溫平為主，通過多個通路作用于TNF、IL6、AKT1等靶點(diǎn)蛋白，并通過其抗炎、抗氧化、抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)等多種機(jī)制治療腰椎間盤突出癥。

關(guān)鍵詞：名老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)；腰椎間盤突出癥；數(shù)據(jù)挖掘；用藥規(guī)律；作用機(jī)制

中圖分類號：R723.14" " " " " " " " " " " " " " " "文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A" " " " " " " " " " " " " " " " "DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2025.05.003

文章編號：1006-1959（2025）05-0016-10

Abstract： Objective" To explore the medication rule and mechanism of Professor XU Changwei in the treatment of lumbar disc herniation. Methods" The case data of Professor XU Changwei's treatment of lumbar disc herniation in the outpatient department of Jingzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine from 2010 to 2018 were collected. The frequency analysis and correlation analysis of the data were carried out by using the “Traditional Chinese Medicine Inheritance Support Platform （V3.5）” to obtain the core prescription， and the network pharmacology analysis was carried out. The TCMSP database was used to obtain the active components of the core prescription， the Gene Cards and OMIM databases were used to screen the disease targets and generate the Venn diagram， and the Cytoscape 3.9.2 software was used to construct the core network. Metascape online database was used to perform GO and KEGG functional enrichment analysis on the obtained key targets. The Autodock program was used for docking， and the visualization of the results was realized through PyMOL. Results" A total of 200 cases were recorded. The prescriptions involved 179 traditional Chinese medicines， 10 of which were high-frequency drugs. Warm and mild drugs were the most used， mostly belonging to the three meridians of liver， spleen and kidney. Pungent， bitter and sweet were the most common tastes. 60 data were obtained by association rules， and 3 core combinations were obtained by cluster analysis. There were 59 core active components， 144 target genes， 613 disease targets and 40 drug-disease common targets in the 4 core drugs （Chuanxiong， Danggui， Duzhong and Niuxi）. There were 3346 GO functional enrichment items， including 2929 biological processes （BP）， 158 cell composition （CC）， and 259 molecular functions （MF）. There were 198 KEGG enrichment pathways. The main active ingredients such as β-sitosterol， 6′-methoxy-（9R）-9-formyl-chickennan-9-aldehyde， baicalin， wogonin， and myristone in the core prescription act on TNF， IL6， AKT1 and other target proteins through AGE-RAGE， IL-17， TNF and other signaling pathways. Molecular docking results showed that the main active components had strong binding activity with the core target. Conclusion" During the treatment of lumbar disc herniation， Professor XU Changwei is focused on tonifying liver and kidney， promoting blood circulation and removing blood stasis， expelling wind and removing dampness， taking into account the protection of spleen and stomach. The medication is mainly warm and calm， and acts on TNF， IL6， AKT1 and other target proteins through multiple pathways. And through its anti-inflammatory， anti-oxidation， anti-apoptosis， immune regulation and other mechanisms to treat lumbar disc herniation.

腰椎間盤突出癥（lumbar disc herniation， LDH）是多因素引起的腰椎間盤纖維環(huán)破裂、髓核突出，繼而壓迫椎神經(jīng)和脊神經(jīng)導(dǎo)致腰腿疼痛的一種慢性退行性疾病[1]，全球約9.4%的人群受其困擾?，F(xiàn)代流行病學(xué)研究表明[2]，LDH多發(fā)于25～40歲人群，以男性居多，在我國總體發(fā)病率約為6%，LDH常累及L4/5、L5/S1節(jié)段，且發(fā)病率呈不斷上升和年輕化趨勢，嚴(yán)重影響患者的工作和生活質(zhì)量[3]。祖國醫(yī)學(xué)并無腰椎間盤突出癥這一病名，但根據(jù)其臨床癥狀可將其歸為“腰腿痛”“痹癥”等范疇[4]。早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》中已有相關(guān)記載，《靈樞·經(jīng)脈》載“脊痛，腰似折，髀不可以曲，腘如結(jié)”，便細(xì)述了腰椎間盤突出癥的癥狀[5]。其治療方式主要分為保守治療和手術(shù)治療[6]，然而手術(shù)治療存在創(chuàng)傷大、費(fèi)用高、術(shù)后康復(fù)慢、易出現(xiàn)并發(fā)癥等缺陷，研究表明大多數(shù)的LDH患者經(jīng)牽引、理療、推拿或針灸等保守治療即可緩解臨床癥狀和體征[7]。中醫(yī)藥在治療腰椎間盤突出癥上有著獨(dú)特的優(yōu)勢，因其臨床療效顯著而成為一種常用的保守治療方式。徐昌偉教授是全國第五批名老中醫(yī)藥專家學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)繼承指導(dǎo)老師、湖北省知名中醫(yī)，在長達(dá)60余年的中醫(yī)骨傷科臨床診療及研究過程中，擅長運(yùn)用中醫(yī)辨證思維，在辨證施治的基礎(chǔ)上運(yùn)用內(nèi)外結(jié)合、整體與局部并重的治療方針，在診治腰椎間盤突出癥上有著獨(dú)特的見解。為進(jìn)一步挖掘與傳承其臨床經(jīng)驗(yàn)及學(xué)術(shù)思想，發(fā)揮中醫(yī)特色優(yōu)勢，本研究利用中醫(yī)傳承輔助平臺（V3.5），結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)以及分子對接等方法分析徐昌偉教授治療腰椎間盤突出癥的用藥規(guī)律及其作用機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

收集2010年1月-2018年6月由荊州市中醫(yī)醫(yī)院徐昌偉主任開具處方且第一診斷為腰椎間盤突出癥的病例資料200例。診斷標(biāo)準(zhǔn)：①有腰部受寒、外傷、勞損等病史；②直腿抬高試驗(yàn)陽性；③腰部疼痛或放射痛伴下肢麻木無力，咳嗽噴嚏時疼痛加重；④腰部CT平掃、X線攝片檢查、MRI檢查結(jié)果為陽性；⑤符合前3項(xiàng)中的兩項(xiàng)異常結(jié)合第④項(xiàng)即可確診。

1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合腰椎間盤突出癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②內(nèi)服中藥復(fù)方湯劑治療或同時使用中藥復(fù)方外用治療；③診治過程及病案信息完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①符合腰椎間盤突出癥診斷，但有腰椎手術(shù)史；②處方中有運(yùn)用非甾體類或其他止痛類，非純中藥治療；③診治過程中斷且病案信息未完善。

1.3 數(shù)據(jù)整理及規(guī)范化處理

由2名研究者將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的原始病案信息以雙人單機(jī)的方式，用標(biāo)準(zhǔn)格式錄入Excel表格，由獨(dú)立的第3名研究者進(jìn)行核查及修正，參考全國中醫(yī)藥行業(yè)高等教育“十三五”規(guī)劃教材《中藥學(xué)》《中藥大辭典》以及《中華人民共和國藥典》（2020版）對中藥名稱、性味歸經(jīng)等進(jìn)行統(tǒng)一化處理：①藥物別名的統(tǒng)一，如“全蟲”統(tǒng)一“全蝎”，“牛夕”統(tǒng)一為“牛膝”；②藥物因炮制方法不同而名稱不同者，若炮制前后功效無顯著差異則統(tǒng)一錄入，如“炙甘草”“生甘草”統(tǒng)一為“甘草”；否則分開錄入，如“干姜”和“生姜”，“熟地黃”和“生地黃”；③性味歸經(jīng)的統(tǒng)一，如“微溫”統(tǒng)一為“溫”。

1.4數(shù)據(jù)分析

采用中醫(yī)傳承輔助平臺（V3.5）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，點(diǎn)擊數(shù)據(jù)管理-數(shù)據(jù)上傳-覆蓋上傳，將規(guī)范后的“徐昌偉-腰痹病”病例數(shù)據(jù)庫以Excel形式上傳平臺，建立“徐昌偉-腰痹病”病例數(shù)據(jù)庫。采用頻率分析、關(guān)聯(lián)規(guī)則分析、聚類分析等方法進(jìn)一步分析處方中的藥物及其四氣五味歸經(jīng)、關(guān)聯(lián)藥對和核心處方，總結(jié)徐昌偉教授治療腰椎間盤突出癥的用藥規(guī)律。

1.5網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究

1.5.1核心中藥處方靶點(diǎn)與腰椎間盤突出癥疾病靶點(diǎn)篩選

將處方分析中所得高頻藥物在TCMSP數(shù)據(jù)庫（https：//tcmsp-e.com/）中依次檢索，以藥物口服生物利用度（oral bioavailability， OB）≥30%、類藥性（drug-likeness， DL）≥0.18作為條件篩選出活性成分，通過其MOL.ID號搜尋成分作用靶點(diǎn)。利用UniProt數(shù)據(jù)庫（https：//www.uniprot.org/）對上述靶點(diǎn)進(jìn)行基因名轉(zhuǎn)換，并篩除沒有靶點(diǎn)的活性成分，從而獲得所需核心處方潛在靶點(diǎn)。運(yùn)用Gene Cards（https：//www.genecards.org/）、OMIM（https：//www.omim.org/）數(shù)據(jù)庫篩選疾病靶點(diǎn)，以“l(fā)umbar disc herniation”為檢索詞，獲取腰椎間盤突出癥的疾病靶點(diǎn)，將靶點(diǎn)進(jìn)行匯總整理并剔除重復(fù)基因。

1.5.2“藥物-活性成分-疾病靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建及蛋白相互作用分析

在Venny2.1（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）中導(dǎo)入所得疾病靶點(diǎn)及藥物靶點(diǎn)，生成韋恩圖，得到交集靶點(diǎn)。使用Cytoscape3.9.2軟件實(shí)現(xiàn)“成分-靶點(diǎn)-藥物”網(wǎng)絡(luò)可視化。將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入String平臺（https：//string-db.org/），物種設(shè)置為“Homo sapiens”，取最高置信度0.9，隱藏游離基因節(jié)點(diǎn)，得到蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)，構(gòu)建（PPI）數(shù)據(jù)庫；將互作網(wǎng)絡(luò)信息導(dǎo)入Cytoscape3.9.2中，并對其進(jìn)行分析，保存網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果，使用Cytoscape中的Generate style from statistics工具，用節(jié)點(diǎn)大小應(yīng)反映Degree的大小，節(jié)點(diǎn)越大Degree值越大；邊的粗細(xì)用于反映Combine score的大小，邊越粗Combine score越大，挑選核心的靶點(diǎn)做出蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5.3 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析

為進(jìn)一步闡述核心處方作用于腰椎間盤突出癥的作用機(jī)制，通過Metascape在線數(shù)據(jù)庫（https：//metascape.org/）對獲得的關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行生物學(xué)過程的GO、KEGG功能富集分析，并通過微生信平臺進(jìn)行可視化繪圖。

1.6分子對接

為進(jìn)一步明確核心處方作用于腰椎間盤突出癥的內(nèi)在分子機(jī)制，將拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)排名靠前的大分子和小分子進(jìn)行分子對接。通過PubChem數(shù)據(jù)庫（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）獲取并建立核心藥物對接小分子庫，通過Alphafold數(shù)據(jù)庫（https：//alphafold.ebi.ac.uk/）得到關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)。首先，使用AutoDock Tools5.6對蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行清除水分子、加氫與電荷處理操作，并進(jìn)行受體結(jié)構(gòu)準(zhǔn)備工作。使用Open Babel及Autodock程序?qū)π》肿訋爝M(jìn)行拆分等準(zhǔn)備工作。使用Autodock程序進(jìn)行對接，最終結(jié)果導(dǎo)入PyMOL（https：//pymol.org/2/）進(jìn)行對接結(jié)果的可視化。

2結(jié)果

2.1病案數(shù)據(jù)挖掘研究

2.1.1高頻藥物統(tǒng)計(jì)及藥效分類

共得到符合條件的藥物179味，其中川芎、當(dāng)歸、杜仲、牛膝使用頻率均＞60%，見表1。參考《中藥學(xué)》，按照功效對藥物進(jìn)行歸類和統(tǒng)計(jì)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)活血化瘀類藥物出現(xiàn)頻數(shù)最多，共63次；其次為補(bǔ)虛類藥物，出現(xiàn)了57次，藥效分類見表2。

2.1.2藥物四氣、五味、歸經(jīng)

經(jīng)過統(tǒng)計(jì)分析，發(fā)現(xiàn)179味中藥的性味以溫平、辛苦甘為主，多歸肝、脾、腎三經(jīng)，見圖1。

2.1.3基于關(guān)聯(lián)規(guī)則的組方規(guī)律分析

在“關(guān)聯(lián)規(guī)則分析”中，設(shè)定支持度為80%，置信度為95%，得到藥物組合共60條，按核心藥物組合置信度由高至低排序，前30對組合見表3。分別設(shè)定支持度40%、60%、80%，置信度0.95，得到網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋱D，見圖2。

2.1.4核心組合統(tǒng)計(jì)分析

利用“聚類分析”功能，將“聚類數(shù)”列為3，通過kmeans算法+聚類提取出核心方劑，得到3組聚類組合，反映了徐昌偉治療LDH處方中配伍關(guān)系相對密切、固定的3組藥物，即核心處方，見表4。

2.2基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究核心藥物治療LDH的機(jī)制

2.2.1篩選核心中藥成分與作用靶點(diǎn)

基于中藥頻數(shù)分析，川芎、當(dāng)歸、杜仲、牛膝為使用頻次＞60%的高頻藥物，故選這4味藥物作為徐昌偉治療LDH的核心組方進(jìn)行分析。通過TSMCP數(shù)據(jù)庫篩選及文獻(xiàn)補(bǔ)充，獲得川芎、當(dāng)歸、杜仲、牛膝的活性成分分別為7、2、28、22個，根據(jù)活性成分MOL.ID號找到對應(yīng)靶點(diǎn)各29、67、259、240個。通過UniProt數(shù)據(jù)庫對以上靶點(diǎn)進(jìn)行基因名轉(zhuǎn)換，并篩除沒有靶點(diǎn)的活性成分后共得到潛在靶點(diǎn)144個。由于活性成分較多，選取度值排名前5的活性成分進(jìn)行展示，見圖3。

2.2.2共同靶點(diǎn)篩選及藥物-活性成分-疾病靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

基于Genecard及OMIM數(shù)據(jù)庫篩選LDH相關(guān)靶點(diǎn)分別有599、34個，經(jīng)去重后得到613個疾病靶點(diǎn)。將613個疾病靶點(diǎn)及144個成分靶點(diǎn)導(dǎo)入Venny2.1.0中，取得共同靶點(diǎn)40個繪制韋恩圖，見圖4。利用Cytoscape3.9.2軟件得到“藥物-活性成分-疾病靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖，見圖5。網(wǎng)絡(luò)圖由53個節(jié)點(diǎn)，52條邊組成，其中正六邊形表示與疾病相關(guān)的藥物成分（Degree值越大節(jié)點(diǎn)越大，代表與疾病相關(guān)性越強(qiáng)），菱形表示交集靶點(diǎn)，倒三角表示腰椎間盤突出癥。連線說明了疾病、藥物、活性成分之間的交叉關(guān)聯(lián)。

2.2.3 PPI蛋白互作網(wǎng)絡(luò)分析

將40個交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING在線數(shù)據(jù)庫，取最高置信度0.90，隱藏游離基因節(jié)點(diǎn)，得到核心處方治療LDH的對應(yīng)靶標(biāo)PPI網(wǎng)絡(luò)，所得結(jié)果儲存為TSV格式，將TSV文件導(dǎo)入Cytoscape3.9.2作可視化處理，得到PPI網(wǎng)絡(luò)圖，見圖6。該網(wǎng)絡(luò)圖由38個節(jié)點(diǎn)和366條邊組成。其中關(guān)聯(lián)度最高的前10種蛋白為TNF、IL6、AKT1、EGFR、ALB、FOS、TGFB1、MMP9、CASP3、JUN，是治療LDH的核心靶點(diǎn)。

2.2.4 GO功能富集分析及KEGG通路富集分析

運(yùn)用Metascape數(shù)據(jù)庫對40個共同靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能及KEGG通路富集分析。得到GO功能富集條目3346條，其中生物過程（BP）2929條，主要包括脂多糖應(yīng)答、對細(xì)菌源分子的反應(yīng)、細(xì)胞對化學(xué)脅迫的反應(yīng)、上皮細(xì)胞增殖、平滑肌細(xì)胞增殖、肌細(xì)胞增殖對氧化應(yīng)激的反應(yīng)、平滑肌細(xì)胞增殖的正調(diào)控、上皮細(xì)胞增殖的調(diào)控等。細(xì)胞組成（CC）158條，包括膜筏、膜微區(qū)、質(zhì)膜微囊、血小板α顆粒管腔、囊泡腔、分泌顆粒腔、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄調(diào)控復(fù)合物、膠原細(xì)胞外基質(zhì)等。分子功能（MF）259條，包括細(xì)胞因子-受體結(jié)合、參與凋亡過程的半胱氨酸型內(nèi)肽酶活性、絲氨酸水解酶活性、內(nèi)酶肽活性、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄起始因子結(jié)合、細(xì)胞因子活性、蛋白酶結(jié)合、蛋白磷酸酶結(jié)合等，見圖7。篩選得到KEGG通路198條，選取前20位應(yīng)用R語言繪柱圖，包括AGE-RAGE信號通路、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染、IL-17信號通路、TNF信號通路、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、Toll樣受體信號通路，見圖8。

2.3分子對接結(jié)果

將節(jié)點(diǎn)度值排名第一的活性成分β-谷甾醇為配體，PPI網(wǎng)絡(luò)中度值排名前3的靶基因AKT1、IL6、TNF為受體分別通過AutodockTools1.5.6軟件進(jìn)行分子對接?；钚猿煞枝?谷甾醇與靶點(diǎn)AKT1、IL6、TNF分子結(jié)合能分別為-7.3、-7.2、-7.1。分子對接結(jié)合熱能＜-5.0 kcal/mol表示結(jié)合活性較好，小于-7.0 kcal/mol表示有強(qiáng)烈的結(jié)合活性。結(jié)果顯示，各靶點(diǎn)與β-谷甾醇之間均有強(qiáng)烈的結(jié)合活性。在PyMOL中進(jìn)行可視化分析，結(jié)果見圖9。

3討論

3.1用藥規(guī)律

LDH是骨科常見的腰腿痛疾患之一[8]，中醫(yī)古代文獻(xiàn)中沒有腰椎間盤突出癥的病名，但《醫(yī)林改錯》中記載有“凡肩痛、臂痛、腰疼、腿疼，或周身疼痛，總名曰痹癥?！薄夺t(yī)學(xué)心悟》曰：“腰痛拘急，牽引腿足?！薄度彘T事親·痛證》云：“夫婦人腰胯疼痛兩腳麻木，惡寒喜暖者，乃是風(fēng)寒濕痹。”此與腰椎間盤突出癥之癥狀如出一轍。故LDH應(yīng)歸為中醫(yī)“腰痛”“腰腿痛”“腰痹”等范疇[9]。

根據(jù)藥物使用頻次分析結(jié)果顯示，徐老治療LDH的藥物以活血化瘀藥（川芎、延胡索、牛膝、血竭）、補(bǔ)虛藥（杜仲、續(xù)斷、當(dāng)歸）、祛風(fēng)濕藥（獨(dú)活、烏梢蛇、秦艽、伸筋草、路路通、桑寄生）為主。其中以行氣活血藥的使用頻次最高。川芎、當(dāng)歸、杜仲、牛膝為使用頻次較高的4味藥物，此4味藥物為徐老自擬方舒筋湯的主要組成。徐老認(rèn)為LDH發(fā)病多為本虛標(biāo)實(shí)，正氣虛弱，腎氣不足，復(fù)感外邪以致氣血不通不榮則發(fā)為本病，病機(jī)關(guān)鍵在于以肝腎為其本，氣血為其道，挾風(fēng)、寒、濕為其標(biāo)[10]。治療上提出“重在調(diào)氣血，補(bǔ)肝腎，祛風(fēng)寒濕”的原則。

本研究結(jié)果顯示，徐老治療LDH常用藥藥性以溫性、平性為主，五味以辛、苦、甘為主溫藥于人，溫和宜人，所謂寒邪得溫則散，氣血得溫則行，而平藥藥性平和，可調(diào)和諸藥，既不會寒涼傷陽，也不會過于溫燥傷陰。徐老偏重于溫平藥，正因其二者可溫通經(jīng)絡(luò)，行氣活血，祛風(fēng)散寒、溫和補(bǔ)虛。所謂五味入五臟，《素問·至真要大論》曰：“酸先入肝，苦先入心，甘先入脾?！薄端貑枴ぶ琳嬉笳摗吩唬骸案慰嗉?，急食甘以緩之”“肝欲散，急食辛以散之，用辛補(bǔ)之，酸瀉之”“脾欲緩，急食甘以緩之，用苦瀉之，甘補(bǔ)之”，辛味能行能散，功在散寒解表、溫經(jīng)、行氣血；苦味入肝，可清熱、燥濕、瀉火；甘味能和能緩，功在和中緩急。辛、苦、甘三味共奏祛風(fēng)寒濕、補(bǔ)益肝腎、行氣活血之功。

徐老用藥大多歸肝（2305次）、脾（1304次）、腎（1249次）三經(jīng)。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為腰為腎之府，腎主骨而藏精生髓，肝主筋而藏血，脾主肌肉[11]。早在《內(nèi)經(jīng)》中就有所體現(xiàn)，《素問·陰陽應(yīng)象大論》指出：肝主筋，腎主骨，腎充則骨強(qiáng)，肝充則筋健，又云“清陽實(shí)四肢?！薄端貑枴っ}要精微論》曰：“腰者，腎之府……郁怒傷肝則諸筋縱弛，憂思傷脾則胃氣不行，二者又能為腰痛之冠，故并及之?！薄端貑枴ゐ粽摗吩唬骸捌⒅骷∪狻柮髡撸宀亓?，主潤宗筋，宗筋主束骨而利機(jī)關(guān)也?！苯Y(jié)合徐老用藥歸經(jīng)可得，筋骨之病首要責(zé)之肝與腎，其次責(zé)于脾胃。言明了肝腎、脾胃與腰之關(guān)系。腎精充足，則腰脊有力，腎精虧虛，則腰脊不舉，足不任地。肝血盈滿則筋力勁強(qiáng)，關(guān)節(jié)屈伸有力靈活，肝血虧虛則筋脈失于濡養(yǎng)，關(guān)節(jié)拘急。脾胃虛弱則無法充分滋養(yǎng)骨骼肌肉，外邪入侵經(jīng)絡(luò)則致氣血運(yùn)行受阻發(fā)為本病。徐老治療LDH通過使用辛、苦、甘之品，溫平并用，以補(bǔ)肝腎強(qiáng)筋骨、行氣活血、祛風(fēng)濕、健脾的方法，恢復(fù)腰部筋骨的正常生理功能。

徐老治療LDH患者時，往往注重“因地制宜”。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，人與自然和諧統(tǒng)一，疾病的發(fā)生發(fā)展過程，就是人與自然界中諸多因素共同作用的結(jié)果。地域氣候條件、生活習(xí)慣差異化，使人在患病時的特征有所不同，因此在用藥時應(yīng)考慮地域治病的特異性。早在《內(nèi)經(jīng)》中，就將致病因素與生活地域環(huán)境二者緊密聯(lián)系起來，提出不同地域環(huán)境治病特點(diǎn)不同，《素問·五常政大論》曰：“陰陽之氣，高下之理，太少之異也……”。荊州地處湖北省中南部，位于江漢平原腹地，屬亞熱帶季風(fēng)濕潤氣候區(qū)[12]。此地常年氣候潮濕，尤其夏季炎熱多雨，多濕則易外感濕邪，加之人們夏季多貪涼，飲食多肥甘厚味，饑飽失常，易損傷脾氣，則脾失健運(yùn)，濕濁內(nèi)生，外濕與內(nèi)濕結(jié)合，浸淫關(guān)節(jié)筋脈，氣血運(yùn)行不暢，則導(dǎo)致疼痛反復(fù)發(fā)作[13]。故徐老在用藥上常加以杜仲、牛膝、桑寄生、秦艽等祛風(fēng)濕藥。另外，有患病日久，遷延難愈者，徐老明確指出“當(dāng)加以蟲類藥”，如全蝎、烏梢蛇等。蟲類藥為“血肉有情之品”，常用于通絡(luò)、化瘀、鎮(zhèn)痙、止痛等[14]。蟲類藥善走竄，可作用于全身經(jīng)絡(luò)，尤善治療頑痹[15]。

由聚類分析得到3組藥物組合，組方1為徐老自擬方舒筋湯加減，方中杜仲味甘性溫，牛膝味苦性平，二者均入肝腎二經(jīng)，合用則補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)筋壯骨、祛風(fēng)濕[16]。川芎性辛溫，《景岳全書·本草正》曰：“川芎，其性善散，又走肝經(jīng)，血中之氣藥也”，因而川芎具有活血行氣，祛風(fēng)止痛的功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明[17]，川芎中的川芎嗪等成分，有著抗血小板聚集，促進(jìn)機(jī)體微循環(huán)，降低神經(jīng)細(xì)胞膜通透性，清除氧自由基，降低機(jī)體內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而改善患者局部炎癥及疼痛程度的作用。當(dāng)歸味甘、辛，為溫藥，入肝、心、脾經(jīng)，善于補(bǔ)血活血止痛，川芎以行氣為要，當(dāng)歸以養(yǎng)血為主，兩者合用氣血兼?zhèn)洌沧嘌a(bǔ)血活血，行氣祛風(fēng)止痛之效。路路通可祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)、散瘀止痛。續(xù)斷既補(bǔ)肝腎，又行血脈，還續(xù)筋骨?，F(xiàn)代網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)表明[18]，續(xù)斷中重要成分熊果苷可通過NF-κB/NLRP3炎癥小體通路保護(hù)和激活軟骨細(xì)胞，從而延緩軟骨退化。組方2為經(jīng)典方獨(dú)活寄生湯加減，桑寄生作為中醫(yī)藥學(xué)中治療風(fēng)濕痹痛的常用藥，味苦甘，性平，歸肝、腎經(jīng)，有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕之效?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明[19]，桑寄生具有一定的抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、降血壓、降血脂、抗氧化、保護(hù)神經(jīng)等藥理作用。LDH后期久病入絡(luò)，加以全蝎可入絡(luò)搜風(fēng)，通絡(luò)止痛。秦艽性辛、苦，歸胃、肝、膽經(jīng)，具有祛風(fēng)濕、清濕熱、止痹痛的功效，治痹癥通用，無論寒熱新舊虛實(shí)兼表與否皆可。組方3為徐老常用方和營通氣散加減，方中川芎味辛氣溫，可活血行氣，祛風(fēng)止痛，當(dāng)歸味甘辛，性溫，入肝、心、脾經(jīng)，可補(bǔ)血活血止痛，二者合用，則補(bǔ)血而不滯，活血而不伐，共奏補(bǔ)血活血、行氣祛風(fēng)止痛之效?！端庤b》言枳殼“消心下痞塞之痰，泄腹中滯寒之氣”，與郁金相配可行氣活血、解郁止痛，與砂仁相配伍可達(dá)到補(bǔ)腎健脾的功效。三七味甘、微苦，性溫，歸肝、胃經(jīng)。微苦瀉散，甘補(bǔ)溫通，既散瘀止血、消腫定痛，又兼能補(bǔ)虛。

結(jié)合徐老思想，對其用藥規(guī)律分析，其一，徐老提倡肝腎為本，注重氣血辨證；其二，中焦脾胃為后天之本，不補(bǔ)脾胃則肝腎無以滋養(yǎng)；其三，因地制宜，常用祛風(fēng)濕藥；其四：善用蟲類藥治療頑痹。

3.2作用機(jī)制

將徐老治療腰椎間盤突出癥的高頻藥物進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究，其中關(guān)鍵的成分包括β-谷甾醇、6′-甲氧基-（9R）-9-醛金雞聚糖-9-醛、黃芩苷、漢黃芩素、肉豆蔻酮等。目前認(rèn)為腰椎間盤突出癥腰腿疼痛主要為機(jī)械壓迫、炎癥化學(xué)刺激、自身免疫反應(yīng)、神經(jīng)根黏連以及電生理機(jī)制等一種或多種機(jī)制共同導(dǎo)致[20]。椎間盤中央膠質(zhì)樣部分髓核變性是椎間盤退化導(dǎo)致腰背痛發(fā)生的主要原因，而各種促炎介質(zhì)，包括腫瘤壞死因子（TNF）和白介素-1β已被證明在人類退行性椎間盤組織中顯著上調(diào)，研究表明TNF、IL-6等促炎介質(zhì)可破壞髓核組織代謝平衡，加速髓核細(xì)胞凋亡從而加快椎間盤退化[21，22]。β-谷甾醇屬于植物甾醇，主要有抗炎、抗氧化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等藥理作用[23]?？梢酝ㄟ^抑制白介素-1β和白介素-6的表達(dá)，減少毒性T細(xì)胞的增殖來發(fā)揮抗炎作用以及抑制TLR4/NF-κB信號通路來影響小膠質(zhì)細(xì)胞極化來減少神經(jīng)炎癥從而減輕疼痛[24]。漢黃芩素具有抗氧化、抗炎、神經(jīng)保護(hù)等作用[25]。漢黃芩素主要通過抑制炎癥相關(guān)酶和減少促炎基因的表達(dá)來發(fā)揮抗炎作用[26]。黃芩苷是一種天然黃酮類化合物[27]，具有抗炎、抗凋亡和抗氧化作用，可通過促進(jìn)PI3K/Akt通路來減弱TNF-α激活的人類髓核細(xì)胞凋亡[28]。綜上，徐老治療腰椎間盤突出癥主要是靠核心組方發(fā)揮其抗炎、抗氧化、抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)等多種機(jī)制實(shí)現(xiàn)。

為探究藥物有效成分治療LDH的作用機(jī)制，本研究構(gòu)建了活性成分與疾病的PPI網(wǎng)絡(luò)，得到核心作用靶點(diǎn)，如腫瘤壞死因子（TNF）、白介素-6（IL-6）、AKT絲氨酸/蘇氨酸激酶1（AKT1）等。目前認(rèn)為LDH的發(fā)生與椎間盤應(yīng)力分布不均、炎癥、自身免疫等機(jī)制有關(guān)。LDH發(fā)生過程中，隨著髓核組織破裂病變，會因突出部分壓迫椎管引發(fā)損傷，從而導(dǎo)致炎癥的發(fā)生及炎癥因子分泌，常見椎間盤炎癥因子有TNF、IL-6、IL-8等。TNF又稱TNF-α，是一種能參與全身炎癥的細(xì)胞信號蛋白，可刺激IL-6的產(chǎn)生。研究表明[29，30]，TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等在椎間盤細(xì)胞老化中發(fā)揮重要作用。

富集分析結(jié)果提示徐老治療腰椎間盤突出癥疾病靶點(diǎn)通路主要涉及AGE-RAGE信號通路、IL-17信號通路、TNF信號通路等。研究表明[31]，AGE-RAGE介導(dǎo)的相互作用可能是椎間盤病理學(xué)的重要因素。椎間盤本身分泌的炎性細(xì)胞因子TNF、IL-17、IL-6是椎間盤性變引發(fā)腰背痛的主要原因[32]。分子對接結(jié)果表示核心組方中關(guān)鍵活性成分與核心靶點(diǎn)蛋白分子均具有較強(qiáng)的結(jié)合能力。

通過對徐老門診病例處方進(jìn)行的數(shù)據(jù)挖掘、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析，結(jié)果表明徐昌偉主任治療腰椎間盤突出癥重在補(bǔ)益肝腎、活血化瘀、祛風(fēng)除濕，兼顧護(hù)脾胃，用藥以溫平為主。核心組方中的β-谷甾醇、6′-甲氧基-（9R）-9-醛金雞聚糖-9-醛、黃芩苷、漢黃芩素、肉豆蔻酮等活性成分通過AGE-RAGE、IL-17、TNF等信號通路作用于TNF、IL6、AKT1等靶點(diǎn)蛋白，并通過其抗炎、抗氧化、抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)等多種機(jī)制治療腰椎間盤突出癥。

參考文獻(xiàn)：

[1]覃鴻圖.腰椎間盤突出癥臨床癥狀及體征與影像學(xué)區(qū)域定位的相關(guān)性研究[D].南寧：廣西中醫(yī)藥大學(xué)，2023.

[2]何玉欽，郭崇秋，黃亞麗，等.微針刀聯(lián)合中醫(yī)正骨手法治療腰椎間盤突出癥44例[J].中國中醫(yī)藥科技，2024，31（4）：737-739.

[3]張清福，喬宇，王昕，等.椎板間入路經(jīng)皮椎間孔鏡下髓核摘除術(shù)治療L4/5腰椎間盤突出癥的短期療效分析[J].骨科，2024，15（2）：169-172.

[4]符碧峰，霍路遙，馮天笑，等.從經(jīng)筋理論探討腰椎間盤突出癥的病因病機(jī)[J].天津中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，41（6）：812-816.

[5]聶穎，劉鑫，盧敏，等.盧敏教授“內(nèi)外兼治”“筋骨并舉”論治腰椎間盤突出癥[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，42（9）：1507-1511.

[6]董麗麗，程倩，李鳳.中醫(yī)特色護(hù)理配合康復(fù)訓(xùn)練在保守治療腰椎間盤突出癥患者中的應(yīng)用[J].四川中醫(yī)，2024，42（3）：208-213.

[7]呂亞希，龐爭爭，朱元宵，等.麥肯基療法聯(lián)合腰部核心肌力訓(xùn)練治療腰椎間盤突出癥的療效觀察[J].中國康復(fù)，2020，35（5）：244-246.

[8]陳千，毛田，李聿琦，等.尪痹膠囊聯(lián)合體外沖擊波治療風(fēng)寒濕滯型腰椎間盤突出癥40例[J].湖南中醫(yī)雜志，2024，40（5）：58-60.

[9]曹盼舉，田永衍，吳建民，等.腰椎間盤突出癥古代中醫(yī)文獻(xiàn)溯源[J].陜西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，41（3）：16-18.

[10]張朝駒，何川，劉偉，等.徐昌偉分期論治骨傷科疾患經(jīng)驗(yàn)[J].湖北中醫(yī)雜志，2015，37（5）：31-32.

[11]郝小剛，周國徽，閆宏旭，等.基于肝腎理論探討腰椎間盤突出癥[J].吉林中醫(yī)藥，2021，41（11）：1412-1415.

[12]高華東，鄧艷君，費(fèi)強(qiáng)，等.1961-2018年荊州市氣候變化特征分析[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，59（16）：66-71.

[13]陳宇.馬武開從濕論治骨關(guān)節(jié)炎的經(jīng)驗(yàn)[J].貴州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2023，45（4）：9-12.

[14]向瑋，盧思儉.盧思儉主任醫(yī)師運(yùn)用蟲類藥治痹經(jīng)驗(yàn)[J].風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2020，9（9）：45-47，52.

[15]張美昱，王麗敏.蟲類藥在痹癥治療中的應(yīng)用探尋[J].中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理，2023，14（21）：132-136.

[16]鄧夢，馬斌祥，關(guān)永林，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討“杜仲-牛膝”治療腰椎間盤突出癥的分子機(jī)制[J].中醫(yī)藥通報(bào)，2022，21（9）：48-54.

[17]張猛，梁一博，孔德奇.川芎聯(lián)合酮咯酸氨丁三醇治療慢性頸肩腰腿痛的效果觀察[J].臨床醫(yī)學(xué)，2020，40（1）：120-121.

[18]Wang C，Gao Y，Zhang Z，et al.Ursolic acid protects chondrocytes， exhibits anti-inflammatory properties via regulation of the NF-κB/NLRP3 inflammasome pathway and ameliorates osteoarthritis[J].Biomed Pharmacother，2020，130：110568.

[19]熊輝，李哲，于永洲，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接技術(shù)研究桑寄生抗炎的作用機(jī)制[J].承德醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2023，40（1）：5-11.

[20]Luo X，Liu J，Wang X，et al.Mechanism exploration of Osteoking in the treatment of lumbar disc herniation based on network pharmacology and molecular docking[J].J Orthop Surg Res，2024，19（1）：88.

[21]Gao S，Wang C，Qi L，et al.Bushen Huoxue Formula Inhibits IL-1β-Induced Apoptosis and Extracellular Matrix Degradation in the Nucleus Pulposus Cells and Improves Intervertebral Disc Degeneration in Rats[J].J Inflamm Res，2024，17：121-136.

[22]Li Z，Yang H，Hai Y，et al.Regulatory Effect of Inflammatory Mediators in Intervertebral Disc Degeneration[J].Mediators Inflamm，2023，2023：6210885.

[23]Khan Z，Nath N，Rauf A，et al.Multifunctional roles and pharmacological potential of β-sitosterol： Emerging evidence toward clinical applications[J].Chem Biol Interact，2022，365：110117.

[24]Zheng Y，Zhao J，Chang S，et al.β-Sitosterol Alleviates Neuropathic Pain by Affect Microglia Polarization through Inhibiting TLR4/NF-κB Signaling Pathway[J].J Neuroimmune Pharmacol，2023，18（4）：690-703.

[25]孫夢菲，歐陽競鋒，吳春陽，等.漢黃芩素減輕LPS誘導(dǎo)BV-2細(xì)胞炎癥并保護(hù)SH-SY5Y細(xì)胞的機(jī)制[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2024，30（20）：62-69.

[26]李會東，楊學(xué)鈺，郭文帆，等.漢黃芩素調(diào)節(jié)炎癥通路對膝骨關(guān)節(jié)炎大鼠炎性損傷的影響[J].世界臨床藥物，2023，44（6）：552-560.

[27]Chmiel M，Stompor-Goracy M.Promising Role of the Scutellaria baicalensis Root Hydroxyflavone-Baicalein in the Prevention and Treatment of Human Diseases[J].Int J Mol Sci，2023，24（5）：4732.

[28]Liu Y，Liu DK，Wang ZW，et al.Baicalein alleviates TNF-α-induced apoptosis of human nucleus pulposus cells through PI3K/AKT signaling pathway[J].J Orthop Surg Res，2023，18（1）：292.

[29]Gong Y，Qiu J，Jiang T，et al.Maltol ameliorates intervertebral disc degeneration through inhibiting PI3K/AKT/NF-κB pathway and regulating NLRP3 inflammasome-mediated pyroptosis[J].Inflammopharmacology，2023，31（1）：369-384.

[30]朱炯，馬雪建，岳宗進(jìn)，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對接探討?yīng)毣罴纳鷾委熝甸g盤突出癥的作用機(jī)制[J/OL].頸腰痛雜志，1-14（2024-05-30）[2024-06-11].http：//kns.cnki.net/kcms/detail/34.1117.R.20240529.1703.014.html.

[31]宋雨.SIRT3調(diào)控線粒體穩(wěn)態(tài)在AGEs誘導(dǎo)椎間盤退變中的作用及機(jī)制研究[D].武漢：華中科技大學(xué)，2020.

[32]何川，龐啟雄，陳洪衛(wèi)，等.腰椎間盤突出癥中醫(yī)證型與血清炎性因子相關(guān)性分析[J].長江大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2020，17（4）：97-100.

收稿日期：2024-06-27；修回日期：2024-07-16

編輯/王萌