浸潤性濾泡亞型甲狀腺乳頭狀癌患者BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素分析

［摘要］ 目的

探究浸潤性濾泡亞型甲狀腺乳頭狀癌（infiltrative follicular papillary thyroid carcinoma，IF-PTC）患者BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素。

方法 選擇2019年8月—2023年7月于我院手術(shù)治療的IF-PTC患者134例，根據(jù)BRAF基因V600E突變情況分為突變組和非突變組。收集并比較兩組患者的年齡、性別及是否合并橋本氏甲狀腺炎，同時(shí)收集腫瘤病灶的數(shù)量、大小、邊界、鈣化、回聲以及被膜侵犯、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等指標(biāo)，采用多因素logistic回歸模型分析IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素。

結(jié)果 本研究中BRAF基因V600E突變患者構(gòu)成比為67.16%。單因素分析結(jié)果顯示，兩組患者的年齡、病灶數(shù)量和被膜侵犯患者構(gòu)成比差異顯著（χ2=7.937～8.874，Plt;0.05）。多因素logistic回歸模型分析顯示，年齡≥55歲、腫瘤多灶和被膜侵犯均為IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（Plt;0.05）。

結(jié)論 年齡≥55歲、腫瘤多灶和被膜侵犯是IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

［關(guān)鍵詞］ 甲狀腺癌，乳頭狀；原癌基因蛋白質(zhì)B-raf；突變；危險(xiǎn)因素

［中圖分類號(hào)］ R736.1;R394

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

Risk factors analysis for BRAF gene V600E mutation in patients with infiltrative follicular papillary thyroid carcinoma

LI Lei， ZHAN Jiezhi， LI Hui， WANG Ruiqing， ZHAO Cheng

（Department of Ultrasound， The Affiliated Hospital of Qingdao University， Qingdao 266003， China）

; ［ABSTRACT］＼ Objective To investigate the risk factors for BRAF gene V600E mutation in patients with infiltrative follicular papillary thyroid carcinoma （IF-PTC）.

Methods A total of 134 patients with IF-PTC who underwent surgical treatment in our hospital from August 2019 to July 2023 were enrolled， and according to the presence or absence of BRAF gene V600E mutation， they were divided into mutation group and non-mutation group. The two groups were compared in terms of age， sex， and comorbidity with Hashimoto’s thyroiditis， and related indicators were collected， including the number， size， margin， calcification， echo， capsule invasion， and cervical lymph node metastasis of tumor lesions. The multivariate logistic regression model was used to investigate the risk factors for BRAF gene V600E mutation in the patients with IF-PTC.

Results In this study， the patients with BRAF gene V600E mutation accounted for 67.16%. The univariate analysis showed that there were significant differences between the two groups in age， the number of lesions， and the constituent ratio of patients with capsule invasion （χ2=7.937-8.874，Plt;0.05）. The multivariate logistic regression analysis showed that age ≥55 years， multifocal tumor， and capsular invasion were independent risk factors for BRAF gene V600E mutation in IF-PTC patients （Plt;0.05）.

Conclusion Age ≥55 years， multifocal tumor， and capsular invasion are independent risk factors for BRAF gene V600E mutations in IF-PTC patients.

［KEY WORDS］ Thyroid cancer， papillary; Proto-oncogene proteins B-raf; Mutation; Risk factors

甲狀腺癌是最常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)病率在過去數(shù)十年內(nèi)始終處于上升趨勢［1-2］。甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid cancer，PTC）占甲狀腺癌的85%～90%，是甲狀腺癌中最為常見的類型［3］。PTC患者一般預(yù)后較好，10年生存率超過90%?；蚋淖冊赑TC的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用，其中BRAF基因突變是最常見的一種，其他常見的致癌基因改變包括RAS基因突變、RET基因重排等［4］。BRAF基因定位于人類7號(hào)染色體上（7q34），其錯(cuò)義點(diǎn)突變常位于基因激酶結(jié)構(gòu)域中的第11和15個(gè)外顯子，其中第15個(gè)外顯子中單個(gè)堿基的錯(cuò)義突變（T1799A），可以導(dǎo)致蛋白質(zhì)翻譯過程中第600位密碼子對應(yīng)的纈氨酸被替換為谷氨酸（V600E）。T1799A突變在所有的BRAF基因突變中占比超過了80%［5］。PTC患者中BRAF基因V600E突變現(xiàn)象較常見，該突變已經(jīng)成為PTC輔助診斷的重要指標(biāo)之一［6］。2017年世界衛(wèi)生組織（WHO）在第4版內(nèi)分泌腫瘤分類［7］中將PTC分為14種亞型，其中最常見的是經(jīng)典型和濾泡亞型（FV-PTC）。FV-PTC可以分為包裹性和浸潤性兩種，其中浸潤性FV-PTC中BRAF基因V600E突變率高達(dá)62.5%［8］。2022年WHO第5版內(nèi)分泌腫瘤分

類［9］中，F(xiàn)V-PTC被進(jìn)一步定義為包裹型浸潤性乳

頭狀癌濾泡型（IEFV-PTC）和浸潤性濾泡亞型PTC（IF-PTC）兩種類型。目前國內(nèi)對于IF-PTC BRAF基因V600E突變與患者臨床及超聲特征相關(guān)性的研究較少。本研究通過探討IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的臨床及超聲相關(guān)危險(xiǎn)因素，旨在為該病的臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年8月—2023年7月于我院行甲狀腺手術(shù)且術(shù)后病理證實(shí)為IF-PTC的患者134例，其中男27例，女107例，年齡18～74歲?；颊呒{入標(biāo)準(zhǔn)：①依據(jù)2022年WHO第5版內(nèi)分泌腫瘤分類病理診斷標(biāo)準(zhǔn)［9］確診為IF-PTC者；②術(shù)前行甲狀腺超聲檢查者；③臨床病例資料完整者；④行術(shù)中病理檢查者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤者；②有頭頸部放射治療史者；③年齡lt;18歲者。

收集患者的年齡、性別、組織樣本BRAF基因V600E免疫組化染色結(jié)果，依據(jù)基因突變結(jié)果將患者分為突變組和非突變組。同時(shí)，根據(jù)2017年美國放射學(xué)會(huì)發(fā)布的甲狀腺影像報(bào)告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)（TIRADS）分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)［10］，記錄患者術(shù)前甲狀腺超聲檢查結(jié)果，包括病灶的數(shù)量、大小、邊界、鈣化、回聲、被膜侵犯、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（所有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均得到病理學(xué)證實(shí)），以及合并橋本氏甲狀腺炎（HT）等情況。上述甲狀腺超聲檢查結(jié)果的記錄由一名具有5年以上工作經(jīng)驗(yàn)的超聲科醫(yī)師進(jìn)行，如有疑問請另一名上級(jí)醫(yī)師協(xié)助確認(rèn)。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS 27.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例（率）表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)；對單因素分析中有顯著差異的指標(biāo)進(jìn)行多因素logistic回歸分析。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)" 果

2.1 兩組患者一般資料比較

本研究共納入IF-PTC患者134例，其中突變組90例，非突變組44例，BRAF基因V600E突變患者構(gòu)成比為67.16%。單因素分析結(jié)果顯示，兩組患者的年齡、病灶數(shù)量和被膜侵犯患者構(gòu)成比差異顯著（χ2=7.937～8.874，Plt;0.05）。見表1。

2.2 IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的多因素logistic回歸分析

將BRAF基因V600E突變作為因變量，單因素分析結(jié)果中Plt;0.05的指標(biāo)作為自變量，進(jìn)行多因素logistic回歸分析。將各變量賦值，BRAF基因V600E突變=1而未突變=0，年齡≥55歲=1而年齡lt;55歲=0，多灶=1而單灶=0，侵犯被膜=1而未侵犯被膜=0。多因素logistic分析結(jié)果顯示，年齡≥55歲、腫瘤多灶和被膜侵犯均為BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素（Plt;0.05）。見表2。

3 討" 論

BRAF基因V600E突變是PTC中最常見的基因突變類型，不同亞型PTC的突變率有所差異［6］，并具有不同的超聲和病理學(xué)特點(diǎn)，復(fù)發(fā)和預(yù)后也有所不同。BRAF基因V600E突變與PTC患者的臨床特征密切相關(guān)［11］。PTC初發(fā)年齡是該病患者生存率的獨(dú)立預(yù)測因素之一，2018年美國癌癥聯(lián)合委員會(huì)（AJCC）公布了第8版甲狀腺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)［12］，其中將55歲作為特定疾病高死亡風(fēng)險(xiǎn)年齡閾值。有研究表明，≤25歲、26～35歲、36～45歲、46～55歲以及≥55歲的PTC患者的BRAF基因V600E突變率分別為68%、75%、80%、82%以及88%［13］。本研究結(jié)果顯示≥55歲是IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素之一，與上述研究結(jié)果相符。

IF-PTC作為PTC的分型，于2022年第一次被定義［9］，現(xiàn)階段國內(nèi)外尚缺乏其相關(guān)超聲特征的報(bào)道。但PTC超聲特征與BRAF基因V600E突變的相關(guān)性目前存在一定爭議。有學(xué)者指出BRAF基因V600E突變與甲狀腺腫瘤的邊界是否清晰、回聲性質(zhì)以及有無鈣化灶均有關(guān)［14］，亦有研究發(fā)現(xiàn)BRAF基因V600E突變與甲狀腺腫瘤的邊界及鈣化灶情況無關(guān)［15］。本研究中兩組患者IF-PTC結(jié)節(jié)的邊界是否清晰、回聲性質(zhì)及有無鈣化灶等指標(biāo)均無顯著差異。有研究指出PTC患者腫瘤病灶數(shù)量與BRAF基因V600E突變密切相關(guān)［16］。本研究結(jié)果顯示，BRAF基因V600E突變組的多灶患者構(gòu)成比顯著高于非突變組，且腫瘤多灶是該基因突變的危險(xiǎn)因素之一。因此，對BRAF基因V600E突變檢測陽性的IF-PTC患者，行超聲檢查時(shí)應(yīng)該更加嚴(yán)謹(jǐn)，以防漏診病灶。甲狀腺被膜侵犯被認(rèn)為是PTC發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素之一［17］。有研究對于186例PTC患者的BRAF基因V600E突變與腫瘤被膜侵犯關(guān)系進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)基因突變者被膜侵犯率為22.4%，未發(fā)生突變者被膜侵犯率為10.2%，提示BRAF基因V600E突變患者腫瘤更易侵犯被膜［18］。本研究結(jié)果顯示，被膜侵犯是BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素，印證了既往研究結(jié)果。第8版AJCC甲狀腺癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)［12］指出，腫瘤大小和頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況是評價(jià)PTC患者腫瘤臨床分期的標(biāo)準(zhǔn)之一。有研究指出BRAF基因V600E突變的PTC患者腫瘤直徑更大、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移趨勢更明顯，在腫瘤直徑2.0～4.0 cm的患者中，BRAF基因V600E突變可能提示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而在腫瘤直徑0.5～1.0 cm的患者中，BRAF基因V600E突變與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無相關(guān)性［19］。然而，本研究結(jié)果表明BRAF基因V600E突變與腫瘤大小及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)，分析原因可能是BRAF基因V600E突變多發(fā)生于PTC早期階段，相對于頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移出現(xiàn)時(shí)間更早［20］。本研究中部分BRAF基因突變患者處于疾病早期，未發(fā)生頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，使結(jié)果產(chǎn)生了統(tǒng)計(jì)學(xué)偏差。HT是一種可能導(dǎo)致甲狀腺功能下降的自身免疫性疾病，研究顯示HT患者更容易合并PTC［21］。HT在PTC的進(jìn)展中像一把“雙刃劍”，既增加了PTC患病風(fēng)險(xiǎn)，但同時(shí)也被視為阻止PTC進(jìn)展的保護(hù)因素。PTC合并HT患者的BRAF基因V600E突變率、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及腫瘤復(fù)發(fā)率均較低［22］。本研究結(jié)果顯示IF-PTC患者BRAF基因V600E突變與HT無關(guān)。目前HT在IF-PTC發(fā)展過程中的相關(guān)影響機(jī)制尚不明了，其與IF-PTC患者基因突變的關(guān)系仍需更加深入的研究。

本研究的局限性在于樣本量較少，且為單中心研究，因此后續(xù)需進(jìn)行大樣本的多中心研究，并且對患者進(jìn)行術(shù)后隨訪追蹤，以進(jìn)一步探討B(tài)RAF基因V600E突變與IF-PTC患者超聲特征以及預(yù)后之間的關(guān)系。

綜上所述，年齡≥55歲、腫瘤多灶和被膜侵犯是IF-PTC患者BRAF基因V600E突變的危險(xiǎn)因素。在臨床中，對于存在BRAF基因V600E突變的IF-PTC患者，進(jìn)行超聲檢查時(shí)需要更加關(guān)注腫瘤灶數(shù)量及被膜侵犯情況，以免對病情的評估產(chǎn)生偏差。

倫理批準(zhǔn)和知情同意：本研究涉及的所有試驗(yàn)均已通過青島大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的審核批準(zhǔn)（文件號(hào)QYFYWZLL28873）。所有試驗(yàn)過程均遵照《人體醫(yī)學(xué)研究的倫理準(zhǔn)則》的條例進(jìn)行。受試對象或其親屬已經(jīng)簽署知情同意書。

作者聲明：趙誠、李磊參與了研究設(shè)計(jì)；李磊、戰(zhàn)介芝、李慧、王瑞清、趙誠參與了論文的寫作和修改。所有作者均閱讀并同意發(fā)表該論文，且均聲明不存在利益沖突。

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（本文編輯 范睿心 厲建強(qiáng)）