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    富血小板血漿采集制備及質(zhì)量控制的回顧性分析

    2023-12-02 10:08:14楊麗娟胡燕吳雅娟張利劉麗萍彭濤甘新宇西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院輸血醫(yī)學(xué)科四川成都610036
    中國輸血雜志 2023年10期
    關(guān)鍵詞:分離機(jī)血量血細(xì)胞

    楊麗娟 胡燕 吳雅娟 張利 劉麗萍 彭濤 甘新宇(西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院 輸血醫(yī)學(xué)科,四川 成都 610036)

    自體富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)因其高濃度的血小板被激活后可釋放多種生長因子,在促進(jìn)創(chuàng)面愈合、組織再生等方面的安全性和有效性得以證實和接受[1-3]。且其來自自體,安全性較高,可在臨床各個領(lǐng)域都得到應(yīng)用,如骨科、難治性皮膚潰瘍、頜面外科、眼科運(yùn)動醫(yī)學(xué)以及整形美容科等[4-9]。 PRP 的制備可采用手工分離制備和采用血細(xì)胞分離機(jī)采集制備[10-11],后者產(chǎn)品中血小板含量以及白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘留量較為穩(wěn)定和可控,但對患者心肺功能和血容量有一定要求,如體重較輕的患者血容量較少、年紀(jì)稍大的患者心肺功能對快速失血的耐受性相對較差,血小板計數(shù)稍低患者采集循環(huán)數(shù)需適當(dāng)增加以及產(chǎn)品血小板濃度偏低等。 相應(yīng)的專家學(xué)者也出具了PRP 制備技術(shù)和注射治療方面共識[12~13],但關(guān)于采集方面文獻(xiàn)報道較少,現(xiàn)將本院采集的256 例PRP 患者數(shù)據(jù)分析報道如下。

    1 材料與方法

    1.1 一般資料 2021 年6 月—2022 年6 月在本院接受PRP治療的256 例患者。 使用NGL XCF 3000 血細(xì)胞分離機(jī)采集10~100 mL 不等的PRP 產(chǎn)品。 其中膝、肩、踝、骶髂關(guān)節(jié)以及股骨關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)炎(痛) 152 例;半月板、髕骨損傷72 例,韌帶損傷25 例,皮膚潰爛2 例,眼部疾病5 例。 所有接受PRP治療者在治療前常規(guī)檢測血常規(guī)、血型和HBsAg、抗-HCV、抗-HIV 和抗-TP、凝血4 項; 所有患者均行自體PRP 治療。本研究經(jīng)過本單位醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)(2023EC2-ky002)。

    1.2 分組 1)按性別,分為男性組和女性組;2)按年齡(歲)分組:組1(18~40 歲),組2(41~55 歲),組3(56~77 歲);3)按采集前Plt(×109/L)分組:組1[(100~150)×109/L],組2[(151~200)×109/L],組3[(201~450)×109/L]。

    1.3 儀器和耗材 NGL XCF 3000 血細(xì)胞分離機(jī)以及1 次性使用成份分離器耗材(四川南格爾,型號P-2000IB);法國ABX MICROS 60 血細(xì)胞分析儀及其配套試劑;山東威高集團(tuán)醫(yī)用高分子制品股份有限公司生產(chǎn)的抗凝劑(ACD-A)。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 24 統(tǒng)計軟件,計量資料以±s表示,采用t檢驗,P<0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 256 名PRP 采集患者基本信息 見表1。

    表1 256 名PRP 采集患者基本信息(±s)

    表1 256 名PRP 采集患者基本信息(±s)

    例數(shù)(n) 年齡(歲) 體重(kg) 心率(次/min) Hb(g/L) RBC(×1012/L) Hct PLT(×109/L)總體 256 35±15 68±11 75±6 150±16 4.94±0.49 0.45±0.44 212±45性別 男性 194 30±12 71±11 75±6 156±12 5.11±0.40 0.47±0.03 211±45女性 62 51±15 59±8 75±5 131±10 4.40±0.36 0.40±0.03 211±46年齡(歲) 18~40 174 26±6 70±11 75±5 155±13 5.08±0.43 0.46±0.03 219±43 41~55 44 49±5 66±11 76±6 142±17 4.71±0.50 0.43±0.05 196±48 56~78 38 65±7 62±10 76±6 135±15 4.55±0.52 0.41±0.04 194±44 Plt 組1(100~150) 26 47±18 66±10 77±6 143±19 4.83±0.65 0.44±0.06 130±14(×109/L) 組2(151~200) 84 36±15 68±11 75±6 150±16 4.95±0.50 0.45±0.04 178±15組3(201~450) 146 33±15 69±12 75±6 151±15 4.96±0.46 0.45±0.04 242±30

    2.2 256 名PRP 采集過程中各指標(biāo)對比分析 數(shù)據(jù)顯示:1)不同性別、不同年齡段和不同血小板計數(shù)的患者在采集時間、循環(huán)血量、采集量上均差異不明顯(P>0.05);2)男性和女性患者采集后的產(chǎn)品白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘存量和血小板含量亦差異不明顯(P>0.05);3)不同年齡段的采集組,采集產(chǎn)品中白細(xì)胞含量隨著年齡段的增加而增高,其中年齡較高組(組3,56~78 歲)白細(xì)胞殘存量(0.64±0.41)×109/L 明顯高于年齡較低組(組1,18~40 歲)的(0.50±0.35)109/L,差異顯著(t=2.076,P<0.05);4)不同血小板計數(shù)的采集組,血小板較低組1[組1,(100-150)×109/L]采集產(chǎn)品中白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘存量均高于其它血小板計數(shù)組,且差異明顯(P<0.05),同時產(chǎn)品中的血小板計數(shù)也顯著低于其它血小板計數(shù)組(P<0.05)(表2)。

    表2 256 例PRP 采集過程中各指標(biāo)對比 (±s)

    表2 256 例PRP 采集過程中各指標(biāo)對比 (±s)

    注:采集時間、循環(huán)血量均已換算成以采集10 mL PRP 為基準(zhǔn);*1 血小板計數(shù)組1 白細(xì)胞殘存量與組2、組3 比較,t 值分別為2.376、3.417,P值均<0.05;*2 血小板計數(shù)組1 紅細(xì)胞殘存量與組2、組3 比較,t 值分別為3.216、2.585,P 值均<0.05;*3 血小板計數(shù)組1 血小板含量與組2、組3 比較,t 值分別為2.815、4.042,P 值均<0.05。

    例數(shù) 采集時間(min) 循環(huán)血量(mL) 采集量(mL) WBC(×109/L) RBC(×1012/L) Plt(×109/L)性別 男 194 6±3 183±89 39±16 0.52±0.39 0.06±0.09 1082±273 62 7±3 199±72 41±17 0.60±0.35 0.08±0.05 1108±303年齡(歲) 18~40 174 6±3 182±90 38±17 0.50±0.35 0.06±0.09 1095±281 41~55 44 7±3 205±81 38±13 0.61±0.46 0.07±0.05 1123±294 56~78 38 6±2 187±65 44±16 0.64±0.41 0.07±0.04 1020±253 Plt 組1(100~150) 26 7±3 220±96 41±23 0.83±0.48*1 0.12±0.06*2 844±187*3(×109/L) 組2(151~200) 84 6±3 192±74 39±16 0.55±0.39 0.06±0.04 1036±251組3(201~450) 146 6±3 180±90 38±15 0.49±0.35 0.06±0.09 1148±285女

    3 討論

    關(guān)于PRP 的采集與制備,國內(nèi)雖出具了一些專家共識,但仍然缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn);不同性別、年齡段以及血小板計數(shù)不同的人群是否均可以采集并達(dá)到理想效果,目前還不清楚。 本數(shù)據(jù)采集患者在采集前均已排除相對采集禁忌證[14]。 本院從2020 年P(guān)RP 開展至2021 年6 月,共采集149例患者數(shù)據(jù),采集儀器為血細(xì)胞分離機(jī)MCS+和NGL XCF 3000,主要用于單采血小板采集。 2021 年6 月以后本院使用改良版NGL XCF 3000 以及配套耗材進(jìn)行PRP 采集。 本試驗從不同性別、年齡段、血小板計數(shù)段3 個方面出發(fā),觀測NGL XCF 3000 血細(xì)胞分離機(jī)在采集過程中的采集時間、循環(huán)血量,以及PRP 產(chǎn)品中白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘存量和血小板計數(shù)值的數(shù)據(jù)并進(jìn)行對比分析。

    數(shù)據(jù)顯示:256 例患者中,均未出現(xiàn)不適反應(yīng);儀器在采集不同性別、不同年齡段和不同血小板計數(shù)患者的采集時間、循環(huán)血量上均差異不明顯(P<0.05);但隨著年齡的增加PRP 產(chǎn)品中的白細(xì)胞含量隨也隨之增高,其中年齡較高組3(56~78 歲)白細(xì)胞殘存量約高出年齡較低組1(18 ~40 歲)0.14×109/L,差異較為明顯(P<0.05)。 關(guān)于產(chǎn)品中白細(xì)胞、紅細(xì)胞的含量在PRP 治療中所起到的作用,目前還存在爭議。 PRP 中白細(xì)胞有著趨化、吞噬和殺菌作用,清除局部壞死組織和病原體,增強(qiáng)抗感染的能力,加快組織的修復(fù)[15~16]。 中性粒細(xì)胞釋放的嗜天青顆粒和特殊顆粒,前者能消化吞噬的細(xì)菌和異物(如組織碎片),后者具有殺菌作用。 同時,中性粒細(xì)胞釋放的花生四烯酸,在一系列反應(yīng)后對調(diào)節(jié)血管口徑和通透性有明顯的作用,還能引起局部紅腫、炎癥反應(yīng)和疼痛,對創(chuàng)傷愈合帶來負(fù)面影響。 因而有研究認(rèn)為,白細(xì)胞可能引起炎癥、變態(tài)反應(yīng)以及紅腫和疼痛反應(yīng),不適用于肌腱病、慢性退行性關(guān)節(jié)炎等疾病的治療[17]。而對于PRP 中紅細(xì)胞,當(dāng)紅細(xì)胞被破壞時釋放出的一些降解產(chǎn)物具有細(xì)胞毒性,最終會導(dǎo)致嚴(yán)重的組織損傷、局部血管收縮伴血管損傷和微循環(huán)功能障礙[18]。 同時紅細(xì)胞的凋亡,也會觸發(fā)巨噬細(xì)胞遷移抑制因子的釋放,從而導(dǎo)致局部細(xì)胞功能障礙[19]。 因而高濃度的紅細(xì)胞不利于組織修復(fù);但紅細(xì)胞有運(yùn)送氣體功能,運(yùn)送的氧氣有利于組織修復(fù),運(yùn)送的NO 有促進(jìn)滑膜細(xì)胞凋亡作用[20]。

    單采血小板的采集要求獻(xiàn)血人員血小板計數(shù)值≥150×109/L,而PRP 的采集因采集量相對較少,一般≤100 mL,因而對于血小板計數(shù)在(100~150)×109/L 的患者我們也進(jìn)行了PRP 采集。 針對患者血小板計數(shù)高低的差異,我們分了3個組,從PRP 產(chǎn)品來看,采集前血小板較低組[組1(100 ~150)×109/L]白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘存量均明顯(P<0.05)高于其它血小板計數(shù)組,相較于組2、組3,其白細(xì)胞殘存量約高出0.3×109/L,紅細(xì)胞約高出0.06×1012/L,同時血小板計數(shù)也顯著低于其它血小板計數(shù)組(P<0.05)。 這可能是血小板計數(shù)較低在采集時,儀器需提高循環(huán)血量才能收集到足夠血小板,因而PRP 產(chǎn)品中白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘存量相對較高。 當(dāng)患者血小板計數(shù)較高時,有利于血小板與其他細(xì)胞分離開來,單循環(huán)收集到的血小板提高,儀器循環(huán)數(shù)也會減少,血漿產(chǎn)量相對也減少,同時產(chǎn)品中白細(xì)胞、紅細(xì)胞殘存量相對較少,而血小板的濃度相對較高。 關(guān)于PRP 中血小板的濃度,國內(nèi)專家共識推薦患者自身血小板濃度的4 ~8 倍或(500 ~1 000)×109/L。 本研究中PRP 中血小板濃度采用的4~8 倍全血濃度,血小板計數(shù)范圍(500 ~1 500)×109/L。 因而采集前血細(xì)胞計數(shù)在(100~150)×109/L 的患者采集的PRP 產(chǎn)品血小板計數(shù)平均值為(844±187)×109/L 能滿足臨床治療需求。 從2020—2022 年2 年多的臨床實踐來看,目前臨床效果較為滿意,沒有收到不良反饋,這與相關(guān)研究結(jié)果較為一致[21]。

    利益沖突:所有作者均聲明不存在利益沖突。

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