桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠的作用及機(jī)制

肖柯心，張小飛，李?lèi)倢?，趙冰潔，李紅玉，詹博，王番，吳玉梅，賈艷艷（.陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 706；.空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科，陜西 西安 7003；3.西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，陜西 西安 70069；.空軍軍醫(yī)大學(xué)藥理學(xué)教研室，陜西 西安 7003）

抑郁癥是一種常見(jiàn)的精神障礙疾病，患者主要表現(xiàn)為持久的心情低落、興趣減退、食欲下降，同時(shí)伴有反應(yīng)遲緩、記憶力下降、失眠等身體癥狀，在嚴(yán)重情況下甚至?xí)憩F(xiàn)出自殘、自殺傾向[1-2]。據(jù)世界衛(wèi)生組織調(diào)查[3-5]結(jié)果顯示，全球范圍內(nèi)抑郁癥患病率高達(dá)11%，而中國(guó)成年人群抑郁障礙的終生患病率為6.8%，且呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)。抑郁癥致病因素復(fù)雜，與社會(huì)、環(huán)境、遺傳等多種因素相關(guān)，目前仍未明確其具體發(fā)病機(jī)制[6-8]。目前一線(xiàn)抗抑郁藥物主要為選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（SSRIs）、5-羥色胺和去甲腎上腺素再攝取抑制劑（SNRIs）、去甲腎上腺素和特異性5-羥色胺能抗抑郁藥（NaSSA）等，但長(zhǎng)期使用存在不良反應(yīng)、患者依從性差、停藥反應(yīng)和成癮性等問(wèn)題[9]。因此，開(kāi)發(fā)更加安全且有效的抗抑郁中藥方劑具有重要的現(xiàn)實(shí)意義[10-11]。

桑玉膏為中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院的中藥協(xié)定處方，是由玉竹、桑椹、黃精、薏苡仁、酸棗仁、枳椇子、梔子7 味中藥制成的膏劑，具有疏肝緩郁、除煩安神、健脾燥濕的功效，臨床上發(fā)現(xiàn)其能改善肝炎患者因肝失疏泄而引起的失眠多夢(mèng)、易怒易躁、情緒不佳等焦慮抑郁樣癥狀。前期研究[12]發(fā)現(xiàn)，桑玉膏對(duì)藥物性肝損傷小鼠具有明顯保護(hù)作用，可能與其提高機(jī)體抗氧化能力，緩解氧化應(yīng)激，降低炎癥因子水平等有關(guān)。因此，本研究擬利用利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠模型，觀(guān)察桑玉膏對(duì)抑郁癥的防治效果，為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物6～8 周齡雄性C57BL/6 小鼠，SPF 級(jí)，體質(zhì)量（20±3）g，購(gòu)自中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（陜）2019-001。小鼠飼養(yǎng)環(huán)境為晝夜12 h/12 h 交替循環(huán)，濕度45%～65%，室溫（22±3）℃，自由攝食、飲水。本動(dòng)物實(shí)驗(yàn)經(jīng)過(guò)中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核，批文號(hào)：KY20223251-1。

1.2 藥物及試劑桑玉膏，由中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科提供，批號(hào)：20220312；利血平（純度≥98%），麥克林生物科技有限公司，批號(hào)：20210204；鹽酸氟西汀膠囊，上海上藥中西制藥有限公司，批號(hào)：20211012。5-羥色胺（5-HT，批號(hào)：20220824）、5-羥基吲哚乙酸（5-HIAA，批號(hào)：20220512）、去甲腎上腺素（NE，批號(hào)：20221025）、多巴胺（DA，批號(hào)：20220830）、皮質(zhì)酮（CORT，批號(hào)：20221021）、促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH，批號(hào)：20221021）ELISA 檢測(cè)試劑盒，均購(gòu)自南京建成生物工程研究所；白細(xì)胞介素1β（IL-1β，批號(hào)：1161887922）、IL-6（批號(hào)：1321879823）、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF，批號(hào)：3818671019）ELISA檢測(cè)試劑盒，以及BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒（批號(hào)：7B15B46）、無(wú)菌PBS（批號(hào)：17D16B21），均購(gòu)自武漢博士德生物有限公司；HE染色試劑盒，武漢博士德生物公司，批號(hào)：16C01A80。

1.3 主要儀器SpectraMaxPius3連續(xù)光譜掃描式酶標(biāo)儀，香港分子儀器公司；5810R 大型高速冷凍離心機(jī)，艾本德中國(guó)有限公司；SCIENTZ-48高通量組織研磨儀，寧波新芝生物科技股份有限公司；IXplore Pro倒置顯微鏡，日本Olympus公司。

1.4 模型復(fù)制、分組及給藥將60只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為6 組：空白對(duì)照組、模型組、鹽酸氟西汀組（3.0 mg·kg-1）和桑玉膏低、中、高劑量組（0.45、0.90、1.80 g·kg-1，根據(jù)動(dòng)物與人體質(zhì)量劑量折算系數(shù)表進(jìn)行換算，即小鼠劑量為人體劑量的9.01 倍），每組10 只。所有藥物均采用無(wú)菌PBS 溶解，按照10 mL·kg-1灌胃，空白對(duì)照組和模型組灌胃等量PBS。每日1 次，連續(xù)灌胃第10 天，對(duì)空白對(duì)照組、鹽酸氟西汀組和桑玉膏低、中、高劑量組5組小鼠進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)（Forced swimming test，F(xiàn)ST）和懸尾實(shí)驗(yàn)（Tail suspension test，TST），完成后各組繼續(xù)灌胃至第14 天。末次灌胃0.5 h后，模型組、鹽酸氟西汀組及桑玉膏低、中、高劑量組小鼠腹腔注射利血平溶液（2.5 mg·kg-1），空白對(duì)照組腹腔注射等量無(wú)菌PBS。注射1 h 后，觀(guān)察各組小鼠眼瞼下垂度并計(jì)分（參考相關(guān)研究[13-14]方法，0 分：完全睜開(kāi)；1 分：眼瞼下垂1/4；2 分：眼瞼下垂1/2；3 分：眼瞼下垂3/4；4分：完全閉合），3 h后測(cè)量各組小鼠體質(zhì)量和肛溫。

1.5 懸尾實(shí)驗(yàn)自制離地面20 cm 高的紙箱，紙箱一面敞開(kāi)便于觀(guān)察，其余面封閉。在紙箱頂部固定一橫桿，將小鼠尾巴用醫(yī)用膠帶固定在橫桿上共6 min，前2 min 讓小鼠適應(yīng)環(huán)境后，記錄后4 min 內(nèi)小鼠不動(dòng)時(shí)間。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保持環(huán)境安靜，避免外界干擾。

1.6 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備高30 cm、直徑20 cm 的圓柱形透明水缸，水深15 cm，水溫23～25 ℃。將小鼠放入水缸中共6 min，前2 min 讓小鼠適應(yīng)環(huán)境后，記錄后4 min 內(nèi)小鼠的不動(dòng)時(shí)間（小鼠以直立姿勢(shì)漂浮，或只做一些小動(dòng)作便把頭露出水面視為不動(dòng)）。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中保持環(huán)境安靜，避免外界干擾。

1.7 ELISA 法檢測(cè)腦組織單胺遞質(zhì)、BDNF 及血清炎癥因子、CORT、ACTH 水平利血平拮抗實(shí)驗(yàn)完成后，對(duì)小鼠進(jìn)行腹主動(dòng)脈取血；然后頸椎脫臼處死小鼠，取腦組織稱(chēng)質(zhì)量后，分離海馬組織及前額葉皮層，保存于-80 ℃。取部分腦組織，加入10倍體積PBS，高速勻漿，以4 ℃、12 000 r·min-1（離心半徑=9.54 cm）離心15 min，取上清液；按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟操作，測(cè)定小鼠海馬組織中5-HT、5-HIAA、NE、DA 含量，以及前額葉皮層中BDNF 含量。將小鼠血液以3 500 r·min-1（離心半徑=9.54 cm）離心15 min，收集血清；按照ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟操作，測(cè)定血清IL-1β、IL-6、CORT、ACTH水平。

1.8 HE 染色法觀(guān)察小鼠海馬組織病理變化取小鼠完整腦組織，置于10%甲醛溶液中固定24 h；石蠟包埋后制作病理切片，采取常規(guī)HE染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察小鼠海馬組織病理變化。

1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析；計(jì)量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示；多組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 桑玉膏對(duì)小鼠懸尾及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響結(jié)果見(jiàn)表1。與空白對(duì)照組比較，桑玉膏中、高劑量組和鹽酸氟西汀組小鼠的懸尾不動(dòng)時(shí)間及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間均明顯縮短（P＜0.05，P＜0.01）。不動(dòng)時(shí)間可反映小鼠的絕望狀態(tài)，不動(dòng)時(shí)間越長(zhǎng)則表明小鼠的絕望程度越高。結(jié)果表明，桑玉膏可減輕行為絕望模型小鼠的絕望程度。

表1 桑玉膏對(duì)小鼠懸尾及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響（±s，n=10）Table 1 Effects of Sangyu Soft Extract on immobile time of forced swimming and tail suspension in mice（±s，n=10）

表1 桑玉膏對(duì)小鼠懸尾及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間的影響（±s，n=10）Table 1 Effects of Sangyu Soft Extract on immobile time of forced swimming and tail suspension in mice（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01

強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間/s 213.66±21.23 165.03±22.28##197.44±18.98 182.32±26.43##171.56±31.19##組別空白對(duì)照組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）-3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80懸尾不動(dòng)時(shí)間/s 140.91±18.78 87.60±18.78##128.75±28.47 119.68±18.27#95.17±29.82#

2.2 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠體質(zhì)量、腦質(zhì)量的影響結(jié)果見(jiàn)表2。各組小鼠之間的體質(zhì)量及腦質(zhì)量無(wú)明顯變化（P＞0.05）。結(jié)果表明，利血平誘導(dǎo)急性抑郁未導(dǎo)致小鼠體質(zhì)量及腦質(zhì)量出現(xiàn)明顯變化，并且桑玉膏給藥14 d 對(duì)小鼠的體質(zhì)量、腦質(zhì)量也無(wú)明顯影響。

表2 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠體質(zhì)量、腦質(zhì)量的影響（±s，n=10）Table 2 Effect of Sangyu Soft Extract on body mass and brain mass of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

表2 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠體質(zhì)量、腦質(zhì)量的影響（±s，n=10）Table 2 Effect of Sangyu Soft Extract on body mass and brain mass of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80體質(zhì)量/g 18.48±0.94 18.41±1.15 17.96±0.86 18.98±0.78 18.09±1.37 19.54±0.66腦質(zhì)量/g 0.41±0.04 0.43±0.02 0.41±0.03 0.42±0.02 0.41±0.03 0.41±0.02

2.3 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠眼瞼下垂度、肛溫的影響結(jié)果見(jiàn)表3。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠肛溫明顯下降（P＜0.01），眼瞼下垂度明顯加重（P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和桑玉膏高劑量組小鼠的眼瞼下垂度明顯減輕（P＜0.01，P＜0.05），肛溫明顯升高（P＜0.05）。結(jié)果表明，桑玉膏能夠拮抗利血平引起的小鼠失溫和眼瞼下垂癥狀。

表3 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠眼瞼下垂度、肛溫的影響（±s，n=10）Table 3 Effects of Sangyu Soft Extract on eyelid ptosis and anal temperature of Reserpine-induced depression mice（x ± s，n=10）

表3 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠眼瞼下垂度、肛溫的影響（±s，n=10）Table 3 Effects of Sangyu Soft Extract on eyelid ptosis and anal temperature of Reserpine-induced depression mice（x ± s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

劑量/（g·kg-1）肛溫/℃36.50±0.53 35.84±0.55##36.50±0.49*35.87±0.28 36.08±0.20 36.38±0.39*組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80下垂度/分0 2.8±0.87##1.5±0.81**2.7±1.10 2.2±0.98 1.9±0.70*

2.4 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織5-HT、5-HIAA 含量的影響結(jié)果見(jiàn)表4。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠海馬組織中5-HT含量明顯降低（P＜0.01），5-HIAA 含量明顯升高（P＜0.01），5-HIAA/5-HT 比值顯著增大（P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和桑玉膏中、高劑量組小鼠海馬組織中5-HT 含量明顯升高（P＜0.05，P＜0.01），5-HIAA含量明顯降低（P＜0.05，P＜0.01），5-HIAA/5-HT比值顯著縮小（P＜0.01）。結(jié)果表明，桑玉膏能夠提高急性抑郁小鼠海馬組織中的5-HT含量，并能夠降低5-HT 向5-HIAA 代謝的水平，進(jìn)一步提高5-HT含量。

表4 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織5-HT、5-HIAA 含量的影響（±s，n=10）Table 4 Effect of Sangyu Soft Extract on the contents of 5-HT and 5-HIAA in hippocampus of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

表4 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織5-HT、5-HIAA 含量的影響（±s，n=10）Table 4 Effect of Sangyu Soft Extract on the contents of 5-HT and 5-HIAA in hippocampus of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

5-HIAA/5-HT 0.13±0.03 0.28±0.05##0.13±0.03**0.25±0.06 0.18±0.03**0.15±0.03**組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80 5-HT/（ng·g-1）454.65±77.19 251.26±42.74##440.31±97.99**268.68±55.81 338.80±63.84*369.78±65.86**5-HIAA/（ng·g-1）57.30±2.87 67.58±2.89##54.41±4.37**63.79±3.55 60.79±5.89*54.92±2.95**

2.5 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織NE、DA 含量的影響結(jié)果見(jiàn)表5。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠海馬組織NE、DA 含量顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和桑玉膏中、高劑量組小鼠海馬組織NE、DA含量均明顯升高（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)果表明，桑玉膏能夠提高急性抑郁小鼠海馬組織NE、DA水平。

表5 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織NE、DA含量的影響（±s，n=10）Table 5 Effect of Sangyu Soft Extract on the contents of NE and DA in hippocampus of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

表5 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織NE、DA含量的影響（±s，n=10）Table 5 Effect of Sangyu Soft Extract on the contents of NE and DA in hippocampus of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

DA/（ng·g-1）1 434.61±446.27 674.61±275.15##1 502.81±340.85**880.08±319.00 1 104.79±382.98*1 359.44±340.85**組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80 NE/（ng·g-1）142.56±13.31 105.05±11.77##133.72±11.62**109.35±5.49 125.84±7.55**132.47±11.90**

2.6 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠前額葉皮層BDNF 含量的影響結(jié)果見(jiàn)表6。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠前額葉皮層BDNF含量顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和桑玉膏高劑量組小鼠前額葉皮層BDNF 含量明顯升高（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)果表明，桑玉膏能夠提高急性抑郁小鼠前額葉皮層BDNF水平。

表6 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠前額葉皮層BDNF含量的影響（±s，n=10）Table 6 Effect of Sangyu Soft Extract on the content of BDNF in prefrontal cortex of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

表6 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠前額葉皮層BDNF含量的影響（±s，n=10）Table 6 Effect of Sangyu Soft Extract on the content of BDNF in prefrontal cortex of Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

BDNF/（pg·g-1）348.80±45.75 244.74±44.66##346.70±51.77**252.86±45.28 281.20±43.63 330.17±51.43*組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80

2.7 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織病理?yè)p傷的影響結(jié)果見(jiàn)圖1?？瞻讓?duì)照組小鼠海馬組織細(xì)胞排列緊密有序，結(jié)構(gòu)形態(tài)正常。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠海馬組織細(xì)胞排列紊亂，間隙疏松增大，表明其出現(xiàn)了一定程度的病理?yè)p傷。與模型組比較，桑玉膏中、高劑量和鹽酸氟西汀組小鼠的海馬組織細(xì)胞排列相對(duì)整齊，層次密集，海馬組織病理?yè)p傷得到一定程度改善。

圖1 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠海馬組織病理?yè)p傷的影響（HE 染色，×200）Figure 1 Effect of Sangyu Soft Extract on pathological damage of hippocampal tissue in Reserpine-induced depression mice（HE staining，×200）

2.8 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠血清IL-1β、IL-6 水平的影響結(jié)果見(jiàn)表7。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血清IL-1β、IL-6水平顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和桑玉膏高劑量組小鼠血清IL-1β、IL-6 水平明顯降低（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)果表明，桑玉膏能夠降低急性抑郁小鼠血清炎癥因子IL-1β、IL-6水平。

表7 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠血清IL-1β、IL-6水平的影響（±s，n=10）Table 7 Effect of Sangyu Soft Extract on serum IL-1β and IL-6 concentrations in Reserpine-induced depression mice（x ± s，n=10）

表7 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠血清IL-1β、IL-6水平的影響（±s，n=10）Table 7 Effect of Sangyu Soft Extract on serum IL-1β and IL-6 concentrations in Reserpine-induced depression mice（x ± s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

IL-6/（pg·mL-1）43.45±11.62 77.36±12.85##47.63±13.21*69.02±13.60 62.44±9.47 52.42±11.30*組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80 IL-1β/（pg·mL-1）81.38±6.18 107.30±9.88##87.12±7.42**101.94±6.87 96.65±6.52 89.74±4.88**

2.9 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠血清CORT、ACTH 水平的影響結(jié)果見(jiàn)表8。與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠血清CORT、ACTH 水平顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，鹽酸氟西汀組和桑玉膏中、高劑量組小鼠血清CORT、ACTH 水平均明顯降低（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)果表明，桑玉膏能夠降低急性抑郁小鼠血清CORT、ACTH 水平，恢復(fù)HPA 軸平衡。

表8 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠血清CORT、ACTH水平的影響（±s，n=10）Table 8 Effects of Sangyu Soft Extract on serum CORT and ACTH concentrations in Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

表8 桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)急性抑郁小鼠血清CORT、ACTH水平的影響（±s，n=10）Table 8 Effects of Sangyu Soft Extract on serum CORT and ACTH concentrations in Reserpine-induced depression mice（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，##P＜0.01；與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

ACTH/（pg·mL-1）9.15±2.42 14.17±2.20##9.13±1.24**12.80±2.47 10.63±1.28*9.15±1.07**組別空白對(duì)照組模型組鹽酸氟西汀組桑玉膏低劑量組桑玉膏中劑量組桑玉膏高劑量組劑量/（g·kg-1）--3.0 mg·kg-1 0.45 0.90 1.80 CORT/（ng·mL-1）23.68±0.97 29.69±2.09##23.95±0.97**27.71±1.60 25.81±1.48**24.40±0.50**

3 討論

抑郁癥屬中醫(yī)“郁癥”范疇，傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為抑郁癥主要是由于七情失調(diào)導(dǎo)致內(nèi)臟氣機(jī)紊亂所致。而肝主情志，喜調(diào)達(dá)，惡抑郁，主舒泄，當(dāng)郁怒、憂(yōu)思等情志刺激影響到肝的疏泄功能，導(dǎo)致肝失條達(dá)，氣機(jī)郁滯，則會(huì)出現(xiàn)情志抑郁諸癥[15-16]。桑玉膏由玉竹、桑椹、黃精、薏苡仁、酸棗仁、枳椇子、梔子7味中藥組成，藥食同源，可長(zhǎng)期食用。方中玉竹為君藥，具有養(yǎng)陰潤(rùn)燥，生津止渴，清肝明目的功效；桑椹、黃精、薏苡仁合用，能健脾益氣，兼以補(bǔ)益肝腎，為臣藥；酸棗仁、枳椇子、梔子等共同發(fā)揮養(yǎng)心安神，清肝除煩的作用，為佐使藥。諸藥合用，共奏疏肝緩郁，健脾燥濕，保肝護(hù)肝之功效，通過(guò)調(diào)節(jié)肝臟疏泄功能，恢復(fù)人體氣機(jī)調(diào)暢，使脾胃正常運(yùn)化，氣血調(diào)和，情志開(kāi)朗暢達(dá)。

行為絕望動(dòng)物模型是通過(guò)懸尾、強(qiáng)迫游泳等方式創(chuàng)造出動(dòng)物無(wú)法逃脫的惡劣處境，使其出現(xiàn)行為絕望（不動(dòng)）狀態(tài)，通過(guò)測(cè)量動(dòng)物的不動(dòng)時(shí)間而快速有效地篩選抗抑郁藥物[17]。利血平是一種囊泡再攝取抑制劑，可使單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)在合成后不能攝入突觸囊泡而被降解，造成神經(jīng)末梢中5-HT、NE、DA 等單胺遞質(zhì)耗竭，從而引起行為和生理上的變化，常用于抑郁動(dòng)物模型復(fù)制[18-19]。利血平誘導(dǎo)的急性抑郁動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)上眼瞼下垂、體溫下降及運(yùn)動(dòng)不能等癥狀，可通過(guò)觀(guān)察動(dòng)物眼瞼下垂度、體溫及出圈率等指標(biāo)來(lái)觀(guān)察動(dòng)物的抑郁狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，桑玉膏預(yù)處理后可顯著縮短小鼠懸尾及強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間，并且可以顯著改善利血平引起的小鼠眼瞼下垂及體溫降低，表明桑玉膏對(duì)利血平誘導(dǎo)的急性抑郁有一定的干預(yù)作用。

抑郁癥致病因素眾多，發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)假說(shuō)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子假說(shuō)、HPA 軸假說(shuō)等被研究者廣泛認(rèn)可。單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)假說(shuō)認(rèn)為抑郁癥的發(fā)病與腦內(nèi)5-HT、NE、DA 等神經(jīng)遞質(zhì)含量降低密切相關(guān)[20]。5-HT 由色氨酸代謝產(chǎn)生，主要存在于大腦和胃腸道細(xì)胞中，少數(shù)存在于外周血液循環(huán)，是與抑郁癥關(guān)系最為密切的神經(jīng)遞質(zhì)之一。臨床研究[21-22]表明，重度抑郁癥患者的血清5-HT 水平僅為正常人群的一半甚至更低，臨床上常用的選擇性5-HT再攝取抑制劑（SSRIs）類(lèi)抗抑郁藥則是通過(guò)抑制5-HT 的再攝取來(lái)提高突觸間隙的5-HT 濃度，從而達(dá)到治療抑郁癥的目的。神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子是負(fù)責(zé)神經(jīng)元形成的生長(zhǎng)因子，具有神經(jīng)保護(hù)和抗細(xì)胞凋亡的作用。BDNF是神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子家族的主要成員，臨床研究[23]表明，重度抑郁癥患者的血液BDNF 水平較低，BDNF水平與患者的認(rèn)知表現(xiàn)正相關(guān)。HPA軸是人體調(diào)節(jié)激素，維持穩(wěn)態(tài)的重要內(nèi)分泌軸，HPA 軸過(guò)度亢進(jìn)與抑郁癥的發(fā)生密切相關(guān)，主要表現(xiàn)為血液CORT、ACTH 水平持續(xù)升高[24]。本研究結(jié)果表明，桑玉膏能夠逆轉(zhuǎn)利血平誘導(dǎo)的急性抑郁小鼠腦內(nèi)5-HT、NE、DA、BDNF 水平降低，并能夠降低5-HT向5-HIAA代謝的水平，以進(jìn)一步提高5-HT含量，表明桑玉膏可通過(guò)提升腦內(nèi)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子水平來(lái)保護(hù)神經(jīng)元細(xì)胞，減少神經(jīng)元細(xì)胞損傷，進(jìn)而提高中樞神經(jīng)單胺遞質(zhì)含量。同時(shí)，桑玉膏可降低急性抑郁小鼠血清CORT、ACTH 及炎癥因子IL-1β、IL-6 水平，調(diào)節(jié)HPA 軸從亢進(jìn)狀態(tài)恢復(fù)至正常水平，從而改善抑郁癥狀。

綜上所述，桑玉膏可降低行為絕望模型小鼠不動(dòng)時(shí)間，緩解利血平誘導(dǎo)的急性抑郁樣癥狀，可能與提高單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF水平，降低炎癥因子水平，調(diào)節(jié)HPA軸紊亂有關(guān)。