液相色譜法測定餅干、派、面包等食品中安賽蜜的含量

趙迪

摘 要：目的：建立一種高效液相色譜法檢測保定市在售餅干、面包、派等食品中安賽蜜的方法，監(jiān)測食品安全風(fēng)險(xiǎn)，保證消費(fèi)品安全。方法：采用C18反相色譜柱，二極管陣列檢測器，以0.02 mol·L-1乙酸銨溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）為流動(dòng)相，檢測波長225 nm，流速1.0 mL·min-1，溫度28.1 ℃，檢測環(huán)境濕度58%，以水為提取溶劑超聲波多次提取安賽蜜，加入沉淀劑去除提取液中雜質(zhì)，進(jìn)樣量5 μL，上機(jī)測定安賽蜜含量。結(jié)果：共檢測了27份樣品，最低檢出限為0.001 μg·mL-1，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.45%，樣品回收率在95%以上，超標(biāo)數(shù)0，合格率100%。結(jié)論：本方法操作簡單、快捷、準(zhǔn)確率較高，適合餅干、面包、派等烘焙食品中安賽蜜含量的監(jiān)測。

關(guān)鍵詞：安賽蜜；高效液相色譜；食品添加劑

Abstract： Objective： To establish a high performance liquid chromatography method for the detection of acesulfame potassium in biscuits， bread， pie and other foods sold in Baoding city， so as to monitor food safety risks and ensure the safety of consumer products. Method：The analysis was performed on a C18 reversed-phase column with diode array detector. The mobile phase was 0.02 mol·L-1 ammonium acetate solution∶methanol =95∶5?（V∶V）. The detection wavelength was 225 nm， the flow rate was 1.0 mL·min-1， the temperature was 28.1 ℃， and?the humidity was 58%. The acesulfame potassium was extracted by ultrasonic with water as the extraction solvent. The precipitant was added to remove the impurities in the extract. The injection volume was 5 μL， and the content of acesulfame potassium was determined by machine. Result： A total of 27 samples were tested， with a minimum detection limit of 0.001 μg·mL-1， a relative standard deviation of 0.45%， and sample recovery rate above 95%， exceed the standard 0， qualified rate 100%. Conclusion： This method is simple and fast to operate， and has high accuracy. It is suitable for monitoring acesulfame potassium content in biscuits， bread， pie and other?baked goods.

Keywords： acesulfame potassium; high performance liquid chromatography; food additive

餅干、面包、派等食品的基本原料是面粉、酵母、食鹽、飲用水和白砂糖，再添加適量牛奶、蛋產(chǎn)品、色素和甜味劑等烘焙而成。烘焙食品營養(yǎng)豐富，色香味俱佳，不僅可以作為主要食物，也可以作為甜品點(diǎn)心，還能夠作為饋贈(zèng)親朋好友的禮品。烘焙類食品作為生活不可或缺的一部分，消費(fèi)水平已經(jīng)超過了傳統(tǒng)米面制品。隨著生活水平的提高，食品的消費(fèi)將保持穩(wěn)定的水平。相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國烘焙類食品行業(yè)在2006—2010年，資產(chǎn)總額、銷售收入的年均增長速度均保持在21%以上，2010年全年烘焙類食品的銷售收入超過1 100億元。

安賽蜜（乙?；撬徕洠┦且环N食品添加劑，和糖精（鄰苯甲?；酋啺罚┫嗨?，甜度較高，被認(rèn)為是最有前途的甜味劑之一。安賽蜜作為非營養(yǎng)型甜味劑，不參加新陳代謝，不為機(jī)體提供能量，具有口感好、無熱量、不代謝、不吸收、無致齲齒性、耐熱和耐酸等優(yōu)點(diǎn)[1]。因此，安賽蜜在1992年就被國家衛(wèi)生部允許應(yīng)用于餐飲領(lǐng)域。乙?；撬徕浭悄壳笆澜缟系?代人工合成的甜味劑，生產(chǎn)工藝簡單、價(jià)格比較便宜，食品生產(chǎn)者遵守相關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)添加安賽蜜，不會(huì)影響食用人群的身體健康，部分食品生產(chǎn)企業(yè)在達(dá)到預(yù)期效果的前提下可能會(huì)提高安賽蜜在食品中的含量，機(jī)體長期攝入安賽蜜類甜味劑，會(huì)嚴(yán)重?fù)p害肝臟的生理功能，對神經(jīng)系統(tǒng)也有嚴(yán)重的影響，老、幼、孕等特殊人群受到的危害尤為嚴(yán)重。為了杜絕超標(biāo)和超范圍使用安賽蜜的食品進(jìn)入市場，對消費(fèi)者健康造成影響，我國對安賽蜜在食品中加入的含量作了嚴(yán)格規(guī)定[2]。安賽蜜最低檢出限0.001 g·kg-1，面包糕點(diǎn)食品中最高允許添加量0.3 g·kg-1，不得超標(biāo)使用[3]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

LC-20A島津液相色譜儀配置紫外檢測器（濟(jì)南捷島分析儀器有限公司）；SK-1渦旋振蕩器（常州國華電器有限公司）；TG16-WS高速離心機(jī)（湘儀離心機(jī)有限公司）；KQ-600E超聲波清洗器（武漢華科達(dá)實(shí)驗(yàn)社貝有限公司）；PL202-S分析天平（深圳時(shí)代之峰有限公司）。C2H3N（色譜純）；KH2PO4（分析純）；冰乙酸（優(yōu)級純）；超純水；乙酸鋅；亞鐵氰化鉀；安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；磷酸二氫鉀溶液（20 mmoL·L-1）：2.72 g無水磷酸二氫鉀，用水定容至1 L。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：YWG-C18（4.6 mm×250 mm，10 μm）；流動(dòng)相：0.02 moL·L-1乙酸銨溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）；流速：1 mL·min-1；檢測波長：225 nm。

1.2.2 方法優(yōu)化

餅干、面包類食品的成分比較復(fù)雜，脂質(zhì)、蛋白質(zhì)等會(huì)影響安賽蜜的檢測效果。因此，在樣品前處理過程中需要除去干擾物質(zhì)，選用乙酸鋅和亞鐵氰化鉀作為沉淀劑，不僅能夠完全除去干擾物質(zhì)，還不干擾安賽蜜的檢測，且容易通過過濾法除去雜質(zhì)[4]。20 ℃安賽蜜在水中的溶解度為270 g·L-1，微溶于酒精等有機(jī)溶劑[2]。超聲提取法能加快分子運(yùn)動(dòng)，加大固體和液體之間的接觸面積，使待測組分脫附和溶解速度加快，提取的速度也更快，提取更完全[2]。已有試驗(yàn)證實(shí)使用純水作為安賽蜜的提取溶劑，超聲提取30 min以上，安賽蜜的加標(biāo)回收率95.0%～98.9%，效果較理想[5]。

1.2.3 樣品處理

準(zhǔn)確稱取樣品10.0 g于50 mL比色管中，用蒸餾水定容，渦旋振蕩器振蕩1 min后置于超聲波清洗器中超聲提取15 min，然后高速離心機(jī)5 000 r·min-1離心10 min，最后取上清液于50 mL容量瓶，加水定容，0.45 μm濾膜過濾，等待測定[4]。根據(jù)安賽蜜的保留時(shí)間、特征光譜定性，采用外標(biāo)法定量[6]。檢測樣品，做加標(biāo)回收試驗(yàn)，取10%的樣品進(jìn)行平行樣品檢測[4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍

用純水對安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行稀釋，配制濃度為0.500 μg·mL-1、2.500 μg·mL-1、5.000 μg·mL-1和12.500 μg·mL-1（現(xiàn)用現(xiàn)配）的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液進(jìn)行測定，以安賽蜜的保留時(shí)間定性分析，以測得的峰面積、安賽蜜質(zhì)量濃度（μg·mL-1）繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線[4]。按10%的比例取平行樣進(jìn)行檢測，得y=33 072x+66.468 6，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9，結(jié)果見表1[3]。

2.2 精確度試驗(yàn)

取1份不含安賽蜜的空白樣品做6次平行測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.45%，見表2。

2.3 加標(biāo)回收試驗(yàn)

隨機(jī)稱取2份樣品，質(zhì)量均為5.00 g，編號1、2，加標(biāo)安賽蜜標(biāo)準(zhǔn)溶液1 μg，按1.2.3方法計(jì)算回收率，具體測定結(jié)果見表3。

2.4 最低檢出限

取安賽蜜5.0 g，定容至50 mL，進(jìn)樣5 μL，按S/N=3計(jì)算，最低檢出限為0.001 μg·mL-1，符合實(shí)驗(yàn)要求。

2.5 樣品檢測結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)檢測樣品共27份，安賽蜜的檢出值均低于0.001 g·kg-1，結(jié)果見表4。

3 結(jié)論

隨著生活水平的提高，人們的食品安全意識(shí)不斷提高。本文采用高效液相色譜法對保定市在售餅干、派、面包等食品中的安賽蜜含量進(jìn)行了檢測，使用C18反相色譜柱作為分離柱，以0.02 mol·L-1乙酸銨溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）為流動(dòng)相，檢測波長225 nm，流速1.0 mL·min-1。樣品處理以水作為提取溶劑，超聲波振蕩，加入沉淀劑去除提取液中雜質(zhì)，操作簡便易行。此次共檢測了27份樣品，安賽蜜的最低檢出限為0.001 μg·mL-1，樣品回收率在95%以上，合格率100%。結(jié)果表明，本方法操作簡便易行、準(zhǔn)確率高，適合用于檢測餅干、面包等烘焙食品中安賽蜜的含量，對于餅干類食品生產(chǎn)企業(yè)和各級食品監(jiān)督單位開展糕點(diǎn)類食品中安賽蜜的檢測有較好的適用性。

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