連翹葉綠茶漱口水的制備工藝研究

楊瑩瑩，張 璐

（1.山西省藥品審評(píng)中心，山西 太原 030006；2.山西省醫(yī)藥與生命科學(xué)研究院，山西 太原 030006）

0 引言

連翹葉是木犀科植物連翹（Forsythia suspense(Thunb.)Vahl） 的干燥葉，在山西、陜西、河北等地有將連翹嫩葉制成保健茶飲用的習(xí)慣[1]。研究表明，連翹葉的化學(xué)成分與連翹果實(shí)十分接近，甚至某些活性成分的含量更高，如連翹苷、連翹酯苷、蘆丁、連翹脂素等[2-5]?，F(xiàn)代藥理研究表明，連翹葉具有抗菌、保護(hù)肝臟、抗氧化等作用[6-8]。

山西省擁有豐富的連翹資源，連翹葉作為山西地方特色食品現(xiàn)已被廣泛開發(fā)成綠茶、紅茶等多種茶飲上市銷售。以連翹葉綠茶為原料，經(jīng)提取、復(fù)配制備具有清新口氣、抗菌效果的功能性漱口水，并通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)其工藝進(jìn)行了研究，為連翹葉綠茶漱口水的研發(fā)提供技術(shù)支持，同時(shí)也為連翹葉資源的綜合開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

連翹葉綠茶，山西盤秀山農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司提供；無水檸檬酸、氯化鈉（食品級(jí)），濰坊英軒實(shí)業(yè)有限公司提供；木糖醇（食品級(jí)），河南糖柜食品有限公司提供；薄荷醇、丙二醇、甘油（分析純），國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供；菌種，金黃色葡萄球菌，CICC；白色念珠菌，CICC；大腸桿菌，CICC。

AB 104-N 型電子天平，上海托利- 梅特勒儀器有限公司產(chǎn)品；HH-6 型數(shù)顯恒溫水浴鍋，國華電器有限公司產(chǎn)品；HC-3508 型高速離心機(jī)，科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司產(chǎn)品；BCD-239WT 型海爾冰箱，青島海爾有限公司產(chǎn)品；BXM-30R 型立式壓力蒸汽滅菌器，上海博迅醫(yī)療生物儀器股份有限公司產(chǎn)品；SPL-150 型生化培養(yǎng)箱，上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司產(chǎn)品；優(yōu)普UPHW-I-90T 系列超純水系統(tǒng)，成都超純科技有限公司產(chǎn)品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 連翹葉綠茶提取液的制備

準(zhǔn)確稱取連翹綠茶10.0 g 置于圓底燒瓶中，加入500 mL 去離子水，于90 ℃恒溫水浴鍋上回流提取1 h，用200 目濾布過濾，收集濾液。濾渣重復(fù)提取1 次，合并濾液，以轉(zhuǎn)速5 000 r/min 離心10 min，取上清液置于4 ℃冰箱備用。

1.2.2 最小抑菌濃度的考查

選擇導(dǎo)致口腔炎癥常見致病菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌為試驗(yàn)菌種[9]。以濾紙片抑菌圈法[10]測(cè)定樣品對(duì)上述3 種致病菌的抑制作用，分別考查添加5%，10%，15%，20%的綠茶提取液的抑菌效果。

1.2.3 漱口水配方單因素試驗(yàn)

（1） 薄荷醇添加量的考查。以去離子水為溶劑，添加連翹綠茶提取液10%，甘油10%，丙二醇5%，檸檬酸0.05%，氯化鈉0.2%，木糖醇0.05%，分別考查薄荷醇添加量為0.01%，0.02%，0.03%，0.04%，0.05%對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響。

（2） 檸檬酸添加量的考查。以去離子水為溶劑，添加連翹綠茶提取液10%，甘油10%，丙二醇5%，氯化鈉0.2%，薄荷醇0.03%，木糖醇0.05%，分別考查檸檬酸添加量為0.01%，0.03%，0.05%，0.07%對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響。

（3） 丙二醇添加量的考查。以去離子水為溶劑，添加連翹綠茶提取液10%，甘油10%，檸檬酸0.05%，氯化鈉0.2%，薄荷醇0.03%，木糖醇0.05%，分別考查丙二醇添加量為1%，3%，5%，7%，9%對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響。

（4） 木糖醇添加量的考查。以去離子水為溶劑，添加連翹綠茶提取液10%，甘油10%，丙二醇5%，檸檬酸0.05%，氯化鈉0.2%，薄荷醇0.03%，分別考查木糖醇添加量為0.01%，0.03%，0.05%，0.07%，0.09%對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響。

（5） 氯化鈉添加量的考查。以去離子水為溶劑，添加連翹綠茶提取液10%，甘油10%，丙二醇5%，檸檬酸0.05%，薄荷醇0.03%，木糖醇0.05%，分別考查氯化鈉添加量為0.05%，0.1%，0.2%，0.3%，0.4%對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響。

（6） 甘油添加量的考查。以去離子水為溶劑，添加連翹綠茶提取液10%，丙二醇5%，檸檬酸0.05%，氯化鈉0.2%，薄荷醇0.03%，木糖醇0.05%，分別考查甘油添加量為5%，10%，15%，20%對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響。

1.2.4 正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，篩選出對(duì)感官評(píng)價(jià)影響較大的3 個(gè)因素，確定各因素的最佳水平，采用L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，通過感官評(píng)價(jià)確定各因素的最佳添加量。

1.2.5 感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

感官評(píng)價(jià)采用百分制綜合評(píng)分，其中色澤30 分，氣味30 分，口味40 分。篩選10 名經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的評(píng)分員組成評(píng)價(jià)小組，對(duì)漱口水進(jìn)行感官評(píng)分[11]。

感官指標(biāo)及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1 感官指標(biāo)及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果與分析

2.1 抑菌濃度

連翹葉綠茶提取液對(duì)不同菌種的平均抑菌直徑見表2。

表2 連翹葉綠茶提取液對(duì)不同菌種的平均抑菌直徑 / mm

由表2 可知，提取液對(duì)3 種常見致病菌的抑菌圈均隨著添加量的降低而減小，對(duì)于大腸桿菌5%提取液有顯著抑菌效果，而對(duì)于金黃色葡萄球菌和白色念珠菌則是10%的提取液有顯著抑菌效果。因此選擇連翹葉綠茶提取液添加量為10%。

2.2 單因素試驗(yàn)

2.2.1 薄荷醇添加量

薄荷醇添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響見圖1。

圖1 薄荷醇添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響

薄荷醇的加入會(huì)產(chǎn)生清涼薄荷味，可清新口氣，但當(dāng)含量升高時(shí)會(huì)產(chǎn)生一定的刺激性。由圖1 可知，隨著薄荷醇添加量的增加，感官評(píng)分先升高后降低，當(dāng)添加量為0.02%時(shí)感官評(píng)分最高。因此，選擇薄荷醇添加量0.01%，0.02%，0.03%作為正交試驗(yàn)的研究水平。

2.2.2 檸檬酸添加量

檸檬酸添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響見圖2。

檸檬酸的加入不僅能調(diào)節(jié)漱口水的口味，還能消除色素沉著，抑制牙結(jié)石的生長。由圖2 可知，隨著檸檬酸添加量的增加，產(chǎn)品的酸度也明顯增加，感官評(píng)分先升高后降低，當(dāng)添加量為0.05%時(shí)感官評(píng)分最高。因此，選擇檸檬酸添加量0.03%，0.05%，0.07%作為正交試驗(yàn)的研究水平。

2.2.3 丙二醇添加量

丙二醇添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響見圖3。

圖3 丙二醇添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響

乙醇常作為助溶劑添加進(jìn)漱口水中，可促進(jìn)薄荷醇等成分的溶解，但乙醇有一定的刺激性且不適宜開車人群。因此，選擇性質(zhì)溫和的丙二醇代替乙醇。由圖3 可知，隨著丙二醇添加量的增加，感官評(píng)分先升高后降低，當(dāng)丙二醇添加量為5%時(shí)感官評(píng)分最高。因此，選擇丙二醇添加量3%，5%，7%作為正交試驗(yàn)的研究水平。

2.2.4 木糖醇添加量

木糖醇添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響見圖4。

圖4 木糖醇添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響

木糖醇作為甜味劑不僅可以促進(jìn)唾液分泌，還具有不能被口腔中的齲齒細(xì)菌發(fā)酵利用的特點(diǎn)，因此可有效預(yù)防齲齒。由圖4 可知，隨著木糖醇添加量的增加，甜度也隨之增加，當(dāng)添加量為0.05%時(shí)感官評(píng)分最高。因此，確定木糖醇的最佳添加量為0.05%。

2.2.5 氯化鈉添加量

氯化鈉添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響見圖5。

圖5 氯化鈉添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響

由圖5 可知，隨著氯化鈉添加量的增加鹽度增加，感官評(píng)分先升高后降低，當(dāng)添加量為0.1%時(shí)感官評(píng)分最高。因此，確定氯化鈉的最佳添加量為0.01%。

2.2.6 甘油添加量

甘油添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響見圖6。

圖6 甘油添加量對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響

漱口水中加入甘油起到矯味和潤濕作用，可去除苦澀味、提升適口感。由圖6 可知，隨著甘油添加量的增加，感官評(píng)分先升高后降低，當(dāng)添加量為10%時(shí)感官評(píng)分最高。因此，確定甘油的最佳添加量為10%。

2.3 正交試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)單因素試驗(yàn)的結(jié)果，篩選出對(duì)感官評(píng)價(jià)影響較大的3 個(gè)因素薄荷醇、檸檬酸和丙二醇作為考查因素，固定其他組分的添加量為連翹葉綠茶提取液10%，氯化鈉0.1%，木糖醇0.05%，甘油10%。

正交試驗(yàn)因素和水平設(shè)計(jì)見表3，正交試驗(yàn)結(jié)果見表4。

表3 正交試驗(yàn)因素和水平設(shè)計(jì)/%

表4 正交試驗(yàn)結(jié)果

由表4 可知，感官評(píng)分最高的是試驗(yàn)5 組，即A2B2C3。極差分析結(jié)果顯示，各因素對(duì)感官評(píng)價(jià)的影響為薄荷醇> 檸檬酸> 丙二醇，最佳的組合是A2B2C2。按照該條件進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，分別做3 次平行試驗(yàn)，其結(jié)果分別為89，91，92，平均90.7 分。因此，確定漱口水的最佳配方為薄荷醇添加量0.02%，檸檬酸添加量0.05%，丙二醇添加量5%。

方差分析見表5。

表5 方差分析

不同添加量的薄荷醇、檸檬酸和丙二醇對(duì)漱口水的感官評(píng)分均具有顯著意義，薄荷醇的添加量影響最大。

3 結(jié)論

以連翹葉綠茶為原料，感官評(píng)價(jià)為考查指標(biāo)，添加薄荷醇、檸檬酸和丙二醇等輔料，制備具有天然植物成分的抑菌漱口水。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)方法確定最佳配方中各組分添加量為連翹葉綠茶提取液10%，薄荷醇0.02%，檸檬酸0.05%，丙二醇5%，氯化鈉0.1%，木糖醇0.05%，甘油10%。按此配方制得的漱口水呈淡黃色，澄清透明，不含酒精成分，刺激性小，且具有天然連翹葉茶的清香和明顯的抑菌作用，可有效清潔口腔、清新口氣，有廣闊的市場(chǎng)前景。