金花茶優(yōu)良砧穗組合初選及嫁接親和力研究

韋曉娟 伍思宇 張幸 梁曉靜 藍(lán)金宣 楊卓穎

摘 要：本研究采用7 種不同山茶屬植物作為砧木，與4 種不同金花茶接穗，組成28 個(gè)組合，進(jìn)行砧穗組合篩選及嫁接親和力研究，開展嫁接成活率、保存率、嫁接苗生長(zhǎng)性狀等嫁接試驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定分析，調(diào)查嫁接苗移栽18 個(gè)月后的生長(zhǎng)狀況，評(píng)價(jià)嫁接口砧、穗可溶性糖含量與嫁接親和性關(guān)系。結(jié)果表明：博白大果油茶與羅斯曼金花茶、中東金花茶接穗的嫁接成活率及存活率均達(dá)到90%以上，與普通金花茶接穗的嫁接成活率和存活率均達(dá)到80%以上，是嫁接親和力最好的砧木；茶花黑牡丹僅與羅斯曼金花茶的嫁接苗有6.67%的保存率，與其他3 種接穗保存率均為0，作為砧木親和力最差。中東金花茶和羅斯曼金花茶2 種接穗與不同砧木嫁接親和性較好，中東金花茶與廣寧紅花油茶、多毛金花茶、黑牡丹、博白大果油茶嫁接成活率均達(dá)到90%以上，羅斯曼金花茶與博白大果油茶、越南抱莖茶嫁接成活率達(dá)到90%以上，與廣寧紅花油茶、宛田紅花油茶嫁接成活率達(dá)到80%以上。嫁接親和力與砧穗的可溶性糖含量有關(guān)，砧穗糖含量越接近，比值越接近1，嫁接成活率就越高。利用主成分分析法開展嫁接親和力綜合評(píng)價(jià)，根據(jù)得分值篩選出5個(gè)優(yōu)良組合，分別為：博白大果油茶/中東金花茶、多毛金花茶/中東金花茶、越南抱莖茶/羅斯曼金花茶、博白大果油茶/羅斯曼金花茶、博白大果油茶/普通金花茶。

關(guān)鍵詞：金花茶；砧穗組合；嫁接；親和力；篩選

中圖分類號(hào)：S571.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

金花茶（Camellia chrysantha）[1]是世界珍貴、稀有的觀賞植物和山茶黃色基因資源，具有極高的觀賞和產(chǎn)品加工價(jià)值，廣大山茶愛好者和科研工作者在苗木快繁方面進(jìn)行了大量研究。隨著金花茶產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，苗木繁育作為產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，其中嫁接繁殖已成為金花茶無性快繁最主要手段之一，然而，在實(shí)際的生產(chǎn)應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，成活后的金花茶嫁接苗仍然有相當(dāng)一部分會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢，生長(zhǎng)周期長(zhǎng)、病蟲害現(xiàn)象明顯、投產(chǎn)晚等滯后現(xiàn)象，這就是常說的“嫁接不親和”

或者說是“后期不親和[2]”現(xiàn)象，因此，篩選出嫁接親和力[3]高的優(yōu)良砧穗組合繁育出高質(zhì)量的嫁接苗應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)栽培中，仍然是解決生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)周期長(zhǎng)、提早投產(chǎn)等問題的最有效途徑之一。

嫁接親和力是指砧木和接穗在嫁接后能正常愈合、生長(zhǎng)和開花結(jié)果的能力[3]，目前關(guān)于嫁接親和力的研究已形成普遍共識(shí)，即“嫁接成活率高的砧穗組合一定是親和的，嫁接苗的田間生長(zhǎng)狀況（包括保存率、抽梢率、新梢長(zhǎng)、新梢粗等）均是反應(yīng)嫁接親和力的主要外部因子[2-11]”。而隨著研究的深入，各國(guó)學(xué)者對(duì)嫁接親和力的研究已逐漸擴(kuò)展至生物化學(xué)及生理學(xué)[9-14]等方面的探討，認(rèn)為親和力還主要取決于砧木與接穗雙方生理作用的相似程度，即二者必須有水分、養(yǎng)分及同化物、異化物質(zhì)的相似和量的相當(dāng)，其嫁接親和力就越強(qiáng)，其中石雪暉等[9]、楊瑞[10]、苗麗[11]開展對(duì)接穗與砧木葉片、嫁接口砧、穗部位糖含量研究發(fā)現(xiàn)，嫁接成活率與砧、穗可溶性糖含量差值呈顯著負(fù)相關(guān)，二者糖含量越接近，差值越小，比值越接近1，嫁接成活率就越高。

關(guān)于金花茶嫁接繁殖及砧木親和力試驗(yàn)，相關(guān)科技人員已開展了一些前期研究，如馬錦林等[4]、包志毅等[7]、張乃燕等[8]的研究，但是他們所采用的砧木品種大多僅是普通油茶一種，或是采用普通油茶、香花油茶、博白大果油茶、宛田紅花油茶中的1～3 種，砧木品種類型單一而且未開展可溶性糖等生理指標(biāo)與嫁接親和相關(guān)性的研究，所獲得的研究結(jié)論缺乏全面性和系統(tǒng)性。本研究以7 種不同山茶屬植物為砧木，以中國(guó)和越南4 種有代表性的金花茶品種為接穗，開展不同砧穗組合嫁接試驗(yàn)，砧木品種不僅采用了常用油茶物種博白大果油茶、陸川油茶、廣寧紅花油茶、宛田紅花油茶等，還啟用了茶花黑牡丹、越南抱莖茶、越南多毛金花茶等觀賞山茶砧木新類型，砧木類型豐富而全面。同時(shí)，本研究采用的4 種金花茶接穗既有本地常見代表性品種（普通金花茶、中東金花茶），又有越南典型品種（羅斯曼金花茶、箱田金花茶），試驗(yàn)不僅進(jìn)行了嫁接成活率、保存率、生長(zhǎng)性狀等常規(guī)指標(biāo)的測(cè)定，還追蹤了嫁接苗移栽18 個(gè)月以后的生長(zhǎng)狀況，并開展了金花茶嫁接繁殖接口的砧、穗可溶性糖含量與嫁接成活率關(guān)系的研究，因此本研究開展的優(yōu)良砧穗組合篩選和嫁接親和力研究具有較高的代表性和系統(tǒng)性，為今后開展金花茶嫁接繁殖、優(yōu)良砧穗組合篩選及嫁接親和力鑒定提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)在廣西林業(yè)科學(xué)研究院油茶種質(zhì)資源庫(kù)山茶苗木培育基地進(jìn)行。所有參試的砧木品種及金花茶接穗均采自廣西林科院山茶繁殖圃。砧木為7 種不同山茶屬植物的扦插苗，基徑粗0.5～0.8 cm 之間，苗齡一致。接穗品種為4 種不同金花茶植物，采集金花茶母樹樹冠外圍中上部飽滿的一年生充分木質(zhì)化或半年生半木質(zhì)化枝條作為接穗。

1.2 方法

（1）2020 年5 月上旬，以7 種砧木與4 種金花茶接穗兩兩組合，共組成28 個(gè)砧穗嫁接組合（表1）。采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，每個(gè)嫁接組合為一個(gè)處理，每處理30 株為一小區(qū)，采用劈接法進(jìn)行嫁接，每個(gè)組合嫁接30 株，3 次重復(fù)。

（2）嫁接3 個(gè)月（2020 年8 月上旬）調(diào)查28個(gè)組合的嫁接成活率和保存率，按成活率、保存率2 項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到60%以上進(jìn)行優(yōu)良砧穗組合初選，同時(shí)對(duì)初選的嫁接苗開展抽梢率、新梢長(zhǎng)、新梢粗、葉片數(shù)量的調(diào)查，使用植物葉綠素含量試劑盒測(cè)定葉綠素a（Chla）、葉綠素b（Chlb）和總?cè)~綠素（Chl），從嫁接接點(diǎn)上方3 cm 的接穗部分和嫁接接點(diǎn)下方3 cm 的砧木部分分別采集樣品各2 g，分別使用葡萄糖、蔗糖含量試劑盒（均為蘇州科銘生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）測(cè)定嫁接苗的葡萄糖、蔗糖含量，使用植物淀粉含量試劑盒（solarbio，BC0705）測(cè)定嫁接苗的淀粉含量。

（3）2020 年11 月底，將初選的嫁接苗移栽到袋口直徑18 cm、高20 cm 的無紡布育苗袋里，栽培基質(zhì)均為黃心土混10%的泥炭土及5%的鈣鎂磷肥，充分拌勻使用，每個(gè)組合各取30 株，擺放在離地約2.9 m 的遮蔭棚下，透光度50%～60%，進(jìn)行相同的日常管護(hù)。移栽18 個(gè)月后調(diào)查嫁接苗的株高、地徑、冠幅、葉片數(shù)量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)采用Excel 2007 和SPSS 17.0 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理、方差分析、LSD 多重比較和主成分分析。對(duì)嫁接苗的成活率、保存率、抽梢率等12 個(gè)與嫁接親和力相關(guān)的指標(biāo)數(shù)據(jù)作標(biāo)準(zhǔn)化處理，進(jìn)行主成分分析、綜合評(píng)分及排序[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 28 個(gè)砧穗組合的嫁接成活率、保存率比較

由表1 可知，嫁接3 個(gè)月后，廣寧紅花油茶/中東金花茶、多毛金花茶/中東金花茶、黑牡丹/中東金花茶、博白大果油茶/羅斯曼金花茶、博白大果油茶/中東金花茶、越南抱莖茶/羅斯曼金花茶等6 個(gè)組合的嫁接成活率均超過90%，廣寧紅花油茶/羅斯曼金花茶、宛田紅花油茶/羅斯曼金花茶、博白大果油茶/普通金花茶等3 個(gè)組合的嫁接成活率分別達(dá)到80%、80%和86.67%，多毛金花茶/普通金花茶、多毛金花茶/羅斯曼金花茶、越南抱莖茶/中東金花茶、陸川油茶/箱田金花茶等4個(gè)組合的嫁接成活率在63%～75%之間，其他15個(gè)組合成活率較低，均在46.67%以下，其中黑牡丹/箱田金花茶嫁接成活率為零。

嫁接3 個(gè)月后，博白大果油茶/羅斯曼金花茶、博白大果油茶/中東金花茶2 個(gè)組合的保存率均超過90%，博白大果油茶/普通金花茶、越南抱莖茶/羅斯曼金花茶2 個(gè)組合的保存率分別達(dá)到83.33%和86.36%，多毛金花茶/普通金花茶、多毛金花茶/羅斯曼金花茶、多毛金花茶/中東金花茶、越南抱莖茶/中東金花茶、陸川油茶/箱田金花茶等5 個(gè)組合的保存率也分別達(dá)到60%～67.78%之間，其他19 個(gè)組合保存率均較低，均在46.57%以下，其中廣寧紅花油茶/普通金花茶、廣寧紅花油茶/羅斯曼金花茶等5 個(gè)組合保存率為零。

2.2 優(yōu)良組合初選

根據(jù)以上“1.2（1）”和“1.2（2）”試驗(yàn)設(shè)計(jì)及要求“成活率和保存率2 項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到60%以上”的初選標(biāo)準(zhǔn)，初選出符合要求的組合9 個(gè)，依次用序號(hào)1～9 表示（表2）。組合1、2、3、5成活率較高，均達(dá)90%以上，其次是組合4，成活率86.67%，組合1、2 保存率最高，均達(dá)90%以上，其次是組合3 和4，保存率分別達(dá)到了86.36%和83.33%。

2.3 初選9 個(gè)組合嫁接苗田間生長(zhǎng)情況

從表3 可看出，嫁接3 個(gè)月后，組合3 抽梢率最大，達(dá)到100%，其次是組合2、5、6、7、9抽梢率達(dá)80%以上。組合1、9 新梢長(zhǎng)和新梢粗較大，新梢長(zhǎng)分別為10.82 cm 和10.40 cm，新梢粗分別為3.01 mm、2.75 mm，二者無顯著性差異。

除組合8 外，其他組合葉片數(shù)量均無顯著差異。

綜合分析表明，組合1～3 各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)表現(xiàn)較好，而組合8 的抽梢率（30%）、新梢長(zhǎng)（1.54 cm）、新梢粗（1.34 mm）、葉片數(shù)量（1.20 片）均最小，各項(xiàng)田間生長(zhǎng)指標(biāo)均顯著低于其他組合。

移栽18 個(gè)月后，組合2 和組合5 的株高、地徑、冠幅和葉片數(shù)量較大，組合1～5 的株高均達(dá)40 cm 以上，地徑達(dá)8.0 mm 以上，冠幅達(dá)0.4 m以上，顯著高于組合6～9。組合1～7 葉片數(shù)量較多，均達(dá)23 片以上，組合8 和組合9 葉片數(shù)量較少，分別為18.20 片和16.40 片。表明組合1～5 顯著促進(jìn)了嫁接苗的生長(zhǎng)，而組合6～9 的株高、地徑、冠幅均顯著低于組合1～5，表明嫁接苗的生長(zhǎng)受到抑制。

2.4 初選9 個(gè)組合嫁接苗葉綠素、糖含量分析

葉綠素含量高低是反映植物光合能力的重要指標(biāo)，葉綠素含量越高，植物光能利用率越高，光合作用能力越強(qiáng)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累越多[14]。由表4 可知，葉綠素a 含量均顯著高于葉綠素b，葉綠素a（Chla）含量是葉綠素b（Chlb）的1～3倍以上，組合5、9 的總?cè)~綠素（Chl）含量較高，分別為0.85、0.82 mg/g，其次是組合8 和組合4，分別為0.65、0.63 mg/g。

組合7 和組合8 嫁接口接穗與砧木葡萄糖比值最接近1，分別為0.99 和0.97，其次是組合1、組合2、組合5，分別為1.28、1.26、1.21。組合2 蔗糖比值最接近1，為1.06，其次是組合5 和組合8，分別為0.85 和0.88。組合2 和組合7 淀粉比值最接近1，分別為0.98 和0.99，其次是組合5、組合8 和組合9，分別為1.15、1.11、0.93。綜合比較表明，嫁接口接穗與砧木3 種可溶性糖含量比值均相對(duì)較接近1 的為組合2、組合5、組合8，其次是組合7 的葡萄糖和淀粉比值較接近1，但其蔗糖比值顯著小于1。

2.5 主成分分析和綜合評(píng)價(jià)

主成分分析和綜合評(píng)價(jià)[16-17]見表5、表6，前3 個(gè)主成分累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)到83.550%，涵蓋了大部分的信息，表明前3 個(gè)主成分能夠代表12 個(gè)性狀對(duì)砧穗組合嫁接親和力的綜合評(píng)價(jià)。其中第1 主成分的特征值為5.254，相應(yīng)貢獻(xiàn)率為43.780%，特征向量較大的因子有成活率、保存率、抽梢率、株高、地徑和冠幅，綜合反映了嫁接成活情況和移栽生長(zhǎng)狀況；得分較高的有組合1（1.059）、組合2（0.994）、組合3（1.038）、組合4（1.013）、組合5（0.931）、組合6（0.895）。第2 主成分的特征值為3.715，相應(yīng)貢獻(xiàn)率為30.955%，特征向量較大的因子有成活率、蔗糖比值和淀粉比值，集中反映了可溶性糖對(duì)嫁接成活的影響；得分較高的為組合2（0.663）和組合5（0.566）。第3主成分的特征值為1.058，相應(yīng)貢獻(xiàn)率為8.815%，主要反映嫁接苗抽新梢情況，得分最高的為組合5（0.754）。計(jì)算9 個(gè)組合的綜合得分，得分越高，綜合表現(xiàn)越好[1]。結(jié)果表明前5 個(gè)綜合因子得分高低依次為：組合2（博白大果油茶/中東金花茶）、組合5（多毛金花茶/中東金花茶）、組合3（越南抱莖茶/羅斯曼金花茶）、組合1（博白大果油茶/羅斯曼金花茶）、組合4（博白大果油茶/普通金花茶）。

3 討論

本研究開展了7 種不同山茶屬植物作為砧木與4 種金花茶接穗兩兩組成的28 個(gè)砧穗組合的嫁接試驗(yàn)，砧木品種不僅包含常用的油茶物種（博白大果油茶、陸川油茶、廣寧紅花油茶、宛田紅花油茶），還包含觀賞茶花（黑牡丹、越南抱莖茶）以及金花茶（多毛金花茶），且4 種金花茶接穗既有本地常見品種（普通金花茶、中東金花茶），又有越南典型品種（羅斯曼金花茶、箱田金花茶）。

因此，本試驗(yàn)開展優(yōu)良砧穗組合篩選和嫁接親和力研究具有較高的代表性。馬錦林等[4]、包志毅等[7]、張乃燕等[8]關(guān)于金花茶嫁接親和力研究中，均認(rèn)為親和力與嫁接成活率、保存率、嫁接苗田間生長(zhǎng)性狀相關(guān)，但并未開展后續(xù)嫁接苗生長(zhǎng)情況的測(cè)定及相關(guān)生理指標(biāo)變化分析。因此，本試驗(yàn)不僅調(diào)查了嫁接成活率、保存率、生長(zhǎng)性狀等指標(biāo)的測(cè)定，且追蹤了嫁接苗移栽18 個(gè)月以后的生長(zhǎng)狀況，并首次開展了嫁接口砧、穗可溶性糖含量與嫁接成活率關(guān)系的研究，為今后開展金花茶嫁接繁殖開展優(yōu)良砧穗組合篩選及嫁接親和力鑒定提供理論參考依據(jù)。

初選出的9 個(gè)組合中，組合2（博白大果油茶/中東金花茶）、組合5（多毛金花茶/中東金花茶）、組合8（陸川油茶/箱田金花茶）的嫁接口接穗與砧木葡萄糖、蔗糖、淀粉3 種糖含量比值均相對(duì)較接近1，組合2 和組合5 成活率最大，分別達(dá)97.78%和96.33%，這與石雪暉等[9]、楊瑞[10]、苗麗[11]等“砧、穗糖含量越接近，比值越接近1，嫁接成活率越高”的研究結(jié)論相一致，而組合8雖然糖含量比值也接近1，但其成活率較低，只有73.35%，特別是其嫁接苗的各項(xiàng)田間生長(zhǎng)指標(biāo)均顯著低于其他組合，究其原因還有待后期開展進(jìn)一步的研究。組合1（博白大果油茶/羅斯曼金花茶）、組合3（越南抱莖茶/羅斯曼金花茶）和組合4（博白大果油茶/普通金花茶）的嫁接成活率、保存率、以及新梢長(zhǎng)、新梢粗等田間生長(zhǎng)狀況均很優(yōu)良，雖然其嫁接口砧穗的葡萄糖比值顯著大于1，蔗糖和淀粉比值顯著小于1，但本課題組認(rèn)為這種現(xiàn)象有可能是暫時(shí)的，經(jīng)過后期的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)以及適應(yīng)外部生長(zhǎng)環(huán)境，嫁接口糖含量差異會(huì)逐漸變小而趨于相同，從而促進(jìn)嫁接苗的生長(zhǎng)。

通過對(duì)嫁接苗的12 個(gè)與嫁接親和力相關(guān)的指標(biāo)進(jìn)行主成分分析及綜合評(píng)價(jià)，篩選出5 個(gè)優(yōu)良組合，依次為：組合2（博白大果油茶/中東金花茶）、組合5（多毛金花茶/中東金花茶）、組合3（越南抱莖茶/羅斯曼金花茶）、組合1（博白大果油茶/羅斯曼金花茶）和組合4（博白大果油茶/普通金花茶）。本試驗(yàn)得到嫁接親和力較好的砧木是博白大果油茶，這與張乃燕等[8]試驗(yàn)結(jié)論相一致，均認(rèn)為博白大果油茶與金花茶親和力高，適合作為金花茶嫁接繁殖砧木。但今后要將篩選出的金花茶嫁接優(yōu)良砧穗組合及優(yōu)良砧木應(yīng)用于規(guī)?；a(chǎn)，還需要進(jìn)一步開展造林后的觀察、測(cè)定。

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