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    日糧添加葡萄籽原花青素對(duì)斷奶仔豬生長性能、血液指標(biāo)及腸道損傷的影響

    2023-08-14 06:55:00涂楓郜平光李琦陳慧張峰陳錫山方曉敏
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2023年13期
    關(guān)鍵詞:炎性反應(yīng)仔豬

    涂楓 郜平光 李琦 陳慧 張峰 陳錫山 方曉敏

    摘要:為研究葡萄籽原花青素(GSP)對(duì)斷奶仔豬生長性能、血液指標(biāo)及腸道損傷的影響,選擇144頭21日齡蘇農(nóng)黑豬,隨機(jī)分為3個(gè)處理組,即哺乳對(duì)照組、斷奶對(duì)照組及斷奶試驗(yàn)組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8頭哺乳仔豬。哺乳對(duì)照組采食母乳,斷奶對(duì)照組和斷奶試驗(yàn)組分別飼喂基礎(chǔ)日糧及含有100 mg/kg GSP的試驗(yàn)日糧。試驗(yàn)期共計(jì) 7 d,結(jié)束時(shí)采集血液與空腸樣本,用于生化指標(biāo)檢測(cè)。結(jié)果表明:(1)斷奶導(dǎo)致仔豬21~28日齡平均日增質(zhì)量顯著降低(P<0.05),但日糧添加GSP對(duì)仔豬斷奶后1周內(nèi)的生長性能無顯著影響(P>0.05)。(2)斷奶對(duì)照組血液D-木糖含量和血漿超氧化物歧化酶(SOD)活性較哺乳對(duì)照組顯著下降,而血漿二胺氧化酶活性與丙二醛(MDA)含量較哺乳對(duì)照組顯著升高(P<0.05);經(jīng)GSP干預(yù)后,上述現(xiàn)象得到明顯改善(P<0.05)。(3)與哺乳對(duì)照組相比,斷奶對(duì)照組空腸絨毛高度(VH)及其與隱窩深度的比值明顯下降,黏膜SOD活性與還原型谷胱甘肽含量顯著降低,黏膜MDA含量顯著增多(P<0.05);與斷奶對(duì)照組相比,飼喂GSP試驗(yàn)日糧的斷奶仔豬空腸VH和黏膜SOD活性均得到明顯提高,黏膜MDA含量顯著減少(P<0.05)。(4)斷奶顯著抑制了斷奶仔豬空腸超氧化物歧化酶2(SOD2)轉(zhuǎn)錄水平,上調(diào)了腫瘤壞死因子α和白細(xì)胞介素6 mRNA豐度(P<0.05);GSP顯著提高了斷奶仔豬空腸還原型輔酶Ⅰ/Ⅱ依賴性醌氧化還原酶1和SOD2 mRNA表達(dá)水平(P<0.05),但未影響細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄表達(dá)(P>0.05)。綜上可知,日糧添加GSP可有效提高斷奶仔豬血漿抗氧化能力,緩解腸道損傷并改善黏膜氧化還原狀態(tài)。

    關(guān)鍵詞:斷奶應(yīng)激;仔豬;葡萄籽原花青素;腸道損傷;氧化還原狀態(tài);炎性反應(yīng)

    中圖分類號(hào):S816.7? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

    文章編號(hào):1002-1302(2023)13-0197-06

    斷奶是仔豬飼養(yǎng)過程中的重要環(huán)節(jié),也是制約養(yǎng)豬生產(chǎn)效益的關(guān)鍵因素。早期斷奶不僅能夠縮短母豬產(chǎn)仔間隔,減少疾病傳播風(fēng)險(xiǎn),也可提高仔豬飼料報(bào)酬與胴體品質(zhì)[1]。然而,由于仔豬在斷奶后早期階段的生長發(fā)育尚不成熟,腸道消化、吸收及代謝能力不足,正常的微生物系統(tǒng)也未建立,故易發(fā)生以腹瀉、采食量降低及生長遲滯為主要特征的“斷奶應(yīng)激綜合征”,給養(yǎng)豬生產(chǎn)造成不可忽視的經(jīng)濟(jì)損失[2]。因此,在飼料中添加能夠提高仔豬抗應(yīng)激能力、改善腸道功能的活性物質(zhì)是緩解斷奶應(yīng)激綜合征的有效途徑之一。

    原花青素是一類由不同數(shù)量的兒茶素或/和表兒茶素組成的多酚類化合物,廣泛存在于各類植物中,具有較強(qiáng)的抗氧化、清除自由基、抗炎及改善機(jī)體代謝等生物學(xué)功能。在結(jié)構(gòu)上,原花青素含有多個(gè)活性酚羥基,能夠提供氫質(zhì)子與超氧陰離子、羥自由基等活性氧反應(yīng),降低氧化應(yīng)激的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[3]。原花青素還可通過抑制炎癥信號(hào)蛋白核因子Kappa B核移位,降低其對(duì)下游炎性介質(zhì)的轉(zhuǎn)錄激活作用,從而發(fā)揮抗炎效果[4]。此外,有報(bào)道稱原花青素可通過降低膽固醇與低密度脂蛋白水平,減少血栓形成,改善機(jī)體脂質(zhì)代謝[5]??梢?,在生產(chǎn)中適當(dāng)應(yīng)用原花青素或有助于緩解斷奶應(yīng)激對(duì)仔豬生長發(fā)育與腸道健康造成的不良影響。

    近年來,葡萄籽原花青素(GSP)因其良好的抗氧化與抗炎效果,在食品營養(yǎng)與保健領(lǐng)域嶄露頭角。在嚙齒動(dòng)物中的研究發(fā)現(xiàn),GSP可有效降低結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸促炎性細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)錄活性與蛋白水平,緩解黏膜氧化應(yīng)激,改善絨毛形態(tài)與黏膜屏障功能[6]。Gao等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),GSP能夠緩解高脂飲食造成的小鼠腸道功能紊亂,提高黏膜完整性,減輕氧化應(yīng)激與炎癥[7]。臨床試驗(yàn)表明,GSP不僅在抗氧化方面的應(yīng)用效果優(yōu)于維生素C和維生素E,還可抑制組胺分泌,發(fā)揮抗炎和抗過敏效果[8]。然而,目前GSP在仔豬生產(chǎn)領(lǐng)域的應(yīng)用研究較少,其對(duì)斷奶仔豬腸道氧化應(yīng)激與炎性反應(yīng)的調(diào)節(jié)效果也尚未明確。因此,本試驗(yàn)旨在研究日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬生長性能、血液指標(biāo)及腸道損傷的影響,為GSP在仔豬生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    本試驗(yàn)于2022年5月在揚(yáng)州市峰豪生態(tài)農(nóng)業(yè)科技有限公司養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行。試驗(yàn)選擇144頭體質(zhì)量相近、健康狀態(tài)良好的21日齡蘇農(nóng)黑豬(含黃淮海黑豬和外種豬血統(tǒng)的新培育品種),隨機(jī)分為哺乳對(duì)照、斷奶對(duì)照和斷奶試驗(yàn)3個(gè)處理組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8頭仔豬,公母各半。哺乳對(duì)照組寄養(yǎng)于體況相近、泌乳能力良好的6頭母豬,斷奶對(duì)照組斷奶并飼喂基礎(chǔ)日糧,斷奶試驗(yàn)組斷奶并飼喂含有100 mg/kg GSP的試驗(yàn)日糧,試驗(yàn)期共計(jì)7 d。GSP購自天津尖峰天然產(chǎn)物研究開發(fā)有限公司,有效含量不低于95%,添加量參照前人研究報(bào)道[9-11]。日糧配制參考NRC(2012),日糧組成與營養(yǎng)水平見表1。所有仔豬自由飲水,斷奶仔豬由專人定時(shí)飼喂,試驗(yàn)期間執(zhí)行常規(guī)免疫程序。

    1.2 樣品采集

    試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇1頭小公豬,按1 mL/kg體質(zhì)量的劑量灌喂10% D-木糖溶液,1 h后于前腔靜脈處采集10 mL血液,置于肝素鈉抗凝管,離心后收集血漿待測(cè)。采集血液樣本后,仔豬電擊致暈、放血致死,迅速剖開腹腔,分離腸道組織,于空腸中間位置采集長度約為10 cm的腸段組織,取1.5~2.0 cm腸段置于4%多聚甲醛溶液,剩余腸段用剪刀剖開并使用載玻片刮取黏膜,樣品裝至凍存管內(nèi),液氮速凍后置于超低溫冰箱保存。

    1.3 生長測(cè)定

    試驗(yàn)開始與結(jié)束當(dāng)日清晨對(duì)所有仔豬進(jìn)行空腹稱質(zhì)量,其間按重復(fù)記錄斷奶對(duì)照與斷奶試驗(yàn)組采食量,并計(jì)算平均日采食量(ADFI)、平均日增質(zhì)量(ADG)與飼料效率(FE)。

    1.4 血液指標(biāo)

    采用比色法檢測(cè)血液D-木糖含量及血漿二胺氧化酶(DAO)與超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,所用試劑盒購自南京建成生物工程研究所,試驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書執(zhí)行。

    1.5 腸道形態(tài)觀察

    空腸樣品于室溫下在4%多聚甲醛溶液中固定24 h,結(jié)束后分別使用梯度乙醇和二甲苯溶液進(jìn)行脫水與透明處理,最后使用石蠟進(jìn)行包埋。對(duì)石蠟包埋的組織樣本進(jìn)行切片,厚度為5 μm。采用蘇木精-伊紅對(duì)腸道切片進(jìn)行常規(guī)染色,樹脂封片后,在倒置的光學(xué)顯微鏡下成像,觀察腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)并記錄腸道絨毛高度(VH)和隱窩深度(CD),計(jì)算VH和CD比值(VH ∶CD)。

    1.6 空腸氧化還原狀態(tài)

    按照南京建成生物工程研究所推薦的方法制備空腸黏膜勻漿液。稱取約200 mg凍存樣本,加入9倍體積且預(yù)冷的無菌生理鹽水,在冰水浴條件下使用玻璃勻漿器進(jìn)行充分研磨,于4? ℃條件下 4 000 r/min 離心15 min,收集上清液用于指標(biāo)分析。采用南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定黏膜勻漿液SOD與谷胱甘肽過氧化物(GSH-Px)活性及還原型谷胱甘肽(GSH)與MDA含量。

    1.7 空腸基因表達(dá)

    參照NCBI公布序列設(shè)計(jì)豬還原型輔酶Ⅰ/Ⅱ依賴性醌氧化還原酶1(NQO1)、血紅素加氧酶1(HO1)、超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1(IL-1β)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、白細(xì)胞介素10(IL-10)及β-肌動(dòng)蛋白(ACTB)基因的特異性引物(表2),序列由生工生物工程股份有限公司合成。取約100 mg空腸黏膜凍存樣品,借助RNA提取試劑盒提取總RNA,檢測(cè)RNA完整性及濃度;使用TaKaRa反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,所獲得的cDNA采用諾唯贊SYBR Green Master Mix試劑盒在Applied Biosystems公司StepOnePlusTM Real-Time PCR System進(jìn)行RT-qPCR;ACTB為內(nèi)參基因,結(jié)果以2-ΔΔCT法表示。

    1.8 數(shù)據(jù)分析

    采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)平均值與標(biāo)準(zhǔn)誤,采用單因素方差分析和Tukey兩兩比較方法計(jì)算差異顯著性,組間P值<0.05時(shí)為差異顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬21~28日齡生長性能的影響

    由表3可知,與哺乳對(duì)照組相比,斷奶對(duì)照組和斷奶試驗(yàn)組21~28日齡ADG均顯著降低(P<0.05)。日糧添加GSP后,斷奶試驗(yàn)組仔豬21~28日齡ADG較斷奶對(duì)照組提高約8.8%,但未達(dá)顯著水平(P>0.05)。此外,飼喂GSP對(duì)斷奶仔豬21~28日齡ADFI和FE均無顯著影響(P>0.05)。

    2.2 日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬血液D-木糖含量與血漿二胺氧化酶(DAO)活性的影響

    由表4可知,斷奶對(duì)照組仔豬血液D-木糖含量顯著低于哺乳對(duì)照組,但血漿DAO活性顯著高于哺乳對(duì)照組(P<0.05);斷奶試驗(yàn)組仔豬血液D-木糖含量顯著高于斷奶對(duì)照組,而血漿DAO活性顯著低于斷奶對(duì)照組(P<0.05)。

    2.3 日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬血漿氧化還原狀態(tài)的影響

    由表5可知,與哺乳對(duì)照組相比,斷奶對(duì)照組仔豬血漿SOD活性顯著降低而MDA含量顯著升高(P<0.05)。與此相反,飼喂含有GSP試驗(yàn)日糧的斷奶仔豬血漿SOD活性較斷奶對(duì)照組顯著升高而MDA含量明顯下降(P<0.05)。

    2.4 日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬空腸形態(tài)的影響

    由表6可知,斷奶對(duì)照組空腸VH與VH ∶CD顯著低于哺乳對(duì)照組(P<0.05);添加GSP可顯著提高斷奶仔豬空腸VH(P<0.05),但對(duì)CD或 VH ∶CD 無顯著影響(P>0.05)。

    2.5 日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬空腸氧化還原狀態(tài)的影響

    由表7可知,斷奶對(duì)照組空腸黏膜SOD活性和GSH含量較哺乳對(duì)照組顯著降低,但MDA含量較哺乳對(duì)照組明顯增多(P<0.05)。飼喂含有GSP的試驗(yàn)日糧后,斷奶仔豬空腸黏膜SOD活性顯著高于飼喂基礎(chǔ)日糧的斷奶對(duì)照組,而且斷奶試驗(yàn)組空腸黏膜MDA含量也顯著下降(P<0.05)。此外,早期斷奶或日糧干預(yù)對(duì)斷奶仔豬空腸黏膜GSH-Px活性無明顯影響(P>0.05)。

    2.6 日糧添加GSP對(duì)斷奶仔豬空腸黏膜抗氧化酶與細(xì)胞因子基因表達(dá)的影響

    由表8可知,斷奶對(duì)照組空腸黏膜SOD2 mRNA表達(dá)豐度較哺乳對(duì)照組顯著減少,而TNF-α和IL-6 mRNA表達(dá)水平較哺乳對(duì)照組顯著增多(P<0.05)。與斷奶對(duì)照組相比,日糧添加GSP顯著提高了NQO1和SOD2轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平(P<0.05)。此外,早期斷奶或日糧干預(yù)對(duì)斷奶仔豬空腸黏膜HO1、SOD1、IL-1β或IL-10 mRNA表達(dá)豐度均無顯著影響(P>0.05)。

    3 討論

    3.1 GSP對(duì)仔豬斷奶后早期階段生長性能的影響

    斷奶期是仔豬生長發(fā)育的一個(gè)重要時(shí)期,此時(shí)腸道發(fā)育尚未完善,斷奶應(yīng)激易造成腸道功能紊亂,導(dǎo)致采食量不足、生長緩慢甚至停滯。重要的是,仔豬斷奶后1周內(nèi)體增質(zhì)量與其出欄日齡有一定負(fù)相關(guān)性,ADG較高的仔豬達(dá)出欄體質(zhì)量用時(shí)更短[1]。因此,改善仔豬斷奶后早期階段的生長性能對(duì)提高生豬養(yǎng)殖效率具有積極意義。本試驗(yàn)中,日糧添加100 mg/kg GSP對(duì)斷奶仔豬21~28日齡ADG、ADFI或FE均無明顯影響,這與以往的研究結(jié)果基本一致,即日糧添加50~150 mg/kg GSP對(duì)仔豬斷奶后4周內(nèi)的生長性能無顯著改變[9-10]。但Park等在初始體質(zhì)量約為19 kg的斷奶仔豬上的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),日糧添加100 mg/kg或200 mg/kg GSP均可顯著提高保育階段FE[9]??梢?,GSP對(duì)生長性能的改善效果與飼喂時(shí)間及仔豬生長階段等有關(guān)。

    3.2 GSP對(duì)斷奶仔豬腸道損傷相關(guān)血液指標(biāo)的影響

    在斷奶過渡期,由于仔豬胃腸道功能無法完全適應(yīng)飼料的消化,特別是固體飼料顆粒易導(dǎo)致腸道絨毛結(jié)構(gòu)損傷,會(huì)直接影響營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收效率。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),斷奶導(dǎo)致仔豬血漿DAO活性顯著升高,斷奶對(duì)照組血漿DAO活性較哺乳對(duì)照組提高約2.5倍,提示斷奶仔豬腸道黏膜受損嚴(yán)重。DAO是腸道黏膜上層絨毛的胞內(nèi)酶,當(dāng)絨毛受損時(shí)DAO會(huì)隨細(xì)胞破裂而釋放入血,故血漿DAO活性可反映腸道黏膜受損程度及其完整性。另外,與哺乳仔豬相比,斷奶仔豬血液D-木糖含量顯著降低,表明斷奶仔豬腸道吸收能力下降,其原因或與斷奶應(yīng)激造成的腸道損傷有關(guān)。

    本試驗(yàn)中,飼喂GSP顯著降低了斷奶仔豬血漿DAO活性,表明GSP能夠改善斷奶應(yīng)激引起的腸道黏膜損傷。Li等試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),添加50~150 mg/kg GSP均可顯著降低35日齡斷奶仔豬血清DAO活性,且添加量為100 mg/kg時(shí)效果最優(yōu)[11]。在免疫應(yīng)激狀態(tài)下,添加GSP也具有降低斷奶仔豬血清DAO活性的作用,并達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著水平[12]。另外,本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)添加GSP可有效提高斷奶仔豬血液D-木糖含量。GSP可能通過緩解斷奶應(yīng)激造成的仔豬腸道損傷,從而改善了仔豬腸道吸收能力。

    3.3 GSP對(duì)斷奶仔豬血漿抗氧化能力的影響

    SOD和GSH-Px在調(diào)節(jié)機(jī)體氧化還原平衡方面起著重要作用。SOD可將氧毒性較高的超氧陰離子轉(zhuǎn)化為毒性較低的過氧化氫,后者經(jīng)GSH-Px催化生成無毒的水。因而,SOD和GSH-Px協(xié)同保護(hù)細(xì)胞免受自由基引發(fā)的氧化損傷,其活性可反映機(jī)體對(duì)自由基的清除能力[13]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,斷奶對(duì)照組血漿SOD活性較哺乳對(duì)照組顯著降低,這可能是導(dǎo)致斷奶仔豬血漿MDA含量較高的一個(gè)重要因素。MDA是脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的終末代謝產(chǎn)物,其含量與機(jī)體氧化損傷程度呈正相關(guān)性[13]。當(dāng)抗氧化酶活性降低時(shí),自由基會(huì)因清除不及時(shí)而在細(xì)胞內(nèi)大量積聚,導(dǎo)致細(xì)胞膜、脂蛋白及其他含脂質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生過氧化反應(yīng),對(duì)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)與生理功能造成負(fù)面影響,嚴(yán)重時(shí)會(huì)引發(fā)細(xì)胞凋亡[14]。

    本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),添加GSP顯著提高了斷奶試驗(yàn)組血漿SOD活性,降低了血漿MDA含量,表明GSP可有效提高斷奶仔豬血漿抗氧化能力,對(duì)緩解斷奶應(yīng)激引發(fā)的機(jī)體氧化損傷具有積極作用。趙家奇等報(bào)道,日糧添加100 mg/kg或150 mg/kg GSP可顯著提高斷奶仔豬血清SOD和GSH-Px活性,降低血清MDA含量;當(dāng)GSP添加量為150 mg/kg時(shí),還可顯著提高斷奶仔豬血清總抗氧化能力(T-AOC)[15]。趙嬌等研究發(fā)現(xiàn),添加100 mg/kg GSP可有效緩解敵草快攻毒造成的斷奶仔豬血清SOD、GSH-Px、T-AOC 和過氧化氫酶活性降低,并提高仔豬血清超氧陰離子和羥自由基的清除能力[16]。

    3.4 GSP對(duì)斷奶仔豬腸道形態(tài)、氧化還原狀態(tài)與炎性反應(yīng)的影響

    腸道VH與CD是評(píng)價(jià)仔豬腸道發(fā)育水平的重要指標(biāo)。以往的研究表明,斷奶應(yīng)激可造成仔豬腸道絨毛萎縮、脫落,隱窩增生[17]。絨毛變短、隱窩加深表明腸道黏膜上皮受損,會(huì)直接影響仔豬消化機(jī)能,導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力下降,這也解釋了斷奶對(duì)照組血液D-木糖含量較哺乳對(duì)照組顯著下降的現(xiàn)象。同時(shí),腸道消化吸收能力不足還會(huì)導(dǎo)致大量未消化物質(zhì)堆積,引發(fā)異常發(fā)酵、腹瀉等負(fù)面問題,是造成仔豬斷奶后生長受阻的關(guān)鍵因素。本試驗(yàn)中,日糧添加GSP顯著提高了斷奶仔豬空腸VH,這有助于提高營養(yǎng)物質(zhì)的吸收面積,對(duì)改善仔豬腸道健康與生長性能具有一定積極影響。

    諸多試驗(yàn)表明,早期斷奶會(huì)誘導(dǎo)仔豬腸上皮細(xì)胞、固有層免疫細(xì)胞等細(xì)胞產(chǎn)生大量自由基,引發(fā)黏膜氧化損傷乃至腸道疾病、免疫力降低及生長性能下降等一系列負(fù)面問題[17-18]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),斷奶對(duì)照組空腸黏膜SOD活性與GSH含量較哺乳對(duì)照組顯著降低而MDA含量明顯升高,同時(shí)斷奶對(duì)照組空腸黏膜SOD2轉(zhuǎn)錄表達(dá)也受早期斷奶影響而明顯減少,說明斷奶應(yīng)激導(dǎo)致仔豬腸道抗氧化能力下降,并伴有脂質(zhì)過氧化損傷,這與前人的試驗(yàn)結(jié)果[17]基本一致。另外,本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼喂斷奶仔豬含有GSP的試驗(yàn)日糧可顯著提高空腸黏膜SOD活性,抑制斷奶應(yīng)激誘導(dǎo)的MDA含量升高現(xiàn)象。值得注意的是,GSP干預(yù)有效提高了斷奶仔豬空腸SOD2與NQO1 mRNA表達(dá)水平,其轉(zhuǎn)錄增多一定程度上解釋了GSP改善斷奶仔豬空腸氧化還原狀態(tài)的機(jī)制。SOD2負(fù)責(zé)編碼位于線粒體內(nèi)的Mn-SOD,它對(duì)清除線粒體超氧陰離子、保護(hù)線粒體蛋白功能及維持線粒體膜電位等方面具有重要作用[19]。NQO1酶屬于Ⅱ相代謝酶,在還原型輔酶Ⅰ或輔酶Ⅱ的參與下,對(duì)進(jìn)入體內(nèi)的外源毒性物質(zhì)進(jìn)行解毒代謝,保證機(jī)體的正常生理功能[20]。上述結(jié)果表明,添加GSP能夠改善斷奶仔豬腸道抗氧化和解毒能力,緩解斷奶應(yīng)激造成的黏膜脂質(zhì)過氧化,這有助于修復(fù)斷奶仔豬腸道形態(tài)損傷。

    在斷奶后早期階段,由于仔豬免疫功能尚不完善,加之腸道形態(tài)損傷,致使微生物、病原體及其他有害物質(zhì)易越過黏膜屏障、逃脫免疫監(jiān)視,侵入機(jī)體后會(huì)引發(fā)腸道黏膜乃至系統(tǒng)性炎癥[21]。本試驗(yàn)中,斷奶對(duì)照組空腸促炎性細(xì)胞因子TNF-α和 IL-6 mRNA表達(dá)水平均顯著高于哺乳對(duì)照組,表明此時(shí)斷奶仔豬黏膜發(fā)生炎性反應(yīng),這與早期斷奶引起的日糧類型轉(zhuǎn)變、生理應(yīng)激及腸道損傷等因素密切相關(guān)。然而,添加GSP對(duì)斷奶仔豬空腸促炎性細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平無顯著改變,提示GSP對(duì)仔豬腸道損傷的保護(hù)作用或通過其他途徑實(shí)現(xiàn)。不過,在結(jié)腸炎小鼠模型上的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),GSP處理可有效降低腸道炎癥評(píng)分及黏TNF-α和IL-1β含量。造成上述試驗(yàn)結(jié)果差異的原因可能與炎癥程度、動(dòng)物種屬及干預(yù)時(shí)間有關(guān)。

    4 結(jié)論

    本試驗(yàn)結(jié)果表明,日糧添加100 mg/kg GSP對(duì)仔豬斷奶后1周內(nèi)的生長性能無明顯影響,但具有提高斷奶仔豬血漿抗氧化能力、緩解腸道損傷及改善黏膜氧化還原狀態(tài)等積極作用。

    參考文獻(xiàn):

    [1]Campbell J M,Crenshaw J D,Polo J. The biological stress of early weaned piglets[J]. Journal of Animal Science and Biotechnology,2013,4(1):19.

    [2]Jayaraman B,Nyachoti C M. Husbandry practices and gut health outcomes in weaned piglets:a review[J]. Animal Nutrition,2017,3(3):205-211.

    [3]Jayaprakasha G K,Singh R P,Sakariah K K. Antioxidant activity of grape seed (Vitis vinifera) extracts on peroxidation models in vitro[J]. Food Chemistry,2001,73(3):285-290.

    [4]Ma X,Wang R H,Yu S T,et al. Anti-inflammatory activity of oligomeric proanthocyanidins via inhibition of NF-κB and MAPK in LPS-stimulated MAC-T cells[J]. Journal of Microbiology and Biotechnology,2020,30(10):1458-1466.

    [5]Valls R M,Llauradó E,F(xiàn)ernández-Castillejo S,et al. Effects of low molecular weight procyanidin rich extract from French maritime pine bark on cardiovascular disease risk factors in stage-1 hypertensive subjects:randomized,double-blind,crossover,placebo-controlled intervention trial[J]. Phytomedicine,2016,23(12):1451-1461.

    [6]Sheng K L,Zhang G H,Sun M,et al. Grape seed proanthocyanidin extract ameliorates dextran sulfate sodium-induced colitis through intestinal barrier improvement,oxidative stress reduction,and inflammatory cytokines and gut microbiota modulation[J]. Food & Function,2020,11(9):7817-7829.

    [7]Gao Z P,Wu H,Zhang K Q,et al. Protective effects of grape seed procyanidin extract on intestinal barrier dysfunction induced by a long-term high-fat diet[J]. Journal of Functional Foods,2020,64:103663.

    [8]Shi J,Yu J,Pohorly J E,et al. Polyphenolics in grape seeds-biochemistry and functionality[J]. Journal of Medicinal Food,2003,6(4):291-299.

    [9]Park J C,Lee S H,Hong J K,et al. Effect of dietary supplementation of procyanidin on growth performance and immune response in pigs[J]. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2014,27(1):131-139.

    [10]Hao R R,Li Q H,Zhao J Q,et al. Effects of grape seed procyanidins on growth performance,immune function and antioxidant capacity in weaned piglets[J]. Livestock Science,2015,178:237-242.

    [11]Li Q H,Yan H S,Li H Q,et al. Effects of dietary supplementation with grape seed procyanidins on nutrient utilisation and gut function in weaned piglets[J]. Animal,2020,14:491-498.

    [12]Wu Y,Mo R,Zhang M,et al. Grape seed proanthocyanidin alleviates intestinal inflammation through gut microbiota-bile acid crosstalk in mice[J]. Frontiers in Nutrition,2021,8:786682.

    [13]Zhang H,Chen Y,Li Y,et al. Medium-chain TAG attenuate hepatic oxidative damage in intra-uterine growth-retarded weanling piglets by improving the metabolic efficiency of the glutathione redox cycle[J]. British Journal of Nutrition,2014,112:876-885.

    [14]Serbecic N,Beutelspacher S C. Anti-oxidative vitamins prevent lipid-peroxidation and apoptosis in corneal endothelial cells[J]. Cell and Tissue Research,2005,320:465-475.

    [15]趙家奇,郝瑞榮,高俊杰,等. 葡萄籽原花青素對(duì)斷奶仔豬免疫力和抗氧化功能的影響[J]. 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2016,36(10):735-739.

    [16]趙 嬌,周招洪,梁小芳,等. 葡萄籽原花青素及維生素E對(duì)氧化應(yīng)激仔豬生長性能、血清氧化還原狀態(tài)和肝臟氧化損傷的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,46(19):4157-4164.

    [17]Zhang H,Chen Y N,Chen Y P,et al. Comparison of the protective effects of resveratrol and pterostilbene against intestinal damage and redox imbalance in weanling piglets[J]. Journal of Animal Science and Biotechnology,2020,11:52.

    [18]徐建雄. 不同斷奶日齡仔豬的氧化應(yīng)激損傷及其機(jī)理研究[D]. 南京:南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2014:39-40.

    [19]Flynn J M,Melov S. SOD2 in mitochondrial dysfunction and neurodegeneration[J]. Free Radical Biology & Medicine,2013,62:4-12.

    [20]Ross D,Siegel D. NQO1 in protection against oxidative stress[J]. Current Opinion in Toxicology,2018,7:67-72.

    [21]易宏波. 抗菌肽CWA對(duì)斷奶仔豬腸道炎癥和腸道屏障功能的作用及其機(jī)制[D]. 杭州:浙江大學(xué),2016:2-3.

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