• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子對(duì)接探討玉屏風(fēng)散治療過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征的作用機(jī)制

    2023-06-17 14:10:51楊冰洋王人杰汪皓宇張業(yè)清
    云南中醫(yī)中藥雜志 2023年5期
    關(guān)鍵詞:分子對(duì)接過(guò)敏性鼻炎網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

    楊冰洋 王人杰 汪皓宇 張業(yè)清

    摘要:目的本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接技術(shù)探討玉屏風(fēng)散治療過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征(CARAS)的作用機(jī)制。方法首先通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)檢索搜集玉屏風(fēng)散的化學(xué)成分和藥物靶點(diǎn)。從GeneCards、Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)和DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)搜集過(guò)敏性鼻炎和哮喘治療相關(guān)靶點(diǎn),構(gòu)建韋恩圖并得到疾病與藥物的交集靶點(diǎn)。使用Cytoscape構(gòu)建單味藥-活性成分-潛在作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò),篩選關(guān)鍵活性成分,然后以STRING構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò),借助Cyto NCA插件篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)。利用Metascape對(duì)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO和KEGG富集分析。最后將關(guān)鍵活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接。結(jié)果從玉屏風(fēng)散中獲得45個(gè)活性成分和對(duì)應(yīng)224個(gè)潛在靶點(diǎn),過(guò)敏性鼻炎相關(guān)靶點(diǎn)有333個(gè),哮喘相關(guān)靶點(diǎn)372個(gè),取交集之后得到39個(gè)潛在靶點(diǎn)。從玉屏風(fēng)散中篩選出槲皮素、山奈酚、7-O-methylisomucronulatol、漢黃芩素、刺芒柄花素、異鼠李素等35個(gè)關(guān)鍵活性成分;對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)鋮?shù)分析后得到6個(gè)核心靶點(diǎn)為IL-6、TNF、IL-1β、PTGS2、CXCL8、IL-10。GO分析結(jié)果表明其涉及炎癥應(yīng)答、對(duì)細(xì)菌的反應(yīng)、細(xì)胞群體增值的負(fù)調(diào)控等生物過(guò)程。KEGG分析結(jié)果表明可能通過(guò)TNF、NF-kB、IL17等信號(hào)通路治療CARAS。分子對(duì)接結(jié)果顯示,100%的關(guān)鍵活性成分與核心靶點(diǎn)的結(jié)合能小于-5.0 kcal·mol-1,具有較好的結(jié)合能力。結(jié)論本研究初步揭示玉屏風(fēng)散通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多通路治療過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征的作用機(jī)制,為后續(xù)基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用提供了參考依據(jù)。

    關(guān)鍵詞:玉屏風(fēng)散;過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征;作用機(jī)制;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);分子對(duì)接

    中圖分類(lèi)號(hào):R765.21文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1007-2349(2023)05-0032-08

    Exploration of the Mechanism of Yupingfeng Powder in the Treatment of Allergic

    Rhinitis-Asthma Syndrome Based on Network Pharmacology and Molecular Docking

    YANG Bing-yang WANG Ren-jie WANG Hao-yu ZHANG Ye-qing

    (1. The Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine,Nanjing University of Traditional Chinese Medicine,

    Nanjing 210028,China;2. Jiangsu Institute of Traditional Chinese Medicine,Nanjing 210028,China;

    3. Jiangsu Branch,China Academy of Chinese Medical Sciences,Nanjing 210028,China)

    【Abstract】Objective: To study the mechanism of Yupingfeng Powder in the treatment of allergic rhinitis-asthma syndrome(CARAS)based on network pharmacology and molecular docking. Methods: Chemical components and drug targets of Yupingfeng Powder were collected by using TCMSP database. Targets related to the treatment of allergic rhinitis and asthma was collected from GeneCards,Online Mendelian Inheritance in Man(OMIM)and DrugBank database,and Venn diagram was constructed to obtain the intersection targets of diseases and drugs. A network of single drug-active ingredient-potential target was built by Cytoscape,and the key active ingredients were screened. Then,PPI network was constructed by STRING,and the key targets were screened by Cyto NCA plug-in. GO and KEGG enrichment analysis of intersection targets were performed by Metascape. Finally,the key active ingredients and the key targets were docked. Results: 45 active ingredients and corresponding 224 potential targets were obtained from Yupingfeng Powder,333 targets related to allergic rhinitis and 372 targets related to asthma and 39 potential targets were obtained after intersection. 35 key active components,such as quercetin,kaempferol,7-O-methylisomucronulatol,baicalin,formononetin and isorhamnetin,were screened from Yupingfeng Powder. PPI network was done by topological parameter analysis to obtain six core targets,namely,IL-6,TNF,IL-1β,PTGS2,CXCL8 and IL-10. The results of GO analysis showed that it involved in inflammatory response,response to bacteria,and negative regulation of cell proliferation. The results of KEGG analysis indicated that TNF,NF-kB,IL17 and other signaling pathways may be used to treat CARAS. The results of molecular docking showed that the binding energy of 100% of the key active ingredients to the core targets was less than -5.0 kcal·mol-1,a good binding ability. Conclusion: This study preliminarily reveals the mechanism of action of Yupingfeng Powder in the treatment of allergic rhinitis-asthma syndrome through multi-component,multi-target and multi-pathway,and provided a reference for subsequent basic research and clinical application.

    【Key words】Yupingfeng Powder; Allergic Rhinitis-Asthma Syndrome; Mechanism of Action; Network Pharmacology; Molecular Docking

    過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征(allergic rhinitis-asthma syndrome,CARAS)是同時(shí)發(fā)生在臨床或亞臨床的上、下呼吸道的過(guò)敏性炎癥,是同一綜合征在呼吸道兩個(gè)部分的表現(xiàn)[1]。上氣道和下氣道被認(rèn)為是一個(gè)統(tǒng)一的形態(tài)和功能單元,從古代中醫(yī)的“鼻肺同源”到現(xiàn)代醫(yī)學(xué)“同一氣道,同一疾病”的提出,都證實(shí)上、下氣道之間存在的聯(lián)系已經(jīng)被觀察到多年,變應(yīng)性鼻炎和哮喘之間在起源、概念共存和相似等方面表現(xiàn)出密切的聯(lián)系,基于在發(fā)病原因、病理生理機(jī)制及組織病理表現(xiàn)上的共性特征,提出了過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征的概念[2]。流行病學(xué)證據(jù)表明變應(yīng)性鼻炎和哮喘之間有很強(qiáng)的關(guān)系。有15%~38%的變應(yīng)性鼻炎患者同時(shí)患有哮喘,而在6%~85%的哮喘患者中存在鼻炎癥狀。此變應(yīng)性鼻炎是哮喘的一個(gè)危險(xiǎn)因素,未經(jīng)治療或處理不當(dāng)?shù)谋茄卓墒瓜又氐娘L(fēng)險(xiǎn)增加三倍[3]。

    中醫(yī)古今醫(yī)家并無(wú)CARAS的專(zhuān)用病名,一般是將過(guò)敏性鼻炎歸于“鼻鼽”,哮喘歸于“哮病”的范疇。鼻鼽與哮證共為肺系疾病,二者更是相互聯(lián)系與影響,《靈樞·本神篇》云:“肺氣虛則鼻塞不利少氣”。肺之竅在鼻,肺之衛(wèi)外不固,風(fēng)寒之邪或異氣侵襲,則外束肌表,陽(yáng)氣無(wú)法宣泄,故噴而上出為之嚏。故為“鼻肺同源”[4]。對(duì)于CARAS的病因病機(jī)研究眾多仍尚無(wú)統(tǒng)一定論,從多角度發(fā)表見(jiàn)解。圍繞病理因素風(fēng)、痰、虛之相關(guān)病機(jī)較為常見(jiàn)。“邪之所湊,其氣必虛”。肺氣不足、衛(wèi)表失固是此病反復(fù)發(fā)作的根本原因,“扶正祛邪”可貫穿治療始終,故當(dāng)補(bǔ)土生金、益氣固表[5]。玉屏風(fēng)散由黃芪、白術(shù)、防風(fēng)3味中藥組成,全方相輔為益氣固表、祛邪扶正之功效。臨床研究顯示,玉屏風(fēng)散能顯著改善氣道患者炎癥、提高免疫功能[6],但其CARAS治療的作用機(jī)制仍不明確。本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù),對(duì)玉屏風(fēng)散治療CARAS的作用機(jī)制進(jìn)行初步探討,以期為后續(xù)基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用提供參考依據(jù)。

    1資料與方法

    1.1玉屏風(fēng)散活性成分的篩選及潛在作用靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)基于TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)(http://lsp.nwu.edu.cn/tcmsp.php)收集玉屏風(fēng)散中黃芪、防風(fēng)、白術(shù)3味中藥的成分。根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(ADME)篩選出玉屏風(fēng)散的活性成分,設(shè)置口服生物利用度(OB)≧30%,類(lèi)藥性(DL)≧0.18,并預(yù)測(cè)玉屏風(fēng)散活性成分的潛在作用靶點(diǎn)。利用Uniprot蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.uniprot.org)對(duì)靶點(diǎn)信息進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。

    1.2過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征治療相關(guān)靶點(diǎn)獲取利用“asthma、allergic rhinitis”為關(guān)鍵詞,分別在 GeneCards 數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.genecards.org)、Online Mendelian Inheritance in Man數(shù)據(jù)庫(kù)(OMIM,https://www.omim.org)、DrugBank數(shù)據(jù)庫(kù)(https://go.drugbank.com)疾病基因數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索與篩選,將得到的靶點(diǎn)分別匯總并去除重復(fù)值,即為過(guò)敏性鼻炎、哮喘治療相關(guān)靶點(diǎn)。

    1.3玉屏風(fēng)散治療過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征潛在作用靶點(diǎn)的獲取使用Venny2.1在線(xiàn)工具(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)對(duì)1.1及1.2中所獲得靶點(diǎn)繪制韋恩圖,所獲得的交集靶點(diǎn)即為玉屏風(fēng)散治療過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征的潛在作用靶點(diǎn)。

    1.4“中藥-活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建使用軟件Cytoscape 3.8.2構(gòu)建“中藥-活性成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò),其中用“節(jié)點(diǎn)”(node)表示單味藥、活性成分或靶點(diǎn),用“邊”(edge)表示節(jié)點(diǎn)之間的關(guān)系;使用Network Analyzer分析工具分析網(wǎng)絡(luò)特征,以研究活性成分與靶點(diǎn)及其之間的關(guān)系,并根據(jù)活性成分在網(wǎng)絡(luò)中的度值(degree)篩選出關(guān)鍵活性成分。

    1.5蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建將1.3中得到的潛在作用靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 11.0數(shù)據(jù)庫(kù)(https://string-db.org)獲得蛋白互作關(guān)系,刪除游離靶點(diǎn),并導(dǎo)入Cytoscape軟件繪制潛在作用靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò),應(yīng)用CytoNCA插件計(jì)算出PPI的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)特征屬性值,篩選出核心靶點(diǎn)。

    1.6通路富集分析使用在線(xiàn)分析工具M(jìn)etascape(https://metascape.org)對(duì)藥物-疾病交集核心蛋白靶標(biāo)基因進(jìn)行GO功能及KEGG通路富集分析,以“P<0.05”為條件進(jìn)行篩選,對(duì)P值進(jìn)行排列從小到大排列,分別選取排名前10位進(jìn)行靶點(diǎn)生物過(guò)程(GO Biological Processes,GO BP)、靶點(diǎn)所在細(xì)胞組分(GO Cellular Components,GO CC)、靶點(diǎn)分子功能(GO Molecular Functions,GO MF)以及前20位進(jìn)行靶點(diǎn)信號(hào)通路(KEGG Pathway)的氣泡圖制作。

    1.7分子對(duì)接通過(guò)PubChem數(shù)據(jù)庫(kù)獲得關(guān)鍵成分的2D結(jié)構(gòu),保存為sdf格式,通過(guò)Chem3D軟件生成配體的3D結(jié)構(gòu),將其能量最小化,并保存為mol2格式。通過(guò)AutoDockTools軟件將配體保存為pdbqt格式配體參數(shù)文件。通過(guò)PDB數(shù)據(jù)庫(kù)下載核心靶點(diǎn)蛋白晶體結(jié)構(gòu),運(yùn)用PyMOL 軟件對(duì)核心靶點(diǎn)進(jìn)行去水、去配體操作,使用AutoDockTools進(jìn)行加氫處理,并受體保存為pdbqt格式配體參數(shù)文件。通過(guò)AutoDockTools軟件設(shè)置蛋白受體的口袋參數(shù),并設(shè)置參數(shù)文本文件,再用AutoDock Vina進(jìn)行分子對(duì)接,將對(duì)接結(jié)果運(yùn)用PyMOL軟件進(jìn)行可視化分析。

    2結(jié)果

    2.1玉屏風(fēng)散活性成分的篩選及作用靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)根據(jù)根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)篩選條件,從TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選出玉屏風(fēng)散的活性化合物45個(gè),黃芪20個(gè),防風(fēng)18個(gè),白術(shù)7個(gè)。將靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果合并后排除重復(fù)值后獲得224個(gè)靶點(diǎn)。檢索數(shù)據(jù)庫(kù)合并后刪去重復(fù)值共得到過(guò)敏性鼻炎治療相關(guān)靶點(diǎn)333個(gè),哮喘治療相關(guān)靶點(diǎn)372個(gè)。取交集后共獲得39個(gè)交集靶點(diǎn),其韋恩圖見(jiàn)圖1。

    2.2玉屏風(fēng)散單味藥-活性成分-潛在作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建和分析利用Cytoscape 3.8.2對(duì)玉屏風(fēng)散單味藥-活性成分-潛在作用靶點(diǎn)的關(guān)系網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行繪制和分析,共獲得269個(gè)節(jié)點(diǎn)與710條關(guān)系,結(jié)果見(jiàn)圖2。通過(guò)NetworkAnalyzer分析玉屏風(fēng)散治療CARAS的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù),選取出連接度大于平均數(shù)2倍的活性成分作為核心成分,獲得槲皮素(quercetin)、山奈酚(kaempferol)、7-O-methylisomucronulatol、漢黃芩素(wogonin)、刺芒柄花素(formononetin)、異鼠李素(isorhamnetin)等35個(gè)關(guān)鍵活性成分。

    2.3潛在作用靶點(diǎn) PPI 網(wǎng)絡(luò)及分析將2.1中獲得的玉屏風(fēng)散與過(guò)敏性鼻炎、哮喘交集得到的靶點(diǎn)提交至STRING11.0平臺(tái),得到潛在作用靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò),見(jiàn)圖3。分析結(jié)果顯示,degree值前6的蛋白分別為IL-6(Interleukin 6)、TNF(tumor necrosis factor)、IL-1β(Interleukin 1 Beta)、PTGS2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2)、CXCL8(Recombinant Human C-X-C motif chemokine 8)、IL-10(Interleukin 10)。

    2.4生物過(guò)程分析與 KEGG 分析使用Metascape平臺(tái)對(duì)39個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行基因富集分析,確定了1341個(gè)GO條目,其中生物過(guò)程相關(guān)條目728個(gè),結(jié)果顯示主要影響炎癥應(yīng)答、脂多糖反應(yīng)、對(duì)細(xì)菌來(lái)源分子的反應(yīng)、細(xì)胞對(duì)有機(jī)環(huán)狀化合物的反應(yīng)、對(duì)外來(lái)刺激的反應(yīng)、對(duì)細(xì)菌的反應(yīng)、細(xì)胞群體增殖的負(fù)調(diào)控、細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)的反應(yīng)、細(xì)胞間粘附的正調(diào)控等生物過(guò)程;細(xì)胞組成相關(guān)條目30個(gè),顯著的條目是突觸膜、突觸前膜、突觸后膜等細(xì)胞成分;分子功能相關(guān)條目69個(gè),參與細(xì)胞因子受體結(jié)合、信號(hào)受體激活活性、信號(hào)受體調(diào)節(jié)活性、受體配體活性、G蛋白偶聯(lián)胺受體活性、G蛋白偶聯(lián)乙酰膽堿受體活性、G蛋白偶聯(lián)神經(jīng)遞質(zhì)受體活性等分子功能。將結(jié)果繪制氣泡圖,見(jiàn)圖4。

    通過(guò)KEGG通路富集分析,有92個(gè)潛在作用靶點(diǎn)參與的通路,主要涉及腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)信號(hào)通路、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信號(hào)通路、白細(xì)胞介素17(interleukin 17,IL-17)信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE信號(hào)通路、脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化、移植物抗宿主病、細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用、炎癥性腸病等。將結(jié)果繪制氣泡圖,見(jiàn)圖5。

    2.5關(guān)鍵成分和核心靶點(diǎn)的分子對(duì)接驗(yàn)證將篩選出的前6個(gè)關(guān)鍵活性成分與6個(gè)核心靶點(diǎn)IL-6、TNF、IL-1β、PTGS2、CXCL8、IL-10分別進(jìn)行分子對(duì)接,見(jiàn)圖6。結(jié)果顯示100%的結(jié)合能小于-5.0 kcal·mol-1,表明二者之間有較好的結(jié)合活性。47%的結(jié)合能小于-7.0 kcal·mol-1,表明配體與受體有強(qiáng)烈的結(jié)合活性。如槲皮素、山奈酚、漢黃芩素、異鼠李素、7-O-methylisomucronulatol、刺芒柄花素6個(gè)成分與PTGS2、TNF都有著強(qiáng)烈的結(jié)合活性;等槲皮素、山奈酚、異鼠李素3個(gè)成分與IL-1β有強(qiáng)烈的結(jié)合活性。其中山奈酚與PTGS2的結(jié)合活性最好(affinity=-9.5 kcal·mol-1),其后為漢黃芩素與PTGS2(affinity=-9.3 kcal·mol-1)、槲皮素與PTGS2(affinity=-9.3 kcal·mol-1)、異鼠李素與PTGS2(affinity=-9.1 kcal·mol-1)、異鼠李素與TNF(affinity=-9.1 kcal·mol-1)、槲皮素與TNF(affinity=-9.0 kcal·mol-1)。對(duì)代表性關(guān)鍵活性成分和核心靶點(diǎn)的分子對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化處理,分子對(duì)接3D圖見(jiàn)圖7。以上結(jié)果說(shuō)明上述6個(gè)關(guān)鍵活性成分與核心靶點(diǎn)的結(jié)合活性較好,可能通過(guò)上述核心靶點(diǎn)發(fā)揮防治CARAS的作用。

    3討論

    CARAS主要以Th2免疫反應(yīng)為特征,其生理病理特征與過(guò)敏性個(gè)體直接相關(guān)[1]。大量文獻(xiàn)證明,中藥可以可通過(guò)調(diào)節(jié)不同T細(xì)胞亞群功能等方式干預(yù)Th2免疫反應(yīng)。在中醫(yī)理論中,目前對(duì)于CARAS病因病機(jī)的認(rèn)識(shí)仍處于探索階段。傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為,此病的病機(jī)屬于本虛標(biāo)實(shí),以“肺氣虧虛”為本虛,以“風(fēng)寒”等為標(biāo)實(shí)?!氨咎摗笔荂ARAS產(chǎn)生的根源,決定著疾病的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸?;颊呦忍旆A賦不足、肺氣虛弱、腠理疏松、衛(wèi)表不固,鼻竅易感外邪,肺失宣降,水液代謝失常,水濕內(nèi)停不化,聚而成痰,阻滯氣道,故而發(fā)病。玉屏風(fēng)散為益氣固表、扶正祛邪的經(jīng)典方劑。有隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上加用玉屏風(fēng)散能夠顯著抑制氣道炎癥,提高機(jī)體免疫力從而改善CARAS患者鼻、肺部癥狀[7]。有實(shí)驗(yàn)顯示,玉屏風(fēng)散聯(lián)合西藥治療能更好的改善CARAS患者肺功能,抑制IL-5、IL-10、IL-13等炎癥因子的表達(dá)[8]。

    玉屏風(fēng)散中以黃芪補(bǔ)三焦而實(shí)衛(wèi),補(bǔ)劑中之風(fēng)藥,可入肺、脾二經(jīng),起到補(bǔ)氣健脾、益衛(wèi)固表、升陽(yáng)止汗、生津養(yǎng)血、利水消腫、脫毒生肌之效;防風(fēng),治風(fēng)之仙藥,入膀胱、脾、肝之經(jīng),具有祛風(fēng)解表、勝濕止痛、止痙等功效,為風(fēng)中之潤(rùn)劑;白術(shù),健脾胃,溫分肉,培土以寧風(fēng)也。入脾、胃經(jīng),具有補(bǔ)氣健脾、燥濕利水、固表止汗等功效。全方防風(fēng)善驅(qū)風(fēng),黃芪以固表,白術(shù)以固里,共奏益氣、固表、祛風(fēng)之效。

    本研究結(jié)果表明玉屏風(fēng)散治療CARAS的核心成分包括槲皮素、山奈酚、漢黃芩素、異鼠李素等。槲皮素是一種黃酮類(lèi)化合物,具有廣泛的治療性質(zhì),包括但不限于其抗氧化、抗癌、抗炎和抗過(guò)敏活性[9]。有研究表明,槲皮素可以通過(guò)降低肥大細(xì)胞釋放的介質(zhì)即組胺、TNF-α、IL-1β、IL-4、IgE和IL-5,從而達(dá)到抗過(guò)敏的作用[10]。同時(shí)有研究結(jié)果表示,槲皮素通過(guò)抑制GATA-3和增加T-bet表達(dá),減少了Th1/Th2極化的改變導(dǎo)致的過(guò)敏性氣道炎癥和高反應(yīng)性[11]。山奈酚,一種黃酮醇類(lèi)類(lèi)黃酮,可以抑制氣道上皮細(xì)胞和過(guò)敏性哮喘小鼠嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)和氣道炎癥[12]。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)山奈酚可以通過(guò)抑制LAD2細(xì)胞的活化及下游MAPK途徑磷酸化,干擾NF-κB信號(hào)傳導(dǎo),減少β-己糖胺酶、和血清中炎癥介質(zhì),如組胺、TNF-α、IL-8和MCP-1的分泌等方式,起到抗過(guò)敏和抗炎的作用[13]。漢黃芩素可以誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞凋亡并減輕過(guò)敏性氣道炎癥[14]。有實(shí)驗(yàn)表明,漢黃芩素可以通過(guò)減少嗜酸性粒細(xì)胞向鼻腔粘膜的遷移以及抑制血清IgE和鼻腔IL-4、IL-5和IL-13水平,抑制AR小鼠模型中的過(guò)敏性細(xì)胞因子起到抗炎、抗過(guò)敏的作用[15]。異鼠李素通過(guò)MAPK和NF-κB途徑減弱TNF-α誘導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞炎癥、增殖和遷移[16]。因此,玉屏風(fēng)散的關(guān)鍵有效成分以天然黃酮類(lèi)化合物為主,通過(guò)調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路,起到抗過(guò)敏、抗炎、調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤等作用。

    通過(guò)對(duì)網(wǎng)絡(luò)圖拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)分析,根據(jù)節(jié)點(diǎn)度值篩選得到IL-6、TNF、IL-1β、PTGS2、CXCL8、IL-10這6個(gè)核心靶點(diǎn)作為玉屏風(fēng)散治療CARAS的潛在作用靶點(diǎn)。分子對(duì)接結(jié)果顯示玉屏風(fēng)散中多個(gè)活性成分與TNF、PTGS2結(jié)合力較強(qiáng),結(jié)合蛋白互作關(guān)系分析結(jié)果推測(cè)TNF、PTGS2可能是玉屏風(fēng)散治療CARAS最關(guān)鍵的作用靶點(diǎn)。PTGS2,又名COX-2(cyclooxygenase-2,環(huán)氧合酶2)僅在炎癥刺激細(xì)胞激活后表達(dá),NK-κB/COX-2/PGE2軸是炎癥的主要途徑。有研究發(fā)現(xiàn)哮喘患者氣道平滑肌表現(xiàn)出COX-2的表達(dá)增強(qiáng)[17]。同時(shí),COX-2也積極參與了主動(dòng)致敏大鼠的變應(yīng)性鼻炎[18]。有實(shí)驗(yàn)研究證實(shí),中草藥可以通過(guò)NF-κB/COX-2和PGE2治療CARAS[19]。

    KEGG富集分析結(jié)果顯示,TNF、NF-κB、IL-17等信號(hào)通路在玉屏風(fēng)散治療CARAS的過(guò)程中發(fā)揮重要作用。TNF-α可以通過(guò)刺激NF-kB磷酸化,從而激活p50-p65亞單位,增加促炎基因如IL-8、IL-6和TNF-α自身的轉(zhuǎn)錄,在氣道炎癥方面起重要作用[20]。同時(shí),TNF-α可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng),參與氣道重塑[21]。TNF-α還可通過(guò)調(diào)節(jié)TRAF2/NF-κB通路與TNFRI偶聯(lián)誘導(dǎo)氣道高反應(yīng)性[22]。在鼻腔成纖維細(xì)胞的研究中,組胺通過(guò)H1R刺激IL-6的產(chǎn)生、激活下游p38 MAPK和NF-κB來(lái)調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)[23]。Th17細(xì)胞及其標(biāo)志性細(xì)胞因子IL-17與哮喘、過(guò)敏性鼻炎的發(fā)生有關(guān)。血清IL-17水平與過(guò)敏嚴(yán)重程度具有顯著相關(guān)性[24]。有實(shí)驗(yàn)證明,IL-17和VEGF信號(hào)在LPS誘導(dǎo)鼻炎的鼻粘膜中的嗜中性細(xì)胞浸潤(rùn)中起重要作用[25]。證據(jù)表明,與健康對(duì)照受試者相比,哮喘患者的痰、支氣管肺泡灌洗液、支氣管活檢和血清中IL-17增加[26]。人體外研究證實(shí),Th17細(xì)胞因子如IL-17A通過(guò)對(duì)ERK1/2 MAPK和NF-kB介導(dǎo)對(duì)哮喘患者和非哮喘患者氣道平滑肌細(xì)胞的促增殖和遷移作用[27]。IL-17A增加纖維細(xì)胞中α-平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá),但不增加膠原的表達(dá),使纖維細(xì)胞的活化和增殖,從而導(dǎo)致促纖維化和促炎活性的增加。在上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中,IL-17又可以誘導(dǎo)TNF-α分泌。IL-17通過(guò)多種方式參與了哮喘氣道高反應(yīng)性和氣道阻塞、氣道重塑、嗜酸性粒細(xì)胞增多和IgE高分泌等多個(gè)病理過(guò)程[28]。

    綜上所述,本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)初步揭示了玉屏風(fēng)散具有多成分、多靶點(diǎn)、多通路的作用特點(diǎn),為后續(xù)針對(duì)玉屏風(fēng)散治療CARAS作用機(jī)制的藥理實(shí)驗(yàn)研究提供了科學(xué)依據(jù)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]Paiva Ferreira LKD,Paiva Ferreira LAM,Monteiro TM,et al.Combined allergic rhinitis and asthma syndrome(CARAS)[J].International Immunopharmacology,2019(74):105718.

    [2]Giavina-Bianchi P,Aun MV,Takejima P,et al.2016.United airway disease:current perspectives[J].Journal of Asthma and Allergy,11(9):93-100.

    [3]Broz·ek JL,Bousquet J,Agache I,et al.Allergic Rhinitis and its Impact on Asthma(ARIA)guidelines-2016 revision[J].Journal of Allergy Clinical Immunology,2017,140(4):950-958.

    [4]賀夢(mèng)雪,孫增濤.中醫(yī)治療成人過(guò)敏性鼻炎哮喘綜合征的研究概況[J].中國(guó)中醫(yī)急癥,2021,30(3):551-553.

    [5]李?lèi)?ài)紅,楊繼,王強(qiáng).支氣管哮喘中醫(yī)治療研究進(jìn)展[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2020,41(6):85-88.

    [6]梁金池.玉屏風(fēng)散聯(lián)合疫苗對(duì)慢性阻塞性肺疾病緩解期患者肺功能及氣道炎性因子的影響[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2021,42(4):48-51.

    [7]楊占軍,李良,張曉,等.西藥聯(lián)合玉屏風(fēng)散對(duì)過(guò)敏性鼻炎-哮喘綜合征58例氣道炎癥及免疫調(diào)節(jié)作用[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥,2021,30(18):109-111+118.

    [8]李潔,曹飛,李玉梅,等.玉屏風(fēng)散輔助治療支氣管哮喘合并過(guò)敏性鼻炎療效及對(duì)sICAM-1、IL-10變化的研究[J].中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2022,40(8):197-200.

    [9]Fortunato LR,Alves CdF,Teixeira MM,et al.Quercetin:a flavonoid with the potential to treat asthma[J].Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences,2012,48(4):589-599.

    [10]Xing Y,Tan C,Luo Y,et al.Effect of Quercetin on Rhinitis via Inflammatory Pathway[J].Pakistan Journal of Zoology,2021,53(2):619-626.

    [11]Park HJ,Lee CM,Jung ID,et al.Quercetin regulates Th1/Th2 balance in a murine model of asthma[J].International Immunopharmacology,2009,9(3):261-267.

    [12]Gong JH,Shin D,Han SY,et al.Kaempferol suppresses eosionphil infiltration and airway inflammation in airway epithelial cells and in mice with allergic asthma[J].Journal of Nutrition,2012,142(1):47-56.

    [13]Cao J,Li C,Ma P,et al.Effect of kaempferol on IgE-mediated anaphylaxis in C57BL/6 mice and LAD2 cells[J].Phytomedicine,2020(79):153346.

    [14]Lucas CD,Dorward DA,Sharma S,et al.Wogonin induces eosinophil apoptosis and attenuates allergic airway inflammation[J].American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,2015,191(6):626-636.

    [15]Kim KA,Jung JH,Choi YS,et al.Anti-inflammatory effect of wogonin on allergic responses in ovalbumin-induced allergic rhinitis in the mouse[J].Allergy & Rhinology,2018(9):2152656718764145.

    [16]Ren X,Han L,Li Y,et al.Isorhamnetin attenuates TNF-alpha-induced inflammation,proliferation,and migration in human bronchial epithelial cells via MAPK and NF-kappaB pathways[J].Anatomical Record-Advances in Integrative Anatomy and Evolutionary Biology,2021,304(4):901-913.

    [17]Comer BS,Camoretti-Mercado B,Kogut PC,et al.Cyclooxygenase-2 and microRNA-155 expression are elevated in asthmatic airway smooth muscle cells[J].American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology,2015,52(4):438-447.

    [18]Rahman MA,Yatsuzuka R,Jiang S,et al.Involvement of cyclooxygenase-2 in allergic nasal inflammation in rats[J].International Immunopharmacology,2006,6(11):1736-1742.

    [19]Song M,Lee SY,Kim M,et al.Saururus chinensis-controlled allergic pulmonary disease through NF-kappaB/COX-2 and PGE2 pathways[J].PeerJ,2020,8:e10043.

    [20]Lykouras D,Sampsonas F,Kaparianos A,et al.Role and Pharmacogenomics of TNF-in Asthma[J].Mini-Reviews in Medicinal Chemistry,2008,8(9):934-942.

    [21]Babu KS,Davies DE,Holgate ST.,Role of tumor necrosis factor alpha in asthma.Immunology and Allergy Clinics of North America,2004,24(4):583-597.

    [22]Berry M,Brightling C,Pavord I,et al.TNF-alpha in asthma[J].Current Opinion in Pharmacology,2007,7(3):279-282.

    [23]Park IH,Um JY,Cho JS,et al.Histamine Promotes the Release of Interleukin-6 via the H1R/p38 and NF-kappaB Pathways in Nasal Fibroblasts[J].Allergy Asthma and Immunology Research,2014,6(6):567-572.

    [24]Ciprandi G,De Amici M,Murdaca G,et al.Serum interleukin-17 levels are related to clinical severity in allergic rhinitis[J].Allergy,2009,64(9):1375-1378.

    [25]Bae JS,Kim JH,Kim EH,et al.The Role of IL-17 in a Lipopolysaccharide-Induced Rhinitis Model[J].Allergy Asthma and Immunology Research,2017,9(2):169-176.

    [26]Agache I,Ciobanu C,Agache C,et al.Increased serum IL-17 is an independent risk factor for severe asthma.Respiratory Medicine,2010,104(8):1131-1137.

    [27]Silverpil E,Linden A.IL-17 in human asthma[J].Expert Review of Respiratory Medicine,2012,6(2):173-186.

    [28]Ramakrishnan RK,Al Heialy S,Hamid Q,Role of IL-17 in asthma pathogenesis and its implications for the clinic[J].Expert Review of Respiratory Medicine,2019,13(11):1057-1068.

    (收稿日期:2022-11-22)

    猜你喜歡
    分子對(duì)接過(guò)敏性鼻炎網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)
    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法分析中藥臨床治療胸痹的作用機(jī)制
    從網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)角度研究白芍治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的作用
    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的沙棘總黃酮治療心肌缺血的作用機(jī)制研究
    基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析丹參山楂組分配伍抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用機(jī)制研究
    基于計(jì)算機(jī)輔助水解的中藥大豆寡肽的ETA拮抗活性預(yù)測(cè)
    靈芝三萜化合物的抗腫瘤靶點(diǎn)預(yù)測(cè)與活性驗(yàn)證
    計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)在分子對(duì)接中的應(yīng)用
    穴位貼敷聯(lián)合中藥內(nèi)服治療過(guò)敏性鼻炎的臨床療效
    自擬益氣除鼽湯配合針灸治療過(guò)敏性鼻炎療效觀察
    低溫等離子消融治療過(guò)敏性鼻炎療效分析
    在线观看一区二区三区激情| 制服诱惑二区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 看免费av毛片| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产欧美日韩一区二区三| 日本a在线网址| 老司机午夜十八禁免费视频| 9191精品国产免费久久| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 久久毛片免费看一区二区三区| 久久99一区二区三区| 国产国语露脸激情在线看| 国产成人av激情在线播放| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | h视频一区二区三区| 久久中文字幕一级| 欧美一级毛片孕妇| 老司机深夜福利视频在线观看| 午夜免费成人在线视频| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 超色免费av| 亚洲欧洲日产国产| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 免费不卡黄色视频| netflix在线观看网站| 成人av一区二区三区在线看| 女人久久www免费人成看片| 亚洲天堂av无毛| 国产一区二区 视频在线| 久久国产精品影院| 亚洲av美国av| 美女主播在线视频| 精品高清国产在线一区| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| www.精华液| 岛国在线观看网站| 99re在线观看精品视频| 一级,二级,三级黄色视频| 国产亚洲欧美精品永久| 九色亚洲精品在线播放| 黄片小视频在线播放| 免费看十八禁软件| 色视频在线一区二区三区| 久久久精品区二区三区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产av又大| 淫妇啪啪啪对白视频| 欧美成人午夜精品| 国产精品免费一区二区三区在线 | 99久久国产精品久久久| 精品久久久精品久久久| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 成人影院久久| 老司机在亚洲福利影院| av视频免费观看在线观看| 人成视频在线观看免费观看| 国产成人av激情在线播放| 婷婷成人精品国产| 色94色欧美一区二区| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲成人手机| 国产成人系列免费观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 我的亚洲天堂| 三上悠亚av全集在线观看| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲人成电影免费在线| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产又爽黄色视频| 嫁个100分男人电影在线观看| 正在播放国产对白刺激| 亚洲 国产 在线| 成人免费观看视频高清| av又黄又爽大尺度在线免费看| 欧美人与性动交α欧美软件| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久精品成人免费网站| 看免费av毛片| 亚洲欧美色中文字幕在线| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 精品第一国产精品| 成人国产一区最新在线观看| 一夜夜www| 人妻久久中文字幕网| 水蜜桃什么品种好| 亚洲久久久国产精品| 亚洲人成电影免费在线| 老司机亚洲免费影院| 一区福利在线观看| 久久久久国内视频| 日日爽夜夜爽网站| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲av第一区精品v没综合| 人妻久久中文字幕网| 欧美精品亚洲一区二区| 捣出白浆h1v1| 国产精品亚洲av一区麻豆| 欧美性长视频在线观看| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 成在线人永久免费视频| 中文欧美无线码| 一本色道久久久久久精品综合| 精品第一国产精品| 一本综合久久免费| 亚洲欧美激情在线| 美女视频免费永久观看网站| 99re在线观看精品视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 日韩中文字幕视频在线看片| 97人妻天天添夜夜摸| 一进一出好大好爽视频| 国产成人av教育| 丰满少妇做爰视频| 久久狼人影院| 香蕉国产在线看| 亚洲精品av麻豆狂野| www.自偷自拍.com| 夜夜爽天天搞| 久久青草综合色| 亚洲 国产 在线| 91av网站免费观看| 免费av中文字幕在线| 一区二区三区激情视频| 亚洲精品美女久久av网站| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜福利视频精品| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 麻豆av在线久日| 91老司机精品| 大型黄色视频在线免费观看| 午夜福利在线免费观看网站| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品久久久久久精品古装| 成年人免费黄色播放视频| 三级毛片av免费| 国产av国产精品国产| 国产精品影院久久| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 精品一区二区三区四区五区乱码| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美乱妇无乱码| 美女福利国产在线| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 中亚洲国语对白在线视频| 黄片播放在线免费| 波多野结衣av一区二区av| 久久精品91无色码中文字幕| 色综合婷婷激情| 少妇精品久久久久久久| 波多野结衣一区麻豆| 精品卡一卡二卡四卡免费| 美女午夜性视频免费| a在线观看视频网站| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产精品久久久av美女十八| 免费观看a级毛片全部| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 一进一出好大好爽视频| 十分钟在线观看高清视频www| 欧美日韩av久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产成人av教育| 欧美激情久久久久久爽电影 | 国产在视频线精品| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 国产单亲对白刺激| 美女视频免费永久观看网站| 精品免费久久久久久久清纯 | 热re99久久精品国产66热6| 国产男女超爽视频在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3 | av视频免费观看在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲色图av天堂| 精品少妇黑人巨大在线播放| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产亚洲av高清不卡| 国产三级黄色录像| 国产高清videossex| 中文字幕制服av| 国产av精品麻豆| 成人国语在线视频| 午夜激情av网站| 亚洲久久久国产精品| 99久久精品国产亚洲精品| 老司机在亚洲福利影院| 国产免费现黄频在线看| 搡老乐熟女国产| 亚洲 国产 在线| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲精品av麻豆狂野| av在线播放免费不卡| 免费观看a级毛片全部| 免费日韩欧美在线观看| 久久精品人人爽人人爽视色| 最新美女视频免费是黄的| 99久久人妻综合| 亚洲精品自拍成人| 一本大道久久a久久精品| 亚洲成人国产一区在线观看| 日韩中文字幕视频在线看片| 欧美 日韩 精品 国产| 一夜夜www| 日本av手机在线免费观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产国语露脸激情在线看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美 日韩 精品 国产| cao死你这个sao货| 美国免费a级毛片| 深夜精品福利| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 精品亚洲成国产av| 中文欧美无线码| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲avbb在线观看| 国产野战对白在线观看| 久久香蕉激情| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲七黄色美女视频| 午夜免费鲁丝| 久久毛片免费看一区二区三区| e午夜精品久久久久久久| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产xxxxx性猛交| 日本av手机在线免费观看| 搡老岳熟女国产| 日韩有码中文字幕| 久久久精品区二区三区| 免费观看av网站的网址| 丁香六月欧美| 欧美黄色片欧美黄色片| 高清在线国产一区| 亚洲国产看品久久| 亚洲免费av在线视频| 在线观看www视频免费| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| av国产精品久久久久影院| av在线播放免费不卡| 久久这里只有精品19| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 久久人妻熟女aⅴ| 日本av手机在线免费观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 精品久久久久久电影网| 成人av一区二区三区在线看| 成年人黄色毛片网站| 美女国产高潮福利片在线看| 精品国产乱码久久久久久男人| 精品一区二区三区av网在线观看 | 十分钟在线观看高清视频www| 国产精品久久久久久精品古装| 欧美在线一区亚洲| 亚洲欧美一区二区三区久久| 99精品欧美一区二区三区四区| 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲一区中文字幕在线| 黑丝袜美女国产一区| 久久人妻av系列| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产99久久九九免费精品| 他把我摸到了高潮在线观看 | 热99久久久久精品小说推荐| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 精品人妻1区二区| 日本av免费视频播放| 国产精品1区2区在线观看. | 亚洲天堂av无毛| 在线观看66精品国产| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 搡老熟女国产l中国老女人| 91精品三级在线观看| www.熟女人妻精品国产| 精品一品国产午夜福利视频| 久久久久国产一级毛片高清牌| 国产在线一区二区三区精| 国产熟女午夜一区二区三区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 69av精品久久久久久 | 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 黄色成人免费大全| 99国产精品一区二区蜜桃av | 一个人免费看片子| 十分钟在线观看高清视频www| 大型黄色视频在线免费观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 天天添夜夜摸| 午夜福利视频精品| 亚洲中文av在线| 国产高清videossex| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 久久久国产一区二区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 两人在一起打扑克的视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 91国产中文字幕| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲av日韩在线播放| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 91精品三级在线观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 久久天堂一区二区三区四区| 午夜久久久在线观看| 欧美在线黄色| 精品午夜福利视频在线观看一区 | 中文字幕人妻熟女乱码| 欧美亚洲日本最大视频资源| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲熟女毛片儿| a级毛片在线看网站| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲成人手机| 国产精品av久久久久免费| 精品少妇内射三级| 亚洲人成77777在线视频| 日日夜夜操网爽| 国产伦理片在线播放av一区| 丰满迷人的少妇在线观看| 两个人免费观看高清视频| 老司机福利观看| 久久久国产欧美日韩av| 精品欧美一区二区三区在线| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 欧美成人免费av一区二区三区 | 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 欧美精品亚洲一区二区| 中国美女看黄片| 老司机在亚洲福利影院| 久久精品成人免费网站| 日本黄色视频三级网站网址 | 国产在线精品亚洲第一网站| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 9色porny在线观看| 国产一区二区三区综合在线观看| 久久 成人 亚洲| av有码第一页| 中文字幕高清在线视频| 日韩视频一区二区在线观看| 在线观看舔阴道视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 9191精品国产免费久久| 国产亚洲精品久久久久5区| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 午夜福利免费观看在线| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 成人三级做爰电影| 日韩欧美一区视频在线观看| av天堂久久9| 久久天堂一区二区三区四区| 精品一区二区三区av网在线观看 | 国产高清videossex| 国产不卡av网站在线观看| 黄色丝袜av网址大全| 欧美午夜高清在线| 久久人妻av系列| 亚洲第一青青草原| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 岛国毛片在线播放| 精品高清国产在线一区| 女性生殖器流出的白浆| 一本久久精品| 男女免费视频国产| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 激情在线观看视频在线高清 | 法律面前人人平等表现在哪些方面| 久久亚洲精品不卡| 多毛熟女@视频| 他把我摸到了高潮在线观看 | 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 亚洲av美国av| 91精品国产国语对白视频| 午夜免费成人在线视频| 亚洲国产欧美在线一区| 另类亚洲欧美激情| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 精品高清国产在线一区| 国产亚洲精品久久久久5区| 在线 av 中文字幕| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 在线观看人妻少妇| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲欧美色中文字幕在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 一区福利在线观看| 久久影院123| 国产欧美日韩精品亚洲av| 脱女人内裤的视频| 久久中文字幕人妻熟女| 激情在线观看视频在线高清 | 一级毛片电影观看| 亚洲第一青青草原| 国产99久久九九免费精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产成人精品在线电影| 欧美人与性动交α欧美软件| 人成视频在线观看免费观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 青草久久国产| 丝瓜视频免费看黄片| 极品人妻少妇av视频| 免费看a级黄色片| 亚洲精品乱久久久久久| 午夜福利欧美成人| 国产高清videossex| 日本精品一区二区三区蜜桃| 丝袜美足系列| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 女警被强在线播放| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| www.精华液| 亚洲,欧美精品.| √禁漫天堂资源中文www| 国产xxxxx性猛交| 多毛熟女@视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久青草综合色| 女性生殖器流出的白浆| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲黑人精品在线| 精品国产亚洲在线| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲成人免费av在线播放| 国产精品免费大片| kizo精华| 精品少妇内射三级| 男女下面插进去视频免费观看| 少妇 在线观看| 两性夫妻黄色片| 999久久久国产精品视频| 成人国语在线视频| 两个人免费观看高清视频| 淫妇啪啪啪对白视频| 一个人免费在线观看的高清视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 啪啪无遮挡十八禁网站| 日韩一区二区三区影片| 久久久国产成人免费| 老熟女久久久| 老司机午夜福利在线观看视频 | 亚洲精品乱久久久久久| 久热这里只有精品99| 久久人妻av系列| 国产三级黄色录像| 国产精品久久久久成人av| 久久久久久久久久久久大奶| 蜜桃国产av成人99| 老司机午夜十八禁免费视频| 两个人免费观看高清视频| 精品少妇久久久久久888优播| 黄色视频,在线免费观看| 下体分泌物呈黄色| 美女主播在线视频| 天天影视国产精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲中文av在线| 99九九在线精品视频| 夜夜爽天天搞| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产97色在线日韩免费| 久久天堂一区二区三区四区| 国产成人精品久久二区二区免费| 久久久久久久精品吃奶| 999久久久精品免费观看国产| 黄色片一级片一级黄色片| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 欧美大码av| 国产免费现黄频在线看| 欧美精品亚洲一区二区| 日韩有码中文字幕| 国产淫语在线视频| 91大片在线观看| 免费高清在线观看日韩| 精品福利观看| 中文字幕人妻熟女乱码| 欧美在线黄色| 日本av手机在线免费观看| 91av网站免费观看| 一区二区三区激情视频| 十分钟在线观看高清视频www| 两个人免费观看高清视频| 日日爽夜夜爽网站| 久久久久久久精品吃奶| 成人av一区二区三区在线看| 成人三级做爰电影| 日本黄色日本黄色录像| 高清欧美精品videossex| 亚洲精品自拍成人| 亚洲伊人色综图| 欧美成人免费av一区二区三区 | 亚洲人成77777在线视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 麻豆国产av国片精品| 免费少妇av软件| 9色porny在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久久国产成人免费| 日韩视频在线欧美| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产亚洲精品久久久久5区| 国产亚洲av高清不卡| 日本vs欧美在线观看视频| 一区福利在线观看| 美女福利国产在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 亚洲全国av大片| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成年人免费黄色播放视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 制服诱惑二区| 99re在线观看精品视频| 日本av手机在线免费观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 最新在线观看一区二区三区| 国产不卡av网站在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲精品自拍成人| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 一级片'在线观看视频| 十八禁网站网址无遮挡| 激情在线观看视频在线高清 | 真人做人爱边吃奶动态| 天天操日日干夜夜撸| 飞空精品影院首页| 午夜久久久在线观看| av有码第一页| 少妇 在线观看| 操美女的视频在线观看| 1024香蕉在线观看| 色综合婷婷激情| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 亚洲欧美激情在线| 女人精品久久久久毛片| 国产精品二区激情视频| 亚洲专区字幕在线| 91国产中文字幕| 无遮挡黄片免费观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美激情高清一区二区三区| 亚洲精品在线美女| 大片电影免费在线观看免费| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 精品亚洲成国产av| 天堂8中文在线网| 国产精品av久久久久免费| 亚洲成人免费电影在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看| 久久久水蜜桃国产精品网| 九色亚洲精品在线播放| 久久久国产成人免费| 日韩成人在线观看一区二区三区| 色视频在线一区二区三区| 大陆偷拍与自拍| 成人特级黄色片久久久久久久 | 午夜精品国产一区二区电影| 久久久精品94久久精品| 国产免费现黄频在线看| 麻豆成人av在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 黄色a级毛片大全视频| kizo精华| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品久久久久成人av| 51午夜福利影视在线观看| 成年版毛片免费区| 一级,二级,三级黄色视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 中国美女看黄片| 美女视频免费永久观看网站| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久精品亚洲av国产电影网| 久热爱精品视频在线9| 一区二区av电影网| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产高清国产精品国产三级| 人妻久久中文字幕网| 国产欧美日韩一区二区三| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 99精国产麻豆久久婷婷| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | av网站在线播放免费| 一进一出好大好爽视频| 久久青草综合色|