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    提高酶抑制率法進(jìn)行果蔬農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)準(zhǔn)確性的建議

    2023-05-30 18:31:14李欣
    食品安全導(dǎo)刊 2023年5期
    關(guān)鍵詞:快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留

    摘 要:隨著生活水平的不斷提高,人們對(duì)于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問(wèn)題的關(guān)注程度越來(lái)越高,隨之而來(lái)的農(nóng)藥殘留問(wèn)題也日益突顯。酶抑制率法是發(fā)展較為成熟的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法,本文分析了酶抑制率法的特點(diǎn),探討了提高酶抑制率法進(jìn)行果蔬農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)準(zhǔn)確性的建議。

    關(guān)鍵詞:酶抑制率法;快速檢測(cè);農(nóng)藥殘留

    Abstract: With the continuous improvement of living standards, peoples attention to the quality and safety of agricultural products is becoming increasingly high, and the problem of pesticide residues is also becoming increasingly prominent. The enzyme inhibition rate method is a relatively mature method for rapid detection of pesticide residues. This article analyzes the characteristics of the enzyme inhibition rate method and explores suggestions for improving the accuracy of the enzyme inhibition rate method for rapid detection of pesticide residues in fruits and vegetables.

    Keywords: enzyme inhibition rate method; rapid detection; pesticide residues

    隨著生活水平的不斷提高,人們對(duì)于農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問(wèn)題的關(guān)注程度越來(lái)越高,隨之而來(lái)的農(nóng)藥殘留問(wèn)題也日益突顯。農(nóng)藥具有防治農(nóng)作物病蟲害,促進(jìn)農(nóng)作物豐產(chǎn)豐收等優(yōu)點(diǎn)。農(nóng)藥在推動(dòng)農(nóng)業(yè)發(fā)展的同時(shí),也對(duì)人體健康產(chǎn)生了一定危害。為了確保將“問(wèn)題”果蔬控制在餐桌之外,農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的使用不可或缺,特別是農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù),憑借著檢測(cè)成本低和操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì),在蔬菜、水果大量上市前的初篩環(huán)節(jié)中起著至關(guān)重要的作用[1-2]。

    在果蔬種植過(guò)程中農(nóng)藥殘留超標(biāo)主要集中在以下4個(gè)方面。①部分種植戶仍在使用國(guó)家明令禁止和限制使用的劇毒、高殘留農(nóng)藥。此類農(nóng)藥毒性大且殘留期長(zhǎng),甚至?xí)?duì)種植用地造成嚴(yán)重污染。②部分種植戶忽視了農(nóng)藥濃度的使用比例,認(rèn)為使用低毒農(nóng)藥不會(huì)有農(nóng)藥殘留超標(biāo)問(wèn)題,從而出現(xiàn)過(guò)量使用低毒農(nóng)藥現(xiàn)象。③無(wú)視農(nóng)藥的使用范圍和安全間隔期規(guī)定。有的種植戶沒(méi)有嚴(yán)格按照農(nóng)藥的標(biāo)簽標(biāo)識(shí)的使用范圍和安全間隔期使用農(nóng)藥,擴(kuò)大農(nóng)藥使用范圍、不到安全間隔期時(shí)間就采收蔬菜,從而導(dǎo)致果蔬中農(nóng)藥殘留超標(biāo)。④在蔬菜種植過(guò)程中忽視其他環(huán)節(jié),也有可能造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)的情況發(fā)生。例如,將發(fā)酵后的雞糞作為蔬菜肥料使用,但是為殺滅雞糞中的蟲害,有的農(nóng)戶會(huì)使用劇毒農(nóng)藥,從而致使蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)的現(xiàn)象也時(shí)有發(fā)生。

    目前,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥是蔬菜種植過(guò)程中被普遍使用的殺蟲劑。自2002年起,甲胺磷、甲基對(duì)硫磷、毒死蜱等66種農(nóng)藥被陸續(xù)規(guī)定為在蔬菜和果樹等農(nóng)作物中禁止使用和限制使用的農(nóng)藥,其中,有很多種農(nóng)藥是有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。自2024年9月1日起,甲拌磷、水胺硫磷、甲基異柳磷、滅線磷這4種有機(jī)磷類農(nóng)藥也將禁止銷售和使用,由此看出,對(duì)蔬菜中這兩類農(nóng)藥殘留量進(jìn)行檢測(cè)顯得尤其重要。

    對(duì)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量進(jìn)行測(cè)定是農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管工作中的重要環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)室常采用儀器分析,如利用色譜、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等檢測(cè)技術(shù)方法對(duì)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量進(jìn)行檢測(cè)分析。這些檢測(cè)技術(shù)出具的結(jié)果十分精準(zhǔn),但因需要高昂的成本且很難在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)等因素,在基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)機(jī)構(gòu)中未能得到廣泛推廣。相比較而言,農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)因應(yīng)用簡(jiǎn)便、使用成本低、靈敏度高等優(yōu)勢(shì),在基層農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中得到廣泛使用。酶抑制率法是目前發(fā)展較為成熟的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù),能針對(duì)蔬菜和水果中的有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行快速篩選測(cè)定。

    1 酶抑制率法的特點(diǎn)

    1.1 酶抑制率法的檢測(cè)原理

    酶抑制率法僅適用于對(duì)樣品中有機(jī)磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速篩選測(cè)定。其檢測(cè)原理是在特定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥能夠抑制膽堿酯酶的正常功能,且抑制程度與樣品中兩種農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常條件下,酶能催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝物(乙酰膽堿)進(jìn)行水解,水解物與顯色劑產(chǎn)生顯色反應(yīng),生成黃色物質(zhì)。使用速測(cè)儀對(duì)待測(cè)液吸光值隨時(shí)間的變化值進(jìn)行測(cè)定,得到抑制率。通過(guò)抑制率數(shù)值即可判斷出被測(cè)樣品中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留是否超標(biāo)。

    1.2 酶抑制率法的優(yōu)點(diǎn)

    ①檢測(cè)過(guò)程所需時(shí)間短,且樣品前處理過(guò)程比較簡(jiǎn)單,單個(gè)蔬菜、水果樣品檢測(cè)所需時(shí)間僅約

    30 min,大大節(jié)約了農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)分析時(shí)間。②儀器設(shè)備體積小,重量輕,便于攜帶,能夠滿足對(duì)樣品進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的工作需求。③操作過(guò)程簡(jiǎn)便,易于掌握,對(duì)操作人員不需要太高的技能要求,通過(guò)短期培訓(xùn)基本可掌握儀器的操作方法。④經(jīng)濟(jì)適用、成本低。目前,市面上有幾十種功能相同或相近的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀器設(shè)備,所以速測(cè)儀器的購(gòu)買、運(yùn)行、維護(hù)的成本與高精農(nóng)殘檢測(cè)設(shè)備相比均比較低,適合在基層日常檢測(cè)工作中廣泛使用。⑤可同時(shí)對(duì)樣品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類兩大類農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)。

    1.3 酶抑制率法的缺點(diǎn)

    1.3.1 容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果

    酶抑制率法對(duì)檢測(cè)條件控制比較嚴(yán)格,檢測(cè)結(jié)果容易出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象,造成檢測(cè)結(jié)果誤判。假陽(yáng)性結(jié)果是由于酶的活性降低或滅活,導(dǎo)致底物不發(fā)揮作用,底物不能水解,不能與顯色劑結(jié)合。檢測(cè)樣品自身成分、檢測(cè)環(huán)境的溫度、操作人員操作行為等因素均可能對(duì)酶活性造成影響[3]。

    1.3.2 呈現(xiàn)假陰性結(jié)果

    受提取時(shí)間、緩沖液成分等因素的影響,檢測(cè)結(jié)果也會(huì)出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象。假陰性結(jié)果是因?yàn)闃悠分械挠袡C(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥沒(méi)有被完全提取出來(lái),導(dǎo)致檢測(cè)值比實(shí)際值偏低。此外,受酶制劑靈敏度的影響,部分農(nóng)藥有檢出限值,樣品中農(nóng)藥含量低于檢出限也會(huì)出現(xiàn)陰性結(jié)果。

    1.3.3 檢測(cè)范圍的局限性

    由于酶抑制率法檢測(cè)原理的局限性,只能對(duì)樣品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速測(cè)定,對(duì)于樣品中這兩大類農(nóng)藥以外的其他類農(nóng)藥,如擬除蟲菊酯類、有機(jī)氯類等農(nóng)藥殘留則無(wú)法檢測(cè)。

    2 提高農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)準(zhǔn)確性的建議

    2.1 規(guī)范抽樣過(guò)程

    抽樣過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵循抽樣標(biāo)準(zhǔn)《蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)抽樣規(guī)范》(NY/T 762—2004)的要求進(jìn)行采樣,采取隨機(jī)抽樣的方式。抽取的樣品應(yīng)能充分代表該批產(chǎn)品的特征,且樣品應(yīng)該為成熟的或待上市的樣品;抽樣過(guò)程嚴(yán)格按規(guī)程操作,準(zhǔn)確記錄樣品相關(guān)信息,認(rèn)真填寫抽樣單;抽樣人員應(yīng)了解所抽取樣品的生產(chǎn)、管理情況,確保抽取的樣品符合農(nóng)藥安全間隔期規(guī)定;且需保證樣品在運(yùn)輸過(guò)程中不得變質(zhì)、損壞、污染等[4-5]。

    2.2 嚴(yán)格遵守檢測(cè)試劑的適用要求

    檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中所有試劑配制和貯存條件都有相應(yīng)的要求,應(yīng)嚴(yán)格遵守試劑說(shuō)明書,注意試劑配制前后的貯存要求,避免試劑因配制或保存不當(dāng)而失活。配制過(guò)程中必須使用蒸餾水或純凈水配制緩沖液,以減少對(duì)檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性的干擾。為了使酶保持正常的活性,獲得準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果,檢測(cè)室溫度應(yīng)盡量維持在20~25 ℃。

    2.3 樣品前處理過(guò)程應(yīng)區(qū)別對(duì)待

    檢測(cè)過(guò)程中應(yīng)確保實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)場(chǎng)清潔,避免其他雜質(zhì)對(duì)樣品造成污染,從而影響檢測(cè)結(jié)果。針對(duì)有明顯污垢的樣品,可擦拭表面的泥土和其他雜質(zhì)后再進(jìn)行下一步操作,但不能用水清洗樣品;針對(duì)葉綠素含量較高的蔬菜樣品,在制樣過(guò)程中則不宜切得太碎,以免影響檢測(cè)結(jié)果。針對(duì)含植物次生物質(zhì)等對(duì)酶的活性有影響的樣品,如蒜、蔥、蘿卜、芹菜、韭菜和蘑菇等,容易產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果,為了降低樣品自身成分對(duì)結(jié)果的干擾,應(yīng)根據(jù)情況采取增加平行檢測(cè)次數(shù)、整株蔬菜浸提等方法進(jìn)行處理。

    2.4 個(gè)別水果和蔬菜等樣品的取樣方式

    一般制樣過(guò)程遵循“食什么部位取什么部位”的原則。通過(guò)多年檢測(cè)實(shí)驗(yàn),總結(jié)出個(gè)別特殊的蔬菜和水果等樣品取樣方式,詳見表1。

    2.5 避免檢測(cè)設(shè)備、檢測(cè)用易耗品等對(duì)結(jié)果的干擾

    檢測(cè)人員應(yīng)重視對(duì)儀器設(shè)備的養(yǎng)護(hù),為避免濕度因素對(duì)檢測(cè)設(shè)備的影響,實(shí)驗(yàn)室的相對(duì)濕度應(yīng)保持在45% RH~65% RH。為保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)先進(jìn)行預(yù)熱,并按儀器要求進(jìn)行定期校正,或由相關(guān)部門進(jìn)行定期校準(zhǔn)。為避免交叉污染,檢測(cè)時(shí)應(yīng)使用專用移液器。同時(shí),注意檢測(cè)試劑的使用應(yīng)遵循“只出不進(jìn)”的原則,從容器中吸出后的試劑不能再放回容器中,以免對(duì)試劑造成污染。檢測(cè)過(guò)程中使用的易耗品,如試劑反應(yīng)盤、試管等應(yīng)及時(shí)清洗,且必須使用蒸餾水或純凈水進(jìn)行清洗,也不能同時(shí)將它們置于容器中清洗,以免造成相互污染、損壞等。

    2.6 提高檢測(cè)員的操作水平

    在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中,每個(gè)操作細(xì)節(jié)都可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響,規(guī)范地進(jìn)行每一步操作,才能使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、科學(xué)。檢測(cè)人員應(yīng)經(jīng)過(guò)系統(tǒng)地培訓(xùn)才可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。檢測(cè)人員在進(jìn)行檢測(cè)過(guò)程中一定要規(guī)范操作流程,如加入試劑時(shí),應(yīng)保持移液器豎直,當(dāng)移液槍頭有試劑時(shí),切勿將移液器平放或倒置,以免對(duì)移液器造成污染,從而污染其他試劑或樣品,加底物與上機(jī)之間的間隔要盡可能短等,因此要求檢測(cè)人員應(yīng)熟練掌握操作流程。總之,檢測(cè)人員應(yīng)不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)并養(yǎng)成良好的操作習(xí)慣,能夠預(yù)判出每個(gè)操作步驟可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果存在的影響因素,盡量避免人為誤差對(duì)檢測(cè)結(jié)果的不利影響。

    2.7 對(duì)陽(yáng)性樣品檢測(cè)結(jié)果的處理

    根據(jù)國(guó)家推薦標(biāo)準(zhǔn)《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)》(GB/T 5009.199—2003),大連市金普新區(qū)區(qū)級(jí)農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)出現(xiàn)陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果處理方法為檢測(cè)結(jié)果抑制率≥50%,判定為疑似陽(yáng)性樣品,對(duì)疑似陽(yáng)性樣品應(yīng)重復(fù)檢測(cè)5次以上,樣品陽(yáng)性重現(xiàn)率≥80%,判定為不合格樣品;樣品陽(yáng)性重現(xiàn)率<80%,為合格樣品。有條件的情況下,對(duì)于不合格樣品應(yīng)通過(guò)定量分析實(shí)驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步檢測(cè),確定具體農(nóng)藥品種和含量。

    3 結(jié)語(yǔ)

    綜上所述,酶抑制率法是一種準(zhǔn)確性較高的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù),在大量蔬菜水果上市前的初篩排查環(huán)節(jié)中起著重要作用,可廣泛應(yīng)用于基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)、種植基地、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)等場(chǎng)合,然而該檢測(cè)技術(shù)仍存在一定的缺陷,但是只要重視產(chǎn)生誤差的原因并盡量減小誤差,規(guī)范每一步的操作步驟,也可提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展,酶抑制率法農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)也將得到不斷優(yōu)化和調(diào)整,在提升農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性中起著越來(lái)越重要的作用。

    參考文獻(xiàn)

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    [2]黎小菊.探討酶抑制率法檢測(cè)蔬菜中農(nóng)藥殘留結(jié)果影響因素[J].農(nóng)村科學(xué)實(shí)驗(yàn),2020(16):99-100.

    [3]劉順宇,郭淑貞,林雙娣,等.酶抑制法在農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)過(guò)程中的應(yīng)用分析[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué),2017(7):85-87.

    [4]李欣,李繼森.提高果菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)準(zhǔn)確性意見[J].農(nóng)家科技,2014(3):148.

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