魚加工副產(chǎn)物酶法制備低聚肽的研究進(jìn)展

葛風(fēng)茹，鄢烽，宋琨燕，楊子祥，付桂明，鄭洪立

南昌大學(xué)食品學(xué)院（南昌 330047）

低聚肽由蛋白質(zhì)降解后形成，一般含有2~10個氨基酸殘基，以肽鍵相連，分子量在1 500 Da以下，是低分子量生理活性肽，也稱為寡肽或小分子活性肽。肽鍵是由一個氨基酸的氨基與另一個氨基酸上的羧基脫水縮合形成（圖1）。低聚肽根據(jù)氨基酸殘基數(shù)量分為二肽、三肽和四肽等。1953年Agar等[1]首次發(fā)現(xiàn)肽可以被腸道利用，這一發(fā)現(xiàn)打破了傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)消化認(rèn)知學(xué)說，即小腸中蛋白質(zhì)的消化產(chǎn)物為氨基酸[2]。隨后研究發(fā)現(xiàn)了低聚肽，此后研究人員圍繞低聚肽開展了大量的研究工作，人們對低聚肽的認(rèn)識越來越深入，實現(xiàn)了低聚肽工業(yè)化應(yīng)用。

圖1 肽鍵的形成示意圖

低聚肽的制備方法包括提取法、合成法以及大分子降解法[3]。提取法是根據(jù)低聚肽溶解能力及溶劑極性不同，使用單種或多種溶劑組合提取低聚肽的方法。該法較早建立，較為簡便；但規(guī)模較小，工藝落后，得到的低聚肽質(zhì)量不高[4]。合成法是指通過化學(xué)方法或生物催化劑的手段合成低聚肽。此法條件溫和，反應(yīng)專一，但合成條件要求高，效率較低[3,5]。大分子降解法是指通過物理、化學(xué)以及生物等手段降解蛋白質(zhì)分子制備得到低聚肽的方法。原料通常包括來源于生物的蛋白。植物蛋白來自茶葉、核桃、大豆以及綠豆等。動物蛋白來自牡蠣、海參、龜類以及魚類等。微生物蛋白包括酵母、谷氨酸菌體等蛋白。通過物理、化學(xué)手段降解蛋白質(zhì)制備低聚肽，反應(yīng)迅速；反應(yīng)過程難以控制，低聚肽得率較低。生物降解法又分為微生物發(fā)酵法和酶法，其中微生物催發(fā)酵法本質(zhì)上是利用微生物分泌的蛋白酶降解蛋白質(zhì)，微生物種類繁多，分泌的酶種類也多，低聚肽得率較高，但后期分離目標(biāo)產(chǎn)物困難且反應(yīng)易受雜菌污染。酶法反應(yīng)專一迅速，條件溫和，低聚肽回收率較高。魚加工副產(chǎn)物酶法制備低聚肽所采用的酶通常包括外源酶和內(nèi)源酶。因此，文章將重點綜述魚加工副產(chǎn)物酶法（外源酶和內(nèi)源酶）制備低聚肽及其催化機(jī)制，以期為我國魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽的研究以及實際生產(chǎn)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)和理論參考。

1 低聚肽的功能及用途

1.1 低聚肽在食品方面應(yīng)用

低聚肽具有顯著的生物活性，且可以直接被胃腸道吸收，作為保健食品、功能性食品等。低聚肽可以減少肉類氧化程度，延長肉制品保質(zhì)期。研究人員發(fā)現(xiàn)低聚肽能夠有效促進(jìn)鈣的吸收，提高大鼠對鈣的利用率[6]。研究發(fā)現(xiàn)核桃低聚肽（WOPs）可以提高植物乳桿菌的存活率，可以作為穩(wěn)定劑添加至酸奶產(chǎn)品中。利用生物技術(shù)從天然蛋白質(zhì)物料中制備的低聚肽具有良好的呈味功能，可用于食品調(diào)味。此外，高F值低聚肽因其獨特的氨基酸組成及生理功能，可以被添加至嬰兒配方奶粉食品中[7]。低聚肽分子量小，結(jié)構(gòu)緊密，易于吸收，具有良好的溶解性及加工特性，可用于多種食品，如營養(yǎng)食品、臨床營養(yǎng)產(chǎn)品、糖果以及飲料，也可用于醬汁、湯、沙拉醬、肉類加工等其他食品產(chǎn)品，使用方便且本身無味，不影響食品口感。

1.2 低聚肽在醫(yī)藥方面應(yīng)用

低聚肽具有抗疲勞、延緩衰老、降血壓、防治糖尿病等功效，可以作為更安全有效的藥物以及醫(yī)用材料。低聚肽可保護(hù)小鼠的肝，減緩疲勞[8]。低聚肽能夠有效清除體內(nèi)過量的自由基以及有害物質(zhì)，修復(fù)細(xì)胞，有效防止機(jī)體衰老[9]。低聚肽還可以激活免疫活性，具有抑菌作用，能夠有效提高機(jī)體對外界病原體感染的抵抗作用。研究人員發(fā)現(xiàn)低聚肽可以通過調(diào)節(jié)抗凋亡信號通路預(yù)防肝細(xì)胞凋亡，改善高脂肪飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝病[10]。此外，低聚肽能夠調(diào)節(jié)血壓，降糖降脂，具有改善糖尿病的作用。

1.3 低聚肽在日化領(lǐng)域應(yīng)用

低聚肽為化妝品研究和應(yīng)用提供新方向和新思路，其功能越來越細(xì)分。低聚肽具有選擇性、有效性、安全性和耐受性等特點，被廣泛應(yīng)用于抗氧化、保濕、抑菌等方面。低聚肽在化妝品中的應(yīng)用不斷增加，低聚肽產(chǎn)品的種類和數(shù)量增加了80%以上[11]。低聚肽具有抗氧化、自我更新等作用，是抗衰老化妝品的理想選擇。體內(nèi)和臨床研究表明，含有生長因子、細(xì)胞因子、基質(zhì)因子或基質(zhì)因子樣肽的化妝品可以促進(jìn)皮膚年輕化并改善皮膚通透性[12]。國外研究人員從藍(lán)藻中提取了多種低聚肽代謝物，被廣泛應(yīng)用于抗皺劑、防曬霜、保濕劑和其他護(hù)膚品中[13]。已有研究表明：低聚肽也可用于化妝品，如抗皺、美白等；這是老年人皮膚化妝品的組成部分[14]。

2 魚加工副產(chǎn)物概述

地球上水體面積占地球表面積的71%以上。水體中蘊藏著大量的魚類資源，我國有魚類約3 000種，魚類資源非常豐富。2019年我國魚類產(chǎn)品總量約為4 000萬 t；其中海洋魚類產(chǎn)品總量約1 000萬 t，淡水魚類產(chǎn)品總量約3 000萬 t；魚類產(chǎn)品加工總量約為1 000萬 t，形成大量的副產(chǎn)物。魚含豐富的蛋白質(zhì)，如膠原蛋白、肌原纖維蛋白、肌基質(zhì)蛋白、血藍(lán)蛋白、肌球蛋白等，所含氨基酸類型豐富，包含人體必需氨基酸，如賴蘇氨酸等，且氨基酸模式是比較均衡的，故魚的蛋白質(zhì)可作為生產(chǎn)低聚肽的良好原料。不同魚類含有的必需氨基酸組成不同，制備得到的低聚肽具有多樣性。

魚頭、魚骨、魚內(nèi)臟、魚皮等魚加工副產(chǎn)物，約占魚總質(zhì)量的40%~55%，魚頭約占25%，魚骨約占12%，魚內(nèi)臟約占10%，魚皮約占5%[15]。魚頭富含蛋白質(zhì)、脂肪、維生素、鐵、鋅等微量元素。魚骨是魚的骨頭，一般包括中椎骨、邊肋骨、腹背尾鰭。魚骨里含有蛋白質(zhì)（膠原、骨膠原）、脂肪、水分以及豐富的鈣質(zhì)和微量元素（鐵、鋅、銅等）。魚內(nèi)臟主要含脂肪、蛋白質(zhì)、維生素等。魚皮是指魚的毛被、表皮、硬鱗、真皮和皮下組織。魚皮富含膠原蛋白。在魚頭、魚骨等魚加工副產(chǎn)物中，魚頭占魚體總質(zhì)量的比重最高，魚骨次之，魚皮最低。但不同魚其魚頭、魚骨、魚皮、魚內(nèi)臟占魚體總質(zhì)量的比例不同；同一種魚不同加工工藝得到的魚頭、魚骨、魚皮、魚內(nèi)臟占比也不同。魚加工副產(chǎn)物富含蛋白質(zhì)，以草魚為例，魚頭、魚骨、魚皮、魚內(nèi)臟、魚鰭和魚鱗的蛋白質(zhì)含量分別為13.8%，15.7%，22.5%，7.73%，16.1%和31.3%[16]。目前魚加工副產(chǎn)物，除部分用于飼料和化肥外，大量廢棄，這浪費了蛋白資源和污染了環(huán)境。如果可以合理利用這些蛋白質(zhì)資源，一方面保護(hù)了環(huán)境，另一方面，可以提升廢棄物附加值，延伸產(chǎn)業(yè)鏈，推動經(jīng)濟(jì)發(fā)展，因此研究開發(fā)魚加工副產(chǎn)物的蛋白資源制備低聚肽具有重要意義和價值。

3 酶法制備低聚肽

酶法是低聚肽制備的常用方法，也是一種公認(rèn)的安全方法。因此，該方法所制備得到的低聚肽被廣泛應(yīng)用于食品、化工和醫(yī)藥行業(yè)。魚加工副產(chǎn)物酶法制備低聚肽可采用的蛋白酶有外源酶和內(nèi)源酶，目前以外源酶為主。通常，外源酶主要從植物（胃蛋白酶和菠蘿蛋白酶）、動物（胰蛋白酶）、細(xì)菌（堿性蛋白酶和中性蛋白酶）和真菌（真菌蛋白酶）中獲得[17]。胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、堿性蛋白酶和木瓜蛋白酶均為內(nèi)切酶。胃蛋白酶具有廣泛特異性，可作用于芳香族氨基酸或亮氨酸的氨基或羧基參與形成的肽鍵；胰蛋白酶具有特異性，只斷裂賴氨酸或精氨酸的羧基參與形成的肽鍵；中性蛋白酶水解疏水性氨基酸殘基的肽鍵；堿性蛋白酶水解包含芳香族氨基酸殘基的肽鍵，特別是精氨酸、賴氨酸和苯丙氨酸等；木瓜蛋白酶具有低特異性，可作用于精氨酸、賴氨酸以及甘氨酸的羧基參與形成的肽鍵[18-19]。外源酶可以以游離酶和固定化酶形式降解魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽。外源酶也可以以單酶和多酶降解魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽。利用外源酶可高效、高純度制備低聚肽，但外源酶成本較高、酶容易失活。能夠降解魚蛋白的內(nèi)源酶主要有組織蛋白酶、膠原蛋白酶、鈣蛋白酶和絲氨酸蛋白酶，利用內(nèi)源酶可低成本制備低聚肽。但內(nèi)源酶的量往往有限，低聚肽制備的效率也較低。

3.1 外源酶

3.1.1 游離酶

目前魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽所用的蛋白酶以游離酶為主，游離酶具有易溶于水、與底物接觸面廣、酶活高等優(yōu)點，但存在與產(chǎn)物難分離、不能循環(huán)使用、易失活等缺點。應(yīng)用較多的游離蛋白酶有堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、菠蘿蛋白酶、真菌蛋白酶等。首先，魚頭、魚骨、魚內(nèi)臟、魚皮結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成差異明顯。其次，不同魚的魚頭、魚骨、魚內(nèi)臟、魚皮等魚加工副產(chǎn)物不一樣。最后，同一種魚不同加工方式所產(chǎn)生的副產(chǎn)物也有差異。因此，不同魚加工副產(chǎn)物所采用的游離酶不同，且其加工工藝也不同。游離酶用于魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽有不同的工藝，包括單酶和多酶水解法，見表1。

表1 魚加工副產(chǎn)物酶法制備低聚肽

單酶水解法是指通過添加單一蛋白酶降解魚加工副產(chǎn)物中蛋白質(zhì)制備低聚肽的方法。單一蛋白酶分解蛋白質(zhì)中特定結(jié)構(gòu)的肽鍵，降解蛋白質(zhì)，得到低聚肽。單酶水解法反應(yīng)過程容易控制，反應(yīng)條件相對簡單，反應(yīng)速度快。不同蛋白酶切割位點不同，降解蛋白質(zhì)后產(chǎn)生的低聚肽種類及活性也存在差異。魚加工副產(chǎn)物單酶制備低聚肽時，可以魚頭、魚骨、魚內(nèi)臟、魚皮等魚加工副產(chǎn)物的混合物作為原料，這省去魚加工副產(chǎn)物混合物的分離環(huán)節(jié)。利用堿性蛋白酶將鲅魚加工副產(chǎn)物直接降解成血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽[20]。魚加工副產(chǎn)物單酶制備低聚肽時，魚頭、魚骨、魚內(nèi)臟、魚皮等也可以單獨作為原料。以中性蛋白酶等處理羅非魚加工副產(chǎn)物，最高水解度達(dá)31.86%，得到不同滋味肽，呈現(xiàn)不同風(fēng)味[21]。在水解效果評價方面，單酶水解多用水解度表示，部分用自由基清除率表示。單酶水解魚蛋白效果并不好，且受底物結(jié)構(gòu)影響較大。由于酶的專一性，單酶水解法只會分解蛋白質(zhì)中特定結(jié)構(gòu)的肽鍵，蛋白質(zhì)水解不徹底。其降解蛋白質(zhì)，水解度介于12.5%~45.5%之間。單酶水解反應(yīng)不徹底，發(fā)酵液味苦，腥味較重，獲得的肽分子量較大，低聚肽不多。

多酶水解法是指多種蛋白酶共同降解蛋白質(zhì)分子制備低聚肽的方法。多酶水解蛋白質(zhì)，不同酶作用于蛋白質(zhì)的不同位點，優(yōu)勢互補，發(fā)揮不同酶各自的水解特性，有效提高蛋白質(zhì)的降解程度；不同選擇性和特異性的蛋白酶組合，可以降解得到更多更小分子的肽。此外，多酶水解法因水解相對徹底，不易產(chǎn)生過重的腥味。多酶水解法分為混合酶水解法和分步酶解法。

混合酶水解法中酶的種類、比例對蛋白質(zhì)的水解程度影響較大，影響所生成的低聚肽種類及結(jié)構(gòu)。混合酶水解法的水解度較單酶水解法高，見表1。中性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶以1∶2混合水解鮐魚的蛋白質(zhì)，最高水解度高達(dá)69.67%[23]。利用蛋白酶（用量1 200 U/g）和胰蛋白酶（用量2 400 U/g）混合酶降解馬面魚加工副產(chǎn)物魚皮制備血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽，在4%魚皮、40 ℃、pH 8.0條件下，酶解4 h效果最好[24]。以0.8%的風(fēng)味蛋白酶和堿性蛋白酶（1∶2）混合酶，在pH 8.5、55 ℃條件下反應(yīng)4.5 h，魚鱗蛋白水解后游離氨基態(tài)氮含量為1.085 mg/100 mL[25]。廉志清等[22]研究發(fā)現(xiàn)將中性蛋白酶與木瓜蛋白酶按1∶1添加2%，在pH 6~7之間、60 ℃、酶解時間4 h條件下，魚鱗蛋白水解后肽收率可達(dá)89.6%。在水解效果評價方面，混合酶水解多用水解度表示，其次是游離氨基態(tài)氮含量以及肽收率?；旌厦杆怍~蛋白可能會出現(xiàn)酶的相互抑制作用，導(dǎo)致反應(yīng)不夠徹底，獲得產(chǎn)物不多，且成本較高。

分步酶解法，即在反應(yīng)第一階段用蛋白酶，使蛋白質(zhì)降解為多肽鏈片段；第二階段添加肽酶進(jìn)一步水解多肽鏈末端的氨基酸，縮短肽鏈。常用的蛋白酶包括胃蛋白酶和堿性蛋白酶。常用的肽酶包括風(fēng)味蛋白酶、胰蛋白酶、復(fù)合蛋白酶等。分步酶解法降解蛋白質(zhì)不僅克服了單酶水解法水解不徹底的缺點，還在一定程度上預(yù)防了混合酶水解過程中多酶相互抑制的問題，同時還可以獲得含量更高的目標(biāo)產(chǎn)物低聚肽。分步酶解法水解魚的蛋白質(zhì)，由于不同酶的最適條件不同，反應(yīng)過程中需改變反應(yīng)條件，過程操作較為復(fù)雜。

酶的先后順序、添加量對蛋白質(zhì)的水解程度有較大影響，同時影響生成低聚肽的種類及結(jié)構(gòu)。用3%胃蛋白酶處理帶魚的蛋白質(zhì)，在35 ℃、pH 2條件下酶解時間3 h后。再用3%風(fēng)味蛋白酶繼續(xù)處理酶解液，在50 ℃、pH 7條件下再酶解3 h后，帶魚蛋白質(zhì)的水解度為40.51%[26]。利用分步酶解法降解真鯛魚骨為低聚肽，酶解條件：5%底物濃度、pH 6.0、800 U/g胰蛋白酶、45 ℃酶解4 h，再加入3 000 U/g風(fēng)味蛋白酶酶解4 h。水解度為42.91%[21]。酶解鰱魚加工副產(chǎn)物，第一步酶解條件：pH 7.0、2.5%中性蛋白酶、45 ℃水解5 h；第二步酶解的條件為2.0%風(fēng)味蛋白酶、55 ℃水解3 h，得到含肽的魚露。分步酶水解通常用水解度和自由基清除率表示魚蛋白的水解效果。

3.1.2 固定化酶

針對游離酶容易被抑制、具有不穩(wěn)定性、難以回收再利用、酶及其片段與食物結(jié)合容易導(dǎo)致過敏反應(yīng)等問題，研究人員開展了酶固定化工作。以固定化堿性蛋白酶與中性蛋白酶（比例1∶1）降解魚加工下腳料，酶解條件：54.5 ℃、pH 8.2、45 min，得到的小于1 500 Da的低聚肽占比81.94%[22]。磁性交聯(lián)酶聚集體技術(shù)制備的固定化堿性和中性蛋白酶共同降解鳀魚加工副產(chǎn)物，酶解條件：54.1 ℃、pH 7.8、45 min，固定化堿性與中性蛋白酶比例為1.5∶1，得到小于1 500 Da的低聚肽占比77.27%[27]。研究發(fā)現(xiàn)酶固定化可以有效解決以上問題。酶的固定化是指將酶固定在多孔顆粒表面，防止酶之間相互作用或者酶與外界分子之間相互作用，可以有效提高酶的穩(wěn)定性。此外，當(dāng)酶是多聚體酶時，酶失活第一步是亞單位解離，通過固定化酶的亞單位將有效防止酶失活。研究發(fā)現(xiàn)酶的固定化還可以提高酶的活性，調(diào)節(jié)酶的選擇特異性[28]。因此，酶的固定化不僅可以實現(xiàn)酶的重復(fù)利用，而且有望成為酶應(yīng)用于工廠生物催化劑的重要方法。固定化酶也存在阻礙反應(yīng)、降低酶活等缺點。

就酶在載體上的附著模式而言，固定化機(jī)制可分為物理（例如通過范德華力吸附等）、化學(xué)（例如酶的載體和氨基酸殘基之間的共價鍵合和交聯(lián)等）和物理化學(xué)（例如微膠囊化等）方法[29]。胰蛋白酶、糜蛋白酶以及堿性蛋白酶等因在食品生產(chǎn)中的廣泛用途，在蛋白酶固定化研究中也較為常見。已有載體成功應(yīng)用于胰蛋白酶的固定化，如聚（乙烯基胺）官能化二氧化硅微粒等。單一酶很難進(jìn)行復(fù)雜的催化反應(yīng)，而多酶催化的級聯(lián)反應(yīng)允許進(jìn)行復(fù)雜的反應(yīng)。多酶催化不僅減少了底物的運輸和反應(yīng)時間，還減少了由于擴(kuò)散引起的中間損失，并產(chǎn)生了更少的副產(chǎn)物和污染物。然而，整合這種多酶催化系統(tǒng)來實現(xiàn)復(fù)雜的反應(yīng)是困難的，因為不同種類的酶最佳使用條件是不同的。游離形式的多種酶難以回收，導(dǎo)致高成本和低生產(chǎn)效率，這限制了它們在工業(yè)應(yīng)用中的使用。與單酶固定化相比，多酶固定化還可以簡化下游分離，容易產(chǎn)生較純的產(chǎn)品。

3.2 內(nèi)源酶

能夠降解魚加工副產(chǎn)物中蛋白質(zhì)為低聚肽的酶除了外源酶，還有內(nèi)源酶。外源酶可以根據(jù)需要而添加不同種類的酶和不同用量，而內(nèi)源酶則不然，這限制了內(nèi)源酶在魚加工副產(chǎn)物中制備低聚肽工業(yè)上的應(yīng)用。內(nèi)源性蛋白酶通常以酶原形式存在于動物的內(nèi)臟消化系統(tǒng)以及肌肉細(xì)胞中，在細(xì)胞凋亡程序啟動后被激活降解動物蛋白。魚中的內(nèi)源性蛋白酶包括鈣激活蛋白酶、結(jié)締組織蛋白酶和溶酶體組織蛋白酶。魚類死亡后，細(xì)胞內(nèi)離子強度增加，膜系統(tǒng)破裂，肌漿中鈣離子釋激活鈣激活蛋白酶，組織蛋白酶釋放到細(xì)胞質(zhì)中，引起魚肉自溶和質(zhì)構(gòu)軟化現(xiàn)象[30]。

不同的內(nèi)源性蛋白酶降解魚蛋白的作用位點不同。根據(jù)所需鈣離子濃度，鈣激活蛋白酶可分為μ- Calpain級和m-Calpain級，主要作用于魚肉蛋白疏水性氨基酸上，尤其是纈氨酸和亮氨酸。溶酶體組織蛋白酶包括B、H、L和D等。溶酶體組織酶B被認(rèn)為是魚類死亡質(zhì)地軟化的最主要原因。研究發(fā)現(xiàn)它可以快速降解肌間線蛋白，也可以降解肌球蛋白中的重鏈（MHC）。溶酶體組織蛋白酶H可作用于魚蛋白的疏水性氨基酸殘基，然而活性較低，一般認(rèn)為對魚肌肉蛋白的降解作用忽略不計。溶酶體組織蛋白酶L可以降解魚的多種蛋白，包括肌球蛋白、肌鈣蛋白等。溶酶體組織蛋白酶D可優(yōu)先切割魚蛋白的疏水氨基酸殘基，可以降解MHC，對魚肌原纖維蛋白的降解作用可以忽略不計[30]。

4 結(jié)語

隨著我國魚加工量的增加，魚加工副產(chǎn)物將不斷增加。魚加工副產(chǎn)物中蛋白質(zhì)制備的低聚肽具有安全、分子量小、易吸收、相容性好等優(yōu)點，也可以實現(xiàn)魚加工副產(chǎn)物的高值化轉(zhuǎn)化和利用。酶法因其環(huán)保、綠色、高效等優(yōu)點，被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)水解領(lǐng)域。魚加工副產(chǎn)物酶法制備低聚肽展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。隨著酶工程和材料工程的不斷發(fā)展，魚加工副產(chǎn)物酶法制備低聚肽未來發(fā)展方向有如下三個方面：一是游離酶法水解魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽時，酶降解過程的調(diào)控和酶解工藝的優(yōu)化，減少降解過程腥味、苦味物質(zhì)等的生成，同時降低酶的用量和成本。固定化酶法水解魚加工副產(chǎn)物制備低聚肽發(fā)展?jié)摿薮螅韫タ斯潭ɑ姑富钕陆档碾y題。構(gòu)建基于酶的高效反應(yīng)器，包括攪拌罐式、流動床式和膜式反應(yīng)器，實現(xiàn)低聚肽的連續(xù)化生產(chǎn)；同時加強對新型固定化酶技術(shù)及載體的探討，提高固定化酶活性，降低生產(chǎn)成本。二是發(fā)展基于超聲波、脈沖電場、微波輔助萃取以及亞臨界水水解等新興技術(shù)輔助的酶法降解魚加工副產(chǎn)物蛋白質(zhì)制備低聚肽的技術(shù)和納米酶技術(shù)。納米酶是具有酶催化特性的納米材料，具有制備簡單、尺寸可控和功能可調(diào)的特點。隨著納米技術(shù)的發(fā)展，納米材料的優(yōu)勢賦予了納米酶可調(diào)節(jié)的多功能性，發(fā)展?jié)摿薮蟆Ｈ浅浞滞诰騼?nèi)源酶降解魚加工副產(chǎn)物蛋白質(zhì)制備低聚肽的應(yīng)用潛力，利用內(nèi)源酶可以免去用酶成本。因此，利用我國豐富的魚加工副產(chǎn)物資源，深入研究魚加工副產(chǎn)物蛋白質(zhì)制備低聚肽，有利于促進(jìn)我國魚產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。