血清HMGB1和SAA對(duì)宮頸癌術(shù)后發(fā)生預(yù)后不良的診斷價(jià)值

王秋梅，劉曉慶，孫姍姍，徐 鳴，張文倩，俞劍娣

復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院婦科，上海 200090

宮頸癌是婦科常見的惡性腫瘤，早期常常無典型癥狀和體征，在出現(xiàn)典型的癥狀和體征后，一般已經(jīng)浸潤性生長，預(yù)后不佳，嚴(yán)重危害患者健康，給社會(huì)和患者家庭帶來沉重負(fù)擔(dān)[1]。到目前為止，預(yù)測(cè)宮頸癌預(yù)后的生物標(biāo)記物的靈敏度和特異度仍較低，因此尋找有效的評(píng)價(jià)宮頸癌預(yù)后的分子標(biāo)記物，對(duì)于宮頸癌的精準(zhǔn)治療、延長生存期和提高生存質(zhì)量具有重要意義[2]。炎癥與婦科腫瘤的關(guān)系日益受到關(guān)注，有研究證實(shí)陰道炎癥和宮頸癌具有明顯關(guān)系，炎癥細(xì)胞因子在宮頸癌的連續(xù)性進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用[3]。高遷移率族蛋白B1(HMGB1)可以與高級(jí)糖基化終產(chǎn)物等受體結(jié)合，激活多種細(xì)胞信號(hào)通路，導(dǎo)致癌癥的發(fā)生和發(fā)展[4-5]。HMGB1作為一種促炎因子，可以導(dǎo)致機(jī)體處于一種慢性炎癥狀態(tài)，導(dǎo)致上皮惡性腫瘤的發(fā)展，并且發(fā)現(xiàn)HMGB1具有促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的潛能[6]。血清淀粉樣蛋白A(SAA)在多種惡性腫瘤中均有研究，在肺癌、結(jié)腸癌、食管癌和胃癌中呈高表達(dá)，并且發(fā)現(xiàn)血清SAA水平高的人群發(fā)生胃癌的風(fēng)險(xiǎn)更高[7]。本研究通過檢測(cè)宮頸癌患者血清HMGB1和SAA的表達(dá)，觀察其對(duì)宮頸癌預(yù)后的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年1月至2019年12月在本院行宮頸癌根治術(shù)的98例患者為宮頸癌組。所有患者均行病理學(xué)檢查確診為宮頸癌。98例患者中絕經(jīng)54例，未絕經(jīng)44例；年齡35～79歲，平均(54.63±12.75)歲；病理類型：鱗狀細(xì)胞癌38例，腺癌41例和鱗腺癌19例。納入標(biāo)準(zhǔn)：宮頸癌為首次確診；均行宮頸癌根治術(shù)；術(shù)后病理切緣為陰性且無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。排除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)前有放療或者化療；圍術(shù)期死亡或者非腫瘤原因死亡；不能進(jìn)行病理分期；有智力障礙或者精神性疾?。换悸匝装Y性疾病和免疫性疾病。選擇同期在本院體檢健康的健康者45例為健康對(duì)照組，其中絕經(jīng)23例、未絕經(jīng)22例，年齡36～78歲、平均(55.44±11.48)歲。兩組年齡和月經(jīng)狀態(tài)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。所有患者均簽署知情同意書，本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過。

1.2方法

1.2.1血液標(biāo)本的留存和檢測(cè) 健康體檢者在門診、宮頸癌患者入院時(shí)和術(shù)后7 d采集肘部靜脈血5 mL左右，在常溫下放置，采用離心機(jī)離心后，取上清液放置在-80 ℃的冰箱中保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清HMGB1、SAA和糖抗原125(CA125)水平，所有試劑盒購自北京貝爾生物工程股份有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.2.2隨訪 術(shù)后患者均通過電話、門診和微信等進(jìn)行隨訪，隨訪時(shí)間從術(shù)后第1天開始，截止時(shí)間2022年4月30日。術(shù)后第1～2年，每3個(gè)月隨訪1次；術(shù)后第3年開始，每6個(gè)月隨訪1次。隨訪中患者在隨訪期內(nèi)出現(xiàn)終點(diǎn)事件如復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和死亡為預(yù)后不良，否則為預(yù)后良好。

1.2.3觀察指標(biāo) 觀察宮頸癌組和健康對(duì)照組血清HMGB1和SAA水平變化；進(jìn)行宮頸癌患者術(shù)后血清HMGB1和SAA水平與術(shù)前的比較；分析宮頸癌患者術(shù)后預(yù)后不良的影響因素；分析血清HMGB1和SAA水平對(duì)宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良的診斷效能，以及血清HMGB1和SAA之間的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1兩組血清SAA、HMGB1和CA125水平的比較 宮頸癌組術(shù)前血清SAA、HMGB1和CA125水平明顯高于健康對(duì)照組(P<0.01)；宮頸癌組術(shù)后7 d血清SAA、HMGB1和CA125水平均較術(shù)前明顯降低(P<0.01)。見表1。

表1 兩組血清SAA、HMGB1和CA125水平的比較

2.2不同宮頸癌預(yù)后患者各臨床指標(biāo)比較 隨訪后出現(xiàn)預(yù)后不良的患者有27例，為預(yù)后不良組，其他71例為預(yù)后良好組。從表2可知，與預(yù)后良好組相比，宮頸癌預(yù)后不良組的不同腫瘤最大徑比例、不同腫瘤分化程度比例、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例以及血清SAA、HMGB1、CA125水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而不同月經(jīng)狀態(tài)比例、年齡、不同病理類型比例和不同宮頸浸潤深度比例在預(yù)后良好組和預(yù)后不良組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同宮頸癌預(yù)后患者各臨床指標(biāo)比較(n或

2.3宮頸癌患者術(shù)后預(yù)后不良的多因素分析 將單因素分析中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)，如腫瘤最大徑(>4 cm=1，≤4 cm=0)、不同腫瘤分化程度(中、低分化=1，高分化=0)、腫瘤分期(Ⅱb～ⅢIa期=1，Ⅰb～Ⅱa期=0)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(有=1；無=0)，以及以宮頸癌患者術(shù)前血清SAA(>79.35 mg/L=1,≤79.35 mg/L=0)、HMGB1(>22.76 pg/μL=1,≤22.76 pg/μL=0)、CA125(>33.03 U/mL=1,≤33.03 U/mL=0)水平均值進(jìn)行賦值，以是否發(fā)生預(yù)后不良為因變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示血清HMGB1>22.76 pg/μL和SAA>79.35 mg/L是宮頸癌患者術(shù)后預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

表3 宮頸癌患者術(shù)后預(yù)后不良的多因素分析

2.4血清HMGB1和SAA水平診斷宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良的診斷效能 血清HMGB1和SAA水平對(duì)宮頸癌患者術(shù)后發(fā)生預(yù)后不良的診斷效能明顯高于CA125(P<0.05)。根據(jù)宮頸癌隨訪后是否發(fā)生不良預(yù)后將上述指標(biāo)進(jìn)行Logistic回歸分析得到方程Y=0.53×XHMGB1+0.31×XSAA-38.93，作為聯(lián)合檢測(cè)指標(biāo)，聯(lián)合檢測(cè)診斷宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良的靈敏度為92.6%，特異度為93.0%，曲線下面積(AUC)為0.975，AUC明顯高于HMGB1(Z=2.463，P<0.05)和SAA(Z=2.559，P<0.05)單項(xiàng)檢測(cè)，而血清HMGB1和SAA之間的AUC差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 血清HMGB1和SAA水平對(duì)宮頸癌患者預(yù)后的診斷效能分析

2.5宮頸癌患者血清HMGB1和SAA水平的相關(guān)性分析 宮頸癌患者血清HMGB1水平與SAA呈正相關(guān)(r=0.642，P<0.01)。見圖1。

圖1 宮頸癌患者血清HMGB1水平與SAA的相關(guān)性分析

3 討 論

惡性腫瘤的早期診斷和術(shù)后隨訪需要一個(gè)能夠反映腫瘤細(xì)胞生長的生物學(xué)指標(biāo)。宮頸癌與炎癥具有密切的聯(lián)系，持續(xù)慢性炎癥在宮頸癌的演進(jìn)過程中發(fā)揮重要作用，腫瘤的微環(huán)境形成離不開炎癥，長期慢性炎癥導(dǎo)致癌基因的存活狀態(tài)發(fā)生改變，最終出現(xiàn)內(nèi)環(huán)境失衡，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[8]。因此炎癥標(biāo)記物對(duì)宮頸癌預(yù)后的判斷是一個(gè)值得研究的問題。在此背景下，本研究發(fā)現(xiàn)，與預(yù)后良好組相比，宮頸癌預(yù)后不良組的不同腫瘤最大徑比例、不同腫瘤分化程度比例、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移比例以及血清SAA、HMGB1、CA125水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)血清HMGB1>22.76 pg/μL和SAA>79.35 mg/L是宮頸癌患者術(shù)后預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。通過ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)SAA和HMGB1水平在宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良的診斷效能明顯高于CA125。因此選擇血清SAA和HMGB1兩個(gè)指標(biāo)對(duì)宮頸癌患者預(yù)后進(jìn)行研究。

本研究顯示宮頸癌組術(shù)前血清HMGB1水平明顯高于健康對(duì)照組，且術(shù)后7 d血清HMGB1水平出現(xiàn)明顯降低，說明HMGB1參與了宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展，血清HMGB1水平的升高與宮頸癌具有一定的聯(lián)系，可能與腫瘤細(xì)胞死亡后被動(dòng)將HMGB1釋放入血或者細(xì)胞外的免疫細(xì)胞主動(dòng)釋放有關(guān)[9]。在一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn)宮頸癌組織的HMGB1表達(dá)水平明顯高于相鄰非癌癥組織，患者HMGB1可能是宮頸癌治療的潛在靶點(diǎn)，HMGB1參與了宮頸癌轉(zhuǎn)移過程[10]。說明血清HMGB1在宮頸癌進(jìn)展的監(jiān)測(cè)方面具有一定的臨床價(jià)值。本研究表明血清HMGB1水平與宮頸癌預(yù)后有關(guān)，是宮頸癌預(yù)后不良的影響因素，與文獻(xiàn)[11]報(bào)道血清HMGB1水平是宮頸癌預(yù)后的獨(dú)立影響因素的結(jié)果一致。當(dāng)血清HMGB1為24.79 pg/μL時(shí)，在診斷宮頸癌術(shù)后發(fā)生預(yù)后不良的靈敏度為71.0%，特異度為91.5%，AUC為0.883，說明血清HMGB1水平對(duì)宮頸癌術(shù)后發(fā)生預(yù)后不良具有較高的診斷效能?，F(xiàn)有研究顯示血清HMGB1水平在鑒別慢性胃炎和宮頸癌方面具有較高的診斷效能，其靈敏度為70%，特異度為96%[12]，而在宮頸癌預(yù)后方面的應(yīng)用報(bào)道并不多。

本研究表明血清SAA水平在宮頸癌組明顯高于健康對(duì)照組，宮頸癌術(shù)后7 d血清SAA水平較術(shù)前明顯降低，說明SAA水平與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展具有一定的聯(lián)系，與文獻(xiàn)[13]報(bào)道宮頸癌患者血清SAA水平升高的結(jié)果一致。SAA是由白細(xì)胞介素-6或白細(xì)胞介素-1和腫瘤壞死因子引起、誘導(dǎo)肝臟合成的蛋白質(zhì)。由于腫瘤的發(fā)展和轉(zhuǎn)移與炎癥反應(yīng)具有較大的關(guān)系[14]，并且發(fā)現(xiàn)血清SAA在不同的腫瘤階段水平不同，并認(rèn)為血清SAA水平可以作為腫瘤不同階段的監(jiān)測(cè)指標(biāo)[15]。本研究結(jié)果顯示宮頸癌預(yù)后不良患者血清SAA水平明顯高于預(yù)后良好組，并且發(fā)現(xiàn)血清SAA水平是宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良的影響因素。這與文獻(xiàn)[7]報(bào)道的結(jié)果類似：血清SAA水平在宮頸癌患者顯著升高，可作為宮頸癌分化、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。本研究顯示血清SAA為77.88 mg/L時(shí)，診斷宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良的靈敏度為92.6%，特異度為71.8%，AUC為0.876，說明血清SAA診斷宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良具有較高的效能。本研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合HMGB1和SAA檢測(cè)對(duì)宮頸癌預(yù)后不良有更高的診斷效能，明顯高于單項(xiàng)指標(biāo)，說明這兩個(gè)指標(biāo)在診斷宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良方面有一定的互補(bǔ)性。而相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)血清HMGB1和SAA水平呈正相關(guān)，說明炎癥指標(biāo)之間具有某種聯(lián)系，其確切機(jī)制需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，血清HMGB1和SAA水平對(duì)于診斷宮頸癌術(shù)后預(yù)后不良有一定的參考價(jià)值。