妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥孕婦血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平與新生兒急性肺損傷的關(guān)系

龔敏琴

復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院產(chǎn)科，上海 200090

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥(ICP)是妊娠期特有的并發(fā)癥，臨床上主要表現(xiàn)為皮膚瘙癢和黃疸等癥狀，可造成早產(chǎn)、新生兒窒息，甚至死亡等嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生[1]?，F(xiàn)有研究顯示ICP孕婦所生產(chǎn)的新生兒超過(guò)13%發(fā)生急性肺損傷(ALI)，影響新生兒肺部有效氧氣交換，新生兒機(jī)體血氧含量降低，引起一系列并發(fā)癥的發(fā)生[2]。因此，如何早期發(fā)現(xiàn)ALI是降低新生兒并發(fā)癥的關(guān)鍵。血小板活化因子(PAF)是強(qiáng)效的脂質(zhì)炎癥介質(zhì)，在ALI疾病過(guò)程中具有重要作用[3]；內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子-1(ESM-1)為內(nèi)皮細(xì)胞上的生物活性因子，參與了內(nèi)皮損傷和炎癥反應(yīng)的過(guò)程，是內(nèi)皮損傷的潛在標(biāo)記物[4]；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)是一種多功能的細(xì)胞因子，參與機(jī)體的炎癥反應(yīng)和組織損傷等多種疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程[5]。本研究檢測(cè)ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平，并觀察其診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的效能，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2020年1月至2022年1月在本院診斷為ICP的孕婦128例作為ICP組，年齡23～35歲、平均(26.32±2.28)歲，孕周36～40周、平均(38.27±1.03)周，孕次1～5次、平均(2.53±0.47)次。選擇同期在本院產(chǎn)檢的正常孕婦45例作為對(duì)照組，年齡22～36歲、平均(26.52±2.14)歲，孕周36～40周、平均(38.84±1.08)周，孕次1～5次、平均(2.42±0.52)次。所有入組者對(duì)本研究均知情同意，簽署知情同意書(shū)；本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核通過(guò)。納入標(biāo)準(zhǔn)：妊娠期ICP的診斷符合《妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥診療指南：2015》[6]中的標(biāo)準(zhǔn)；單胎妊娠；在本院產(chǎn)檢，資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：孕前有肝臟疾病、肝功能異常和膽汁代謝異常；存在其他妊娠合并癥，如胎膜早破、妊娠期高血壓和妊娠期糖尿病等；孕婦有先天性心臟?。蝗焉锲诤喜⒅匾腥?。兩組年齡、孕期和孕次等基線資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1血液標(biāo)本的留取和檢測(cè) 患者入院后或孕婦入院產(chǎn)檢時(shí)抽取肘靜脈血約5 mL，采用離心機(jī)離心10 min(3 000 r/min，半徑為9 cm)，取上清液放置在-70 ℃的冰箱中待測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平；采用酶循環(huán)法測(cè)定總膽汁酸(TBA)水平。試劑盒購(gòu)自武漢賽培生物科技有限公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.2.2分組 根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[6]，將ICP患者分為輕度組和重度組。血清TBA≥10 μmol/L且<40 μmol/L，以皮膚瘙癢為主要臨床癥狀為輕度；血清TBA≥40 μmol/L，以嚴(yán)重瘙癢為主要臨床癥狀，伴有多胎妊娠、復(fù)發(fā)性ICP、曾因ICP致圍生兒死亡等情況者為重度。

參考相關(guān)文獻(xiàn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，將ALI分為暫時(shí)性呼吸增快癥(TTPN)和新生兒呼吸窘迫綜合征(RDS)。TTPN：呼吸表淺、發(fā)紺、呼吸暫停、呼吸頻率>80次/分、肺部濕啰音(出生后2 h)和三凹征，具備以上3項(xiàng)即可診斷為TTPN；新生兒RDS：氧合指數(shù)<200 mm Hg，呼吸頻率>80次/分和胸部X線片顯示雙肺彌漫性浸潤(rùn)性肺水腫改變。根據(jù)生產(chǎn)的新生兒是否發(fā)生ALI，將ICP患者分為ALI組和無(wú)ALI組。

1.3觀察指標(biāo) 比較ICP組和對(duì)照組血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平；比較ICP不同嚴(yán)重程度患者及生產(chǎn)不同嚴(yán)重程度ALI新生兒的ICP患者中血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平；分析血清PAF、ESM-1和TGF-β1診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的效能。

2 結(jié) 果

2.1ICP組和對(duì)照組血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較 ICP組血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，見(jiàn)表1。

表1 ICP組和對(duì)照組血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較

2.2不同嚴(yán)重程度ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較 根據(jù)ICP的嚴(yán)重程度將患者分為輕度組93例，重度組35例。重度組血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平明顯高于輕度組(P<0.01)，見(jiàn)表2。

表2 不同嚴(yán)重程度ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較

2.3生產(chǎn)的新生兒有無(wú)發(fā)生ALI的ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較 根據(jù)生產(chǎn)的新生兒是否發(fā)生ALI，將ICP患者分為ALI組31例，無(wú)ALI組97例。ALI組ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平顯著高于無(wú)ALI組(P<0.01)，見(jiàn)表3。

表3 生產(chǎn)的新生兒有無(wú)發(fā)生ALI的ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1比較

2.4生產(chǎn)不同嚴(yán)重程度ALI新生兒的ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較 根據(jù)新生兒出生后ALI的診斷標(biāo)準(zhǔn)，分為TTPN組21例和RDS組10例。RDS組ICP患者血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平明顯高于TTPN組(P<0.01)，見(jiàn)表4。

表4 生產(chǎn)不同嚴(yán)重程度ALI新生兒的ICP患者血清 PAF、ESM-1和TGF-β1水平比較

2.5血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的效能 根據(jù)ICP患者生產(chǎn)的新生兒是否發(fā)生ALI進(jìn)行二元Logistics回歸分析，得方程Y= 0.6×XPAF+0.65×XESM-1+0.11×XTGF-β1-34.60,作為聯(lián)合檢測(cè)指標(biāo)，聯(lián)合檢測(cè)診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的靈敏度為80.6%，特異度為100.0%，AUC為0.965，AUC明顯高于PAF(Z=3.567，P<0.01)、ESM-1(Z=2.537，P<0.05)、TGF-β1(Z=2.377，P<0.05)單項(xiàng)檢測(cè)的AUC，而PAF、ESM-1和TGF-β1單項(xiàng)檢測(cè)的AUC之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表5和圖1。

圖1 血清PAF、ESM-1和TGF-β1診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的ROC曲線

表5 血清PAF、ESM-1和TGF-β1診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的效能

3 討 論

ICP患者膽汁在體內(nèi)淤積引起的毒性反應(yīng)破壞肝細(xì)胞，導(dǎo)致丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高，此類患者發(fā)生不良妊娠結(jié)局的風(fēng)險(xiǎn)高于正常孕婦，其中新生兒ALI是常見(jiàn)的不良妊娠結(jié)局[8]?，F(xiàn)有研究證實(shí)ICP患者由于膽汁在體內(nèi)淤積，導(dǎo)致胎兒肺組織出現(xiàn)損傷，表現(xiàn)為肺血管內(nèi)皮出現(xiàn)損傷和肺血管痙攣，從而影響到新生兒的肺功能[9]。如何早期診斷新生兒ALI對(duì)于改善新生兒的預(yù)后具有重要臨床意義。

本研究發(fā)現(xiàn)ICP組血清PAF水平明顯高于對(duì)照組，并且隨著ICP疾病嚴(yán)重程度的升高而升高，說(shuō)明血清PAF水平能反映ICP的嚴(yán)重程度。現(xiàn)已知PAF是一種內(nèi)源性磷脂介質(zhì)，具有廣泛的生物活性，參與ALI的發(fā)生，主要與下列因素有關(guān)[10-12]：PAF通過(guò)激活各種炎癥細(xì)胞，促使細(xì)胞因子大量釋放，造成血管內(nèi)皮細(xì)胞和基底膜損傷，導(dǎo)致ALI的發(fā)生；PAF直接引起肺毛細(xì)血管收縮，導(dǎo)致血管內(nèi)靜水壓升高，造成血管通透性增加，使血管內(nèi)皮功能發(fā)生障礙；PAF通過(guò)激活各種炎癥通路引起血管緊張素A2的釋放和高氣道反應(yīng)，加劇肺水腫；PAF參與了核轉(zhuǎn)錄因子的激活，后者是發(fā)生ALI的關(guān)鍵性轉(zhuǎn)錄因子。本研究還發(fā)現(xiàn)ICP患者ALI組血清PAF水平明顯高于無(wú)ALI組，并且發(fā)現(xiàn)PAF為19.4 μg/L時(shí)，其診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的靈敏度為71.0%，特異度為77.3%，AUC為0.805，說(shuō)明血清PAF水平在診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI時(shí)具有較高的效能。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)RDS組ICP患者血清PAF水平明顯高于TTPN組，說(shuō)明血清PAF水平是判斷新生兒ALI嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)，與文獻(xiàn)[13]報(bào)道血清PAF水平是判斷肺損傷的重要指標(biāo)的結(jié)論一致。

本研究發(fā)現(xiàn)ICP組血清ESM-1水平明顯高于對(duì)照組，并且隨著ICP嚴(yán)重程度升高而升高，說(shuō)明血清ESM-1是反映ICP嚴(yán)重程度的指標(biāo)。現(xiàn)已知ESM-1是主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌的一種特異性蛋白質(zhì)，主要在呼吸道上皮細(xì)胞、肺毛細(xì)血管細(xì)胞和肺動(dòng)脈中大量表達(dá)，參與了機(jī)體的炎癥、血管新生和組織損傷等病理生理過(guò)程[14]。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)炎癥反應(yīng)時(shí)，炎癥介質(zhì)大量釋放，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷，表現(xiàn)為大量的ESM-1合成，參與血管內(nèi)皮損傷的病理生理過(guò)程。本研究發(fā)現(xiàn)ALI組ICP患者血清ESM-1水平明顯高于無(wú)ALI組，并且發(fā)現(xiàn)血清ESM-1為14.15 μg/L時(shí)，對(duì)診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI具有較高的效能，與文獻(xiàn)[15]報(bào)道血清ESM-1水平是ALI重要診斷指標(biāo)的結(jié)論一致。本研究顯示血清ESM-1水平隨著ALI疾病嚴(yán)重程度升高而升高，說(shuō)明血清ESM-1水平同樣也是判斷新生兒ALI嚴(yán)重程度的指標(biāo)。當(dāng)炎癥介質(zhì)作用于肺血管內(nèi)皮細(xì)胞時(shí)引起ESM-1大量釋放，而ESM-1表達(dá)的升高能夠明顯抑制白細(xì)胞的黏附和遷移，降低對(duì)組織的損傷[16]，從而達(dá)到保護(hù)肺組織的作用。

本研究顯示ICP組血清TGF-β1水平明顯高于對(duì)照組，并且隨著ICP嚴(yán)重程度的升高而升高，說(shuō)明血清TGF-β1水平是反映ICP嚴(yán)重程度的指標(biāo)。現(xiàn)已知TGF-β1在炎癥修復(fù)和細(xì)胞外基質(zhì)的降解過(guò)程中具有重要作用[17]。在一項(xiàng)關(guān)于ALI的研究中發(fā)現(xiàn)TGF-β1能夠誘導(dǎo)氣道炎癥反應(yīng)，對(duì)氣道上皮細(xì)胞具有破壞作用，促進(jìn)膠原蛋白和糖蛋白的大量聚集，導(dǎo)致氣道平滑肌增生，引起氣道重塑[18]。本研究顯示ALI組ICP患者血清TGF-β1水平明顯高于無(wú)ALI組，并且發(fā)現(xiàn)血清TGF-β1為110.53 ng/L時(shí)，對(duì)診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI具有較高的效能，其靈敏度為83.9%，特異度為83.5%，AUC為0.871，同時(shí)發(fā)現(xiàn)RDS組ICP患者血清TGF-β1水平明顯高于TTPN組，說(shuō)明血清TGF-β1水平是判斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的指標(biāo)，而且是判斷新生兒ALI嚴(yán)重程度的指標(biāo)。本研究顯示聯(lián)合檢測(cè)血清PAF、ESM-1和TGF-β1水平診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的靈敏度為80.6%，特異度為100.0%，AUC為0.965，明顯高于PAF、ESM-1和TGF-β1單項(xiàng)檢測(cè)，說(shuō)明這3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)能夠明顯提高對(duì)ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的診斷效能，各項(xiàng)指標(biāo)在診斷ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI時(shí)具有某種互補(bǔ)性，可能與均為反映內(nèi)皮損傷的指標(biāo)有關(guān)，其具體機(jī)制需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，血清PAF、ESM-1和TGF-β1是反映ICP嚴(yán)重程度的指標(biāo)，參與了ALI的發(fā)生、發(fā)展，這3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)有助于提高對(duì)ICP患者生產(chǎn)的新生兒發(fā)生ALI的診斷效能。