孕中期水通道蛋白1、白細(xì)胞介素37表達(dá)水平對(duì)高危孕婦發(fā)生子癇前期的預(yù)測(cè)價(jià)值

席翠萍，楊 潔

(1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院,陜西 延安 716000;2.銅川市人民醫(yī)院,陜西 銅川 727000)

子癇前期是孕中晚期特有的以高血壓為顯著特征的并發(fā)癥，病情可持續(xù)進(jìn)展，嚴(yán)重威脅孕產(chǎn)婦及圍產(chǎn)兒的健康[1]。雖然關(guān)于子癇前期的研究較多，但確切發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，對(duì)子癇前期進(jìn)行有效預(yù)測(cè)，及時(shí)進(jìn)行適當(dāng)干預(yù)，是改善預(yù)后的關(guān)鍵所在，然而當(dāng)前臨床缺乏有效、可靠和經(jīng)濟(jì)的預(yù)警指標(biāo)。近年來(lái)，子癇前期高危因素在此病發(fā)生中的預(yù)測(cè)價(jià)值引起部分學(xué)者的重視，聯(lián)合高危因素的多因子聯(lián)合篩查子癇前期高危孕婦，展示出良好前景。水通道蛋白1(Aquaporin,AQP1)是唯一在內(nèi)皮細(xì)胞膜上表達(dá)且具有調(diào)控水轉(zhuǎn)運(yùn)的水通道蛋白，其表達(dá)或功能的改變與高血壓有關(guān)[2]。研究[3]顯示，子癇前期的發(fā)生、發(fā)展非常依賴AQP1介導(dǎo)的水代謝紊亂、腹水形成和胎盤(pán)損傷。有研究[4]證明，子癇前期患者存在過(guò)度炎性反應(yīng)，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，影響胎盤(pán)血管形成，是此病病因的重要組成部分。白細(xì)胞介素-37(Interleukin-37,IL-37)是一種新發(fā)現(xiàn)的抗炎因子，能抑制炎性因子表達(dá)而發(fā)揮抗炎效應(yīng)，具有保護(hù)胎盤(pán)血管內(nèi)皮功能的生物學(xué)作用，在子癇前期孕婦中降低，可能用于此病的預(yù)測(cè)[5]。鑒于具有子癇前期危險(xiǎn)因素的孕婦外周循環(huán)中是否存在有AQP1、IL-37的表達(dá)變化，兩者是否與子癇前期發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，鮮有相關(guān)報(bào)道。對(duì)此，本研究旨在探討孕中期AQP1、IL-37對(duì)高危孕婦發(fā)生子癇前期的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年1月至2021年12月于兩院接受規(guī)律產(chǎn)檢的174例具有子癇前期高危因素孕婦作為研究對(duì)象，經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：?jiǎn)翁ト焉?；年齡20～45歲；初次產(chǎn)檢孕周<15周；具有子癇前期病史、糖尿病史、慢性高血壓、年齡>40歲等高危因素。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心腦血管疾病或主要臟器功能不全者；長(zhǎng)期服用免疫調(diào)節(jié)劑或糖皮質(zhì)激素者；患有免疫系統(tǒng)疾病者；近期有全身性感染史者。根據(jù)是否發(fā)生子癇前期進(jìn)行分組，分為子癇前期組和非子癇前期組。其中子癇前期組38例，年齡21～44歲，平均(29.86±4.57)歲；產(chǎn)次0～3次，平均(1.02±0.68)次；孕前體重指數(shù)20～28 kg/m2，平均(23.81±1.35)kg/m2；非子癇前期組136例，年齡20～43歲，平均(28.04±3.95)歲；產(chǎn)次0～3次，平均(1.13±0.54)次；孕前體重指數(shù)20～28 kg/m2，平均(22.97±1.28)kg/m2。兩組上述一般情況比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(均P>0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 所有孕婦均于孕15～20周及孕24～28周，被抽取清晨空腹靜脈血5 ml，放置于抗凝試管中，進(jìn)行離心處理，轉(zhuǎn)速為3500 r/min，持續(xù)離心10 min，分離并提取血清，使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清AQP1、IL-37水平，檢測(cè)儀器為美國(guó)BIO-RAD伯樂(lè)-550型全自動(dòng)酶標(biāo)儀，檢驗(yàn)試劑盒分別來(lái)源于上海西唐生物科技有限公司(批號(hào)18645)、上海仁捷生物科技有限公司(批號(hào)20367)，嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)，在空白孔調(diào)零并讀取吸光度值(波長(zhǎng)450 nm)，描繪標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算血清AQP1、IL-37水平，每份血清測(cè)2孔，取平均值。在孕24～28周，測(cè)量孕婦收縮壓、舒張壓，留取孕婦24 h尿液，使用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特AU680自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)1 ml尿液中白蛋白含量，乘以24 h尿液量，得出24 h尿蛋白定量。

1.3 觀察指標(biāo) 以定期產(chǎn)檢及電話聯(lián)系的方式進(jìn)行隨訪，直至分娩；以孕20周后出現(xiàn)高血壓，收縮壓≥140 mmHg及(或)舒張壓≥90 mmHg，伴有尿蛋白陽(yáng)性(24 h尿蛋白定量≥0.3 g或隨機(jī)尿蛋白定量≥0.1 g/L)，作為判斷子癇前期的標(biāo)準(zhǔn)[6]。比較兩組一般資料、孕24～28周血壓、24 h尿蛋白定量、分娩孕周、新生兒出生體重、血清AQP1、IL-37水平；通過(guò)受試者工作特征曲線(ROC)下面積(AUC)評(píng)價(jià)血清AQP1聯(lián)合IL-37對(duì)子癇前期的預(yù)測(cè)效能。

2 結(jié) 果

2.1 兩組孕24～28周收縮壓、舒張壓、24 h尿蛋白定量比較 所有孕婦均獲得隨訪，其中子癇前期組孕24～28周收縮壓、舒張壓均高于非子癇前期組，24 h尿蛋白定量大于非子癇前期組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組孕24～28周收縮壓、舒張壓、24 h尿蛋白定量比較

2.2 兩組分娩孕周、新生兒出生體重比較 子癇前期組分娩孕周、新生兒出生體重均小于非子癇前期組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組分娩孕周、新生兒出生體重比較

2.3 兩組血清AQP1、IL-37表達(dá)水平比較 子癇前期組孕15～20周及孕24～28周血清AQP1、IL-37表達(dá)水平均高于非子癇前期組(P<0.05),見(jiàn)表3。

表3 兩組血清AQP1、IL-37表達(dá)水平比較

2.4 相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，子癇前期孕婦孕24～28周收縮壓、舒張壓、24 h尿蛋白定量與孕15～20周血清AQP1水平呈正相關(guān)(均P<0.05)，與IL-37水平呈負(fù)相關(guān)(均P<0.05)；分娩孕周、新生兒出生體重與血清AQP1水平呈負(fù)相關(guān)(均P<0.05)，與IL-37水平呈正相關(guān)(均P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 AQP1、IL-37與血壓、24 h尿蛋白定量及部分妊娠結(jié)局的相關(guān)性

2.5 AQP1聯(lián)合IL-37預(yù)測(cè)子癇前期的ROC曲線分析 經(jīng)ROC曲線(圖1)分析，孕15～20周血清AQP1聯(lián)合IL-37預(yù)測(cè)高危孕婦發(fā)生子癇前期的AUC為0.918(OR：0.275，95%CI：0.080～0.973)，明顯大于單一指標(biāo)AQP1的0.671(OR：0.452，95%CI：0.347～0.892)和IL-37的0.711(OR：0.192，95%CI：0.457～0.946)，經(jīng)De Long檢驗(yàn)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=2.152、2.681，P=0.000)。

圖1 AQP1聯(lián)合IL-37預(yù)測(cè)子癇前期的ROC曲線

3 討 論

子癇前期被公認(rèn)為導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的主要原因之一，是多機(jī)制和多因素致病，高齡、肥胖、子癇前期病史等均是此病的危險(xiǎn)因素，但其預(yù)測(cè)此病的臨床價(jià)值有限。如何尋找與子癇前期高危因素相結(jié)合，較為準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)和簡(jiǎn)便的子癇前期預(yù)測(cè)方法，是當(dāng)前臨床研究的難點(diǎn)。目前認(rèn)為，全身小血管痙攣引起血管內(nèi)皮損傷或功能異常，增加血管通透性，導(dǎo)致體液及蛋白質(zhì)滲漏、胎盤(pán)缺血缺氧，啟動(dòng)了子癇前期發(fā)生的病理機(jī)制[7-8]。Bremme等[9]研究顯示，重度子癇前期孕婦更容易并發(fā)羊水量減少及腹水形成。因此，介導(dǎo)水代謝紊亂、腹水形成和羊水減少的AQP1，具有抑制滋養(yǎng)細(xì)胞侵入，導(dǎo)致子宮及胎盤(pán)組織缺氧的生物學(xué)功能，可能是子癇前期早期預(yù)測(cè)的關(guān)鍵因子。從本研究結(jié)果可知，子癇前期組孕15～20周及孕24～28周血清AQP1水平均高于非子癇前期組，與Karaszi等[10]研究顯示子癇前期孕婦胎盤(pán)組織中AQP1陽(yáng)性表達(dá)率明顯升高的這一結(jié)果相符，預(yù)示著孕15～20周血清AQP1水平升高可能與子癇前期的發(fā)生及病情進(jìn)展有關(guān)。出現(xiàn)上述結(jié)果的原因，考慮如下：①高水平表達(dá)的AQP1可誘導(dǎo)胎盤(pán)中滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入子宮動(dòng)脈，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞及滋養(yǎng)細(xì)胞增殖，影響血管壁的完整性和通透性，使胎盤(pán)重鑄障礙并缺血缺氧，出現(xiàn)一系列子癇前期癥狀[11]；②AQP1可影響母胎液體交換和羊水重吸收，導(dǎo)致羊水減少、腹水形成，促進(jìn)子癇前期發(fā)生。

越來(lái)越多研究顯示，子癇前期的本質(zhì)是一種過(guò)度的炎癥反應(yīng)[12]。鑒于IL-37能抑制多種致炎因子表達(dá)，具有顯著的抗炎效應(yīng)，對(duì)于保護(hù)胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞和血管內(nèi)皮功能均具有積極作用，可能在子癇前期中介導(dǎo)負(fù)反饋機(jī)制[13]。李慧敏等[14]研究顯示，IL-37可能拮抗AQP1增強(qiáng)炎癥介質(zhì)表達(dá)的生物學(xué)功能，在子癇前期發(fā)生、發(fā)展中起到有效的保護(hù)性作用。Yuan等[15]研究指出，高危孕婦血清IL-37水平降低發(fā)生在高血壓及蛋白尿出現(xiàn)之前。也有學(xué)者檢測(cè)羊水IL-37的濃度顯著降低時(shí)，會(huì)在妊娠過(guò)程中對(duì)血管內(nèi)皮功能產(chǎn)生損傷，進(jìn)而誘導(dǎo)子癇前期發(fā)生[16]。然而上述研究均未能明確孕中期血清IL-37對(duì)子癇前期發(fā)病的預(yù)測(cè)價(jià)值，能否對(duì)子癇前期的發(fā)病起到保護(hù)性，仍存在爭(zhēng)議。從本研究表3結(jié)果可知，子癇前期組孕15～20周及孕24～28周血清IL-37水平均較非子癇前期組明顯降低，提示孕15～20周血清IL-37水平的變化與子癇前期疾病本身有關(guān)，這可能與IL-37在滋養(yǎng)細(xì)胞增殖和植入過(guò)程中起增強(qiáng)作用，促進(jìn)胎盤(pán)血管生長(zhǎng)有關(guān)。與此同時(shí)，本研究通過(guò)Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果提示子癇前期孕婦高水平的AQP1和低水平的IL-37可導(dǎo)致血壓升高、尿蛋白加重和胎兒生長(zhǎng)受限，減小分娩時(shí)孕周，究其原因，考慮在于孕15～20周血清AQP1水平升高和IL-37水平降低，引起胎盤(pán)血管內(nèi)皮功能紊亂、過(guò)度的炎性反應(yīng)、拮抗胎盤(pán)血管生成，導(dǎo)致胎盤(pán)缺血缺氧，進(jìn)而影響胎兒生長(zhǎng)發(fā)育。

子癇前期是一種異質(zhì)性疾病，血管生成不平衡和過(guò)度炎癥反應(yīng)均可以導(dǎo)致子癇前期，單一指標(biāo)難以準(zhǔn)確預(yù)測(cè)子癇前期，除與復(fù)雜的病因、發(fā)病機(jī)制有關(guān)外，還與研究對(duì)象有關(guān)。關(guān)于子癇前期的高危因素較多，如高齡、肥胖、既往有子癇前期病史等，而任何一項(xiàng)高危因素均會(huì)顯著增大此病發(fā)生的可能性，顯然高危因素在子癇前期預(yù)測(cè)中的價(jià)值不容忽視[17-18]。已有報(bào)道顯示，在具有子癇前期高危因素孕婦中進(jìn)行AQP1、IL-37檢測(cè)，對(duì)子癇前期的預(yù)測(cè)價(jià)值更高[19]。在本研究中，孕15～20周血清AQP1聯(lián)合IL-37預(yù)測(cè)高危孕婦發(fā)生子癇前期的AUC為0.918，預(yù)測(cè)效能較好。在臨床實(shí)踐中，血清AQP1、IL-37檢測(cè)具有無(wú)創(chuàng)、經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)，作為孕中期的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，發(fā)現(xiàn)血清AQP1、IL-37水平異常的孕婦可與具有子癇前期高危因素的孕婦一樣，應(yīng)強(qiáng)化子癇前期的篩查，進(jìn)行更密切的監(jiān)護(hù)，以便及早發(fā)現(xiàn)子癇前期，予以相應(yīng)干預(yù)，改善妊娠結(jié)局。汪洪友等[20]研究發(fā)現(xiàn)，高水平的AQP1結(jié)合低水平的IL-37可以預(yù)測(cè)子癇前期，與本研究結(jié)果相契合，但該學(xué)者認(rèn)為血清AQP1、IL-37水平在一定期間會(huì)有峰值出現(xiàn)，因此建議下一步研究需觀察具有子癇前期高危因素孕婦血清AQP1、IL-37水平的變化趨勢(shì)，可能會(huì)有更高級(jí)別的證據(jù)支持?；诒狙芯拷Y(jié)果，有助于加深對(duì)子癇前期發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識(shí)，為從蛋白或基因水平尋找干預(yù)靶點(diǎn)，采取AQP1拮抗劑和IL-37增強(qiáng)劑用于防治子癇前期提供新途徑。

綜上所述，孕15～20周的具有子癇前期危險(xiǎn)因素孕婦血清AQP1水平升高，IL-37水平降低，對(duì)子癇前期發(fā)生均具有預(yù)測(cè)價(jià)值，兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)的效能較好，值得臨床予以重視。本研究的不足之處在于樣本量有限，存在結(jié)果偏倚的可能性，在后續(xù)的研究中，應(yīng)該擴(kuò)大研究規(guī)模，增加樣本量，分析AQP1、IL-37在子癇前期發(fā)病中的作用機(jī)制，確定孕15～20周血清AQP1、IL-37對(duì)子癇前期的預(yù)測(cè)界值，為臨床確定兩項(xiàng)指標(biāo)的正常值范圍提供更可靠的依據(jù)。