湖南省市售茶葉中24種農(nóng)藥殘留的檢測與分析

吳 茜，陳珉珉，林仲儀

（株洲市食品藥品檢驗所，湖南 株洲 412000）

茶葉中含有多種生物活性成分，如多酚、色素、多糖、生物堿、游離氨基酸和皂苷［1－6］，具有抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗癌、心血管保護(hù)、抗糖尿病、抗肥胖和肝臟保護(hù)等多種健康功能［7－12］，被譽(yù)為“世界三大飲料之一”［13］。中國的茶文化源遠(yuǎn)流長，有這樣一句美譽(yù)：茶為國飲，湖南為先［14］。湖南省是產(chǎn)茶大省，也是茶葉消費和出口大省，茶葉種植規(guī)模不斷擴(kuò)大，茶葉的質(zhì)量安全問題受到越來越多的關(guān)注［15］。農(nóng)藥殘留是目前我國茶葉質(zhì)量安全中最為突出的共性問題，嚴(yán)重影響我國茶產(chǎn)業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展［16］。平衡農(nóng)藥使用與茶葉質(zhì)量、安全和消費者健康至關(guān)重要［17］。有關(guān)數(shù)據(jù)表明：茶樹、茶葉使用的農(nóng)藥已經(jīng)超過了80種,其中主要是化學(xué)類農(nóng)藥，而生物類及其他類農(nóng)藥較少［18］?；瘜W(xué)類農(nóng)藥按其化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為無機(jī)類和有機(jī)類農(nóng)藥，其中有機(jī)類農(nóng)藥包括有機(jī)氯農(nóng)藥、有機(jī)磷農(nóng)藥、有機(jī)金屬類農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等［19］。有機(jī)磷類農(nóng)藥的毒性高以及存在環(huán)境污染與累積毒性的風(fēng)險，是食品安全監(jiān)管的重要化學(xué)物質(zhì)［20］。擬除蟲菊酯類是一類新型仿生農(nóng)藥，相比于有機(jī)磷、有機(jī)氯、氨基甲酸酯類農(nóng)藥，具有高效、低毒，殺蟲譜廣，活性較高的特點［21］。近年來的研究表明菊酯類農(nóng)藥對環(huán)境和人體仍具有潛在危害［22－24］。JIE F等［25］研究發(fā)現(xiàn)，隨機(jī)采自杭州、昆明和廈門的茶葉樣品中，農(nóng)藥殘留檢出率為88.8%，超標(biāo)率為17.5%，檢出32種農(nóng)藥殘留，其中聯(lián)苯菊酯污染頻次最多。劉琳等［26］研究發(fā)現(xiàn)，在323份茶葉樣品中，檢出農(nóng)藥殘留161份，檢出率為49.8%，超標(biāo)樣品7份，超標(biāo)率2.2%。聯(lián)苯菊酯檢出頻次最高，其檢出率為38.3%。易守福等［27］研究發(fā)現(xiàn)，對湖南省14個地級市抽檢的1220批茶葉中，592批次茶葉檢出農(nóng)藥殘留，檢出率為48.5%，其中5批次茶葉農(nóng)藥殘留超標(biāo)，超標(biāo)率為0.4%。本研究利用氣相色譜（GC）對湖南省市售的189份茶葉樣品中18種有機(jī)磷類和6種擬除蟲菊酯類共24種農(nóng)藥殘留情況進(jìn)行檢測，并利用Excel對測定結(jié)果進(jìn)行整理和分析，以期為湖南省茶葉質(zhì)量與安全監(jiān)管提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

2021－2022年對湖南省茶葉市場、超市、農(nóng)貿(mào)市場和網(wǎng)店進(jìn)行隨機(jī)取樣，共計189份。每份樣品取樣量不少于1 kg，-20℃保存?zhèn)溆?。涉及的茶葉種類包括綠茶、紅茶、黑茶、白茶、青茶、黃茶（表1）。

表1 茶葉樣品信息Table 1 Information on sampled tea products

1.2 試劑與儀器設(shè)備

1.2.1 主要試劑

水胺硫磷、甲胺磷、乙酰甲胺磷、毒死蜱、敵敵畏、殺撲磷、氧化樂果、樂果、甲基對硫磷、對硫磷、高效氯氟氰菊酯和氯氟氰菊酯12種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（壇墨質(zhì)檢）；二秦農(nóng)、蠅毒磷、硫線磷、馬拉硫磷、氯唑磷、伏殺磷、滅菌磷、三唑磷、聯(lián)苯菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯11種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）；甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品（濃度為100 μg·mL-1，上海安譜）；乙腈［色譜純，霍尼韋爾貿(mào)易（上海）］；丙酮和氯化鈉（分析純，國藥集團(tuán)）；正己烷（分析純，天津市化學(xué)試劑研究所）。

1.2.2 主要儀器設(shè)備

Agilent Tech 7890B氣相色譜儀，配有FPD和ECD檢測器（美國安捷倫）；QGC-12T氮吹儀（上海泉島）；TC16-WS臺式高速離心機(jī)（湖南湘儀）；RE-2000B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮）；HGB550高速組織搗碎機(jī)（美國waring）；FW-135粉碎機(jī)（北京永光明）；XSE205Du電子天平［梅特勒-托利多儀器（上海）］；弗羅里硅土固相萃取小柱（Agela Technology Florisil SPE column，1000 mg·mL-1）。

1.3 試驗方法

主要參照NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》［28］和GB 2763-2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》［29］，具體如下。

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

有機(jī)磷類：量取水胺硫磷、甲胺磷、乙酰甲胺磷、毒死蜱、敵敵畏、殺撲磷、氧化樂果、樂果、甲基對硫磷、對硫磷、二秦農(nóng)、蠅毒磷、硫線磷、馬拉硫磷、氯唑磷、伏殺磷、滅菌磷、三唑磷各100 μL，將其配成10 mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液。分別移取上述混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液 0.02、0.05、0.08、0.1、0.2 mL于1.5 mL進(jìn)樣瓶中，分別將其稀釋至1 mL，待GC測定分析。

擬除蟲菊酯類：量取高效氯氟氰菊酯、氯氟氰菊酯、聯(lián)苯菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯、甲氰菊酯各100 μL，將其配成10 mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液。分別移取上述混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.05、0.08、0.1、0.2、0.5 mL于1.5 mL進(jìn)樣瓶中，分別將其稀釋至1 mL，待GC測定分析。

1.3.2 樣品前處理

隨機(jī)稱取茶葉樣品200 g，粉碎混勻。稱取2.00 g樣品加入20 mL乙腈，高速勻漿提取 2 min，過濾至裝有3～6 g氯化鈉的具塞量筒中，殘渣再用20 mL乙腈再次提取，合并乙腈層，旋至近干，用2 mL正己烷復(fù)溶，弗羅里硅土固相萃取小柱用5 mL丙酮-正己烷溶液（1∶9，V∶V）活化后，加入待凈化液，用10 mL丙酮-正己烷溶液（1∶9，V∶V）洗脫，收集洗脫液，氮吹濃縮近干，用正己烷復(fù)溶定容至2 mL。

1.3.3 儀器條件

有機(jī)磷類：儀器設(shè)備為Agilent 7890B氣相色譜儀，色譜柱為DB-1701（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口類型為分流進(jìn)樣（分流比4∶1），溫度為220℃；檢測器類型為FPD，溫度為250℃；柱溫箱升溫程序為150℃保持3min 以6℃·min-1升至250℃保持4 min；載氣流量為2.0 mL·min-1。

擬除蟲菊酯類：儀器設(shè)備為Agilent7890B氣相色譜儀，色譜柱為RTX-1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；進(jìn)樣口類型為分流進(jìn)樣（分流比5∶1），溫度為220℃；檢測器類型為ECD，溫度為320℃；柱溫箱升溫程序為150℃保持2 min以6℃·min-1升至275℃保持23 min；載氣流量為1.5 mL·min-1。

2 結(jié)果與分析

2.1 24種農(nóng)藥殘留GC測定效果

將處理后茶葉樣品按1.3.3上GC測試。以農(nóng)藥殘留標(biāo)樣濃度為橫坐標(biāo)，以農(nóng)藥殘留色譜峰面積為縱坐標(biāo)，各農(nóng)藥保留時間、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、相關(guān)系數(shù)、最小檢出限、加標(biāo)回收率、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，見表2；其中有機(jī)磷類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度梯度為：20、50、80、100、200 ng·mL-1，空白茶樣加標(biāo)濃度梯度“低加標(biāo)、中加標(biāo)、高加標(biāo)：20、40、100 ng·mL-1”；擬除蟲菊酯類標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度梯度為：50、80、100、200、500 ng·mL-1，空白茶樣加標(biāo)濃度梯度“低加標(biāo)、中加標(biāo)、高加標(biāo)：50、100、200 ng·mL-1”。有機(jī)磷類農(nóng)藥標(biāo)樣色譜圖和茶樣色譜圖見圖1、2。擬除蟲菊酯類農(nóng)藥標(biāo)樣色譜圖和茶樣色譜圖見圖3、4。由表2可以看出，18種有機(jī)磷類和6種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行方法驗證，線性方程相關(guān)系數(shù)R2范圍0.987～0.999，回收率72.56%～112.38%，基本滿足農(nóng)藥殘留檢測回收率要求［30］。

圖1 18種有機(jī)磷標(biāo)樣色譜圖（100 ng·mL-1）Fig. 1 Chromatogram of 18 organophosphorus pesticide standards（100 ng·mL-1）

圖3 6種擬除蟲菊酯標(biāo)樣色譜圖（100 ng·mL-1）Fig. 3 Chromatograms of 6 pyrethroid standards（100 ng·mL-1）

表2 24種農(nóng)藥線性方程、回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差等Table 2 Linear equations, percent recovery, and relative standard deviations for 24 pesticides

（接表2）

圖2 茶葉樣品中有機(jī)磷色譜圖Fig. 2 Chromatogram of organophosphorus pesticide in tea

圖4 茶葉樣品中擬除蟲菊酯色譜圖Fig. 4 Chromatograms of pyrethroids in tea

2.2 湖南省市售茶葉農(nóng)藥殘留檢測結(jié)果

在茶類和產(chǎn)地都有所代表性的189份茶葉樣品中，95份樣品中檢出農(nóng)藥殘留，檢出率為50.3%。依據(jù)GB 2763-2021《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對農(nóng)殘陽性檢出樣品進(jìn)行判定，結(jié)果表明所有樣品的農(nóng)藥殘留量均低于國家標(biāo)準(zhǔn)限定的要求，合格率為100%。在涉及的24種農(nóng)藥中，僅有4種農(nóng)藥被檢出，其中有機(jī)磷類只有毒死蜱被檢出，擬除蟲菊酯類有聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯被檢出。檢出情況見表3。

表3 湖南省市售茶葉農(nóng)藥殘留檢出情況Table 3 Detection of pesticide residues in teas marketed in Hunan

（接表3）

（接表3）

（接表3）

3 結(jié)論與討論

3.1 檢出率分析

茶葉種類差異。綠茶抽樣44份，檢出27份，檢出率為61.4%；紅茶抽樣38份，檢出20份，檢出率為52.6%；黑茶抽樣34份，檢出20份，檢出率為58.8%；白茶抽樣30份，檢出14份，檢出率為46.7%；青茶抽樣23份，檢出7份，檢出率為30.4%；黃茶抽樣20份，檢出7份，檢出率為35.0%。由此可知，不同茶類的檢出率的高低排序為綠茶＞黑茶＞紅茶＞白茶＞黃茶＞青茶。

農(nóng)藥種類差異。毒死蜱檢出7份，檢出率3.7%；聯(lián)苯菊酯檢出41份，檢出率21.7%；氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯檢出58份，檢出率30.7%；甲氰菊酯檢出33份，檢出率17.5%；由此可見，不同農(nóng)藥種類的檢出率的高低排序為氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯＞聯(lián)苯菊酯＞甲氰菊酯＞毒死蜱。雖然毒死蜱的檢出率最低，但是檢出毒死蜱殘留的均為產(chǎn)自湖南的黃茶。

3.2 檢出值分析

在檢出有農(nóng)藥殘留的95份茶葉樣品中，毒死蜱的檢出值大于0.5 mg·kg-1（1/4限量值）的有0份；聯(lián)苯菊酯的檢出值大于1.25 mg·kg-1（1/4限量值）的有0份；氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的檢出值大于3.75 mg·kg-1（1/4限量值）的有0份；甲氰菊酯的檢出值大于1.25 mg·kg-1（1/4限量值）的有7份，其中大于2.5 mg·kg-1（1/2限量值）的有1份，產(chǎn)地均為福建，如表3所示。所以，產(chǎn)自福建的茶葉中甲氰菊酯的殘留存在超限量值的風(fēng)險。

綜上所述，所有樣品均符合國家標(biāo)準(zhǔn)要求，合格率100%。檢出率分析表明，不同茶葉種類中，綠茶檢出率最高，黑茶其次；不同農(nóng)藥種類中，氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯的檢出率最高，聯(lián)苯菊酯其次，少量檢出毒死蜱，應(yīng)避免使用。