變應(yīng)原免疫治療誘導(dǎo)免疫耐受形成機(jī)制

黃歡歡，郭胤仕

變應(yīng)原免疫治療(allergen immunotherapy，AIT)是世界過敏組織(world allerge organization，WAO)推薦的治療過敏性疾病“四位一體”方法的重要組成部分，主要針對(duì)由IgE介導(dǎo)的變應(yīng)性疾病，包括過敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)、過敏性哮喘(allergic asthma，AA)及特應(yīng)性皮炎(allergic dermatitis，AD)等，是目前唯一能改變過敏性疾病進(jìn)程的治療方法。AIT主要包括皮下免疫治療(subcutaneous immunotherapy，SCIT)和舌下免疫治療(sublingual immunotherapy，SLIT)兩種。

已有研究顯示，AIT能調(diào)節(jié)2型免疫應(yīng)答(type 2 immunity response)反應(yīng)向正?；较蜣D(zhuǎn)變，誘導(dǎo)機(jī)體建立起變應(yīng)原特異性免疫耐受，達(dá)到長期的疾病修飾作用。本文就近年來有關(guān)AIT治療機(jī)制的研究進(jìn)行綜述。

1 AIT對(duì)適應(yīng)性免疫的影響

1.1 AIT對(duì)T細(xì)胞的影響

1.1.1 AIT下調(diào)部分Th2細(xì)胞數(shù)量并減少IL- 4分泌：AIT抑制2型輔助T細(xì)胞(type 2 T help cells，Th2)是誘導(dǎo)免疫耐受的重要環(huán)節(jié)，而CD3CD4Treg在免疫耐受的產(chǎn)生及維持中發(fā)揮核心作用。

從知識(shí)背景和工作內(nèi)容可以看出，青年編纂的工作除了具有服務(wù)性以外，還具有研究性和學(xué)術(shù)性。因此，編纂的任職經(jīng)歷也成為了這些青年職員治學(xué)道路上的重要環(huán)節(jié)。具體而言，青年編纂的治學(xué)呈現(xiàn)出三個(gè)特點(diǎn)。

Wambre等觀察到Th2細(xì)胞亞群還存在一定的異質(zhì)性，其中包含與過敏性疾病相關(guān)的表型，研究認(rèn)為CD27CRTH2Th2細(xì)胞亞群被認(rèn)為在過敏反應(yīng)中起核心作用，在過敏患者體內(nèi)也能檢測到更多CD45CD49dCD27CRTH2CD161Th2細(xì)胞。AIT能優(yōu)先耗竭這一Th2細(xì)胞亞群，從而減輕過敏反應(yīng)。

總之，AIT能通過誘導(dǎo)致耐受性樹突狀細(xì)胞的形成，恢復(fù)pDC產(chǎn)生INF-a的能力，輔助生成Treg，減少Th2細(xì)胞的產(chǎn)生，誘導(dǎo)免疫耐受。

1.1.2 AIT誘導(dǎo)Treg形成：CD3CD4Treg是一群具有抑制能力的T細(xì)胞亞群，可以分為胸腺來源的CD25FOXP3Tregs(tTregs)和接受抗原刺激后在胸腺外產(chǎn)生的外周來源Tregs(pTregs)兩大類，后者包括：外周誘導(dǎo)的FOXP3T細(xì)胞、產(chǎn)生IL- 10的Treg細(xì)胞(Tr1)、產(chǎn)生TGF-β的Th3細(xì)胞。AIT能增加IL- 10Treg的比例，并促進(jìn)其產(chǎn)生抑制性細(xì)胞因子IL- 10，通過組胺受體、CTLA- 4，PD- 1等參與的多項(xiàng)機(jī)制，抑制Th2反應(yīng)及其他效應(yīng)細(xì)胞反應(yīng)，這些變化與臨床癥狀改善有關(guān)。IL- 10是主要的細(xì)胞因子，能通過下調(diào)Th1細(xì)胞產(chǎn)生IL- 2、TNF-γ和Th2細(xì)胞產(chǎn)生IL- 4、IL- 5，減弱單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的抗原呈遞能力，降低樹突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)表面共刺激分子的表達(dá)，誘導(dǎo)Treg的產(chǎn)生等途徑，促進(jìn)特異性IgG4產(chǎn)生，AIT后誘導(dǎo)的IgG4與IgG2一起，同IgE競爭結(jié)合肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞上的過敏原，負(fù)調(diào)節(jié)超敏反應(yīng)。據(jù)報(bào)道，SLIT后外周血中IL- 10 mRNA 表達(dá)水平的增加預(yù)示著更好的臨床反應(yīng)，被認(rèn)為是潛在的預(yù)測療效的生物標(biāo)志物。

AIT能夠誘導(dǎo)樹突狀細(xì)胞的耐受性表型，表現(xiàn)為低水平的MHC-II和共刺激因子CD80、CD86，增加Treg，減少Th0向Th2細(xì)胞的分化。另外，AIT能暫時(shí)增加DC上的FcεRI表達(dá)，這可能參與促進(jìn)血清IgE的清除，對(duì)免疫穩(wěn)態(tài)的產(chǎn)生也起著正向作用。小鼠實(shí)驗(yàn)表明，F(xiàn)cεRI能增加DC通過表面IgE的抗原捕獲能力，導(dǎo)致T細(xì)胞的短暫增殖，隨之而來的是抗原特異T細(xì)胞的系統(tǒng)性缺失，形成免疫耐受。

DC在過敏性氣道炎癥中起到重要作用。首先，在小鼠實(shí)驗(yàn)中可以觀察到，暴露于變應(yīng)原后，DC在Toll樣受體(Toll-like receptors，TLR)4的激活及基質(zhì)金屬蛋白酶9的作用下迅速募集到小鼠肺部；其次，DCs還能提供豐富的促炎趨化因子(如IL- 1β，IL- 12，IL- 6和TNF)；另外，組織內(nèi)的未成熟樹突狀細(xì)胞(immature dendritic cell，iDC)可通過固有的模式識(shí)別受體(pattern-recognition receptors，PRRs)，如TLRs 或C型凝集素受體(C-type-lectin receptors，CLRs)，識(shí)別并呈遞抗原，促進(jìn)iDC的成熟。成熟DC表面MHC和共刺激因子(如CD40，CD80，CD86)上調(diào)，形成更多的MHC-肽復(fù)合物，吸引效應(yīng)T細(xì)胞到肺；同時(shí)CCR7 等歸巢受體上調(diào)，加速DC向淋巴結(jié)遷移，并進(jìn)入次級(jí)淋巴器官的T細(xì)胞區(qū)域。成熟DC攜帶抗原，能有效刺激T細(xì)胞的增殖、分化。

1.2.2 試驗(yàn)組 在對(duì)照組患者的治療基礎(chǔ)上，給試驗(yàn)組的患者增加熱療的治療手段，即對(duì)試驗(yàn)組患者采用WB-1型腫瘤熱療機(jī)，對(duì)患者的患側(cè)進(jìn)行深部熱療，可以根據(jù)具體病人對(duì)溫度的耐受情況來調(diào)整溫度，每次熱療持續(xù)30 min，1次/d，以1周為1個(gè)療程，一共治療3個(gè)療程。1.3檢測方法

1.1.3 AIT調(diào)整Tfh和Tfr細(xì)胞平衡：目前研究還發(fā)現(xiàn)在次級(jí)淋巴器官中存在濾泡輔助T細(xì)胞(follicular helper T cells，Tfh)，其高表達(dá)CXCR5、PD- 1、Bcl- 6、IL- 21，負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)抗體類型轉(zhuǎn)換，促進(jìn)親和力成熟和 B 細(xì)胞記憶生成。IgE的產(chǎn)生需要IL- 4Tfh，在過敏性疾病患者外周循環(huán)中也能觀察到IL- 13Tfh增加。而濾泡調(diào)節(jié)T細(xì)胞(follicular regulatory T cells，Tfr)可以通過抑制早期生發(fā)中心反應(yīng)抑制Tfh介導(dǎo)的B細(xì)胞反應(yīng)，但具體是通過抑制免疫球蛋白的類型轉(zhuǎn)換，或減弱IgEB 細(xì)胞活化程度來達(dá)到這一效果，目前尚無定論。AIT能重新建立Tfh和Tfr細(xì)胞之間的平衡，調(diào)節(jié)抗體類型轉(zhuǎn)換，減少IgE的產(chǎn)生，防止過敏的發(fā)生。

1.2 AIT對(duì)B細(xì)胞的影響

1.2.2 AIT誘導(dǎo)Breg形成：目前研究發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞參與免疫耐受形成。目前人體中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了三種亞型的Breg，其中CD19CD5CD1dBreg和CD19CD24CD38Breg抑制Th1細(xì)胞，但以CD19CD25CD71CD73為特征的適應(yīng)性調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(inducible Breg cells，iBreg)可能在維持免疫耐受中發(fā)揮作用。iBreg可以產(chǎn)生抗炎細(xì)胞因子，主要為IL- 10，抑制免疫。van de Veen等通過針對(duì)毒液免疫治療的養(yǎng)蜂人研究發(fā)現(xiàn)，在免疫治療后3～4月，患者體內(nèi)特異性IL- 10Breg的頻率增加了2～5倍，同健康養(yǎng)蜂人相仿，IgG4B細(xì)胞頻率也明顯增加；IL- 10Breg可以直接抑制CD4T細(xì)胞反應(yīng)，并顯著上調(diào)IgG4。純化的IL- 10Breg較IL- 10Breg多產(chǎn)生15倍的IgG4，但其他類型免疫球蛋白產(chǎn)生率不變。

在AIT后，在IL- 4、IL- 10同時(shí)存在的情況下，IgE類別轉(zhuǎn)換為IgG4，患者體內(nèi)特異性的IgG4抗體，即“封閉抗體”滴度升高，免疫耐受的產(chǎn)生與其直接抑制IgE活性相關(guān)。

固有淋巴樣細(xì)胞(innate lymphoid cells，ILCs)是一類主要存在于組織中，參與固有免疫的淋巴細(xì)胞，表達(dá)CD25和CD127，但不表達(dá)其他免疫細(xì)胞譜系的標(biāo)志，在體內(nèi)廣泛參與病原體感染、過敏反應(yīng)、組織修復(fù)、腫瘤發(fā)生等過程。

1.2.1 AIT誘導(dǎo)封閉抗體形成：B細(xì)胞通過產(chǎn)生封閉抗體在免疫耐受中起核心作用。在根據(jù)一項(xiàng)針對(duì)黑麥草花粉(ryegrass pollen，RGP)過敏患者的臨床實(shí)驗(yàn)，對(duì)經(jīng)過連續(xù)兩個(gè)或三個(gè)療程的季前舌下免疫治療的患者使用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)外周血單核細(xì)胞和血清免疫分析結(jié)果顯示，SLIT增加了RGP特異性血清IgG2和IgG4以及IgG2和IgG4記憶B細(xì)胞的頻率，而對(duì)IgE記憶B細(xì)胞沒有影響。

2 AIT對(duì)固有免疫的影響

2.1 對(duì)樹突狀細(xì)胞的影響

DC作為抗原呈遞細(xì)胞，將適應(yīng)性免疫與固有免疫聯(lián)系在一起。它能持續(xù)監(jiān)測體內(nèi)環(huán)境，呈遞抗原給區(qū)域淋巴結(jié)，調(diào)控初始T細(xì)胞(na?ve T cells，Th0)向Th1、Th2、Th17細(xì)胞等的分化，對(duì)抗原作出應(yīng)答。

根據(jù)一項(xiàng)使用活體顯微鏡檢查Treg-DC相互作用的研究表明，Tr1還能與DCs特異性相互作用，破壞它們與抗原特異性T細(xì)胞的穩(wěn)定接觸。

但同時(shí)，DC在維持免疫耐受中也起著重要作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在選擇性耗竭小鼠體內(nèi)的CD11c細(xì)胞后，Th1、Th17細(xì)胞反應(yīng)性增加，誘發(fā)了強(qiáng)烈的自身免疫癥狀，例如脾腫大、淋巴結(jié)病等。 對(duì)卵清蛋白“脫敏治療”后小鼠的研究發(fā)現(xiàn)，肺CD103DCs可通過上調(diào)視黃醛脫氫酶(retinal dehydrogenase，RALDH)的活性，增加視黃酸(retinoic acid，RA)，輔助生成Foxp的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cells，Treg)，誘導(dǎo)免疫耐受。

2)移動(dòng)通信網(wǎng)絡(luò)由無線接入點(diǎn)AP、天線及移動(dòng)通信核心網(wǎng)組成，負(fù)責(zé)將攝像頭、通話器及RFID讀寫器上報(bào)給網(wǎng)管中心的果蔬運(yùn)輸過程的實(shí)時(shí)信息。同時(shí)，將網(wǎng)管中心的參數(shù)調(diào)整信息傳送給相應(yīng)車輛；互聯(lián)網(wǎng)Internet負(fù)責(zé)將移動(dòng)通信網(wǎng)絡(luò)的信息路由轉(zhuǎn)發(fā)到對(duì)應(yīng)的網(wǎng)管中心。

在過敏受試者中，AIT能恢復(fù)由TLR9介導(dǎo)的漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞(plasmacytoid Dendritic cells，pDCs)產(chǎn)生INF-a的能力，而不影響pDCs數(shù)量及TLR9的表達(dá)。但是，也有研究者在AIT過程中觀察到了pDCs的上調(diào)。在AIT開始后的第6個(gè)月及第12個(gè)月測定外周血中樹突狀細(xì)胞的數(shù)目及頻率，可以觀察到pDCs較第3個(gè)月時(shí)升高，同時(shí)伴有CD1mDCs減少及CD141mDCs 的增多。pDCs可誘導(dǎo)Treg并介導(dǎo)口服耐受性，導(dǎo)致 T 細(xì)胞無反應(yīng)性或耐受性。

系統(tǒng)加載了項(xiàng)目區(qū)域內(nèi)1:2000最新不動(dòng)產(chǎn)遙感影像成果，將全部貧困戶在二三維地圖上進(jìn)行了精確落圖，包括每家每戶房屋、擁有的田塊均有精準(zhǔn)坐標(biāo)位置。系統(tǒng)可以通過時(shí)間軸動(dòng)態(tài)展示連續(xù)幾年來貧困戶脫貧變化情況，綠色代表貧困戶、紅色代表脫貧戶。如圖2所示。

IL- 4是介導(dǎo)Th0細(xì)胞向Th2細(xì)胞分化的關(guān)鍵因子。Th2細(xì)胞再分泌IL- 4等2細(xì)胞因子，正反饋促進(jìn)Th0向著Th2分化，形成Th2為主的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致過敏癥狀的出現(xiàn)。AIT可通過甲基化IL- 4細(xì)胞因子啟動(dòng)子，抑制Th2細(xì)胞分泌2型細(xì)胞因子，達(dá)到脫敏效果。

2.2 對(duì)固有淋巴樣細(xì)胞的影響

IgG4抗體的結(jié)構(gòu)決定了其具有獨(dú)特的生物學(xué)特性。一方面，兩個(gè)IgG4抗體分子之間能進(jìn)行“Fab臂交換”，形成單價(jià)雙特異性抗體，因而無法與抗原交聯(lián)形成免疫復(fù)合物，阻礙IgE對(duì)過敏原與B細(xì)胞結(jié)合的促進(jìn)；另一方面，肥大細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞表面存在FcεRI和FcγRIIb，IgG4能作為“封閉抗體”與IgE 競爭性結(jié)合肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞上的FcεRI受體，阻礙抗原與IgE的交聯(lián)，阻止肥大細(xì)胞及嗜堿性粒細(xì)胞的脫顆粒；同時(shí)，IgG4還能同效應(yīng)細(xì)胞表面的FcγRIIb結(jié)合，阻斷FcεRI信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而阻礙效應(yīng)細(xì)胞的活化；同時(shí)還能抑制IgE介導(dǎo)的信號(hào)呈遞，減少過敏原特異性記憶B細(xì)胞產(chǎn)生IgE。

根據(jù)ILCs產(chǎn)生的細(xì)胞因子及表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子，可將其分為三類。第一類包括ILC1s及自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell，NK)，它們依賴于轉(zhuǎn)錄因子T-bet，并產(chǎn)生干擾素γ(interferon-gamma，INF-γ)，對(duì)細(xì)胞內(nèi)病原體(如病毒)和腫瘤起反應(yīng)；第二類即ILC2s，表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子GATA3和RORα，接受IL- 25、IL- 33和TSLP刺激并產(chǎn)生2型細(xì)胞因子IL- 4、IL- 5、IL- 13，啟動(dòng)針對(duì)變應(yīng)原的早期免疫反應(yīng)，募集嗜酸性粒細(xì)胞，對(duì)抗寄生蟲感染；第三類包括ILC3s和淋巴組織誘導(dǎo)細(xì)胞(lymphoid tissue inducer cells，LTi)，依賴于轉(zhuǎn)錄因子RORγt，并能產(chǎn)生IL- 17、IL- 22，可對(duì)抗細(xì)菌和真菌等細(xì)胞外微生物。

1994年德州撤區(qū)設(shè)市以來，經(jīng)山東省政府批準(zhǔn)，先后增加了德州經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)、運(yùn)河經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)2個(gè)行政規(guī)劃．在2009年，德州市開始編制《德州市城市總體規(guī)劃（2011—2020）》（以下簡稱規(guī)劃），并獲得國務(wù)院辦公廳的批準(zhǔn)．根據(jù)《規(guī)劃》內(nèi)容，德城區(qū)規(guī)劃形成“一帶三心三城”的水綠天然分隔，組團(tuán)發(fā)展的城市空間結(jié)構(gòu)．《規(guī)劃》總體描述了德城區(qū)向東發(fā)展的格局，對(duì)于東部新城重點(diǎn)開發(fā)建設(shè)，而對(duì)于歷史文化區(qū)，如京杭大運(yùn)河德州段、德州城墻遺址等要限制開發(fā)，重點(diǎn)保護(hù)．

AR患者在接觸變應(yīng)原后，外周血中表達(dá)CD84的ILC2增多，促進(jìn)T2炎癥因子生成。研究發(fā)現(xiàn)，在對(duì)AIT治療產(chǎn)生良好應(yīng)答的AR患者及健康人群中，ILC2、ILC3的數(shù)量較未接受AIT治療或?qū)χ委煼磻?yīng)較差的AR患者減少。同時(shí)，他們體內(nèi)可檢測到更多的ILC1。對(duì)AIT治療產(chǎn)生良好應(yīng)答的患者ILC1/ILC2比值與健康人相仿，提示ILC在免疫耐受中起著一定作用。

Wang等研究發(fā)現(xiàn)，人類腸道組織中存在著能分泌IL- 10的ILCregs，ILCregs可以通過分泌IL- 10抑制ILC1s和ILC3s的激活，抑制腸道炎癥，有利于腸道免疫穩(wěn)態(tài)的維持。同時(shí)，ILCregs還能自分泌TGF-β1，維持ILCregs的擴(kuò)增。在此基礎(chǔ)上，Golebski等發(fā)現(xiàn)健康對(duì)照組外周血中存在KLRG1CD117CRTH2ILCs，在受到變應(yīng)原刺激時(shí)，能較過敏患者產(chǎn)生更多的IL- 10。IL- 10能通過減弱NFKB1、MYC等促炎基因的表達(dá)、增強(qiáng)抗炎轉(zhuǎn)錄因子EGR1、減少IL- 6及IL- 8的產(chǎn)生等，減弱Th反應(yīng)并維持上皮細(xì)胞的完整性，并證實(shí)接受AIT的患者KLRG1CD117CRTH2ILCs產(chǎn)生IL- 10的能力得以恢復(fù)。

有瀑河景觀帶。位于城市規(guī)劃區(qū)瀑河兩岸，串聯(lián)起大小不等的一些點(diǎn)狀綠地，形成了瀑河兩側(cè)的綠色項(xiàng)鏈，是平泉市近年來改造建設(shè)的重要地段，也是改善城市景觀和濱水景觀的點(diǎn)睛之筆。

綜上，變應(yīng)原免疫治療通過影響固有免疫和適應(yīng)性免疫誘導(dǎo)免疫耐受，達(dá)到臨床癥狀的緩解。對(duì)適應(yīng)性免疫應(yīng)答，AIT促進(jìn)IL- 10Treg和IL- 10Breg的生成，調(diào)節(jié)Tfh與Tfr細(xì)胞間的平衡，抑制Th0向Th2細(xì)胞分化，降低2型細(xì)胞因子(如IL- 4)水平，增加患者IgG4抗體滴度，阻礙IgE與抗原交聯(lián)，抑制效應(yīng)細(xì)胞脫顆粒；對(duì)固有免疫應(yīng)答，AIT誘導(dǎo)DCs的致耐受表型，輔助生成Treg，降低分泌T2細(xì)胞因子的ILC2數(shù)量，恢復(fù)ILCreg產(chǎn)生IL- 10的能力，故而形成長期的免疫耐受。