沉香線香燃香吸入助睡眠作用及機(jī)制探究＊

弓 寶 ，王燦紅 ，王新騰 ，吳玉蘭 ，魏建和 ，2＊＊

（1. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所海南分所/海南省南藥資源保護(hù)與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室&國家中醫(yī)藥管理局沉香可持續(xù)利用重點(diǎn)研究室 ?？?570311；2. 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所/中草藥物質(zhì)基礎(chǔ)與資源利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室&瀕危藥材繁育國家工程實(shí)驗(yàn)室 北京 10019）

失眠多由內(nèi)在情志或外在工作壓力等因素引起，目前失眠或入睡困難已經(jīng)成為臨床常見疾病之一，越來越多的人在睡眠及睡眠質(zhì)量方面得不到保障[1]。臨床常用的鎮(zhèn)靜催眠藥品不良反應(yīng)較多，人們長期服用均會(huì)出現(xiàn)不同程度的停藥反跳、耐受性，甚至產(chǎn)生藥物依賴癥等等不良反應(yīng)[2-3]，因此醫(yī)藥學(xué)家們一直在尋找安全有效的替代藥物。

沉香在我國香料界及傳統(tǒng)醫(yī)藥領(lǐng)域擁有上千年的使用歷史[5]，當(dāng)白木香樹的樹干或枝條受到外界傷害刺激后會(huì)自發(fā)產(chǎn)生的一種樹脂類物質(zhì)，那么含有這種樹脂的木材便是沉香[4]。沉香傳統(tǒng)的使用方法以直接熏點(diǎn)吸入的方式居多，具有鎮(zhèn)靜安神、改善睡眠的功效[6]，但是其吸入助睡眠藥效和作用機(jī)制尚未闡釋清楚。隨著通體結(jié)香技術(shù)的廣泛應(yīng)用和推廣，國內(nèi)外種植沉香的面積逐年擴(kuò)大，沉香資源問題得到了解決[7]，沉香市場上相關(guān)產(chǎn)品也日益增多，沉香線香作為沉香主要的產(chǎn)品形式之一，因其使用和攜帶方便，備受消費(fèi)者的重視和歡迎[6]。已有報(bào)道顯示，沉香香粉和揮發(fā)油熏香吸入具有鎮(zhèn)靜抑制自主活動(dòng)及促睡眠作用[8-11]。但是，有關(guān)線香以傳統(tǒng)燃燒熏香吸入的鎮(zhèn)靜催眠作用及作用機(jī)理一直未見相關(guān)報(bào)道。

本研究采用自制熏香儀，應(yīng)用傳統(tǒng)熏點(diǎn)沉香線香的方法，觀察其對失眠模型小鼠協(xié)同戊巴比妥鈉睡眠狀況以及行為學(xué)的影響，此外檢測沉香線香熏點(diǎn)吸入后，失眠模型小鼠體內(nèi)5-HT 等神經(jīng)遞質(zhì)水平變化以及與Glu 能系統(tǒng)代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白如GluR1 及VGluT1表達(dá)的影響，初次探究以傳統(tǒng)熏點(diǎn)沉香方式吸入給藥后，其鎮(zhèn)靜安神作用及其可能的機(jī)制，為沉香線香等熏香類醫(yī)藥產(chǎn)品臨床應(yīng)用及后期沉香大健康產(chǎn)業(yè)的優(yōu)化升級提供重要的參考依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

自制熏香儀（50 cm × 50 cm× 40 cm 正方體，其內(nèi)部放置1 個(gè)20 cm×20 cm×20 cm 鏤空的圓柱體結(jié)構(gòu)，中間可放置熏香香插）；自主活動(dòng)儀（Shanghai Xinsoft Information Technology Co.,Ltd.,Serial:(RD-1118-COM4)；沉香線香（沉香加工中心制備）；戊巴比妥鈉（LOT NO: top2017012301, Merck, USA）；地西泮片（LOT NO: 20200921, Taiyuan Zhenxing Pharmaceutical Co., Ltd.,）；5-HT 試劑盒（LOT NO: DRE30136, Beijing Bosheng Jingwei Technology Co., Ltd.,）、GABAA試劑盒（LOT NO: DRE31429, Beijing Bosheng Jingwei Technology Co., Ltd.,）、Glu 試 劑 盒（LOT NO:DRE31214, Beijing Bosheng Jingwei Technology Co.,Ltd.,）、SDS-PAGE 凝 膠 制 備 試 劑 盒（LOT NO:HP201501, Wuhan Servicebio Technology Co, Ltd.,）、腺苷 試 劑 盒 :（LOT NO: DRE31229, Beijing Bosheng Jingwei Technology Co.,Ltd.,）、BCA 蛋白濃度測定試劑盒（LOT NO: BL522A, Beijing Labgic Technology Co,Ltd.,）、GluR1 一 抗（LOT NO: AF2473, BiYuntian Biotechnology Co., Ltd.,）、VGluT1 一 抗（LOT NO: bs-11267R, Beijing Boosen Biotechnology Co., Ltd.,）、山羊抗兔二抗（LOT NO: A0208, BiYuntian Biotechnology Co.,Ltd.,）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

購買雄性昆明小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，體質(zhì)量區(qū)間為18-22 g，由海南省藥物研究所有限公司提供（SCXK[瓊]2019-0004）；SPF級動(dòng)物飼養(yǎng)室中常規(guī)飼養(yǎng)，環(huán)境溫度維持25±1℃，環(huán)境濕度維持50±5%，日夜光照時(shí)間為12 h:12 h，3天適應(yīng)期后開始實(shí)驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組造模及給藥

將動(dòng)物按照隨機(jī)法分成：空白對照組，氯苯丙氨酸模型組，地西泮對照組（2.5 mg·kg-1），低、中、高劑量線香熏香組：0.25 g 線香（相當(dāng)于100 mg·kg-1沉香醇提物），0.5 g 線香（相當(dāng)于200 mg·kg-1沉香醇提物）、1 g線香（相當(dāng)于400 mg·kg-1沉香醇提物），共設(shè)6組，每組10 只小鼠?？瞻讓φ战M與氯苯丙氨酸模型組不作相應(yīng)處理；地西泮對照組采用腹腔注射方法給予地西泮；低、中、高劑量線香熏香組動(dòng)物置薰香儀中進(jìn)行熏香，分別稱重0.25，0.5，1.0 g沉香線香放置到熏香儀中的香插上點(diǎn)燃，將小鼠放入薰香儀，薰香1 h/次，連續(xù)給藥7天。第1次和第2次給藥后，模型組及給藥組均按照300 mg·kg-1劑量注射給予對氯苯丙氨酸，連續(xù)2天，制備失眠模型。參照文獻(xiàn)[12-14]，如小鼠表現(xiàn)為體重減輕、毛發(fā)凌亂、光澤消失且具有一定強(qiáng)攻擊性等情況發(fā)生，則判斷為造模成功。

2.2 沉香線香熏點(diǎn)吸入對失眠模型小鼠的睡眠觀察

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按2.1 法分組后進(jìn)行造模并給藥，模型組及熏香各組腹腔注射給予戊巴比妥鈉（50 mg·kg-1），用計(jì)時(shí)器記錄動(dòng)物入睡時(shí)間以及睡眠時(shí)長，記錄時(shí)間精確到秒（S）。

2.3 沉香線香熏點(diǎn)吸入對失眠模型小鼠自主活動(dòng)的觀察

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按2.1 法分組后進(jìn)行造模及給藥，放置在動(dòng)物自主活動(dòng)儀內(nèi)進(jìn)行行為學(xué)觀察，分析記錄各組小鼠10 min 內(nèi)在活動(dòng)中央?yún)^(qū)域的停留時(shí)間、整個(gè)活動(dòng)區(qū)域動(dòng)物運(yùn)動(dòng)的總路程以及動(dòng)物運(yùn)動(dòng)的平均速度，每組觀察實(shí)驗(yàn)間隔，使用消毒酒精擦拭場箱，并清潔箱底糞便。測試時(shí)保持周圍環(huán)境安靜。

2.4 ELISA 法對沉香線香熏點(diǎn)吸入各組小鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)水平測定

選取2.3 實(shí)驗(yàn)檢測后的小鼠，用乙醚麻醉后，將小鼠處死并在冰塊上取出腦組織，用醫(yī)用NaCl 溶液洗凈，濾紙擦干稱取重量。將腦中海馬組織剝離出來，冰浴條件下加入溫度為4℃的醫(yī)用NaCl冷凍溶液混合進(jìn)行勻漿后，低溫條件下，在每分鐘3000 轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速下離心15 min，離心液保存于-20℃低溫冰箱內(nèi)。依據(jù)試劑盒測定的方法要求制作相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，將測定樣品中5-HT、Glu、AD、GABAA的 OD 值帶入，計(jì)算各組小鼠腦組織內(nèi)5-HT等遞質(zhì)的水平變化。

2.5 Western blot 法對腦內(nèi)海馬體相關(guān)蛋白表達(dá)的測定

將小鼠海馬體腦組織從全腦中分離，加入0.9%NaCl 溶液勻漿，離心，棄去上清液，加入RIPA 裂解液后進(jìn)行蛋白定量，采用試劑盒的方法，應(yīng)用酶標(biāo)儀對海馬體腦組織中的蛋白進(jìn)行濃度檢測，進(jìn)行配膠后加上樣量電泳至PVDF膜上，用5%脫脂奶粉封閉1 h后，加 1:2000 的一抗 β-actin，1:1000 的 GluR1 以及 1:1000的VGluT1。樣本置40℃溫度下過夜，二抗置于室溫條件下孵育后，采用凝膠成像儀成像的方法測定。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理及數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS18.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，結(jié)果以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”（）的形式呈現(xiàn)，并使用 GraphPad Prism 軟件繪制成柱形圖展示。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 沉香線香熏香吸入對小鼠睡眠的影響

觀察沉香線香熏點(diǎn)吸入后，觀察戊巴比妥鈉協(xié)同作用下對小鼠睡眠的影響情況，評價(jià)熏香吸入對睡眠作用的影響[15-22]，課題組在小鼠不死亡，而翻正反應(yīng)消失的前提下，參考前期實(shí)驗(yàn)研究使用劑量[12]，統(tǒng)計(jì)小鼠入眠時(shí)間及睡眠時(shí)長（圖1）。從結(jié)果可以看出，模型組睡眠觀察指標(biāo)與空白組睡眠觀察指標(biāo)比較，模型組小鼠入睡時(shí)間相對延長（P＜0.01）且睡眠時(shí)長減少（P＜0.05），體現(xiàn)造模方法可行；熏點(diǎn)線香組與模型組的睡眠觀察指標(biāo)相比較可以看出，熏香吸入高、中、低劑量組均能顯著減少失眠小鼠的入眠時(shí)間（P＜0.05或P＜0.01），說明沉香線香熏點(diǎn)吸入可以促進(jìn)小鼠進(jìn)入睡眠狀態(tài)；與模型組比較發(fā)現(xiàn)，熏香吸入中劑量組能顯著增加小鼠睡眠時(shí)長（P＜0.05），說明熏點(diǎn)吸入沉香線香可提高失眠小鼠的睡眠質(zhì)量；而熏香吸入的低劑量組和高劑量組則影響不顯著，可能與初始劑量不足，而加大劑量后出現(xiàn)先揚(yáng)后抑的拋物線反應(yīng)；臨床上應(yīng)用鎮(zhèn)靜安神類藥物時(shí)也發(fā)現(xiàn)，低劑量時(shí)有鎮(zhèn)靜促睡眠作用，隨著劑量加大反而出現(xiàn)興奮樣的反轉(zhuǎn)效應(yīng)?？梢婋S著劑量加大，藥效不是一直隨之增強(qiáng)，到達(dá)一定程度可能會(huì)出現(xiàn)反作用，這也提示沉香熏香可能有“雙向調(diào)節(jié)作用”，需進(jìn)一步研究闡釋。

圖1 沉香線香熏點(diǎn)吸入對失眠小鼠睡眠狀況的觀察

3.2 沉香線香熏點(diǎn)吸入對失眠模型小鼠自主活動(dòng)的觀察

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處于新環(huán)境下，其自主活動(dòng)的表現(xiàn)、探索行為以及緊張程度都會(huì)發(fā)生變化，而曠場實(shí)驗(yàn)是評價(jià)這些變化常用的方法之一，一般作為評價(jià)動(dòng)物行為變化、動(dòng)物是否出現(xiàn)焦慮或抑郁行為等方面被廣泛使用[23]。除空白對照組外，其余各組小鼠熏點(diǎn)吸入沉香線香后，放入曠場中進(jìn)行自主活動(dòng)觀察實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用計(jì)算機(jī)統(tǒng)計(jì)軟件考察小鼠總運(yùn)動(dòng)路程（mm）、運(yùn)動(dòng)平均速度（mm·s-1）及靜止時(shí)間（s）等指標(biāo)（圖2）。從結(jié)果看出，造模后模型小鼠的運(yùn)動(dòng)路程和運(yùn)動(dòng)速度變化不明顯，而小鼠靜止的時(shí)間減少（P＜0.05）；而熏點(diǎn)吸入沉香線香后，低、中劑量熏點(diǎn)線香組的自主活動(dòng)均顯著減少（P＜0.05），而高劑量熏點(diǎn)線香組的變化反而不顯著；低、中、高劑量組的動(dòng)物在靜止時(shí)間指標(biāo)上均顯著增加（P＜0.01），說明沉香線香熏點(diǎn)吸入可以增加動(dòng)物安靜狀態(tài)；其與地西泮對照組觀測指標(biāo)相比無差異性（P ＞0.05），說明熏點(diǎn)沉香線香和陽性對照藥作用無顯著差異。

圖2 沉香線香熏香吸入對小鼠自主活動(dòng)的影響

3.3 沉香線香熏香后小鼠腦組織中Glu、GABAA、GABAA/Glu、5-HT、AD的含量變化

現(xiàn)代研究表明Glu、GABA、5-HT、AD 等神經(jīng)遞質(zhì)的水平高低以及GABA/Glu 的平衡均在睡眠—覺醒節(jié)律中起到重要的作用，觀察其含量的高低對睡眠狀況起到一定的指導(dǎo)意義[24]（圖3）。從結(jié)果可以看出，失眠模型小鼠的Glu 的水平增加比較明顯（P＜0.05），而5-HT 的含量和GABAa的含量均有所降低和減少（P＜0.05），與此同時(shí)GABA/Glu 平衡值與AD 含量值則顯著降低和減少（P＜0.05），結(jié)果說明通過造模，小鼠腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的水平與未造模相比有很大差異；地西泮對照組的小鼠體內(nèi)Glu 的水平明顯下降（P＜0.05），沉香線香熏點(diǎn)吸入后有一定程度的增加（P＜0.05）；另外地西泮對照組與沉香線香熏點(diǎn)吸入各組的GABA水平均有所升高（P＜ 0.05），且GABA/Glu 的平衡值與AD 水平值顯著升高（P＜ 0.01）；熏香吸入低劑量和中劑量組小鼠的5-HT 含量水平明顯升高（P＜0.01），反而高劑量組有下降趨勢（P＜0.05），以上總體說明熏點(diǎn)沉香后對影響睡眠的主要神經(jīng)遞質(zhì)有調(diào)控作用。

圖3 沉香線香熏香后小鼠腦組織中Glu、GABAA、GABAA/Glu、5-HT、AD的含量變化

3.4 沉香線香熏點(diǎn)吸入對腦內(nèi)海馬體GluR1和GluT1蛋白表達(dá)的影響

文獻(xiàn)研究表明谷氨酸（Glu）為廣泛分布于哺乳類動(dòng)物腦內(nèi)中可引起興奮作用的一類神經(jīng)遞質(zhì)[25]，其重要原料谷氨酰胺（Gln）在谷氨酰胺酶（TG酶）的協(xié)同作用下生成谷氨酸，所以谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為谷氨酸的程度對機(jī)體內(nèi)維持谷氨酸含量的高低十分的重要[26]。GluR1是谷氨酸的相關(guān)受體蛋白且具有傳遞興奮性信息作用；VGluT1 廣泛分布與谷氨酸囊泡陌上，在囊泡膜離子濃度改變的條件下，協(xié)助谷氨酸在囊泡間轉(zhuǎn)運(yùn)，其對機(jī)體谷氨酸含量的維持起到至關(guān)重要[27-28]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)造模組小鼠腦組織中的VGluT1 蛋白量下降較為明顯（P＜ 0.05），而GluR1 的蛋白量有下降的趨勢，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；地西泮對照組與熏點(diǎn)吸入各組的GluR1表達(dá)量增加（P＜0.05），地西泮對照組與熏點(diǎn)吸入中劑量及高劑量組的VGluT1 蛋白表達(dá)量增加（P＜ 0.05）（圖4）。

圖4 沉香線香熏香后對小鼠腦組織中GluR1及VGluT1蛋白表達(dá)的影響

4 討論

目前藥效研究中，針對改善失眠癥藥物評價(jià)的經(jīng)典模型為戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的睡眠模型以及使用氯苯丙氨酸注射制作失眠模型[29,13]，睡眠實(shí)驗(yàn)的評價(jià)指標(biāo)?？疾焖邼摲诤退邥r(shí)間兩個(gè)指標(biāo)[30-31]，參考文獻(xiàn)研究[32-33]利用PCPA 制作動(dòng)物失眠模型。本研究結(jié)果顯示，相比正常組，連續(xù)注射PCPA 2d，小鼠自主活動(dòng)顯著增加，表明小鼠出現(xiàn)了失眠癥狀。與模型組相比較，熏點(diǎn)沉香線香可以縮短失眠小鼠模型的睡眠潛伏期，且在一定熏香劑量下可延長其睡眠時(shí)間，表明沉香線香熏點(diǎn)吸入具有改善睡眠作用。

給予動(dòng)物相應(yīng)的藥物后觀察其自主活動(dòng)行為的變化情況，是評價(jià)作用于精神方面藥物或者神經(jīng)方面藥物常用的方法之一[23]。本實(shí)驗(yàn)參照徐飛飛[14]和王帥[12]報(bào)道的自主活動(dòng)評價(jià)方法，選擇運(yùn)動(dòng)總路程、平均速度和靜止時(shí)間作為評價(jià)指標(biāo)。結(jié)果顯示，與模型組相比較，低劑量組和中劑量組沉香線香熏香后能夠減少小鼠運(yùn)動(dòng)總路程，且運(yùn)動(dòng)的平均速度同時(shí)下降，而高劑量組這兩個(gè)指標(biāo)改變不明顯，這與睡眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果中高劑量組反而不能顯著延長睡眠時(shí)間相一致，可能與有效物質(zhì)成分代謝轉(zhuǎn)化或高劑量的反作用有關(guān)，均需做進(jìn)一步研究；低劑量組、中劑量組和高劑量組均可增加小鼠曠場中靜止時(shí)間，根據(jù)文獻(xiàn)研究報(bào)道[15]，自主活動(dòng)能力的降低可以說明沉香線香熏香后對氯苯丙氨酸造模的失眠小鼠睡眠有一定的改善作用。之前已有文獻(xiàn)報(bào)道采用沉香提取物灌胃，可以降低小鼠自主活動(dòng)頻率以及延長睡眠時(shí)間[12]，綜上表明無論是采用熏香還是沉香提取物灌胃均能夠降低小鼠的自主活動(dòng)。

5-HT 可影響“睡眠-覺醒”的節(jié)律過程，是與睡眠功能密切相關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)之一，抑制5-HT 的合成或者破壞5-HT 能神經(jīng)元均能導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)不同程度的失眠行為[34-35]。通過給予動(dòng)物腹腔注射PCPA，從而阻礙動(dòng)物機(jī)體內(nèi)5-HT 生成，進(jìn)而達(dá)到睡眠剝奪的目的[36]。本研究發(fā)現(xiàn)與模型組比較，熏點(diǎn)沉香線香后，能夠升高失眠模型小鼠5-HT 遞質(zhì)含量，表明沉香線香熏點(diǎn)吸入改善小鼠失眠癥狀的作用機(jī)制，可能與其具有調(diào)節(jié)腦內(nèi)5-HT 遞質(zhì)的作用有關(guān)。但是隨著熏香劑量的增加，5-HT 含量呈現(xiàn)下降趨勢，是否說明沉香熏香具有雙向調(diào)節(jié)作用，需要進(jìn)一步研究。

神經(jīng)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究表明，大腦的興奮-抑制功能存在著平衡關(guān)系，其對睡眠狀態(tài)有一定的影響[37-38]，谷氨酸脫羧酶可以輔助使得機(jī)體內(nèi)興奮型的神經(jīng)遞質(zhì)Glu 可以轉(zhuǎn)化為抑制型的神經(jīng)遞質(zhì)GABA，因此GABA 與Glu 之間的平衡是否穩(wěn)定，對失眠質(zhì)量提升有很大的關(guān)系[39]。熏點(diǎn)沉香線香后可同時(shí)提高小鼠腦組織中興奮型神經(jīng)遞質(zhì)Glu 和抑制型神經(jīng)遞質(zhì)GABA的量，從而整體上使得GABA/Glu 平衡值增加，可以推斷出熏點(diǎn)沉香線香助睡眠的機(jī)制有可能與調(diào)節(jié)Glu和GABA 有關(guān)，這與報(bào)道的沉香氣體吸入給藥后，可以促進(jìn)小鼠睡眠，改善小鼠失眠狀態(tài)，作用機(jī)理有可能是通過下調(diào)Glu 的水平，或上調(diào)GABA 的水平，進(jìn)而最終使得Glu/GABA 比值整體下調(diào)有關(guān)[9]的說法相一致。而降低的Glu 是否轉(zhuǎn)化為GABA 則需要后期深入研究。在睡眠-覺醒的周期調(diào)控中，AD 遞質(zhì)會(huì)跟隨著神經(jīng)元活動(dòng)而快速分泌，文獻(xiàn)研究表明[40]谷氨酸能神經(jīng)元能引起腺苷的分泌，腺苷水平的高低變化可以起到調(diào)控睡眠的作用。本研究表明，與模型組相比較，熏點(diǎn)沉香線香后可顯著提高腺苷的水平，這也可能是沉香熏香助睡眠的作用機(jī)制之一。

谷氨酰胺（Gln）在谷氨酰胺酶的作用下轉(zhuǎn)化為Glu，而Glu 是影響調(diào)節(jié)睡眠的重要中樞神經(jīng)遞質(zhì)之一[26]，而VGluT1是谷氨酸能神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的主要蛋白之一，其表達(dá)水平的高低決定了體內(nèi)組織中谷氨酸水平的高低，因此課題組選擇影響Glu 興奮傳遞及轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)的GluR1和VGluT1水平進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)熏點(diǎn)沉香后能顯著提高腦組織中GluR1及VGluT1水平，表明它們可能通過間接調(diào)控Glu/GABA 的平衡發(fā)揮促睡眠作用。

綜上所述，在一定劑量下熏點(diǎn)吸入沉香線香，可以改善失眠模型小鼠的睡眠指標(biāo)，減少失眠模型小鼠自主活動(dòng)并增加其靜止的時(shí)間，對其腦內(nèi)與睡眠相關(guān)的如5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)有相應(yīng)的調(diào)節(jié)作用，對與Glu相關(guān)的GluR1 及VGluT1 相關(guān)蛋白的表達(dá)也有一定的影響?；谝陨辖Y(jié)果可以得出，沉香線香燃燒熏香后具有助睡眠的作用，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)腦內(nèi)5-HT遞質(zhì)含量、調(diào)控GABA-Glu 分泌平衡以及Glu 合成代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)，提示沉香熏香吸入后通過“多通路、多靶點(diǎn)、多成分”發(fā)揮助睡眠的作用。但是長時(shí)間大劑量熏點(diǎn)沉香線香是否會(huì)產(chǎn)生反向調(diào)節(jié)作用需要做進(jìn)一步研究。沉香熏香改善睡眠的療法目前在臨床上已有小范圍的推廣應(yīng)用[11]，本研究結(jié)果可為以后沉香熏香在臨床上治療失眠癥的推廣以及沉香大健康產(chǎn)品的優(yōu)化升級提供重要的依據(jù)和借鑒。