基于表觀遺傳學調(diào)控的中醫(yī)藥治療男性不育癥研究進展＊

陳央娣 ，孫自學

（1. 河南中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院 鄭州 450000；2. 河南省中醫(yī)院/河南中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院 鄭州 450002）

男性不育癥（Male Infertility,MI）是由多種因素導致男性生殖功能障礙的一種疾病。近半個世紀男性精子質(zhì)量下降約50%，不孕不育癥已成為繼心血管疾病、腫瘤之后的當今世界第三大疑難疾病，嚴重威脅人類的生殖健康[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計，全世界有將近15%的育齡夫婦受不育問題困擾，在我國約為10%，且其發(fā)病率有逐年增高的趨勢，而其中大約50%是由男性因素引起的[2-3]，且超過60%-75%的患者病因不明[4]。

隨著分子生物學的發(fā)展及對疾病的研究深入，人們對男性不育癥的發(fā)病機制有了新的認識，認為大多數(shù)特發(fā)性男性不育是由表觀遺傳修飾的改變所導致的。因此，針對表觀遺傳的調(diào)控已成為生殖醫(yī)學研究領域的熱點。表觀遺傳學是研究在未改變DNA 序列的情況下，基因表達發(fā)生的多種可遺傳改變，包括DNA甲基化、組蛋白修飾、非編碼RNA等方面，并由此導致的表型變化，強調(diào)基因與環(huán)境的相互作用。相關研究表明，表觀遺傳修飾異常與精子生成障礙、精液質(zhì)量降低有直接關系，從而導致男性不育[5-7]。孫自學教授帶領的課題組在前期研究工作中，通過高通量測序技術，發(fā)現(xiàn)某些miRNA、lncRNA 與精子DNA 損傷有關，而自擬益腎通絡方在治療男性不育癥方面具有良好的臨床療效，其機制可能通過調(diào)控異常的miRNA、lncRNA而發(fā)揮治療作用。因此，近年來表觀遺傳學在男性不育方面的研究日益增多。同時，中醫(yī)藥研究學者發(fā)現(xiàn)，表觀遺傳學與某些中醫(yī)理論，如“天人相應”“證候”“體質(zhì)學”等，存在高度一致性，兩者都強調(diào)人體的生理、病理變化受外界環(huán)境因素的影響，故認為中藥在男性不育癥治療中的作用有可能是通過多靶點調(diào)控表觀遺傳修飾而發(fā)揮的。因此，明確這些機制可以為臨床治療男性不育癥提供指導并尋找新的靶標。

1 中醫(yī)藥治療男性不育癥相關理論的表觀遺傳學基礎

1.1 腎主生殖、整體觀念與表觀遺傳學

“腎藏精，主生殖”，腎之功能正常是男子具備并維持正常生殖功能的重要生理基礎。而表觀遺傳修飾在人類精子產(chǎn)生及成熟的過程中起著重要作用，其正常調(diào)控對于人類生殖功能具有重要意義[8]。受精前精子細胞的DNA是高度甲基化的；受精后4 h內(nèi)，精子便發(fā)生快速、主動地去甲基化[9]?？梢姡澳I主生殖”之“先天之精”的調(diào)節(jié)作用與表觀遺傳修飾在精子發(fā)生發(fā)育過程中的調(diào)控具有相似之處。另有研究發(fā)現(xiàn)，補腎中藥可增加腎虛型少弱精癥患者的精子印跡基因H19 的表達[10]，即中藥通過補腎改善生殖功能的機制從表觀遺傳學角度得到了較合理的解釋，并揭示了“腎主生殖”理論的科學內(nèi)涵。

中醫(yī)又強調(diào)整體觀念，注重人體與外部環(huán)境（包括自然環(huán)境和社會環(huán)境）之間的統(tǒng)一性。因此，人體是處于一個不斷運動變化去適應環(huán)境改變的動態(tài)平衡之中，即“天人相應”。如此維持陰陽平衡，腎與其他臟腑之間功能協(xié)調(diào)，則男性生殖功能才能發(fā)揮正常。表觀遺傳修飾隨外部環(huán)境的變化而出現(xiàn)可逆性改變的這一特性與之亦有相似性。表觀遺傳修飾的重編對環(huán)境變化十分敏感，在精子發(fā)生發(fā)育過程中，若重新編程發(fā)生錯誤，將導致多種表觀遺傳缺陷性疾病。Oakes 等[11]報道5-氮雜胞苷處理動物后，不育率明顯增加，因為5-氮雜胞苷可使精子DNA 甲基化程度降低，選擇性地抑制DNA 的甲基化能力。因此，從表觀遺傳學角度分析中醫(yī)一直強調(diào)對外在環(huán)境因素的干預以起到預防保健和治療病證的作用這一觀點，就可以得到合理的現(xiàn)代醫(yī)學理論解釋。總之，表觀遺傳學所體現(xiàn)出來的整體觀、動態(tài)觀與中醫(yī)藏象學說可謂不謀而合。

1.2 辨證論治與表觀遺傳學

辨證論治是中醫(yī)的靈魂之一，有中醫(yī)學者認為，證候?qū)嵸|(zhì)與表觀遺傳學有著密切的內(nèi)在聯(lián)系，疾病的不同證候類型存在不同的表觀遺傳修飾，即表觀遺傳學是中醫(yī)證候多樣性的部分物質(zhì)基礎。劉氏等[12]對急性髓系白血病中醫(yī)證型與ID4基因啟動子區(qū)甲基化進行了相關性研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各證型患者ID4 基因啟動子區(qū)甲基化陽性率由低到高依次為氣陰兩虛證、瘀血痰結(jié)證和毒熱熾盛證，表明中醫(yī)證型與表觀遺傳學修飾之間存在一定的聯(lián)系?！澳I主生殖”，故腎虛是導致男性不育癥發(fā)生的根本病機，有學者發(fā)現(xiàn)腎虛型少弱精子癥不育患者的精子DNA 印跡基因H19 的表達較健康對照組下調(diào)[13]。因此，表觀遺傳學在探究中醫(yī)證候?qū)嵸|(zhì)方面具有十分重要的地位。而在治療上，同樣是男性不育癥，若證候不同，發(fā)生的表觀遺傳修飾不一樣，治療就有所不同；對不同原因所致男性不育癥，若證候一樣，其表觀遺傳修飾改變位點相同則可采用同一治則治療，這與中醫(yī)學的“同病異治”、“異病同治”思想不謀而合[14]。

1.3 中醫(yī)體質(zhì)與表觀遺傳學

男性不育癥的發(fā)生、發(fā)展及預后與體質(zhì)也是密切相關的。先天稟賦與后天環(huán)境的相互作用能促成體質(zhì)的形成，而體質(zhì)可能是表觀遺傳修飾而引起的外在表型[15]。辛衛(wèi)云等[16]認為，中醫(yī)藥通過調(diào)理全身臟腑功能協(xié)調(diào)、陰陽平衡、改善體質(zhì)的治療作用，從微觀角度來看，可能是通過調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄及其表達、蛋白修飾、非編碼RNA 等表觀遺傳作用，逆轉(zhuǎn)異常改變的表觀遺傳信息而達到治療目的的。

由此可見，中醫(yī)的腎主生殖、整體觀念、辨證論治、體質(zhì)學說等理論與表觀遺傳學變化存在一定的相關性和密切的聯(lián)系，具有表觀遺傳學基礎?；诖耍兴幹委熂膊”憩F(xiàn)出的多層面、多靶點、多通路的特點，可能與調(diào)控表觀遺傳學變化有關，能作用于表觀遺傳修飾中的多個環(huán)節(jié)。

2 中醫(yī)藥治療男性不育癥的表觀遺傳學靶點

2.1 DNA甲基化與男性不育癥

DNA 甲基化（DNA methylation），即DNA 化學修飾的一種形式，是最早被發(fā)現(xiàn)的表觀遺傳機制。它通常是指在DNA 甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferases,DNMTs）的 催 化 下 ，以 S- 腺 苷 甲 硫 氨 酸（S-adenosylmethionine, SAM）為甲基供體，將甲基基團轉(zhuǎn)移到DNA 的胞嘧啶（C）和鳥嘌呤（G）兩個核苷酸上的過程，最常見的是5'-胞嘧啶鳥嘌呤-3'（cytosine phosphate guanosine,CpG）雙核苷酸中胞嘧啶環(huán)的第5位碳原子甲基化，形成5- 甲基胞嘧啶（5-methylcytosine,5mC）。DNA甲基化能調(diào)節(jié)細胞分化與基因表達，在胚胎發(fā)育、基因印記及人類疾病的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。目前，越來越多研究表明，DNA甲基化的異常與男性不育之間有密切聯(lián)系。

劉丹等[17]通過對少、弱、畸精癥男性不育患者精液中DNA 的抗氧化基因——核因子E2 相關因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2, NRF2）進行甲基化分析，證實NRF2 啟動子上游CpG 島內(nèi)408-994bp 段的第7 個甲基化位點的缺失與精子成熟障礙有關。這項研究排除了因NRF2 單體型對精液質(zhì)量的影響，從而更有力地證實NRF2 甲基化的異常與男性不育有關。Kumar等[18]通過對30例少精子癥患者精液中的基因——精子生成相關蛋白（spermatogenesis associated proteins,SPATAs）中的 SPATA4、SPATA5 和SPATA6 進行甲基化分析，發(fā)現(xiàn)上述基因啟動子顯著高甲基化，表明這三個基因的高甲基化影響生精過程，與少精子不育癥相關。Fei等[19]對非梗阻性無精子癥（non-obstructive azoospermia, NOA）患者與正常男性進行DNA 甲基化的全基因組對比分析，確定含Sry盒基因30（Sry-box containing gene 30, SOX30）是NOA患者睪丸組織啟動子段最顯著的高甲基化基因，并通過動物實驗，發(fā)現(xiàn)SOX30缺失小鼠精子生成障礙而不育，從而證實SOX30 的高甲基化使其本身失活，與NOA的發(fā)生有關。

目前有研究表明，中藥能通過作用于DNA 甲基化的相關靶標在精子的生成、成熟過程及DNA完整性方面發(fā)揮非常重要的調(diào)控作用。孫自學等[20]研究發(fā)現(xiàn)，苯并(a)芘（benzo(a)pyrene, BaP）染毒可致雄性大鼠精子DNA 甲基化改變，其中編碼lncRNA 的783 個基因上調(diào)，同時3378個基因下調(diào)，以下調(diào)為主，予益腎通絡方干預后，對62 個異常甲基化上調(diào)基因和56 個異常甲基化下調(diào)基因具有防護作用，說明該藥通過調(diào)節(jié)異常甲基化水平，促進相關基因轉(zhuǎn)錄并表達，其機制可能與lncRNA 途徑有關，而非通過DNMTs，從而提高DNA 甲基化異常大鼠的生殖能力。連方等[10]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，生精方能明顯改善少弱精子癥患者的精液質(zhì)量，提高生育力，上調(diào)不育患者精子印跡基因H19表達是該藥發(fā)揮療效的可能機制。不同的中藥復方可能通過不同的作用機制，如：調(diào)控DNMTs水平，升高或降低，避害趨利；調(diào)控特定基因的甲基化及印記基因、整體基因組等，達到“陰陽”平衡而起效。

2.2 組蛋白修飾與男性不育癥

組蛋白修飾（histone modification）是指與DNA 結(jié)合存在的蛋白質(zhì)——組蛋白，在相關酶的作用下，其N-末端氨基酸殘基發(fā)生甲基化（methylation）、乙?；╝cetylation）、磷 酸 化（phosphorylation）、泛 素 化（ubiquitination）、ADP 核糖基化（glycosylation）等修飾的過程，是染色質(zhì)重塑的主要機制[21-22]。目前研究較多的修飾方式是組蛋白的乙酰化和甲基化。這些修飾可調(diào)節(jié)組蛋白與DNA 的結(jié)合程度改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu)，進而調(diào)節(jié)基因的活化或沉默影響其轉(zhuǎn)錄。目前，許多研究發(fā)現(xiàn)組蛋白修飾影響生精細胞基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯。組蛋白的包裝修飾發(fā)生在生精細胞的有絲分裂和減數(shù)分裂的階段，將雄性生殖細胞DNA與組蛋白結(jié)合形成核小體，以利于精子發(fā)生過程中使常染色質(zhì)呈開放狀態(tài)及異染色質(zhì)呈凝集狀態(tài)，從而對生精過程發(fā)揮重要作用[23-24]。

Samantha 等[25]采用納米液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對31 例精液參數(shù)正常和異常的男性精液標本中組蛋白H3、H4 上組蛋白翻譯后修飾（post-translational modifications, PTMs）的相對豐度進行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：弱畸形精子癥患者的精液樣本顯示H4 乙?；瘻p少，H4K20 和H3K9 甲基化改變；弱精子癥患者的精液標本顯示H4 乙?；档秃虷3K9 甲基化；孤立性異常進展者的標本主要表現(xiàn)為H4 乙?；档?；而畸形精子樣本與正常精子樣本相似，提示不同表現(xiàn)精子樣本顯示出不同改變的組蛋白PTMs 特征，說明組蛋白PTMs 與精子活力、形態(tài)有密切關系。Xiaoli 等[26]利用RNA-seq 發(fā)現(xiàn)，從出生至14 日齡，小鼠睪丸中組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶（包含2 甲基轉(zhuǎn)移酶的SET 結(jié)構(gòu)域（the SET domain-containing 2 methyltransferase, SETD2））mRNA 水平顯著增加，而生殖細胞特異性的SETD2 基因敲除模型小鼠的組蛋白H3上的36位賴氨酸三甲基化修飾（trimethylation of lysine 36 on H3, H3K36me3）完全丟失，同時精子生成所需基因的表達下調(diào)，包括編碼頂體酶結(jié)合蛋白1（acrosomal enzyme binding protein 1, Acrbp1）和精蛋白的基因，導致精子發(fā)生異常并伴有頂體畸形而發(fā)生不育，表明SETD2 依賴的H3K36me3 修飾在精子發(fā)生中起著非常重要的作用。Yoshiki 等[27]通過動物研究發(fā)現(xiàn)，在雄性生殖細胞分化過程中，組蛋白H4的各個N端位點表現(xiàn)出不同的修飾模式，如根據(jù)單甲基化、雙甲基化或三甲基化殘基的不同而產(chǎn)生不同的甲基化模式，細長精子細胞顯示組蛋白H4 乙?；鰪?，而所有的H4 修飾在減數(shù)分裂前期表現(xiàn)顯著，提示組蛋白H4 修飾能調(diào)節(jié)精子發(fā)生過程中基因的表達，參與精母細胞減數(shù)分裂過程。

學者發(fā)現(xiàn)，組蛋白修飾能調(diào)控生精過程、影響精子質(zhì)量，并能將表觀遺傳信息傳遞到受精卵，影響子代遺傳信息，若其發(fā)生異?？梢鸩挥齕28]。蔡劍等[29]通過腹腔注射環(huán)磷酰胺建立生精功能障礙模型大鼠，后予強精片（分低、中、高劑量組）進行干預，檢測相關指標，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中、高劑量組大鼠睪丸組織中G9a 蛋白和G9a、Cdyl mRNA 表達明顯升高，組蛋白脫乙酰酶1（histone deacetylase,HDAC1）蛋白及其mRNA 表達明顯降低，該藥的作用機制推測是通過上調(diào)G9a、Cdyl表達和下調(diào)HDAC1 表達而改善模型大鼠的精子質(zhì)量。HDAC1是組蛋白的去乙酰化酶之一。有研究證實，去乙?；讣易迮c基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、染色體易位、基因抑制及細胞增殖、分化、凋亡等相關[30]。組蛋白修飾也是研究男性不育癥發(fā)生機制的一個熱點，中醫(yī)可以此為切入點，深入研究中藥干預男性不育癥組蛋白修飾的作用機理，從分子水平闡釋男性不育的發(fā)病機制及中藥的表觀遺傳作用。

2.3 非編碼RNA調(diào)控與男性不育癥

非編碼RNA（noncoding RNAs,NcRNAs）是由基因組轉(zhuǎn)錄而成的不編碼蛋白質(zhì)的RNA 分子，約占人類基因組的98%，包括核糖體RNA（rRNA）、轉(zhuǎn)運RNA（tRNA）和調(diào)控RNA 等，而調(diào)控性NcRNAs又分為長度小于 200 個核苷酸（nt）的短鏈非編碼 RNA（small noncoding RNA, sncRNA），如微小 RNA（microRNA,miRNA）；長 度 大 于 200nt 的 長 鏈 非 編 碼 RNA（lncRNA）；及呈封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)、無游離5＇和3＇末端的環(huán)形RNA（circRNA）。NcRNAs 除了能在轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達外，還能以RNA 形式在多個層面參與基因表達調(diào)控，如在細胞凋亡、基因印跡、腫瘤發(fā)生和表觀遺傳修飾等過程中發(fā)揮作用[31]。近幾年，隨著對NcRNAs 與男性不育之間關系的研究深入，已發(fā)現(xiàn)其亦能調(diào)控精原干細胞（spermatogonial stem cell,SSC）通過有絲分裂進行自我更新和細胞分化，參與初級精母細胞的減數(shù)分裂等過程[32-34]。

Sara 等[35]應用 Diff-Quick、RT-PCR 方法對 55 名生育能力正常和異常的男性所提供的精子和睪丸組織樣本進行分析，結(jié)果顯示，嚴重及中度少弱畸精癥患者miR-383 和miR-122 的表達較正常精子組顯著增高，非梗阻性無精子癥患者miR-15b 和miR-122 表達高于梗阻性無精子癥患者，而靶基因p53、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（cysteinyl aspartate specific proteinase 9, caspase-9）和細胞周期素D（cyclinD1）的表達水平隨miRNAs 的表達變化發(fā)生原則性變化。表明miRNAs 能調(diào)控精子發(fā)生過程，精子畸形與其表達變化有關。Meng 等[36]發(fā)現(xiàn)，lncRNA Gm2044 和 miR-202 在非梗阻性無精子癥患者睪丸組織中表達顯著增高。通過lncRNA 微陣列、加州大學圣克魯斯分校（University of California—Santa Cruz, UCSC）基因組瀏覽器、生物信息學分析、核糖核酸提取、實時熒光定量（real time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR）、蛋白質(zhì)印跡、細胞增殖分析等，驗證了lncRNA Gm2044，作為 miR-202 宿主基因，能抑制 miR-202 的靶基因——RNA 結(jié)合蛋白 fox-1 同源物 2（RNA binding protein fox-1 homolog 2,Rbfox2）及其蛋白質(zhì)表達水平。并通過體外實驗發(fā)現(xiàn)lncRNA Gm2044 過表達抑制了NCCIT 細胞增殖，而條件性敲低miR-202 或過表達Rbfox2 則減弱了上述的抑制作用，說明MiR-202-Rbfox2 分子信號通路介導了lncRNA Gm2044 對NCCIT增殖的抑制作用。Francesco等[37]通過微陣列技術分析弱精子癥患者和正常對照組的精子（SPZ）中差異表達的circRNA，確定了9138 個轉(zhuǎn)錄本，其中22%是新發(fā)現(xiàn)的。然后通過Percoll梯度分離出兩個SPZ種群（A SPZ=優(yōu)質(zhì)，B SPZ=低質(zhì)量），再對其進行微陣列分析，A 級和 B 級 SPZ 中總共鑒定出 1432 個差異表達的（DE）-circRNA，并發(fā)現(xiàn) B 級中有 664 個上調(diào)的circRNA 和768 個下調(diào)的circRNA，而在正常精子來源的SPZ 中有148 個DE-circRNA，證明了差異circRNA有效負載。Deubiquitinase（USP）是已證明的在精子發(fā)生過程中起重要作用的去泛素化酶，circUSP54下游的某些mRNA 靶標參與線粒體活性，如液泡蛋白分選相關蛋白13A（vacuolar protein sorting-associated protein 13A, VPS13A）和 含 三 聯(lián) 基 元 4（tripartite motif containing 4, TRIM4），與精子活力有關；還有一些mRNA 靶標在維持精液質(zhì)量方面起著關鍵性的作用，如超氧化物歧化酶2 抗原（superoxide-dimutase-2,SOD2）和X 連鎖凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）[38-41]。

關于中藥治療男性不育癥的非編碼RNA 調(diào)控機制的研究尚處于起步階段，國內(nèi)外鮮見報道。在其他學科的相關研究較多，如在腫瘤疾病領域發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇苷能通過下調(diào)長鏈非編碼RNA HULC 的表達來抑制肝癌細胞系SMMC-7721 和HepG2 的增殖和侵襲[42]。在免疫性疾病領域發(fā)現(xiàn)，雷公藤F（tripterygium wilfordiiHook.f., TWHF）能明顯降低類風濕關節(jié)炎（rheumatoid arthritis, RA）患者體內(nèi)的循環(huán)miR-146a水平，抑制炎癥反應，改善患者癥狀[43]。在心血管疾病領域發(fā)現(xiàn)丹皮酚能明顯改善缺血性心律失常和降低心肌細胞中miRNA-1 的表達[44]。我們課題組初步研究發(fā)現(xiàn)，益腎通絡方干預后與精子DNA 損傷模型大鼠比較，共有 59 個 miRNA 發(fā)生變化，其中 39 個上調(diào)，20個下調(diào)，其中以miR-466c 差異最為明顯，推測益腎通絡方可能通過逆轉(zhuǎn)miRNA 表達紊亂，尤其是miR-466c 調(diào)控精子DNA 損傷修復過程；進一步研究還發(fā)現(xiàn)，lncRNA TCONS_00092730 調(diào)控 MEI4 基因與精子DNA 損傷有關，而益腎通絡方的作用機制可能與此存在聯(lián)系，具體機制尚在深入研究當中。祖國醫(yī)學博大精深，借鑒其他學科的研究思路，利用現(xiàn)代技術手段，相信在未來中藥干預男性不育方面能很快找到其所作用的非編碼RNA 分子及其靶基因，從表觀遺傳學角度揭示其深層的分子機制，論證中藥療效的科學性和提供新的治療思路。

3 問題與展望

中醫(yī)遵循整體觀念，首重辨證論治，重視環(huán)境、情志等因素對臟腑之間生克制化的影響以及體質(zhì)的形成，而上述理論與表觀遺傳學存在密切的關系。既往研究表明，中藥能以多靶點、多途徑、多層面來進行表觀遺傳學干預。因此，將中醫(yī)藥與表觀遺傳學相融合是新時代診治男性不育癥的新思路與新方法。目前，許多研究都證實表觀遺傳修飾異常參與了精子生成過程的多個環(huán)節(jié)，中藥通過調(diào)控異常的表觀遺傳修飾治療男性不育癥是新的研究方向。但是，中醫(yī)藥診治男性不育癥表觀遺傳作用的研究尚不完全成熟?，F(xiàn)有研究中，中藥復方對應的表觀遺傳靶標是單一的，且局限于DNA甲基化和組蛋白修飾方面，非編碼RNA調(diào)控的作用機制報道鮮少。

谷瑞升等[45]在國家自然科學基金重大研究計劃“細胞編程和重編程的表觀遺傳機制”中期進展概述中指出，DNA 甲基化和去甲基化、細胞重編程以及該過程中核染色質(zhì)和非編碼核酸調(diào)控是未來研究的3個集成方向。中醫(yī)藥治療男性不育癥的研究需貼近該方向，應充分依靠現(xiàn)代循證醫(yī)學體系，利用現(xiàn)代科技，重視臨床研究與動物實驗，充分開發(fā)與挖掘中醫(yī)藥的獨特優(yōu)勢，尋找中醫(yī)證候診斷的表觀遺傳相關生物標志物，揭示中藥治療男性不育癥的表觀遺傳作用，形成中醫(yī)表觀遺傳醫(yī)學知識網(wǎng)絡，從而更好地為中醫(yī)藥診治男性不育癥理論提供客觀的科學依據(jù)及新的中醫(yī)診療思路。

道長險阻，當然未來工作中存在許多難點，比如：男性不育癥的發(fā)病機制尚未完全闡明，中藥與表觀遺傳學的多層次、多靶點、多途徑的相互作用應采用何種有效的方法去研究并構(gòu)建。有學者認為，需要進一步完善表觀遺傳學的研究方法，使男性不育癥的表觀遺傳學相關靶標系統(tǒng)化，使對本病的檢測便捷化，這樣才能使表觀遺傳學在男性不育癥的治療中有更好的應用[14]。道阻且長，行則將至。相信未來我們能對中醫(yī)藥診治男性不育癥的表觀遺傳作用的研究更加深入，為男性不育癥的中醫(yī)診療提供強有力的科學支持。