腎功能正常的青年個(gè)體血漿脂聯(lián)素水平與高血壓的關(guān)系：漢中青少年高血壓隊(duì)列

郭璇惠 ，褚 超 ，馬 瓊 ，廖月圓 ，嚴(yán) 瑜 ，袁 悅 ，胡佳文，汪 洋，楊睿海，牟建軍

（1. 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科，陜西西安 710061；2. 西安市第一醫(yī)院，陜西西安 710002；3. 漢中市人民醫(yī)院心血管病研究所，陜西漢中 723000）

肥胖可導(dǎo)致機(jī)體代謝紊亂，進(jìn)而發(fā)生循環(huán)、泌尿和內(nèi)分泌等系統(tǒng)疾病。肥胖時(shí)脂肪組織功能紊亂，脂肪細(xì)胞分泌多種脂肪因子和炎癥因子，例如脂聯(lián)素、腫瘤壞死因子和白介素-6[1]。表達(dá)失衡的各類介質(zhì)通過作用于包括心臟、血管和肌肉在內(nèi)的多個(gè)組織和器官，在肥胖相關(guān)疾病的病理生理過程中產(chǎn)生不同的影響。目前公認(rèn)肥胖與高血壓之間存在因果關(guān)聯(lián)，脂肪因子失衡是肥胖誘導(dǎo)高血壓的重要機(jī)制之一。闡明脂肪因子參與血壓調(diào)節(jié)將有助于更深入地理解高血壓的發(fā)病機(jī)制，還可為高血壓防治提供新靶點(diǎn)。

脂聯(lián)素是一個(gè)由脂肪組織特異分泌的重要脂肪因子，生理情況下具有改善胰島素抵抗和抗炎等多種生物學(xué)作用；同時(shí)，還可在肥胖和代謝綜合征等多種病理過程中發(fā)揮保護(hù)作用[2-3]。目前對(duì)循環(huán)脂聯(lián)素水平與高血壓之間關(guān)系的流行病學(xué)研究結(jié)果尚存在爭(zhēng)議。部分研究顯示，人群血脂聯(lián)素與血壓水平存在負(fù)相關(guān)性，低脂聯(lián)素血癥可獨(dú)立預(yù)測(cè)高血壓的發(fā)生[4-5]。而另有一些學(xué)者報(bào)道外周血脂聯(lián)素與高血壓之間無顯著關(guān)聯(lián)[6-7]。此外，MALLAMACI 等[8]發(fā)現(xiàn)，血漿脂聯(lián)素濃度受性別和腎功能的影響，僅在男性高血壓合并腎功能不全患者中出現(xiàn)升高。迄今，以腎功能正常青年人群為基礎(chǔ)，探討脂聯(lián)素與高血壓關(guān)系的研究甚少，本研究對(duì)此進(jìn)行進(jìn)一步探討。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究人群

2013 年 3 月-5 月，以“漢中兒童青少年高血壓隊(duì)列”為基礎(chǔ)，通過等距隨機(jī)抽樣法（n=10）對(duì)該隊(duì)列人群進(jìn)行抽樣，抽取463 例個(gè)體作為研究對(duì)象進(jìn)行隨訪[9]。排除標(biāo)準(zhǔn)：繼發(fā)性高血壓患者、心腦血管病和外周血管疾病、近期感染性疾病、循環(huán)hs-CRP 水平≥10 mg/L者、風(fēng)濕性疾病、肝功表現(xiàn)異常、腎功能不全者（血清肌酐≥140 μmol/L 和/或eGFR＜60 mL/min·1.73 m2）、孕期和哺乳期女性以及不同意參加者。

共有373 例參與基線研究，排除12 例不符合入選標(biāo)準(zhǔn)者（包括缺少血生化資料者4 例、腎功能不全者1 例和血漿 hsCRP≥10 mg/L 者 7 例），最終納入分析者共361例，其中包括血壓正常個(gè)體270 例和高血壓個(gè)體91例。本研究方案獲西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過；研究開展前，向參與對(duì)象詳細(xì)介紹本研究情況，獲取其同意并簽署了知情同意書。

1.2 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

通過調(diào)查問卷采集參與者的一般資料（年齡、性別、教育程度、職業(yè)和體力活動(dòng)）、疾病史和藥物使用情況（高血壓、糖尿病和高脂血癥等）以及家族史等情況，同時(shí)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)量血壓、身高、體質(zhì)量、腰臀圍及心率。身高和體質(zhì)量在脫鞋帽和身著內(nèi)衣下進(jìn)行，體質(zhì)量測(cè)量精確到0.5 kg，身高測(cè)量精確到0.2 cm，連續(xù)測(cè)量2 次，取平均值。體質(zhì)指數(shù)（body mass index,BMI）=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)。

1.3 血壓測(cè)量

血壓測(cè)量按照WHO 提供的標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，事先對(duì)所有參加血壓測(cè)量的工作人員進(jìn)行統(tǒng)一培訓(xùn)和考核。使用魚躍牌臺(tái)式汞柱血壓計(jì)進(jìn)行測(cè)量。在安靜環(huán)境下進(jìn)行血壓測(cè)量，測(cè)量之前，囑受檢者休息30 min，禁吸煙、劇烈活動(dòng)和避免飲用刺激性飲料等。根據(jù)受試者上臂圍大小選用不同尺寸袖帶，測(cè)量右上臂坐位血壓。按Korotkoff聽音法，第1聲取為收縮壓（SBP），第5音為舒張壓（DBP）。測(cè)量血壓3次，每次間隔1 min，要求相鄰兩次所測(cè)血壓的差值不能超過4 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），將第2 次和第3 次血壓的平均值納入統(tǒng)計(jì)分析。將指腹平放于受檢者橈動(dòng)脈靠近手腕處，觸摸橈動(dòng)脈搏動(dòng)，計(jì)時(shí)30 s的脈搏計(jì)數(shù)，并計(jì)算每分鐘的搏動(dòng)次數(shù)，單位為次/min。高血壓定義參照2010年中國(guó)高血壓防治指南，即SBP≥140 mmHg 和/或DBP≥90 mmHg，或近2 周正在服用降壓藥物者[10]。

1.4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

采集受試者空腹靜脈血，常溫3 000 r/min，離心半徑16 cm，離心10 min，現(xiàn)場(chǎng)分離血清，采用日立7060 型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血生化指標(biāo)，包括空腹血糖、血脂四項(xiàng)[甘油三酯(triglycerides, TG)、總膽固醇(total cholesterol, TC)、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein, HDL）和低密度脂蛋白（low-density lipoprotein, LDL）]、血清肌酐及尿酸。采用免疫散射比濁法（德國(guó)西門子醫(yī)療診斷公司，CardioPhase?hsCRP試劑盒）測(cè)定血漿hs-CRP水平。采用高效液相法測(cè)定血漿同型半胱氨酸（plasma homocysteine,HCY）含量。以上檢測(cè)由西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科完成。此外，將分離的血清和血漿于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 血漿脂聯(lián)素的測(cè)定

依據(jù)雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（enzymelinked immunosorbent assay, ELISA）原理對(duì)血漿脂聯(lián)素的濃度進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自安徽合肥巧伊生物科技有限公司，檢測(cè)方法按ELISA 試劑盒所附說明書進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)所用試劑盒及檢測(cè)方法的各指標(biāo)、實(shí)驗(yàn)環(huán)境質(zhì)量控制指標(biāo)以及其他相關(guān)質(zhì)控參數(shù)均控制在允許范圍內(nèi)，批內(nèi)和批間變異均＜10%。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行。根據(jù)資料的分布類型使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）或中位數(shù)（四分位間距）進(jìn)行描述，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示。首先檢驗(yàn)每個(gè)定量指標(biāo)的正態(tài)性，對(duì)于非正態(tài)分布資料，進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后再進(jìn)行統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)。正態(tài)分布資料的組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或單因變量多因素方差分析（校正年齡和性別），非正態(tài)資料組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)，采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行樣本率的組間比較。采用Pearson 相關(guān)分析和偏相關(guān)分析統(tǒng)計(jì)正態(tài)分布指標(biāo)之間的相關(guān)性，Spearman 相關(guān)分析則用來計(jì)算非正態(tài)分布指標(biāo)間的相關(guān)性。以是否患有高血壓作為二分類變量，將脂聯(lián)素（性別特異性三分位數(shù)）、年齡、吸煙、飲酒、高血壓家族史、肥胖、心率、糖尿病及血清TC、TG、LDL、HDL 和其他生化參數(shù)作為自變量分別納入單因素Logistic回歸方程，將篩選出的有意義結(jié)果進(jìn)一步納入二元Logistic回歸模型，明確腎功能正常青年個(gè)體血漿脂聯(lián)素水平與高血壓的關(guān)系。

2 結(jié) 果

2.1 受試者的一般情況

受試者的基本特征組間比較結(jié)果顯示，高血壓組的男性比例、吸煙率、飲酒率及肥胖率顯著高于血壓正常組（均P＜0.05）；與血壓正常組相比，高血壓組具有較高的血壓、心率、BMI、TG、血清尿酸、超敏C 反應(yīng)蛋白和HCY，以及較低的血漿脂聯(lián)素水平和LDL（均P＜0.05）；而兩組間高血壓家族史、TG、LDL、空腹血糖和血清肌酐差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表1）。

表1 高血壓患者和血壓正常者一般特征的比較Tab. 1 Baseline demographic and clinical characteristics of hypertensive and normotensive groups

2.2 不同亞組人群的血漿脂聯(lián)素水平的比較

根據(jù)不同性別和高血壓狀態(tài)分組的組間比較顯示，在血壓正常組和高血壓組男性的血漿脂聯(lián)素（對(duì)數(shù)值）分別為（0.60±0.24）μg/mL 和（0.52±0.21）μg/mL，而女性相應(yīng)組則為（0.73±0.23）μg/mL和（0.68±0.23）μg/mL，男性低于女性；此外，男性的高血壓患者的血漿脂聯(lián)素濃度低于男性血壓正常組，而女性高血壓組的血漿脂聯(lián)素水平僅較女性血壓正常組有下降趨勢(shì)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.32，圖1）。

圖1 不同性別血壓正常組和高血壓組患者血漿脂聯(lián)素水平的比較Fig. 1 Comparison of plasma adiponectin level in normotensive and hypertensive patients of different genders

2.3 血漿脂聯(lián)素與血壓的偏相關(guān)分析情況

簡(jiǎn)單相關(guān)分析顯示，血漿脂聯(lián)素水平與SBP和 DBP 均呈弱相關(guān)性（r=-0.232，P＜0.001；r=-0.237，P＜0.001），偏相關(guān)分析校正年齡和性別后，脂聯(lián)素與SBP 和DBP 的相關(guān)性有所減弱，但仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（r=-0.155，P=0.003；r=-0.144，P=0.006，圖 2）。

圖2 受試者血漿脂聯(lián)素水平與收縮壓和舒張壓的偏相關(guān)分析Fig.2 Partial correlation analysis of plasma adiponectin level with systolic BP and diastolic BP

2.4 血漿脂聯(lián)素水平與高血壓的關(guān)聯(lián)

以研究對(duì)象的高血壓狀態(tài)（1=高血壓，0=非高血壓）為因變量，依據(jù)單因素Logistic回歸分析結(jié)果（校正年齡和性別），將脂聯(lián)素（性別特異性三分位數(shù)分組）、年齡、BMI、心率、血清尿酸、TG、HDL 和超敏C 反應(yīng)蛋白作為自變量納入二元Logistic回歸方程。橫斷面分析顯示年齡、BMI、心率和血漿脂聯(lián)素水平是高血壓的獨(dú)立影響因素（均P＜0.05），其中血漿脂聯(lián)素水平與高血壓患病風(fēng)險(xiǎn)呈負(fù)性關(guān)聯(lián)，脂聯(lián)素位于性別特異性最低三分位者的高血壓患病風(fēng)險(xiǎn)為最高三分位者的 2.46 倍（OR=2.46，95%CI：1.22～4.99，表 2）。

表2 血漿脂聯(lián)素水平與高血壓患病的關(guān)聯(lián)分析Tab. 2 Association between plasma adiponectin level and hypertension

3 討 論

本研究以陜西漢中農(nóng)村361 名年齡為32～41 歲的腎功能正常個(gè)體為研究對(duì)象，探討血清脂聯(lián)素水平與高血壓發(fā)生的關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，基線階段高血壓患者的血清脂聯(lián)素水平顯著低于血壓正常者；血漿脂聯(lián)素與SBP 和DBP 呈獨(dú)立負(fù)相關(guān)；回歸分析顯示低脂聯(lián)素水平是高血壓的獨(dú)立影響因素。

作為肥胖特征性細(xì)胞因子之一，脂聯(lián)素參與肥胖相關(guān)的多種疾?。ㄈ绱x綜合征、CKD 和癌癥等）的發(fā)生和發(fā)展[11-12]。目前，學(xué)者們對(duì)脂聯(lián)素在高血壓中如何發(fā)揮作用也進(jìn)行了廣泛探討，但結(jié)論不一。FURUHASH 等[6]發(fā)現(xiàn)，在血壓正常組和高血壓不合并胰島素抵抗組之間的血清脂聯(lián)素濃度并無明顯差異，只在高血壓合并有胰島素抵抗的患者中減低，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)外周血脂聯(lián)素水平與血壓之間無顯著相關(guān)性。另一項(xiàng)以967 名30～65 歲日本成人為研究對(duì)象的研究顯示，血清脂聯(lián)素水平與SBP 和DBP 呈負(fù)相關(guān)，但在調(diào)整年齡、性別和BMI之后，上述相關(guān)性并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[13]。動(dòng)物研究發(fā)現(xiàn)，KKay 肥胖小鼠與C57BL/6J小鼠相比，前者的血壓水平較高，而血漿脂聯(lián)素水平較低，同時(shí)在高鹽飲食情況下，脂聯(lián)素基因敲除小鼠的血壓水平顯著高于野生型小鼠，而經(jīng)腺病毒感染途徑補(bǔ)充脂聯(lián)素能夠逆轉(zhuǎn)KKay 肥胖小鼠和AdipoQ-/-小鼠升高的血壓[14]。BRAMBILLA 等[15]以正常體質(zhì)量和肥胖兒童為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)低脂聯(lián)素血癥是高血壓的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，該作用部分獨(dú)立于肥胖、脂肪分布和胰島素抵抗。與之一致的是，本研究以中國(guó)大陸農(nóng)村地區(qū)青年個(gè)體為對(duì)象，探討血漿脂聯(lián)素與高血壓的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高血壓患者的血漿脂聯(lián)素水平顯著低于血壓正常個(gè)體；偏相關(guān)分析顯示血漿脂聯(lián)素與血壓間存在微弱但較顯著地相關(guān)性；進(jìn)一步回歸分析發(fā)現(xiàn)，校正年齡、性別和BMI 等混雜因素后，該人群的血漿脂聯(lián)素水平與高血壓患病呈獨(dú)立負(fù)性關(guān)聯(lián)。上述研究結(jié)論不一致的原因尚不完全清楚，有待進(jìn)一步探討。

低脂聯(lián)素血癥促進(jìn)高血壓發(fā)生的機(jī)制尚未完全闡明，既往研究提示內(nèi)皮、腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）和交感神經(jīng)系統(tǒng)等可能在其中發(fā)揮關(guān)鍵作用[16]。首先，內(nèi)皮功能失調(diào)可能在脂聯(lián)素和高血壓之間發(fā)揮作用。人群研究顯示，低脂聯(lián)素血癥與血管舒張功能減少相關(guān)，而補(bǔ)充脂聯(lián)素可促進(jìn)主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞NO 的生成[17]?；A(chǔ)研究表明，脂聯(lián)素可通過增加mRNA 穩(wěn)定性、eNOS 絲氨酸位點(diǎn)（Ser1179）磷酸化等途徑參與eNOS 活性和NO 生成的調(diào)節(jié)[16,18]。其次，RAS 活化在肥胖誘導(dǎo)高血壓中發(fā)揮橋梁作用，而RAS 阻斷劑應(yīng)用可升高脂聯(lián)素水平和改善胰島素抵抗[19]。低脂聯(lián)素血癥可能通過誘導(dǎo)脂肪組織中RAS的活化導(dǎo)致體質(zhì)量增加和高血壓發(fā)生[6,20]。第三，體內(nèi)游離脂肪酸可能在低脂聯(lián)素誘導(dǎo)高血壓發(fā)生中發(fā)揮關(guān)鍵作用。肥胖受試者體內(nèi)升高的游離脂肪酸水平可能通過刺激交感神經(jīng)激活參與肥胖相關(guān)高血壓的發(fā)生，而脂聯(lián)素可刺激骨骼肌內(nèi)脂肪酸氧化進(jìn)而調(diào)節(jié)游離脂肪酸水平[21-22]。最后，較多證據(jù)提示慢性低度炎癥在高血壓發(fā)生發(fā)展中占據(jù)重要地位。脂聯(lián)素具有抗炎和抗氧化功能。研究顯示，脂聯(lián)素可經(jīng)過NF-κB 途徑抑制促炎因子IL-8 和超敏C 反應(yīng)蛋白等的表達(dá)，同時(shí)還可抑制高血糖和氧化型低密度脂蛋白誘導(dǎo)的ROS 生成[23-24]。因此，炎癥和氧化應(yīng)激可能是低脂聯(lián)素血癥促進(jìn)高血壓發(fā)生的另一重要途徑。

本研究尚存在不足：首先，本研究為橫斷面研究，尚無法確定低脂聯(lián)素血癥與高血壓間的因果關(guān)聯(lián)；其次，研究樣本量偏小，后期需要大型、多中心研究對(duì)本結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證；再者，本研究人群基于既往建立的人群隊(duì)列抽取，年齡跨度偏小，后期需在其他成年人群中予以驗(yàn)證。

綜上所述，青年人低脂聯(lián)素血癥是高血壓的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。生命早期對(duì)個(gè)體進(jìn)行血清脂聯(lián)素水平測(cè)定對(duì)高危人群的識(shí)別具有重要價(jià)值。